全 文 ：收稿日期:2000-10-31
文章编号:1006-2858(2001)03-0204-03
欧亚列当提取物抗脂质过氧化作用的研究
刘东春1 , 王　芳2 , 崔　征1 , 李玉山1 , 殷　军1 , 董　焱1
(1.沈阳药科大学中药系;　2.沈阳药科大学药学系 , 辽宁 沈阳　110016)
摘要:本文通过对欧亚列当不同层提取物抗脂质过氧化作用的研究发现 ,欧亚列当乙酸乙酯及正
丁醇层提取物能明显抑制小鼠体内外肝脏过氧化脂质的生成。 欧亚列当所含的列当苷及毛蕊花
苷为抗脂质过氧化的活性成分 ,其抗脂质过氧化的半数抑制浓度分别为(1.2±0.2)g/ mL和(1.1±
0.3)g/ mL 。
关键词:欧亚列当;列当苷;毛蕊花苷
中图分类号:R 96　　　文献标识码:A
　　列当科(Orobanchaceae)列当属(Orobanche
L.)植物欧亚列当(Orobanche cumana Wallr.)是
寄生草本植物 ,广泛分布于东北 、内蒙等地[ 1 , 2] 。
长期以来 ,欧亚列当一直被认为是农田杂草而被
人们忽视 ,国内外未见对其药理作用进行研究。
列当属多种植物在我国部分地区民间药用 ,全草
入药 ,具补肾助阳 ,强筋壮骨之功效 。用于治疗腰
膝冷痛 、阳痿 ,遗精[ 3 , 4] 。作者对欧亚列当进行了
药效学研究 ,已首次发现其具有抗疲劳 ,改善脑组
织循环 ,增强免疫及雄性激素样作用[ 5] 。本文进
一步探讨了欧亚列当乙酸乙酯及正丁醇提取物抑
制过氧化脂质的作用 ,并从乙酸乙酯提取物中提
纯出列当苷(orobanchosid)及毛蕊花苷(verbasco-
side),对其抗质脂过氧化的活性进行了研究 。
1　材料与仪器
欧亚列当提取物:欧亚列当药材(采自吉林白
城 ,经沈阳药科大学生药学教研室主任崔征教授
鉴定 ,为 Orobanche cumana Wallr.)粉碎成粗粉 ,
以 90%乙醇渗漉至渗漉液近无色 ,减压浓缩至渗
漉液无醇味 ,将浓缩液制成1 mL相当于1 g药材
的水溶液 ,再先后分别以等体积的石油醚 、氯仿 、
乙酸乙酯 、正丁醇萃取 3次。回收溶剂 ,得各部分
浸膏 。
列当苷(Or)、毛蕊花苷(V):从欧亚列当乙酸
乙酯层中分离提纯 ,并通过 NMR 、IR等光谱数据
进行了结构验证 。
维生素 E(VE ,批号 980408),东药集团沈阳
市红旗制药厂产品;硫代巴比妥酸(TBA ,批号
911102),上海试剂二厂产品。
721分光光度计 ,上海第三分析仪器厂。昆
明种雄性小鼠 ,18 ～ 22 g ,沈阳药科大学动物室提
供(合格证号:辽实合字 033号)。
2　方法与结果
2.1　欧亚列当不同层提取物对小鼠肝脏过氧化
脂质生成的影响(体外)[ 6]
取雄性小鼠 10只 ,断头处死 ,迅速取出肝脏 ,
置预冷的 4℃生理盐水中 ,洗去残血 ,制成 5%肝
匀浆生理盐水液 。每只小鼠肝匀浆分成 7份 ,每
份1 mL ,分别加入生理盐水(空白对照管),VE(阳
性对照管),不同溶剂提取物溶液各1 mL , 37℃温
育振荡 1.5 h , 加入 20%三氯乙酸1 mL , 静置
10 min ,离心(3000 r/min),取上清液1.5 mL ,加入
0.67%TBA 1 mL ,沸水浴10 min ,冷却。在532 nm
波长处测 OD值 ,以四乙氧基丙烷为标准 ,计算每
克组织过氧化脂质生成量。体外实验结果表明:欧
亚列当不同层提取物对小鼠肝脏过氧化脂质生成
影响不同。其中乙酸乙酯及正丁醇提取物对小鼠
肝脏过氧化脂质生成有明显的抑制作用(表 1)。
2.2　欧亚列当乙酸乙酯及正丁醇层提取物对小
鼠肝脏过氧化脂质生成的影响(体内)[ 6]
取雄性小鼠 40只 ,随机分为 4组。每天灌胃
(i.g.)欧亚列当乙酸乙酯及正丁醇提取物或 VE 1
次 ,连续10 d ,同时作空白对照 。第11 d断头处死
小鼠 ,取肝脏制成 5%肝匀浆。实验步骤同实验
第 1 8 卷　第 3 期
2 0 0 1 年 5 月
沈　阳　药　科　大　学　学　报
Journal of Shenyang Pharmaceutical University
Vol.18 　　No.3
May 2001　p.204
DOI :10.14066/j.cnki.cn21-1349/r.2001.03.014
2.1(除去温育1.5 h步骤)。体内实验结果表明:
乙酸乙酯及正丁醇提取物对小鼠肝脏过氧化脂质
生成有非常明显的抑制作用。其中乙酸乙酯提取
物作用最强(表 2)。因此我们从欧亚列当乙酸乙
酯层提纯出列当苷和毛蕊花苷 ,对其抗脂质过氧
化活性进行了进一步研究 。
Tab.1　The ef fects of dif ferent extracts from Orobanche cumana on the content of malondialdehyde
(MDA)in liver tissue of mice(in vitro)
Group No o f mice Dose(final concentration mg/m L) MDA(nmo l/g tissue)( x ±s)
Control 10 — 154.28±18.78
Vitamin E 10 0.001 41.80±10.21＊＊＊
H2O ext. 10 0.1 152.78±27.33
CHCl3 ex t. 10 0.1 151.93±30.49
Petroleum ether ex t. 10 0.1 147.01±34.02
AcOEt ex t. 10 0.1 121.22±27.14＊
n-BuOH ex t. 10 0.1 131.31±23.59＊
　　＊＊＊P<0.001 , ＊P<0.05 vs contro l
Tab.2　The effects of ethyl acetate and n-butanol extracts from Orobanche cumana on the content of malondialdehyde(MDA)
in liver tissue of mice(in vivo)
Group No of mice Dose(mg/kg) MDA(nmo l/g tissue)( x ±s)
Control 10 - 10.61±3.62
Vitamin E 10 75 5.44±2.05＊＊
AcOEt ex t. 10 500 1.71±0.41＊＊＊
n-BuOH ex t. 10 500 7.04±2.73＊
　　＊＊＊P<0.001 , ＊＊P<0.01 , ＊P<0.05 vs.control
2.3　列当苷(Or)和毛蕊花苷(V)对小鼠肝脏过
氧化脂质生成的影响(体外)[ 6]
取雄性小鼠 10只 ,实验方法同实验 2.1。计
算每克组织过氧化脂质生成量 ,同时计算半数抑
制浓度 IC50 。体外实验结果表明:用乙酸乙酯提
纯的 Or、V 对小鼠肝脏过氧化脂质生成有非常明
显的抑制作用 。其半数抑制浓度分为 1.2±0.2 、
1.1±0.3 g/mL。提示 Or 、V 是欧亚列当中抗脂
质过氧化作用的活性成分(表 3)。
Tab.3　The ef fects of Or and V on the content of malondialdehyde(MDA)in liver tissue of mice(in vitro)
Group
No o f
mice
Dose(μg/m L final
concentra tion)
MDA(nmol/ g tissue)
( x±s)
IC50
(μg/m L)
control 10 — 130.71±28.44
VE 10 5 5.91±3.88＊＊＊ 0.3±0.1
10 1 22.78±7.43＊＊＊ (0.2 ～ 0.4)
10 0.5 56.82±11.85＊＊＊
10 0.1 97.03±11.15＊＊
Or 10 10 3.78±2.55＊＊＊ 1.1±0.2
10 5 15.09±5.18＊＊＊ (1.0 ～ 1.3)
10 1 61.84±10.06＊＊＊
10 0.5 102.18±11.65＊
10 0.1 135.25±13.70
V 10 10 2.29±1.58＊＊＊ 1.1±0.3
10 1 81.71±11.25＊＊＊ (0.8 ～ 1.4)
10 0.1 120.54±13.81
　　＊＊＊P<0.001 , ＊＊P<0.01 , ＊P <0.05 vs control
205第 3 期 刘东春等:欧亚列当提取物抗脂质过氧化作用的研究　　　
3　讨论
许多研究表明:机体活性氧 、自由基过多会引
起脂质过氧化反应 、蛋白质变性 、酶失活 、DNA链
断裂 、生物结构受损 ,细胞解体及至机体病变死
亡。很多疾病的发生均与自由基引发脂质过氧化
有关 。如衰老的原因之一就是机体内质脂过氧化
物生成过多对细胞膜产生明显的损害作用 ,加速
细胞衰老与死亡[ 7] 。因而从某种意义上说 ,抑制
质脂过氧化反应便可以大大减少这类疾病的发
生。肝脏中含有丰富的线粒体 、内质网和高耳基
体复合物 ,这些细胞器膜在没有抗氧化药物的作
用下易产生脂质过氧化。通过体内与体外实验我
们发现欧亚列当乙酸乙酯及正丁醇提取物对小鼠
肝脏脂质过氧化物生成有明显的抑制作用 ,并且
确定列当苷和毛蕊花苷为抗肝脏脂质过氧化的活
性成分。因此我们初步认为欧亚列当具有很好的
抗衰老作用 ,其中含有的列当苷等苯乙醇苷类化
合物(pheny lethanoide gly cosides , PEG)是抗氧化
活性成分 。本文的研究结果为使欧亚列当进一步
开发成为抗衰老药物提供了初步依据。
参考文献:
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对免疫功能及酯质过氧化的作用 [ J] .上海医科大学
学报 , 1995 , 22(4):306-308.
[ 7] 刘玉兰 , 牟孝硕 ,颜鸣 , 等.螺旋藻多糖的抗衰老作用
[ J] .中国药理学通报 , 1998 , 14(4):362-363.
An experimental study on anti-lipid-peroxidation ef-
fects of Orobanche cumana Wallr.
LIU Dong-chun1 , WANG Fang2 , CUI Zheng1 , LI Yu-shan1 , YIN Jun1 , DONG Yan1
(1.Department of Tradi tional Chinese Medicines;　2.Department of Pharmacy , Shenyang Pharmaceu-
tical University , Shenyang　110016 , China)
Abstract:The ef fect of inhibition on lipid peroxides of Orobanche cumana Wallr.was investigated.It was
showed that lipid peroxides in livers of mice could be inhibi ted by ethyl acetate and n-butanol ex tracts from
Orobanche cumana Wallr..Orobanchoside and verbascoside isolated f rom the ethyl acetate ex tract w ere re-
garded as ant i-lipid-pero xidat ion bioactive substances.The IC50 of the tw o compounds w ere (1.1 ±
0.2)μg/mL and (1.1±0.3)μg/mL respectively.Orobanche cumana Wallr.can be developed as a new
medicinal resource.
Key words:Orobanche cumana Wallr.;o robanchoside;verbascoside;lipid peroxides
206 　　　沈　阳　药　科　大　学　学　报 第 18卷