全 文 ：灯心草镇静作用活性部位的研究*
王衍龙　黄建梅#　张硕峰　孙建宁
　王衍龙 ,男 , 24岁 ,在读医学硕士生
#通讯作者:黄建梅 ,女 ,副教授 ,医学硕士生导师;E-m ail:hu angjanm eiluck@ sohu. com
*国家教育部 “优秀青年教师资助计划 ”项目
(北京中医药大学中药学院　北京 100102)
摘要:目的　确定灯心草镇静作用的活性部位 。方法　灯心草部位提取物的制备主要采用溶剂法 ,
灯心草全草先用 95%的乙醇提取 ,得到的提取物进一步用石油醚 、氯仿 、乙酸乙酯和甲醇依次提
取 ,得到极性由小到大的 4个提取部位。活性筛选采用常规的镇静催眠实验 ,观察灯心草提取物对
小鼠自主活动的影响以及在戊巴比妥钠协同下对小鼠睡眠时间的影响 。结果　灯心草 95%乙醇
提取物有确切的镇静和催眠作用 ,在乙醇提取物的 4个不同极性的部位中 ,乙酸乙酯部分的镇静作
用最为确切 。结论　首次确定了灯心草的乙酸乙酯部分是镇静作用的有效部位。在此基础上 ,可
以更深入探讨灯心草镇静作用的有效成分或成分群以及镇静作用的特点。
关键词:灯心草;镇静作用;催眠作用;活性部位
中图分类号:R285.5
Sedative fraction from Juncus effuses L.
WANG Yan-long, HUANG J ian-m ei, ZHANG Shuo-feng, SUN Jian-ning
(Be ijing University of ChineseM edicine, Be ijing 100102 )
Abstract:Objective　 To de term ine the ac tive frac tion w ith seda tive effect from Juncus effuses L.
Method 　The samples w ere prepared by so lvent extraction. The who le Juncus effusus L. w as ex tracted
w ith 95% ethano l a t first, and then the e thano lic extract w as further sepa ra ted w ith petroleum ethe r,
ch lo ro form , e thy l aceta te and me thano l in turn to ge t four fractions from large to sm all in po larity. The
sedative and hypno tic experimen tw as made for active screening. The influences o f ex tracts from Juncus
effuses L. on mouse autonom ic ac tiv ity and sleeping time (combined w ith pen toba rbita l sodium )were
obse rved. Result　Juncus effuses L. had re liab le sedative and hypnotic effects. The ethy l ace tate extract
had the most de fin ite seda tive effect among the four differen t po larity frac tions of Juncus effuses L.
Conc lusion 　It is the first time tha t the ethy l ace tate extrac t of Juncus effuses L. is proved to be the
effective seda tive frac tion. O n th is basis the furthe r stud ie s a re needed on active princip les or principle
group w ith sedative effect and the charac te ristics of this e ffec t in Juncus effuses L.
Key words:Juncus effusus L. seda tive effect, hypno tic effect, active fraction
灯心草为灯心草科植物灯心草 Juncuse effusus
L.的干燥茎髓 。该药甘 、淡 ,微寒 。归心 、肺 、小肠
经 。能清心火 ,利小便。用于心烦失眠 ,尿少涩痛 ,
口舌生疮[ 1] 。灯心草的化学成分主要有菲类 [ 2] 、二
氢菲类 [ 3 - 5]及其苷[ 6] 、黄酮[ 2] 、甘油酯 [ 2, 7] 、三萜类
化合物[ 8 -9]和挥发油等 。尽管灯心草的化学成分已
有研究 ,临床作用也比较确切 ,但是灯心草中治疗心
烦失眠的有效成分或成分群并不明确 ,作用特点和
作用机理也不清楚。 2000年版药典中没有相应成
分的定性定量标准。为此 ,我们对灯心草的干燥全
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第 29卷第 3期 2006年 3月
Vo .l 29 No. 3 M a r. 2006
　 　 北京中医药大学学报
Journal o f Be ijing Unive rsity o f T raditiona l Chine seM edic ine
草进行了药效学实验研究 ,首先证明灯心草干燥全
草的 95%乙醇提取物具有镇静 、催眠作用 ,然后将
该提取物依次用石油醚 、氯仿 、乙酸乙酯 、甲醇 4种
极性不同的溶剂提取 ,分为 4部分 , 进行了活性筛
选 ,现将研究结果报道如下 。
1　实验材料
1. 1　药物
灯心草干燥全草 ,采自福建古田 。戊巴比妥钠 ,
德国进口北京化学试剂公司分装 ,批号:020402。安
定片 ,北京益民药业有限公司产品 ,批号:0302080,
规格:含 2. 5mg /片 。
1. 2　动物
ICR小鼠 ,雄性 ,体重 20 ～ 24 g,北京维通利华
试验动物技术有限公司提供。
1. 3　仪器
MK -AN IMEX小动物自主活动仪 ,日本产。
2　实验方法
2. 1　预试及提取溶剂的确定
2. 1. 1　药材提取 ,供试品制备:灯心草干燥全草
170 g,先用乙醚提取 3次 ,药渣晾干后再用 95%乙
醇提取 3次 ,提取后的药渣晾干后再用水提取 3次 ,
提取的时间均为 1、1、0. 5 h。 3种溶剂提取分别出
膏 1. 5、11. 5、17. 7 g,提得的干膏减压干燥 24 h后 ,
分别加适量吐温 - 80研磨 ,再加水继续研磨使乳
化 ,并根据给药剂量和给药体积加水稀释 (最终各
给药组供试液吐温 - 80含量均为 0. 5%)。
2. 1. 2　乙醚提取物 、95%乙醇提取物 、水提取物对
小鼠自主活动次数的影响试验:取小鼠 60只 ,雄性 ,
随机分成 5组 ,每组 12只 。溶媒对照组灌胃给予
0. 5%的吐温 - 80水溶液;给药组分别灌胃给予已
配制好的醚提物 、醇提物 、水提物供试液 ,剂量均为
20 g /kg(该剂量经预试得出);阳性对照组灌胃给予
5 mg /kg的安定水溶液。给药体积均为 20 mL /kg,
下同。给药 1 h后 ,将小鼠置小动物自主活动仪中 ,
使其适应 3m in后 ,记录 8 m in内活动次数。
2. 1. 3　乙醚提取物 、95%乙醇提取物 、水提取物延
长戊巴比妥钠睡眠时间试验:小鼠 60只 ,雄性 ,随机
分成 5组 ,每组 12只。阳性对照组灌胃给予 4 mg /
kg的安定水溶液 ,其余各组给药情况同 2. 1. 2。各
组给相应药物 1 h后 ,腹腔注射阈剂量的 0. 3%戊巴
比妥钠 (阈剂量经预试为 35 mg /kg)。观察翻正反
射消失至恢复时间。
2. 2　活性部位的筛选
2. 2. 1　药材提取与粗分离:灯心草干燥全草 15. 5
kg,切为 2 ～ 3 cm的小段 ,以 15倍量 95%乙醇回流
提取 3次 ,分别提取 1.5、1、1 h,提取液回收乙醇 ,浓
缩成膏。将浸膏加 80 ～ 100目硅胶 (青岛海洋化工
厂)2 kg拌样 ,水浴加热至全干 ,称量为 3 100 g。将
干燥后的样品装入层析柱中 ,依次用石油醚 、氯仿 、
乙酸乙酯 、甲醇洗脱 ,洗脱液回收溶剂 ,得到的稠膏
分别为 30. 6、93.3、210. 3、943. 5 g。
2. 2. 2　石油醚 、氯仿 、乙酸乙酯 、甲醇 4个提取部分
对小鼠自主活动次数的影响试验 [ 10] :比较 4部分对
小鼠自主活动次数影响的差异 。 4部分取样后减压
干燥 24 h ,分别加适量吐温 - 80研磨 ,再加水继续
研磨使乳化 ,并根据给药剂量和给药体积加水稀释
(最终各给药组供试液吐温 - 80含量均为 0. 5%)。
小鼠 72只 ,雄性 ,随机分成 6组 ,每组 12只。溶媒
对照组灌胃给予 0. 5%的吐温 - 80水溶液;4给药
组分别灌胃给予已配制好的石油醚 、氯仿 、乙酸乙
酯 、甲醇部分的供试液 ,剂量均为 20 g /kg;阳性对照
组灌胃给予 5 mg /kg的安定水溶液 。给药 1 h后 ,
将小鼠置小动物自主活动仪中 ,使其适应 3 m in后 ,
记录 8 m in内活动次数 。
2. 2. 3　石油醚 、氯仿 、乙酸乙酯 、甲醇 4个提取
部分延长戊巴比妥钠睡眠时间试验 [ 10] :小鼠 72
只 ,雄性 ,随机分成 6组 , 每组 12只 。阳性对照
组灌胃给予 4 m g /kg的安定水溶液 , 其余各组给
药情况同 2. 2. 2。各组给相应药物 1 h后 ,腹腔
注射阈剂量的 0.3%戊巴比妥钠 。观察翻正反射
消失至恢复时间 。
2.3　统计学处理
计量资料用 –x ±s表示 ,用统计软件 SPSS 10.0
处理各组数据与溶媒对照组 t检验比较 , P <0.05
表示具有显著性差异。
3　结果
3. 1　三种提取物对小鼠自主活动次数的影响
结果见表 1。
表 1　乙醚提取物 、95%乙醇提取物 、水提取物
对小鼠自主活动的影响(–x±s)
组别 n 剂量 活动次数 /次
溶媒对照 12 20 m L /kg 1168. 5±90. 4
乙醚部分 12 20 g /kg 1138. 6±101. 6
95%乙醇部分 12 20 g /kg 1042. 1±60. 8**
水提部分 12 20 g /kg 1198. 7±69. 6
阳性对照 12 5 mg /kg 955. 1±67. 3***
　　注:与溶媒对照组比 *P <0. 05　**P <0. 01　
***P <0. 001
182 北京中医药大学学报　 　 　 　　　 　　　　　　　　　　　第 29卷
3. 2　三种提取物对戊巴比妥钠睡眠时间的影响
结果见表 2。
表 2　乙醚提取物 、 95%乙醇提取物 、水提取物
延长戊巴比妥钠睡眠时间试验(m in;–x±s)
组别 n 剂量 睡眠时间
溶媒对照 12 20 mL /kg 18. 2±6. 1
乙醚部分 12 20 g /kg 23. 6±10. 4
95%乙醇部分 12 20 g /kg 29. 3±8. 4**
水提部分 12 20 g /kg 19. 3±9. 8
阳性对照 12 4 m g /kg 105. 4±19. 6***
　　注:与溶媒对照组比较**P <0.01　***P <0.001
3. 3　4个提取部分对小鼠自主活动的影响
结果见表 3。
表 3　石油醚 、氯仿 、乙酸乙酯 、甲醇 4个
提取部分对小鼠自主活动的影响(次;–x±s)
组别 n 剂量 8 m in内活动
溶媒对照 12 20 mL /kg 1174. 6±89. 3
石油醚部分 12 20 g /kg 1094. 0±155. 1
氯仿部分 12 20 g /kg 983. 6±147. 9**
乙酸乙酯部分 12 20 g /kg 982. 7±191. 6**
甲醇部分 12 20 g /kg 1053. 3±214. 4
阳性对照 12 5 m g /kg 624. 8±243. 2***
　　注:与溶媒对照组比较**P <0.01　***P <0.001
3. 4　4个提取部分对戊巴比妥钠睡眠时间的影响
结果见表 4。
表 4　石油醚 、氯仿 、乙酸乙酯 、甲醇 4个提取
部分延长戊巴比妥钠睡眠时间试验(–x±s)
组别 n 剂量 睡眠时间
溶媒对照 12 20 mL /kg 22. 8±13. 1
石油醚部分 12 20 g /kg 30. 5±9. 7
氯仿部分 12 20 g /kg 26. 8±11. 9
乙酸乙酯部分 12 20 g /kg 35. 8±12. 3*
甲醇部分 12 20 g /kg 18. 8±8. 3
阳性对照 12 4 m g /kg 120. 3±44. 8***
　　注:与溶媒对照组比较*P <0. 05　***P <0.001
4　结论
灯心草在传统中药学分类中归利水渗湿药 。然
而其有清心除烦的功效 ,主治心热烦躁 、心烦失眠 、
小儿夜啼等症[ 11] ,这些功能主治与镇静催眠的药效
对应。本研究旨在从药效学角度证实灯心草的镇静
催眠作用 ,并确定起镇静催眠作用的活性部位 ,进而
确定有镇静催眠作用的活性成分。
经预实验可知 ,灯心草的 95%乙醇提取物能够明
显减少小鼠自主活动 ,明显延长阈剂量戊巴比妥钠所
导致的睡眠时间 ,故有明显的镇静催眠作用。而乙醚
提取物和水提物无镇静催眠作用。从大量提取的实际
条件考虑 ,确定正式实验时直接用 95%乙醇提取。
正式实验用 95%乙醇提取并分成的 4部分中 ,
氯仿部分和乙酸乙酯部分均能显著减少小鼠自主活
动 ,只有乙酸乙酯部分能够明显延长阈剂量戊巴比
妥钠所导致的睡眠时间 。由以上实验结果可知 ,乙
酸乙酯部分的镇静催眠作用最为确切 ,故选定乙酸
乙酯部分进行下一步活性筛选。
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(收稿日期:2005-05-30)
183 第 3期 王衍龙等　灯心草镇静作用活性部位的研究