全 文 :成都中医药大学学报
JournalofChengduUniversityofTCM
2008年 6月第 31卷第 2期
Jun.2008, Vol.31, No.2
紫花地丁抗炎及体外抑菌作用活性部位的筛选研究
陈胡兰 汤沛然 陈兴 赵波 张梅
(成都中医药大学药学院 , 四川成都 610075)
摘 要:目的:筛选出紫花地丁抗炎及抑菌作用的活性部位 。方法:通过二甲苯致小鼠耳肿胀实验及
体外抑菌实验 , 观察紫花地丁水煎剂 、紫花地丁乙醇提取物各分离部位对炎症的影响及体外抑菌作用 。结
果:紫花地丁水煎剂 、紫花地丁乙醇提取物乙酸乙酯部位对二甲苯所致的小鼠耳肿胀有明显的抑制作用
(P<0.05), 对大肠杆菌 、 沙门氏菌 、 金色葡萄球菌 、 表皮葡萄球菌有较强的抑菌作用。结论:紫花地丁
水煎剂 、紫花地丁乙醇提取物乙酸乙酯部位是紫花地丁发挥抗炎 、抑菌作用的主要活性部位。
关键词:紫花地丁;抗炎;抑菌
中图分类号:R284.1;R931.6 文献标识码:A 文章编号:1004-0668 (2007)02-0052-02
基金项目:四川省中医药管理局科研基金资助项目 (基金编号 200613)
作者简介:陈胡兰 , 女 , 1974年生;在读博士 , 讲师;研究方向:中药及其复方物质基础及质量标准化研究。
StudyonBioactivePartswithAnti-inflammatoryEfectsand
Anti-bacteriaFunctioninViolaYedoensisMakino
CHENHu-lan, TANGPei-ran, CHENXing, etal
(SchoolofPharmacy, ChengduUniversityofTraditionalChineseMedicine, Chengdu, 610075)
Abstract:Objective:Toidentifythebioactivepartswithanti-inflammatoryefectsandanti-bacteriafunctioninViolayedoen-
sisMakino.Methods:Themodelsofdimethylbenzene-inducedmouseearedemaandvitroantibacterialexperimentwere
performed.Results:Thewaterextractandethylacetatepartcouldinhibitearedema(P<0.05)andhadantibacterialactivitiesagainst
Escherichiacoli, Salmonela, Staphylococcusaureus, Staphylococcusepidermidis.Conclusion:Thewaterextractandethylacetatepart
arethemainbioactivepartsofViolayedoensisMakino.
Keywords:ViolayedoensisMakino;anti-inflammation;anti-bacteriafunction
紫花地丁[ 1]为堇菜科 (Violaceae)植物紫花地
丁 ViolayedoensisMakino的干燥全草 , 其功能为清
热解毒 , 凉血消肿 , 用于疔疮肿毒 , 痈疽发背 , 丹
毒 , 毒蛇咬伤等病症 , 临床应用广泛。目前对紫花
地丁药效学研究较少 , 本文采用二甲苯致小鼠耳肿
胀实验及体外抑菌实验对紫花地丁抗炎及抑菌作用
的活性部位进行了筛选 , 为进一步的研究工作提供
依据。
1 材料
1.1 药材
紫花地丁 , 购于成都市五块石药材市场 , 由成
都中医药大学裴瑾博士鉴定为堇菜科植物紫花地丁
ViolayedoensisMakino的干燥全草。
1.2 试药
所用试剂均为分析纯 。
1.3 动物
昆明种小白鼠 , 雄性 , 体重 (20±2)g, 由四
川医学科学院实验动物研究中心提供 (合格证号
SCXK(川)2004-15)。
1.4 菌种
大肠杆菌 、 沙门氏菌 、 金色葡萄球菌 、 表皮葡
萄球菌由成都中医药大学基础医学院医学实验中心
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DOI :10.13593/j.cnki.51-1501/r.2008.02.017
第 2期 陈胡兰等 紫花地丁抗炎及体外抑菌作用活性部位的筛选研究
微生物与免疫学实验室提供。
2 方法与结果
2.1 供试品的制备
紫花地丁粉末 200 g, 加 5倍量乙醇加热回流 3
次 , 每次 2 h, 回收乙醇 , 浸膏用水溶解 , 分别用
石油醚 , 乙酸乙酯 , 正丁醇萃取 , 萃取液浓缩至 4
g(生药) /mL, 得到紫花地丁乙醇提取物石油醚
部位 、 乙酸乙酯部位 、正丁醇部位 、 水部位。
取紫花地丁药材 20 g, 加入 200 mL水 , 浸泡
0.5h, 加热煮沸 5 ~ 10 min, 双层纱布滤过;残渣
加 100mL水 , 加热至沸腾 5 min, 滤过;残渣再次
加入 100 mL水 , 加热至沸腾 5 min, 滤过;将 3次
得到的滤液合并浓缩至 20 mL, 得紫花地丁水煎剂
1 g(生药) /mL。
2.2 二甲苯致小鼠耳肿胀实验 2
取昆明种小鼠 50只 , 雄性 , 体重 (20±2)g,
随机分为空白组 、紫花地丁乙醇提取物石油醚部位
组 (1组)、乙酸乙酯部位组 (2组)、 正丁醇部位
组 (3组)、水部位组 (4组)、紫花地丁水煎剂组
(5组), ig给药 , 每天 1次 , 连续 7 d, 于末次给
药 1h后 , 将二甲苯 0.3mL滴于小鼠右耳 , 左耳不
涂做对照。 2 h后将小鼠颈部脱臼处死 , 用直径 9
mm的打孔器分别在左 、右耳同一部位打下圆耳片 ,
称重 , 计算左 、 右耳片重量之差作为肿胀度 , 比较
组间差异。结果见表 1。
表 1 紫花地丁水煎剂 、 乙醇提取物各分离部位
对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 ( x±s)
组别 剂量 (生药 g/kg)试验例数 (只) 耳肿胀度 (mg)
空白组 — 10 7.3±3.2
1组 0.8 10 5.2±3.2
2组 0.8 10 3.4±2.5*
3组 0.8 10 6.7±4.3
4组 0.8 10 4.7±5.3
5组 0.8 10 3.3±2.2*
与空白组比较 , *P<0.05
紫花地丁乙醇提取物乙酸乙酯部位 、 紫花地丁
水煎剂可以明显抑制二甲苯诱发的小鼠耳肿胀 。
2.3 体外抑菌实验
分别取紫花地丁乙醇提取物水部位 (1号)、
石油醚部位 (2号)、 正丁醇部位 (3号)、乙酸乙
酯部位 (4号)、 紫花地丁水煎剂 (5号)各 2 mL
于灭菌空白平皿中 , 将已灭菌营养琼脂冷却至 50℃
左右 , 注入 18 mL/皿 , 充分混匀 , 得到 10倍稀释
的含药平板 , 用定量点种法分别接种约为 103 ~ 104
CFU/mL大肠杆菌 、 沙门氏菌 、 金色葡萄球菌 、表
皮葡萄球菌菌液 20μL于普通营养琼脂平板和含药
平板上 , 经 37℃, 24h培养 , 计数生长菌落 , 对比
生长数量的差别 , 从而判断紫花地丁乙醇提取物各
分离部位及紫花地丁水煎剂的体外抑菌效果 。结果
见表 2。
表 2 紫花地丁水煎剂 、 乙醇提取物各分离部位体外抑菌实验
菌种 含药平板 (10×稀释) 营养琼脂平板
1 2 3 4 5 CK对照
大肠杆菌 24 ≥ 100 0 0 0 ≥100
沙门氏菌 33 42 18 0 0 48
金色葡萄球菌 9 7 11 0 0 14
表皮葡萄球菌 9 0 4 0 0 48
通过计数各含药平板与 CK对照平板上的细菌
生长数量得知 , 紫花地丁水煎剂和乙醇提取物乙酸
乙酯部位对各细菌均有抑制作用 , 在 10倍稀释时
能够完全抑制 103 ~ 104 CFU/mL菌量的大肠杆菌 、
沙门氏菌 、 金色葡萄球菌 、表皮葡萄球菌的生长繁
殖;紫花地丁乙醇提取物水部位 、 石油醚部位 、正
丁醇部位在 10倍稀释时对 103 ~ 104 CFU/mL菌量
的大肠杆菌 、沙门氏菌 、 金色葡萄球菌 、 表皮葡萄
球菌有不同程度的抑制作用。
3 讨论
紫花地丁水煎剂和乙醇提取物乙酸乙酯部位对
二甲苯诱发的小鼠耳肿胀有明显的抑制作用 , 对大
肠杆菌 、沙门氏菌 、 金色葡萄球菌 、表皮葡萄球菌
均有抑制作用 , 在 10倍稀释时能够完全抑制 103 ~
10
4 CFU/mL菌量的各细菌的生长繁殖 。
该结果表明:紫花地丁水煎剂和乙醇提取物乙
酸乙酯部位具有明显的抗炎作用和抑菌作用 , 是紫
花地丁发挥抗炎抑菌作用的主要活性部位 , 为进一
步的研究工作提供了依据 。
致谢:本研究工作体外抑菌实验部分得到了成
都中医药大学基础医学院医学实验中心秦玉花老师
的协助 , 在此致谢。
参考文献
[ 1] 中国药典委员会 .中华人民共和国药典 .2005年版一
部 [ M] .北京:化学工业出版社 , 2005.
[ 2] 张大方 , 孟宪丽 , 吴清和 , 等 .药理与中药药理实验
[ M] .上海:上海科学技术出版社 , 2002:93-94.
(收稿日期:2008-01-24)
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