全 文 :扁蓄对枸杞蚜虫杀虫活性的研究
刘立红 1 ,丁建海1 ,刘世巍 1 ,梁永锋 1 ,杨敏丽 2
(1.宁夏师范学院化学化工学院 ,宁夏固原 756000;2.宁夏大学能源化工重点实验室 ,宁夏银川 750021)
摘要 [目的 ]研究扁蓄对枸杞蚜虫的杀虫活性。 [方法]采用点滴法 ,测定了扁蓄乙醇提取物和石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇和水几
种不同极性萃取物对枸杞蚜虫的触杀活性。 [结果 ]扁蓄提取物对枸杞蚜虫有较高的触杀活性 , 浓度为 50.00g/L时 , 48 h的校正死亡
率达 95.4%,毒力回归方程为:y=4.745 7+1.098x, LC50 =1.707g/L。几种萃取物对枸杞蚜虫的杀虫活性的顺序为石油醚 >氯仿 >正丁醇>乙酸乙酯>水 ,石油醚萃取物 48h的校正死亡率 96.7%。 [结论]扁蓄对枸杞蚜虫具有较强的触杀活性且杀虫活性物质为一类
小极性的化合物。
关键词 扁蓄;杀虫活性物质;提取分离;枸杞蚜虫
中图分类号 S482.3+9 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2008)32-14183-02
StudyontheInsecticidalActivityoftheExtractsfromPolygonumaviculareL.againstWolfberryAphids
LIULi-hongetal (DepartmentofChemicalEngineering, NingxiaTeachersUneversity, Guyuan, Ningxia756000)
Abstract [ Objective] TheresearchaimedtostudytheinsecticidalactivityofextractsfromPolygonumaviculareL.againstwolfberryaphids.
[ Method] Theinsecticidalactivitiesoftheethanolextractsand5kindsofextractswithpetroleumether, chloroform, ethylacetate, n-butanol,
waterfromP.aviculareagainstwolfberryaphidswerestudied.[Result] Theresultsshowedthattheextractdisplayedhighcontactactivityto
wolfberyaphids.Thecorrectedmortalityafter48hreached95.4%undertheconcentrationof50.00g/Landtheregressionequationofviru-
lencewasy=4.745 7+1.098x, LC50 =1.707g/L.Theinsecticidalactivitiesof5extractsagainstwolfberryaphidswasintheorderofpetrole-umether>chloroform>n-butanol>ethylacetate>water.Thecorectedmortalityofpetroleumetherextractsafter48hwas96.7%.
[ Conclusion] P.avicularehadveryhighcontacttoxicitytowolfberryaphids.Theinsecticidalactivesubstanceswereakindofweakornon-
polarcompounds.
Keywords PolygonumaviculareL.;InsecticidalsubstanceExtractionandseparation;Wolfberryaphids
基金项目 宁夏自然科学基金资助项目(NZ08171);宁夏高等学校科学
研究基金资助项目(2006237-75);宁夏师范学院基金资助项
目(Z07002);国家自然科学基金资助项目(20565003)。
作者简介 刘立红(1955-),女,湖南新华人 ,教授,从事天然药物研究。
收稿日期 2008-09-16
扁蓄(PolygonumaviculareL.)为蓼科蓼属植物 ,全国大
部分地区均有生产 ,以河南 、四川 、浙江 、山东 、吉林 、河北等
地产量较大 ,全草可入药 。现代药理学研究表明 ,扁蓄全草
提取物含多种药用有效成分 ,主要为黄酮类化合物扁蓄甙和
槲皮素甙 ,具有利尿 、降压 、抗菌等作用 [ 1-3] 。对扁草的研究
目前主要限于医药方面 ,而对于扁蓄在杀虫方面的系统研究
还鲜见报道。为了充分利用这种植物资源 ,笔者以枸杞蚜虫
为试虫 ,对扁蓄中的杀虫活性物质进行了提取与初步分离。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试植物。扁蓄采自宁夏中卫市南部 。采集时间为
夏季 ,采集全草。将所采集的植物阴干 ,用植物粉碎机磨碎
并通过 40目筛 ,得到干粉。干粉装入塑料袋 ,在 4 ℃冰箱中
保存备用。
1.1.2 供试昆虫。枸杞蚜虫直接从银川市郊区未用任何农
药的野生枸杞树上采集 ,选择体形健壮 、整齐的无翅虫进行
试验。
1.1.3 主要仪器 。HP400GS型智能人工气候培养箱(武汉
瑞华仪器设备有限责任公司);AL204型电子天平(上海梅特
勒 -托利多仪器有限公司);RE-252AA型旋转蒸发仪(上海
亚荣生化仪器厂);SHB2-Ⅲ型循环水式多用真空泵(郑州长
城工贸有限公司);KA-2250 DE型数控超声波清洗器(昆山
市超声仪器有限公司)。
1.2 方法
1.2.1 扁蓄粗提物的制备。称取扁蓄干粉 50 g,放入 1 000
ml的锥形瓶 ,加入 8倍量浓度 95%乙醇溶液 ,浸泡 24h,超声
30 min,抽滤 ,残渣再用 8倍量溶剂提取 ,重复 3次。合并 3
次抽滤液 ,用旋转蒸发仪浓缩得浸膏。将浓缩得到的浸膏用
浓度 50%的丙酮配制系列浓度 。放在 4 ℃冰箱中 ,备用。
1.2.2 扁蓄粗提物的初步分离 。称取浓缩后的浸膏 5.6 g,
用 30ml水悬浮 ,装入分液漏斗中 ,采用液 -液分配萃取法依
次用石油醚 、氯仿 、乙酸乙酯 、正丁醇按照 1∶1比例萃取 ,将得
到的不同极性萃取物及水层剩余物均称重 ,计算萃取率。具
体分离过程见图 1[ 4] 。
图 1 提取物的液-液分配萃取分离。
Fig.1 Extractionandseparationofliquid-liquidpartitionof
extracts
1.2.3 杀虫活性测定(点滴法)。挑选健康 ,大小一致的无
翅枸杞蚜虫 ,在虫体前胸背板处点滴约 1 μl供试液;将试虫
转入垫有保湿滤纸的培养皿中 ,饲喂新鲜枸杞叶片。于处理
后 24、48 h分别记录幼虫的死亡情况 。每处理 30头 ,重复 6
次 ,对照浸渍浓度 50%丙酮 。计算死亡率和校正死亡率。
死亡率(%)=(死亡数 /供试总数)×100
校正死亡率(%)=(处理组死亡率 -对照组死亡率)/
(1-对照组死亡率)×100
安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2008, 36(32):14183-14184 责任编辑 张杨林 责任校对 李洪
2 结果与分析
2.1 扁蓄粗提物杀虫活性测试结果 由表 1可知 ,扁蓄粗
提物对枸杞蚜虫有较强的触杀活性 。随着浓度的增大和时
间的延长 ,枸杞蚜虫的校正死亡率都在升高;质量浓度为
0.05 g/ml,其 48 h校正死亡率可达 95.4%。
表 1 扁蓄粗提物对枸杞蚜虫触杀作用
Table1 ContacttoxicityofP.aviculareL.crudeextractstowolf-
berryaphid %
供试样品∥g/ml
Testingsample
死亡率
Mortality
24h 48h
校正死亡率
Correctedmortality
24h 48h
0.05 92.0 95.7 91.7 95.4
0.025 80.0 87.5 79.3 86.6
0.012 5 79.4 83.1 78.7 81.9
0.006 25 55.1 82.0 53.6 80.7
0.003 125 34.3 59.1 32.1 56.2
注:每处理 30头 ,重复 6次。毒力回归方程:y=4.745 7+1.098x, r=
0.950 7, LC50 =0.001 707g/ml(LC50的 95%置信区间 0.001 061~
0.002 747g/ml)。
Note:Thereare30headsineachtreatmentwith6repeats.Toxicregression
equationisy=4.745 7+1.098x, r=0.950 7, LC50 =0.001 707
g/ml(95% confidenceintervalofLC50 is0.001 061 -0.002 747
g/ml).
2.2 扁蓄粗提物的初步分离及活性跟踪测试结果 由表 2
表 2 液-液分配萃取法对扁蓄粗提物的初步分离结果
Table2 PreliminaryseparationofP.aviculareL.crudeextracts
byliquid-liquidpartitionextractionmethod
提取物
Extracts
状态
State
重量∥g
Weight
萃取率∥%
Extractionrate
石油醚萃取物 Petroleumetherextract固态 Solid 1.231 21.80
氯仿萃取物 Chloroformextract 固态 Solid 0.068 1.21
乙酸乙酯萃取物 Aceticetherextract固态 Solid 0.429 7.60
正丁醇萃取物 Butanolextract 固态 Solid 1.031 18.20
水层剩余物 Waterlayerresidues 固态 Solid 1.722 30.40
可知 ,各溶剂萃取物得率大小依次为水 >石油醚 >正丁醇 >
乙酸乙酯 >氯仿。由表 3可知 ,以枸杞蚜虫为试虫时 ,各萃
取物的活性为石油醚 >氯仿 >正丁醇 >乙酸乙酯 >水。
表 3 不同溶剂萃取物对枸杞蚜虫的触杀作用
Table3 Contacttoxicityofdifferentsolventextractstowolfberry
aphid %
供试样品
Testingsample
死亡率
Mortality
24h 48h
校正死亡率
Corectedmortality
24h 48h
石油醚萃取物 Petroleumetherextract91.7 97.2 91.1 96.7
氯仿萃取物 Chloroformextract 54.2 67.8 50.9 64.2
乙酸乙酯萃取物Aceticetherextract 16.2 31.7 13.4 26.8
正丁醇萃取物 Butanolextract 47.4 57.9 45.6 54.9
水层剩余物 Waterlayerresidues 13.8 30.5 10.9 25.5
注:供试样品均为 0.005g/ml。
Note:Thetestingsamplesareal0.005g/ml.
3 结论与讨论
(1)试验所选用的植物扁蓄是一种常用的中药材 ,具有
利尿降压等作用。该研究结果表明 ,扁蓄对枸杞蚜虫也具有
很高的触杀活性 ,并通过对其乙醇粗提物浸膏的初步分离和
杀虫活性跟踪测试 ,明确了扁蓄中的杀虫活性物质为一类小
极性的化合物。
(2)该试验可以明确扁蓄乙醇浸膏的石油醚萃取部位的
活性最强 ,得率最高 ,为进一步研究扁蓄中的杀虫活性物质
奠定了的基础。但由于植物次生物质种类多 ,结构复杂 ,所
得石油醚部位物质仍是一类混合物 ,还必须进一步采用柱层
析分离和活性跟踪的方法分离纯化得到杀虫活性单体物质 ,
另外有关扁蓄的杀虫机理也有待深入研究。
参考文献
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究[ J] .安徽农业科学 , 2008, 36(9):3765, 3813.
(上接第 14154页)
由表 1、2可看出 ,主次因素由极差大小确定:A>D>B
>C,即影响甘草渣黄酮提取效率的因素贡献率为乙醇浓度
>提取时间 >提取功率 >固液比。各因素内的比较表明 , 3
个乙醇浓度水平间存在极显著差异 ,其中以 80%乙醇提取的
效果最佳;固液比对甘草渣中黄酮得率没有明显的影响 ,在
不考虑其他因素的前提下可以选择最节约成本的水平 ,所以
选取 1∶10;不同提取功率间存在显著差异 ,其中以 300 W为
最佳提取功率;提取时间的长短对提取率也有影响 ,而提取
时间 60 min时即达到了提取要求。综合上述试验结果与分
析 ,甘草渣黄酮乙醇提取最佳的工艺条件为 A2 B1C1D2。
3 结论与讨论
从经济成本综合因素考虑 ,甘草渣中的总黄酮最佳提取
工艺条件为:80%乙醇 ,固液比 1∶10,微波功率 300W,微波辅
助回流 60 min。经试验验证 ,在此条件下 ,甘草渣中总黄酮
收率达到 0.408%。采用微波技术对活性物质的提取具有萃
取效率高 、选择性强 、重现性好 、节省时间 、节省溶剂 、节能 、
污染小等众多优点。该法对提取甘草渣中总黄酮有明显优
势 ,为该药材的进一步研究和合理利用提供了基础资料。
参考文献
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14184 安徽农业科学 2008年