全 文 :常春卫矛质量标准研究
蒋 林1,黎 明1,雷震鸣1,韦松基2
(1. 广西中医学院制药厂,广西 南宁 530023;2. 广西中医学院,广西 南宁 530001)
摘要 目的:建立常春卫矛药材的质量控制标准。方法:采用生药学和薄层色谱法对其进行鉴定,并测定其水
分、总灰分和浸出物的含量。结果:对常春卫矛的药材性状、显微特征进行了描述;对不同产地的常春卫矛进行了
薄层色谱鉴别;测定了水分、总灰分和浸出物的含量。结论:较全面的考察了常春卫矛的各项质量指标,为制定常
春卫矛的质量标准提供了依据。
关键词 常春卫矛;质量标准;TLC
中图分类号:R282. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2012)01-0050-04
收稿日期:2010-12-03
基金项目:广西壮族自治区自然科学基金(2010GXNSFA013224) ;广西壮族自治区科学研究与技术开发计划项目(0815005-2-6)
作者简介:蒋林(1965-) ,男,教授,主要从事药品食品开发研究;Tel:0771-5086006,E-mail:bainianlejiang@ 163. com。
常春卫矛药材为卫矛科植物常春卫矛 Euony-
mun hederaceus Champ. ex Benth. 的干燥地上部分。
常春卫矛为常绿攀援灌木,生于疏林及山坡上,主要
分布于福建、台湾、湖南、广东、广西、贵州、云南等
地,具有补肝肾,强筋骨,活血调经功效;临床上主治
肾虚腰痛,久泻,风湿痹痛,跌打损伤,月经不调〔1〕。
目前除了对常春卫矛的化学成分有少量研究报道
外〔2〕,尚未见到对其系统深入的研究工作,近年我
们通过对常春卫矛药效试验表明,常春卫矛乙醇提
取物对抗疲劳、抗炎、镇痛、抗凝血、免疫增强、改善
血液流变学等指标有明显的作用〔3、4〕。因此,为了
更好地开发利用这一植物资源,本实验对常春卫矛
进行药材性状、显微特征和薄层色谱鉴别,并测定其
水分、总灰分和浸出物的含量。为制定常春卫矛的
质控标准、开发新药奠定了基础。
1 实验材料与仪器
1. 1 药材与试剂 常春卫矛药材,分别釆于广西
的武鸣、上林、资源、全州、灵川、隆林、宾阳、来宾、西
林、灌阳,由广西中医学院韦松基教授鉴定为卫矛科
植物 常 春 卫 矛 Euonymun hederaceus Champ. ex
Benth. 的干燥地上部分。卫矛醇对照品由中国药
品生物制品检定所提供,批号:111781-200901;甲
醇、氯仿、石油醚、丁醇、丙酮等试剂均为分析纯。
1. 2 仪器 Sartorius BT125D电子天平(赛多利斯
科学仪器有限公司) ;SG250HE超声波清洗仪(上海
冠特超声仪器有限公司) ;Motic生物显微镜。
2 方法与结果
2. 1 药材性状 本品为干燥的地上部分,茎枝常
有不定根,呈圆柱状,有纵皱纹,略弯曲,长短不一,
直径 3 ~ 10 mm,茎棕褐色,表面粗糙,有较大且突起
皮孔;枝灰褐色,有细疣状密集皮孔,幼枝灰褐色,扁
圆柱形,质坚硬,不易折断,断面不整齐,呈纤维状,
浅黄色。单叶对生,叶柄长 5 ~ 10 mm;叶片薄革质,
略皱缩,灰绿色或黄绿色,完整叶片展平后为长椭圆
形或椭圆形,长 2 ~ 10 cm,宽 2 ~ 4 cm,先端渐尖,边
缘有圆锯齿,基部楔形或近圆形,叶脉两面隆起,侧
脉每边 5 ~ 6 条。聚伞花序;花 4 数。蒴果近球形,
带紫色,果皮无刺。气微,味淡、微苦。
2. 2 显微特征
2. 2. 1 实验方法:分别取新鲜常春卫矛药材直径
为 3 ~ 10 mm部分,用石蜡切片法制片,经双重染色
制成永久片。粉末制片取茎、叶样品晒干、粉碎并过
60 目筛,用稀甘油制片,用 Motic 生物显微镜观察、
系统成像。
2. 2. 2 茎横切面:为圆形戓椭圆形,表皮细胞 1
列,类圆形戓椭圆形,外被角质层,有的细胞排列成
乳头状突起,表皮下面具 2 ~ 3 列厚角组织。皮层由
数层圆形戓椭圆形薄壁细胞组成。韧皮部外层 1 ~
3 列筛管分子被挤压成不规则状,断续成环状排列。
形成层明显。木质部较宽,导管为类圆形及多角形,
排列不整齐。射线细胞数列,作径向排列成放射状。
髓部较宽,薄壁细胞较大,类圆形,内含草酸钙簇晶
及淀粉粒。见图 1。
2. 2. 3 叶横切面:上下表皮细胞各 1 列,较大,呈
椭圆形或卵圆形,排列整齐。栅栏组织 2 列,呈柱
状,排列整齐,通过主脉。主脉的上表皮细胞与栅栏
组织之间有 1 ~ 2 列厚角细胞。海绵组织由类圆形、
椭圆形薄壁细胞构成,排列疏松。主脉维管束一个,
半圆状,外韧形。主脉突出。木质部导管数 10 列。
韧皮部细胞长方形或多角形,有 4 ~ 10 数列;在韧皮
部外方有厚角组织呈半月形,厚角细胞 2 ~ 5 列。下
表皮细胞1列,较小呈椭圆形或卵圆形,有气孔,内
·05· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 35 卷第 1 期 2012 年 1 月
DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2012.01.018
图 1 常春卫矛茎横切面详图
1. 木栓层 2. 厚角组织 3. 皮层 4. 筛管群 5. 韧皮部
6. 形成层 7. 木质部 8. 髓部
侧有厚角细胞 2 ~ 3 列。薄壁细胞中含草酸钙簇晶
及淀粉粒。表皮外具非腺毛及角质层,栅栏组织细
胞较窄,由 1 列细胞构成,中脉向上高突,较尖,下面
较宽而平坦。中脉维管束 4 个,木质部宽厚,韧皮部
较窄,维管束外侧薄壁细胞中含草酸钙簇晶和针晶
束,中脉上下表皮内侧具厚角组织。见图 2、图 3。
图 2 常春卫矛叶横切面简图
1. 上表皮 2. 栅栏组织 3. 海绵组织 4. 木质部 5. 韧
皮部 6. 下表皮 7. 厚角组织
2. 2. 4 粉末特佂:木栓细胞浅棕色,长方形或多边
形。可见单细胞非腺毛。气孔为不定式。淀粉粒脐
点人字形,多为单粒或复粒。有多数散在的棕色体。
图 3 常春卫矛叶横切面详图
1. 角质层 2. 上表皮 3. 厚角组织 4. 木质部 5. 韧皮
部 6. 下表皮
图 4 常春卫矛粉末图
1. 木栓细胞 2. 淀粉粒 3. 导管 4. 簇晶 5. 气孔
6. 纤维
·15·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 35 卷第 1 期 2012 年 1 月
石细胞长方形或近菱形,宽约 14 μm,直径 20 ~ 50
μm。偶见草酸钙簇晶。纤维多数,直径约 15 μm。
导管类型有螺纹、网纹及孔纹等,尤以螺纹、孔纹导
管为多,直径 10 ~ 20 μm。见图 4。
2. 3 浸出物测定 取常春卫矛药材粗粉 4 g,精密
称定,置于锥形瓶中,精密加正丁醇 100 mL,密塞,
冷浸,前 6 h 内时时振摇,再静置 18 h,用干燥滤器
迅速滤过,精密量取续滤液 20 mL,置已干燥至恒重
的蒸发皿中,在水浴上蒸干后,于105 ℃干燥 3 h,置
干燥器中冷却 30 min,迅速精密称定重量。结果见
表 1。
2. 4 水分测定 取常春卫矛药材 2 ~ 5 g,平铺于
干燥至恒重的扁形称量瓶中,厚度不超过 10 mm,精
密称定,打开瓶盖在 100 ~ 105℃干燥 5 h,将瓶盖盖
好,移至干燥器中,冷却 30 min,精密称定,再在上述
温度干燥 1 h,冷却,称重,至连续两次称重的差异不
超过 5 mg为止。根据减失的质量,计算样品中的含
水量。结果见表 2。
表 1 各地常春卫矛正丁醇浸出物测定结果
产地 武鸣 上林 资源 全州 灵川 隆林 宾阳 来宾 西林 灌阳
正丁醇浸出物 /% 3. 85 3. 62 3. 71 3. 59 3. 77 3. 86 3. 86 3. 70 3. 46 3. 23
表 2 各地常春卫矛水分测定结果
产地 武鸣 上林 资源 全州 灵川 隆林 宾阳 来宾 西林 灌阳
水分 /% 5. 85 8. 08 7. 17 6. 59 8. 77 5. 16 6. 06 7. 81 6. 32 5. 48
2. 5 总灰分测定 将常春卫矛药材粉碎,使能通
过二号筛,混合均匀后,取 2 ~ 3 g,置炽灼至恒重的
坩埚中,称定质量(准确至 0. 01 g) ,缓缓炽热,注意
避免燃烧,至完全炭化时,逐渐升高温度至 500 ~
600 ℃,使完全灰化并至恒重。根据残渣质量,计算
供试品中总灰分的含量。结果见表 3。
表 3 各地常春卫矛总灰分测定结果
产地 武鸣 上林 资源 全州 灵川 隆林 宾阳 来宾 西林 灌阳
总灰分 /% 3. 85 4. 43 4. 04 3. 59 3. 77 3. 56 3. 33 3. 96 3. 54 3. 91
2. 6 薄层鉴别 取常春卫矛药材粗粉 2 g,加正丁
醇 25 mL,超声 1 h,过滤,滤液浓缩至干,定容至 4
mL容量瓶中。精密称取卫矛醇对照品适量,制成每
1 mL含卫矛醇 1 mg的对照品溶液。分别点于同一
硅胶 G薄层板上,以丁醇-丙酮-水-冰醋酸(40∶ 50∶ 8
∶ 2)为展开剂,展开,取出,晾干。先喷 0. 1%高碘酸
钠水溶液,5 min 后再喷苯胺试液,最终显浅蓝色
底,白色斑点。见图 5。
图 5 常春卫矛薄层图
1. 武鸣 2. 上林 3. 资源 4. 全州 5. 灵川 6、7. 卫矛
醇对照品 8. 隆林 9. 宾阳 10. 来宾 11. 西林 12. 灌
阳
3 讨论
3. 1 常春卫矛与扶芳藤为同科同属植物,文献报
道扶芳藤含有卫矛醇活性成分〔5〕,而常春卫矛未见
报道。笔者曾做了常春卫矛与扶芳藤薄层色谱比较
试验,显示有相同斑点,为此,我们选定用卫矛醇来
做常春卫矛薄层鉴定的对照品。
3. 2 本文曾经尝试过正丁醇∶乙醇∶水(4∶ 2∶ 1)和
正丁醇∶丙酮∶水(4∶ 6 ∶ 1)为展开剂,及 10%硫酸乙
醇等不同显色剂。但是分离效果及显色效果均不理
想。最终采用以丁醇-丙酮-水-冰醋酸(40∶ 50∶ 8∶ 2)
为展开剂,并用 0. 1%高碘酸钠水溶液和苯胺试液
做为显色剂,不仅能够达到很好的分离效果,并且能
较好的显色。
3. 3 通过从药材性状、显微和薄层色谱几个方面
的鉴定,能较好的鉴别常春卫矛药材,为建立常春卫
矛质量标准打下基础。因此,我们暂定常春卫矛的
质量标准为,醇浸出物不得少于 3. 5%,水分不得过
10. 0%,总灰分不得过 4. 5%,显微和薄层应具有常
春卫矛的显微和薄层特征。
参 考 文 献
[1] 国家中医药管理局《中华本草》编委会 . 中华本草
·25· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 35 卷第 1 期 2012 年 1 月
[M].第十三卷第五册 . 上海:上海科学技术出版社,
1999:274.
[2]中囯科学院北京植物研究所编 . 中囯高等植物图鉴
[M]. 第二册 . 北京:科学岀版社,1974:666.
[3]吴玉强,蒋林,钟正贤 . 常春卫矛与爬行卫矛提取物免
疫调节抗疲劳作用对比研究[J]. 中国实验方剂学杂
志,2011,17:(12) :132.
[4]吴玉强,蒋林,钟正贤,等,常春卫矛与爬行卫矛提取物
止血消瘀药效研究[J]. 时珍国医国药,2011,22: (8) :
1842.
[5]广西壮族自治区卫生厅 . 广西中药材标准[S]. 南宁:
广西壮族自治区卫生厅,1996:112.
·化学成分·
石南藤化学成分研究
赵国伟1,夏 文2,陈 萍1,韩恩吉2* ,向 兰1*
(1. 山东大学药学院,山东 济南 250012;2. 山东大学齐鲁医院,山东 济南 250012)
摘要 目的:对石南藤的化学成分进行研究。方法:利用正相硅胶、反相硅胶和葡聚糖凝胶 Sephadex LH-20
等多种柱色谱技术对石南藤的化学成分进行分离,根据核磁共振光谱等数据进行结构鉴定,对分离得到的化合物
进行 DPPH自由基清除活性和乙酰胆碱酯酶抑制活性检测。结果:从石南藤乙酸乙酯相分离鉴定了 10 个化合物,
分别为:3,4-亚甲二氧基-苯甲酸(1)、香草酸(2)、苯甲酸(3)、N-p-香豆酰酪胺(4)、风藤酮(5)、风藤奎醇(6)、异风
藤奎醇 A(7)、4-羟基-3,5-二甲氧基 -苯甲酸(8)、风藤酰胺(9)和二氢荜茇明宁碱(10)。结论:化合物 1 ~ 6 为首
次从石南藤中分离得到,化合物 2、8 具有一定的自由基清除活性,其 EC50值分别为 224. 33 μg /mL和 11. 44 μg /mL,
化合物 1 ~ 10 均无乙酰胆碱酯酶抑制活性。
关键词 石南藤;化学成分;DPPH自由基清除活性;乙酰胆碱酯酶抑制活性
中图分类号:R284. 1 /R284. 2 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2012)01-0053-04
Study on the Bioactive Constituents of Piper wallichii
ZHAO Guo-wei1,XIA Wen2,CHEN Ping1,HAN En-ji2,XIANG Lan1
(1. School of Pharmacy,Shandong University,Jinan 250012,China;2. Qilu Hospital,Shandong University,Jinan 250012,China)
Abstract Objective:To investigate the bioactive constituents in the stem of Piper wallichii. Methods:Compounds were separated
by column chromatography of silica gel,ODS-A and Sephadex LH-20. Their structures were elucidated based on spectral analysis. DP-
PH scavenging activity and AchE inhibitory activity were tested. Results:10 compounds were isolated and their structures were identi-
fied as 3,4-methylenedioxy-benzoic acid(1) ,vanillic acid(2) ,benzoic acid(3) ,N-p-coumaroyltyramine(4) ,futoenone(5) ,futo-
quinol(6) ,isofutoquinol A(7) ,4-hydroxy-3,5-dimethoxy-benzoic acid(8) ,futoamide(9) ,dihydropiperlonguminine(10). Conclu-
sion:Compounds 1 ~ 6 are isolated from P. wallichii for the first time. Vanillic acid(2)and 4-hydroxy-3,5-dimethoxy-benzoic acid
(8)show scavenging activity against DPPH radical with ED50 at 224. 33μg /mL and 11. 44μg /mL,respectively. No compound shows
inhibition activity against AchE.
Key words Piper wallichii (Miq.)Hand. -Mazz.;Chemical constituents;DPPH scavenging activity;AchE inhibitory activity
收稿日期:2011-08-18
基金项目:国家自然科学基金(30271647,81073005) ;山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(BS2010YY032)
* 通讯作者:韩恩吉,Tel:0531-82169320,E-mail:enjihan@ sdu. edu. cn;向兰,Tel:0531-88382028,E-mail:xianglan02@ sdu. edu. cn。
石南藤 Piper wallichii(Miq. )Hand. -Mazz. 为胡
椒科胡椒属植物,藤茎入药,具有祛风寒、强腰膝、补
肾壮阳的功效,传统上常用于风湿痹痛、腰腿痛等的
治疗〔1〕。
为了进一步揭示其药效物质基础并对其进行开
发利用,本课题组对石南藤的化学成分进行了系统
分离,得到了 10 个化合物,分别鉴定为:3,4-亚甲二
氧基-苯甲酸(1)、香草酸(2)、苯甲酸(3)、N-p-香豆
酰酪胺(4)、风藤酮(5)、风藤奎醇(6)、异风藤奎醇
A(7)、4-羟基-3,5-二甲氧基-苯甲酸(8)、风藤酰胺
(9)和二氢荜茇明宁碱(10)。其中,化合物 1 ~ 6 为
首次从该植物中分离得到。此外,笔者还对化合物
1 ~ 10 的 DPPH自由基清除活性和抗乙酰胆碱酯酶
活性进行了测定。
1 仪器与材料
AVANCE 600 型超导超屏蔽傅立叶变换核磁共
·35·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 35 卷第 1 期 2012 年 1 月