全 文 :扁蓄对小菜蛾杀虫活性物质初选
丁建海 , 杨敏丽* (宁夏大学能源化工重点实验室 ,宁夏银川 750021)
摘要 [目的]分离扁蓄中的杀虫活性物质。[方法]采用液-液分配萃取法分离扁蓄乙醇粗提物的活性物质 , 以小菜蛾为试虫 ,进行室
内毒力测定和杀虫活性跟踪测试 ,计算萃取率 、死亡率和校正死亡率。[结果] 扁蓄粗提物对小菜蛾 3龄幼虫的 LC50为 0.011 8 g/ml。扁
蓄乙醇浸膏的石油醚萃取部位的活性最强 ,得率最高 ,为 21.80%,各溶剂萃取率大小依次为石油醚>正丁醇>乙酸乙酯>氯仿。各萃
取物的活性为石油醚>氯仿>正丁醇>乙酸乙酯>水。石油醚萃取物 72 h对小菜蛾的 3龄幼虫触杀活性最高 ,死亡率和校正死亡率分
别为 96.7%、96.6%。[结论]扁蓄对小菜蛾具有很高的触杀活性。扁蓄的杀虫活性物质为一类小极性的化合物 ,在粗提物中得率最高。
关键词 扁蓄;杀虫活性物质;提取分离;小菜蛾
中图分类号 Q946 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2007)36-11890-01
Preliminary Screening of the Insecticidal Active Substances in Polygonum aviculare L.to Plutella xylostella
DING Jian-hai et al (Key Laboratory of Energy Sources and Chemical Engineering , Ningxia University, Yinchuan , Ningxia 750021)
Abstract [ Objective] The research aimed to separate the insecticidal active substances from Polygonum aviculare L.[Method] The active substances in
crude extracts from Polygonum aviculare L.were separated with alcohol by liquid-liquid distribution extraction method.With Plutella xylostella as the tested
insects , indoor toxicity determination and the tracking test on the insecticidal activity were made to calculate the extraction rate, the mortality rate and the
corrected mortality rate.[ Result] LC50 of crude extracts from P.aviculare to the 3rd instar larva was 0.011 8 g/ml.The parts extracted by petroleum
ether in ethanol-extracts from P.aviculare had the strongest activity and the highest yield(21.80%).The extraction rates of each solvent was in order as
follows:petroleum ether >butanol>ethyl acetate>chloroform.The activities of each extract was petroleum ether >chloroform>butanol>ethyl acetate>
water.The extracts by petroleum ether for 72 h had the highest contact toxicity to the 3rd instar larva ,with the mortality rate and the corrected mortality
rate of 96.7% and 96.6% resp.[ Conclusion] P.aviculare had very high contact toxicity to P.xylostella.The insecticidal active substances in P.avicu-
lare were a kind of small-polar compounds with the highest yield in the crude extracts.
Key words Polygonum aviculare L;Insecticidal active substance;Extraction and separation;Plutella xylostella
基金项目 国家自然科学基金资助项目(20565003);宁夏自然科学基
金资助项目(NZ0719)。
作者简介 丁建海(1977-),男 ,宁夏中卫人 ,在读硕士 , 从事植物源
杀虫剂研究。 *通讯作者 , 博士 ,教授 , E-mai l:yml@nxu.
edu.cn。
收稿日期 2007-07-19
扁蓄(Polygonum aviculare L.)系蓼科蓼属植物 ,全国大部
分地区均产 ,以河南 、四川 、浙江 、山东 、吉林 、河北等地产量
较大。文献报道扁蓄有一定的杀虫活性[ 1-3] ,但对其活性物
质并未见研究报道。笔者对扁蓄乙醇提取物的杀虫活性进
行了初步筛选 ,发现其对小菜蛾有较强的杀虫活性。拟以小
菜蛾为试虫 ,通过杀虫活性跟踪检测 ,对扁蓄中的杀虫活性
物质进行初步分离。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试植物材料。扁蓄采自宁夏中卫市南部。采集时
间为夏季 ,采集全草 。将所采集的植物阴干 ,用植物粉碎机
磨碎并通过40目筛 ,得干粉 ,装入塑料袋 ,在4 ℃冰箱中保存
备用。
1.1.2 供试昆虫。小菜蛾采用人工饲养 ,选择健康 、大小一
致的 3龄幼虫进行试验。
1.2 仪器 人工气候箱 、电子天平 、超声波清洗器 、植物样品
粉碎机 、旋转蒸发仪 、电热鼓风干燥箱 、培养皿 、量筒 、烧杯等。
1.3 方法
1.3.1 扁蓄粗提物的制备。准确称取扁蓄干粉 50 g ,放入
1 000ml锥形瓶中 ,加入 8倍量 95%乙醇溶液 ,浸泡 24 h ,超
声 30min ,抽滤 ,残渣再用 8倍量溶剂提取 ,重复 3次。合并 3
次抽滤液 ,用旋转蒸发仪浓缩得浸膏 。将浓缩得到的浸膏用
50%的丙酮配制成浓度为 0.050 000、0.025 000、0.012 500、
0.006 250 、0.003 125g/ml的溶液 ,置 4 ℃冰箱中备用。
1.3.2 扁蓄粗提物的初步分离 。称取浓缩后的浸膏 5.6 g ,
用 30ml水悬浮 ,装入分液漏斗中 ,采用液-液分配萃取法依
次用石油醚 、氯仿 、乙酸乙酯 、正丁醇按照 1∶1比例萃取 ,将
得到的不同极性萃取物及水层剩余物均称重 ,计算萃取率 。
具体分离过程见图 1。
图 1 扁蓄粗提物的初步分离
1.3.3 杀虫活性测定。浸虫法:挑选健康 、虫体大小一致的
3龄小菜蛾幼虫 ,放入用纱网制成的圆柱形容器 ,在溶液中浸
10 s ,迅速取出 ,并用干净的吸水纸吸去多余药液 ,然后将浸
药试虫转入垫有保湿滤纸的培养皿中 ,饲喂新鲜甘蓝叶片 。
于处理后 24 、48和 72 h 分别记录幼虫的死亡情况。每处理
10头 ,重复 6次 ,对照浸渍 50%丙酮。计算死亡率 。
表1 扁蓄粗提物对小菜蛾 3龄幼虫室内毒力测定 %
供试样品
g/ml
死亡率
24 h 48 h 72 h
校正死亡率
24 h 48 h 72 h
0.050 000 73.3 76.6 90.0 73.3 76.6 90.0
0.025 000 56.5 64.3 73.3 56.5 64.3 73.3
0.125 000 36.7 36.7 43.3 36.7 36.7 43.3
0.006 250 11.2 20.5 30.0 11.2 20.5 30.0
0.003 125 3.3 16.7 16.7 3.3 16.7 16.7
2 结果与分析
2.1 扁蓄粗提物杀虫活性测试结果 结果见表 1。计算毒
(下转第 11893页)
安徽农业科学 , Journal of Anhui Agri.Sci.2007, 35(36):11890 ,11893 责任编辑 孙红忠 责任校对 李洪
DOI :10.13989/j.cnki.0517-6611.2007.36.045
53.0%~ 64.0%;切封洞法防治过程用药量少 ,防治费用最
低 ,投药有效率为 70.0%~ 92.0%。使用 3种投药方法在不
同季节进行鼢鼠防治 ,春季投药有效率最高 ,切封洞法投药
春季比夏季投药有效率提高了 22.0%。在春季 ,林内杂草比
较少 ,鼢鼠经过一个漫长的冬季 ,急需补充营养 ,取食活动频
繁 ,防治人员容易找到鼠洞 ,投药准确性高;而在夏季和秋
季 ,林内杂草多 ,生长茂盛 ,防治人员不易发现鼠洞 ,投药准
确性差。如果条件允许 ,防治应该在春季进行。在劳力充
足 ,用工费低 ,时间许可的情况下 ,采用切封洞法最好。
表 6 不同季节 3种投饵方法的防治费用统计
防治时间 地点 防治方法 投饵洞数∥个 洞投药量∥kg 药成本∥元 劳力费∥元 总成本∥元 投药有效率∥%
2001年夏季 柴沟 插洞 150 1.5 30 8.0~ 10.0 39.0 30.0
切洞 100 1.0 20 13.3 33.3 53.0
切封洞 50 0.5 10 20.0 30.0 70.0
2002年春季 柴沟 插洞 150 1.5 30 5.7~ 6.7 36.2 36.7
切洞 100 1.0 20 10.0 30.0 64.0
切封洞 50 0.5 10 13.3 23.3 92.0
2003年秋季 柴沟 插洞 150 1.5 30 8.0~ 10.0 39.0 32.7
切洞 100 1.0 20 13.3 33.3 60.0
切封洞 50 0.5 10 20.0 30.0 90.0
注:用工费每人 20元/ d;药剂 20元/kg。
4 结论与讨论
(1)在鼠害严重的造林地 ,造林前用无公害克鼠星防治 1
次 ,造林后再用无公害克鼠星防治 1次 ,平均造林成活率可
达 97.1%,比对照提高 18.4%;造林后 2年平均保存率可达
95.3%,比对照提高 28.5%。果树由于立地条件较好 ,鼠害
防治彻底 , 2年保存率达 97.3%。
(2)在最佳的防治季节 ,根据当地的实际情况 ,劳力费 、
药剂费在防治中所占比例 ,选择较低的防治成本和当地易于
接受的投饵方法 ,以较低投入使害鼠得到有效防治 。
(3)鼠害是林业的大敌 ,严重危害林业 6大工程的实施 ,
在害鼠的控制方面 ,化学防治目前仍是有效的防治手段 ,在
化学防治的过程中 ,决定鼠害控制成败的关键因素是药剂的
选择 ,其次是防治人员的投药技术。克鼠星灭鼠剂的研制与
应用 ,在杀灭害鼠的同时 ,保护了天敌 ,维持了生态系统的平
衡 ,在农林牧业鼠害的防治方面 ,具有广阔的应用前景。
参考文献
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(上接第 11890页)
力回归方程:y =2.993 7+1.874 1 x ,相关系数 r =0.989 0 ,
LC50=0.011 8 g/ml(LC50的 95%置信区间 0.008 93~ 0.015 50
g/ml)。
2.2 扁蓄粗提物的初步分离及活性跟踪测试结果 由表 2
知 ,各溶剂萃取物得率依次为水>石油醚>正丁醇>乙酸乙
酯>氯仿。以小菜蛾为试虫时 ,各萃取物的活性为:石油醚
>氯仿>正丁醇>乙酸乙酯>水。所以判断扁蓄杀虫活性
成分在极性弱的部分 ,且其在粗提物中得率最高 ,最终确定
对石油醚萃取物进行柱层析分离 。
表 2 液-液分配萃取法对扁蓄粗提物的初步分离及其萃取物对
小菜蛾 3龄幼虫触杀活性测试结果
供试样品 重量
g
萃取率
%
死亡率∥%
24 h 48 h 72 h
校正死亡率∥%
24 h 48 h 72 h
石油醚萃取物 1.231 21.80 90.0 96.7 96.7 90.0 96.6 96.6氯仿萃取物 0.068 1.21 57.1 67.9 71.4 57.1 61.3 70.4
乙酸乙酯萃取物 0.429 7.60 0 0 0 0 0 0正丁醇萃取物 1.031 18.20 0 0 0 0 0 0
剩余水层萃取物 1.722 30.40 0 0 0 0 0 0
注:供试样品作提取物时为固态 ,触杀小菜蛾时浓度 0.005 000 g/ml。
3 讨论
(1)扁蓄是一种常用的中药材 ,具有利尿降压等作用 。
研究结果表明 ,扁蓄对小菜蛾具有很高的触杀活性 ,通过对
其乙醇粗提物浸膏的初步分离和杀虫活性跟踪测试 ,明确了
扁蓄中的杀虫活性物质为一类小极性的化合物 。
(2)该试验可以明确扁蓄乙醇浸膏的石油醚萃取部位的
活性最强 ,得率最高 ,为进一步研究扁蓄中的杀虫活性物质
奠定了基础。但由于植物次生物质种类多 ,结构复杂 ,所得
石油醚部位物质仍是一类混合物 ,还必须进一步采用柱层析
分离和活性跟踪的方法 ,分离纯化得到杀虫活性单体物质 。
另外有关扁蓄的杀虫机理也有待深入研究。
参考文献
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