全 文 ：2.4　样品含量测定 分别取供试品溶液 ,进样 5μl,在给定的色
谱条件下 , 测定岩白菜素的峰面积 , 采用对照品对照法计算其含
量 , 结果见表 1 ～ 2(不同采收期的羽叶鬼灯檠 、七叶鬼灯檠采自
剑川县)。岩白菜素对照品及样品图谱见图 1。
表 1　3种岩陀药材及岩白菜根茎中岩白菜素的含量 %
样品 产地 岩白菜素的含量
羽叶鬼灯檠 大理三阳峰 4.06
剑川 4.14
云龙 2.97
西南鬼灯檠 宁蒗 4.30
七叶鬼灯檠 大理三阳峰 2.72
岩白菜 大理三阳峰 4.87
　　n=3
表 2　不同采收期两种岩陀药材中岩白菜素的含量 %
样品 5月 6月 7月 8月 9月 10月
羽叶鬼灯檠 4.62 4.42 4.23 4.14 4.28 4.58
七叶鬼灯檠 3.22 3.17 3.15 3.11 3.20 3.32
　　n=3
a-对照品岩白菜素;b-羽叶鬼灯檠　1.岩白菜素
图 1　HPLC图
3　讨论
3.1　检测波长的选择 应用紫外可见分光光度计 UV1100 在
190 ～ 400 nm范围内对岩白菜素进行紫外扫描 , 并结合三维图 ,
发现该化合物有两个吸收峰 ,分别位于 220nm和 275nm, 考虑流
动相中甲醇在 220 nm波长处对基线有影响 , 故实验中检测波长
选为 275 nm。
3.2　流动相与色谱柱的选择 本实验曾比较过文献报道过的多
种流动相:甲醇 -水(25∶ 75), 甲醇 -水(45∶55), 甲醇 -醋酸
-水(12∶0.5∶88)等系统 [ 3 ～ 5] , 经过反复多次实验 , 选择本文
“ 2.1”项色谱条件;加 0.1%磷酸可抑制拖尾。我们还对 3种色
谱柱 [ ZORBAXSB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm, 5 μm), ZOR-BAXDB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm, 5 μm), ZORBAXXDB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm, 5μm)]进行比较 , 在该色谱条
件下 ,以 ZORBAXSB-C18色谱柱(4.6mm×150mm, 5μm)分离
度较好 ,柱效高。
通过测定发现 , 3种岩陀药材中以西南鬼灯檠 Rodgersiasam-
bucifoliaHemsl.根茎中岩白菜素的含量最高 , 以七叶鬼灯檠
RodgersiaaesculifoliaBatal.根茎中岩白菜素的含量最低。同种岩
陀药材在不同产地(采自同一月份)岩白菜素的含量也有差异。
采于同一产地不同采收期的岩陀药材中岩白菜素的含量有明显
的差异 ,以 8月份含量最低 ,故作者认为最佳采收期为 5月份前 、
10月份后。
参考文献:
[ 1 ] 　云南省卫生厅.云南省药品标准 [ M] .昆明:云南大学出版社 ,
1996:72.
[ 2 ] 　江苏新医学院.中药大辞典 [ M].上海:上海人民出版社 ,
1999:2359.
[ 3 ] 　孙诗清 ,李多伟 ,郭培莹 ,等.RP-HPLC测定不同产地鬼灯檠中岩
白菜素的含量 [ J] .中成药 , 2003, 25(12):979.
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[ J] .分析科学学报 , 2003, 19(6):525.
[ 5 ] 　丁家欣 ,张秋海 ,张　玲 ,等.RP-HPLC测定不同产地与采收期虎
耳草中岩白菜素的含量 [ J].中国中药杂志 , 2002, 27(10):792.
收稿日期:2008-02-29;　修订日期:2008-05-27
基金项目:广东省科技厅课题(No:2004B30101002);广东中医药局课题(No:1040083)
作者简介:王榕乐(1982-),男(汉族),福建福州人 ,现任中山大学中山医学院神经生物学中心行政秘书 ,硕士学位 ,主要从事新药筛选研究工作.
＊通讯作者简介:谭毓治(1956-),男(汉族),江西九江人,现任广东药学院药理学教授,硕士生导师,学士学位,主要从事药物筛选与新药研究工作.
毛茛总苷抗炎镇痛作用研究
王榕乐 , 谭毓治＊ , 罗绍宝
(广东药学院 ,广东 广州　510006)
摘要:目的 观察毛茛总苷抗炎 、镇痛作用。方法 采用小鼠热板法和扭体法实验观察镇痛作用;用二甲苯诱导小鼠耳廓
肿胀和角叉菜胶诱导大鼠足肿胀实验模型观察抗炎作用。结果 200, 400, 800 mg· kg-1毛茛总苷能显著减小二甲苯诱导
的小鼠耳廓肿胀程度 , 抑制由 55℃热板刺激诱导的小鼠疼痛反应和醋酸刺激引起小鼠腹腔疼痛反应 ,效应具有浓度依赖
性;200, 400mg· kg-1毛茛总苷明显抑制角叉菜胶诱导的大鼠足肿胀。结论 毛茛总苷具有显著的抗炎 、镇痛作用。
关键词:毛茛总苷;　抗炎;　镇痛
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2009)02-0290-02
Anti-inflammatoryandAnalgesicEffectofTotalGlycosidesofRanunculusjaponicus
WANGRong-le, TANYu-zhi＊ ,LUOShao-bao
(Dept.ofPharmacology, GuangdongPharmacologicalUniversity, Guangzhou510006 China)
Abstract:ObjectiveTostudytheanti-inflammatoryandanalgesiceffectsoftotalglycosidesofRanunculusjaponicus.Meth-
odsHot-plateandbody-contortionmethodswereusedtoobservetheanalgesicefects.Dimethylbenzene-inducedauris
swelingmodelinmiceandcarrageen-inducedfeetswellingmodelinratswereestablishedtoobservetheanti-inflammatory
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时珍国医国药 2009年第 20卷第 2期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2009VOL.20NO.2　
effects.ResultsTotalglycosidesofRanunculusjaponicusatdiferentdoses(200, 400, 800 mg· kg-1)couldmarkedlyinhibit
dimethylbenzene-inducedearswellinginmice, relievepainresponseofmiceinducedby55℃ hot-plateandaceticacidsitu-
mulationinmiceabdominalcavity, withdosedependence;totalglycosidesofRanunculusjaponicus(400, 800 mg· kg-1)could
alsosignificantlyinhibitcarrageen-inducedfeetswellinginrats.ConclusionTotalglycosidesofRanunculusjaponicushasobvi-
ousanti-inflammatoryandanalgesicefects.
Keywords:TotalglycosidesofRanunculusjaponicus;　Anti-inflammation;　Analgesia
　　毛茛 Ranunculusjaponicus,又名鱼疗草 、野芹菜等 , 是毛茛科
(Ranunculaceae)毛茛属多年生草本植物 , 生长于河沟 、池沼 、水
堤旁及阴湿的草丛中 , 全国各地都有分布 , 来源丰富。 《中药大
辞典》 [ 1]记载毛茛可以治疟疾 、黄疸 、偏头痛 、胃痛 、风湿关节痛 、
鹤膝风等疾病。毛茛以民间应用为主 , 目前仅有少量的毛茛化学
成分及其药理毒理方面的研究 , 尚未进行系统研究。毛茛总苷
(TGOR)为毛茛有效药理成分之一 , 对毛茛总苷的抗炎镇痛研究
鲜见报道 , 为此我们对其进行抗炎镇痛研究 , 为进一步开发毛茛
提供实验理论依据。
1　材料与仪器
1.1 　药品 毛茛总苷由广东药学院药理教研室制备提供 , 地塞
米松(浙江仙琚制药股份有限公司 , 批号:060105), 硫酸罗通定
注射液(广东省博罗先锋药业集团有限公司 , 批号:060104)。
1.2 　动物 SPF级 SD大鼠 ,体重 150 ～ 160 g, 由广东省医学实
验动物中心提供 , 许可证号:SCXK(粤)2003 -002, 粤监证字
2005A010。 SPF级 NIH小鼠 , 体重 18 ～ 22g, 雌雄各半 ,由广东省
医学实验动物中心提供 , 许可证号:SCXK(粤)2003-002, 粤监证
字 2005A012。
1.3　仪器 电子分析天平(FA2104S型), 超级恒温器(501型)。
1.4　药物制备 毛茛全草晾干切碎 , 85%乙醇回流提取 3次 ,过
80目筛 ,合并提取液 , 减压浓缩回收溶剂 , 等体积的醋酸乙酯萃
取若干次至醋酸乙酯层为浅绿色。下层(水层)蒸干溶剂 , 得膏
状物经 D-101大孔树脂吸附 , 水洗 , 弃去 , 再用纯乙醇洗脱 , 收
集此部位 , 蒸干乙醇得膏状物即毛茛总苷。
2　方法与结果
2.1　 抗炎作用
2.1.1　毛茛总苷对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响 [ 2] 取 NIH
小鼠 48只 ,雌雄各半 , 随机均分 5组 , 即生理盐水组 , 毛茛总苷
低 、中 、高 3个剂量组(即 200, 400, 800 mg· kg-1), 地塞米松组
(10 mg· kg-1)。给药 1次 /d, 连续 3 d。末次给药后 1h,各组小
鼠右耳涂二甲苯 0.05ml/只 ,左耳作对照 , 15min后处死小鼠 , 用
直径 7mm的打孔器将双耳同部位等面积切下 , 用电子天平分别
称重 , 按下式计算右耳肿胀率。
右耳肿胀率(%)=右耳片重 -左耳片重左耳片重 ×100%
结果表明 TGOR各剂量组对二甲苯诱导的小鼠耳廓肿胀有
明显抑制作用。见表 1。
表 1　毛茛总苷对二甲苯诱导的耳廓肿胀抑制作用( x±s)
组别 剂量 C/mg· kg-1 右耳肿胀率(%)
生理盐水 - 　　　123±23
地塞米松 10 　　　54±61＊＊
TGOR(低) 200 　　　38±34＊＊
TGOR(中) 400 　　　47±50＊＊
TGOR(高) 800 　　　28±24＊＊
　　与生理盐水组比较 , ＊＊P<0.01;n=10
2.1.2　毛茛总苷对角叉菜胶所致大鼠足肿胀的影响 [ 2] 取 SD
大鼠 50只 ,雌雄各半 , 随机均分 5组 , 即生理盐水组 , 毛茛总苷
低 、中 、高 3个剂量组(即 400, 200, 100 mg· kg-1), 地塞米松组
(5 mg· kg-1), 给药 1次 /d。连续 3 d。末次给药后 2 h, 用软皮
尺先测定每鼠右后肢正常踝关节周长 ,分别在大鼠右后足跖皮下
注射 1%角叉菜胶混悬液 0.1ml/只 ,致炎 ,随后分别于 1, 2, 4, 6h
各测量 1次踝关节周长 , 记录结果 , 按下式计算足周长变化。
足周长变化 =致炎后踝关节周长 -致炎前踝关节周长
结果表明 TGOR高 、中剂量组均能显著抑制角叉菜胶所致足
肿胀 , 且第 4 ～ 6小时期间作用较强。见表 2。
表 2　毛茛总苷对角叉菜胶所致大鼠足肿胀的影响( x±s)
组别 剂量 C/mg· kg-1 足周长 l/mm
1h 2h 4h 6h
生理盐水 - 2.7±1.1 3.4±1.8 4.0±1.5 3.0±0.8
地塞米松 5 1.2±0.9＊＊ 1.7±1.2＊ 1.6±0.8＊＊ 1.4±0.8＊＊
TGOR(低) 100 2.2±1.0 3.4±0.8 2.9±1.9 3.0±0.8
TGOR(中) 200 2.0±1.1 2.3±1.3 2.5±1.2＊ 1.8±0.9＊＊
TGOR(高) 400 1.6±1.2＊＊ 2.2±1.2 2.6±1.0＊ 1.9±1.2＊
　　与生理盐水比较 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01;n=10
2.2 　镇痛作用
2.2.1　毛茛总苷对热板刺激引起小鼠疼痛反应的影响 [ 3] 调节
超级恒温水浴的温度在(55±0.5)℃, 将热板预热 10 min。取 18
～ 22 g雌性小鼠 , 每次 1只放在热板上 , 小鼠自放在热板上至出
现舔后足所需时间(s)作为该鼠的痛阈值。凡舔后足时间小于
5s或大于 30s或跳跃者 ,弃之不用。 将合格的 40只小鼠随机分
为 5组 , 即生理盐水组 , 毛茛总苷低 、中 、高 3个剂量组(即 200,
400, 800 mg· kg-1)、罗通定组(300 mg· kg-1)。各实验组小鼠
给药 1次 /d。对照组给等量的生理盐水 , 连续 3次。末次给药后
60 min测定小鼠痛阈值 ,如 60 s仍无反应 , 将小鼠取出 , 以免烫
伤 , 其痛阈值按 60s计算。结果表明 TGOR高中低剂量组显著抑
制 55℃热板刺激诱导的小鼠疼痛反应(P<0.01), 表现为痛阈值
升高 , 并呈现剂量效应依赖性。见表 3。
2.2.2　毛茛总苷对醋酸刺激引起小鼠扭体反应的影响 [ 4] 取
NIH小鼠 50只 ,雌雄各半 ,随机均分 5组 , 即生理盐水组 , 毛茛总
苷低 、中 、高 3个剂量组(即 200, 400, 800 mg· kg-1), 罗通定组
(30mg· kg-1)。各实验组小鼠给药 1次 /d。对照组给等量的生
理盐水 ,连续 3次。 末次给药后 1 h, 各鼠腹腔注射 0.6%乙酸
0.2ml/只 ,观察 15emin内各鼠出现的扭体次数 ,并计算各药的镇
痛百分率:
镇痛百分率(%)=对照组平均扭体次数 -给药组平均扭体次数对照组平均扭体次数 ×100%
表 3　毛茛总苷对小鼠热板法致痛作用的影响( x±s)
组别 剂量 C/mg· kg-1 痛阈值 t/s
生理盐水 - 14.8±2.2
罗通定 30 22.3±5.0＊＊＊
TGOR低剂量 200 20.2±3.2＊＊＊
TGOR中剂量 400 24.1±5.4＊＊＊
TGOR高剂量 800 25.9±8.3＊＊＊
　　与生理盐水组比较 , ＊＊＊P<0.01;n=10
结果表明 TGOR各剂量组可明显抑制醋酸所致小鼠躯体疼
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2009VOL.20NO.2 时珍国医国药 2009年第 20卷第 2期
痛。见表 4。
表 4　毛茛总苷对醋酸诱发小鼠扭体反应的影响( x±s)
组别 剂量/mg· kg-1
15min内
扭体次数
镇痛百分率
(%)
生理盐水 28.5±10.9 -
罗通定 30 9.0±10.3＊＊＊ 68.4
TGOR低剂量 200 15.5±5.4＊＊＊ 45.6
TGOR中剂量 400 6.4±4.6＊＊＊ 47.7
TGOR高剂量 800 8.8±6.7＊＊＊ 76.8
　　与生理盐水组比较 , ＊＊＊P<0.01;n=10
3　讨论
寻找和研究没有依赖性 、不良反应少 、疗效确切的镇痛抗炎
药一直是药物研究的热点内容之一。 从植物中寻找镇痛抗炎药
有其优点:药效良好 、不良反应少及资源丰富等优势 ,已经引起了
人们的重视。
本课题组采用经典的动物炎症和疼痛模型观察毛茛总苷的
抗炎镇痛作用。镇痛实验结果证明 , 毛茛总苷能提高小鼠热刺激
体表的痛阈 , 延长热板痛反应时间 , 抑制醋酸刺激腹腔粘膜引起
的痛反应 , 减少各鼠的扭体次数 , 说明毛茛总苷具有镇痛作用。
抗炎实验结果表明 , 毛茛总苷减少大鼠足肿胀和二甲苯诱导的耳
廓肿胀程度 ,说明毛茛总苷具有抗炎作用。本研究结果为毛茛系
统的药理研究和深入的药学研究奠定了基础。毛茛总苷镇痛抗
炎作用的活性成分及其作用机制有待进一步研究。
参考文献:
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社 , 1993:437.
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民卫生出版社, 2001:911.
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收稿日期:2008-01-20;　修订日期:2008-04-30
基金项目:贵州省科技计划课题(黔科合计省合 [ 2005] 4004)
作者简介:张学愈(1969-),男(汉族),贵州遵义人 ,现任遵义医药高等专科学校讲师 ,学士学位 ,主要从事中药质量标准研究工作.
＊通讯作者简介:潘年松 (1964-),男(汉族),贵州遵义人 ,现任遵义医药高等专科学校教授 ,博士学位 ,主要从事中药药理研究工作.
石油醚提取过 50目和过 325目筛
温莪术粉挥发油收率比较
张学愈 1 , 盛　勇2 , 邹　俊 2 , 涂铭旌2 , 潘年松 1＊
(1.遵义医药高等专科学校 ,贵州 遵义　563004;
2.四川大学材料科学与工程学院 ,四川 成都　610065)
摘要:目的 探讨并比较石油醚回流提取温莪术粗粉和微纳米粉体挥发油的最佳工艺。方法 将温莪术粉碎为过 50目筛
的粗粉与过 325目筛的微粉 , 采用 L18(21 ×37)表之正交实验设计 ,以温莪术挥发油的提油率为考察指标 ,以粉碎度 、提取
时间 、加石油醚质量倍数及提取次数为工艺考察对象。结果 以温莪术的挥发油提取率为考察指标 ,由直观分析可知各因
素对提取的影响作用大小依次为提取次数 >加石油醚质量倍数 >提取时间 >粉碎度。方差分析结果表明 ,在石油醚回
流提取温莪术挥发油的工艺中 ,提取次数和加石油醚的质量倍数对提油率有高度显著影响 ,提取时间和粉碎度有显著影
响。提油率为:2.09% ～ 3.62%,以过 325目筛温莪术粉体 , 加 20倍量石油醚 , 回流 2 h, 提取 3次的提油率最高 , 提油率
为 3.62%。结论 该法的最佳工艺为:过 325目筛温莪术微纳米粉体 ,加 20倍质量倍数的石油醚 ,回流 2 h,提取 3次。
关键词:温莪术;　挥发油;　粒径;　石油醚回流提取;　正交实验
中图分类号:R284.1　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2009)02-0292-02
ComparisonofVolatileOilbyMeansofPetroleumAetherExtractingRatewith50 Mesh
and325MeshforCurcuma
ZHANGXue-yu1 , SHENGYong2 , ZOUJun2 , TUMing-jing2 , PANNian-song1＊
(1.ZunyiMedicalColege, Zunyi563004 , China;2.MaterialScienceandEngineeringColege, SichuanUniver-
sity, Chengdu610065, China)
Abstract:ObjectiveToinvestigateandcomparethebestextractionmethodbypetroleumetherfromCurcumawenyujinY.H.ChenetC.Lingpowderandmicronanometerpowder.MethodsCurcumawenyujinY.H.ChenetC.Lingwasgrindedin50 mesh
powderand325 meshmicronanometerpowder, thenextractedbycircumfluenceextractionmethodofpetroleumether.Conditions
fortheextractionpercentageofvolatilefluidwerestudiedbyorthogonalexperimentaldesignofL18(21 ×37), influencesofdegreeofgrinding, processtimeofextraction, qualityofpetroleumetherandtimesofextractionwereinvestigated.ResultsTheintu-
itionisticanalysisshowedtheorderofeffectoftimesofextraction>qualityofpetroleumether>processtimeofextraction>de-
greeofgrinding.Analysisofvarianceshowedthatintheprocessbycircumfluenceextractionmethodofpetroleumether, timesof
extraction, qualityofpetroleumether, processtimeofextractionanddegreeofgrindinghadsignificanteffectontheextractionrate.
ConclusionTheoptimumconditionwasmicronanometerpowderof325meshCurcumawenyujinY.H.ChenetC.Ling, 20 times
amountofpetroleumether, refluringfor2 h, andextracting3 times.
Keywords:CurcumawenyujinY.H.ChenetC.Ling;　Volatilefluid;　Particlesize;　Circumfluenceextractionmethodofpetroleumether;　Orthogonalexperiments
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时珍国医国药 2009年第 20卷第 2期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2009VOL.20NO.2