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新疆圆柏叶的质量标准研究



全 文 :药物研究
收稿日期:2016 - 05 - 27
基金项目:新疆维吾尔自治区科技支撑计划项目 (201433103)。
作者简介:陈燕 (1985 -),女,在读研究生,助理研究员,主要从事维吾尔药材质量和化学成分研究。E - mail:
chenmaomao158@ 163. com
通信作者:邢建国 (1968 -),男,汉族,硕士研究生,研究员,研究方向为中药及维吾尔药新剂型制剂。E - mail:
xjgdd@ 163. com
新疆圆柏叶的质量标准研究
陈 燕1,2 谭 为2 李晨阳2 徐 芳2 赵 军2 邢建国2*
1. 新疆医科大学,新疆 乌鲁木齐 830011;2. 新疆维吾尔自治区药物研究所,新疆 乌鲁木齐 830004
【摘 要】 目的:建立新疆圆柏叶的质量控制方法。方法:采用性状、显微鉴别、薄层色谱鉴别、水分测定、总灰
分测定、酸不溶性灰分测定、浸出物测定、挥发油含量测定等方法。结果:建立新疆圆柏叶性状和显微、薄层色谱等的鉴
别方法,制定其水分不得过 9. 5%,总灰分不得过 7. 0%,酸不溶性灰分不得过 1. 0%,醇溶性浸出物不得少于 23. 0%,挥
发油含量不得少于 1. 8% (mL/g)。结论:制定的新疆圆柏叶质量标准全面、可控。
【关键词】 新疆圆柏叶;质量标准;显微鉴别;薄层色谱鉴别
【中图分类号】R282. 5 【文献标志码】A 【文章编号】1007 - 8517 (2016)16 - 0014 - 03
Study on the Quality Standard of Sabina Vulgaris Folium
CHEN Yan1,2 TAN wei2 LI chenyang2 XU fang2 ZHAO jun2 XING jianguo2*
1. Chinese Medicial Department ,Xinjiang Medicial University,Urumqi 830011,China;
2. Xinjiang Institute of Materia Medica,Urumqi 830004,China
Abstract:Objective To establish the quality standard of Sabina Vulgaris Folium. Methods It was indentified by macroscopical i-
dentification,microscopical identification and TLC identification. The methods for quality control were also including the determination
of water,total ash,acid - insoluble ash,extract and volatile oil. Results To establish the characters in macroscopical identification,
microscopical identification and TLC identification of Leaves of Sabina Vulgaris. The maximum of moisture should not exceed 9. 5% .
The maximum of total ash and acid - insoluble ash should not exceed 7. 0% and 1. 0%,respectively. The yield of ethanol extracts
should not be less than 23. 0% . The content of volatile oil should not be less than 1. 8% (mL/g). Conclusion The quality standard
established can be used for the quality control of the Leaves of Sabina Vulgaris .
Key words:Sabina Vulgaris.;Quality Standard;Microscopical Identification;TLC Identification
新疆圆柏又名砂地柏、叉子圆柏和臭柏等,
为柏科圆柏属植物 Sabina vulgaris Ant. 的常绿匍匐
灌木,广泛分布于我国新疆、甘肃、内蒙和陕北
的干旱荒山和沙地之中[1]。多年来,新疆以圆柏
叶代替侧柏叶供药用,为本地习用品[2]。新疆圆
柏叶入蒙药 (伊曼—阿日查),能清热、利尿、止
血、消肿、治伤及祛黄水、主治肾与膀胱热、发
症、痛风、游痛症等[3],并具有治疗风湿性关节
炎、类风湿性关节炎、小便不利等疾病的功效[4]。
本所码依拉·买买提依明[5]等只收集一批药材对
其的性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别、挥发油测
定进行了初步探讨。,本文收集了不同产地的 14 批
新疆圆柏叶药材,按 2010 版 《中国药典》要求对
新疆圆柏叶的性状、水分、灰分、浸出物及挥发
油等质量方面进行较为系统的研究,以期为新疆
圆柏叶的质量控制提供试验数据。
1 仪器与材料
1. 1 仪器 CX31RTSF 型显微镜 (奥林巴斯
(中国)有限公司);AL204 型电子天平 (梅特
勒 - 托 利 多 仪 器 (上 海) 有 限 公 司);
AS10200AD 型超声波清洗器 (天津奥特赛恩斯
仪器有限公司);WHF - 203B 三用紫外分析仪
(上海精科实业有限公司)。
1. 2 药材 新疆圆柏药材均于 2014 年 6 月采集自
全疆各地,共 14批;经何江副研究员鉴定为柏科植
物新疆圆柏 Sabina vulgaris Ant. Var. vulgaris 的干燥
叶,批号分别为 20140604、20140605-1、20140605-
2、20140605-3、20140605-4、20140608-1、20140608-
2、20140609-1、20140609-2、20140610-1、20140610-
2、20140402、20140508-1、20140508-2。
1. 3 试药 芦丁对照品 (批号:100080-200707);槲
皮苷 (批号:111538-200504);其他试剂均为分析纯。
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2 方法与结果
2. 1 性状鉴别 本品叶贴伏于枝上,深绿色或黄绿
色。叶二型,鳞叶交互对生,相互紧覆,菱形或菱
状卵圆形,长 1 ~2. 5mm,先端钝或微尖,全缘,背
面中部生有椭圆形腺体;刺叶生于幼龄植株上,有
时壮龄植株亦有少量刺叶,常交互对生或兼有三叶
交叉轮生,排列紧密,向上斜展,长 3 ~7mm,先端
刺尖,上面凹,下面拱圆,中肋明显,被白粉。叶
质脆,易折断。气清香,味苦涩、微辛。见图 1。
2. 2 显微鉴别 表皮细胞类长方形,长 38 ~133μm,
宽 10 ~ 25μm;气孔甚多,凹陷形,略木质化,副卫
细胞环式,气孔长 36 ~57μm,宽 21 ~37μm;纤维细
长,单个或成束,有的壁较厚,孔沟狭窄,有的壁较
薄,孔沟宽,直径7 ~35 μm;木薄壁细胞多见,呈念
珠状,略为木质化,长 20 ~ 119μm,宽 11 ~ 36μm。
偶见梯纹或具缘纹孔管胞。见图 1。
叶横切面呈类椭圆形或不规则形,中央为小
枝部分,周边为鳞片状叶。外被厚角质层,表皮
细胞整齐 1 列,叶肉栅栏细胞短柱状,海绵组织细
胞环状排列,细胞间隙较疏松,其间有 1 ~ 2 个树
脂道;嫩枝部分韧皮部细胞细小,排列整齐,形
成层 1 列,木质部由管胞组成,中央髓部细胞类圆
形、扁小。见图 2。
2. 3 薄层色谱鉴别 取药材粉末 5g,加 50mL 石
油醚 (60℃ ~ 90℃),加热回流提取 3 次,每次
1h,弃去石油醚液,药渣挥干,加甲醇 20mL,超
声处理 20min,滤过,将滤液浓缩至 2mL,作为供
试品溶液。另取芦丁对照品、槲皮苷对照品,加
甲醇分别制成每 1mL 含 0. 2mg 的溶液,作为对照
品溶液。照薄层色谱法 (中国药典一部附录ⅥB)
试验,吸取上述供试品溶液和对照品溶液各 5μL,
分别点于同一硅胶 G 薄层板上,以乙酸乙酯 -丙
酮 -水 -甲酸 (7∶ 3 ∶ 1 ∶ 0. 2)为展开剂,展开,取
出,晾干。供试品色谱中,在与对照品色谱相应
的位置上,分别显相同颜色的斑点。见图 3。
2. 4 水分[6] 水分测定参照中国药典 2010 年版一
部附录 IX H水分测定法 (甲苯法),结果见表 1。
根据测定结果,新疆圆柏叶水分平均为 6. 57%,
最高 7. 99%,以最高值的 20%设限,建议制定新
疆圆柏叶水分限度为不得过 9. 5%。
2. 5 总灰分和酸不溶性灰分[6] 总灰分和酸不溶
性灰分测定参照中国药典 2010 年版一部附录 IX K
灰分测定法,结果见表 1。根据测定结果,新疆圆
柏叶总灰分平均 4. 57%,最高 5. 76%,酸不溶性
灰分平均 0. 37%,最高 0. 54%,以最高值的 20%
设限,建议制定新疆圆柏叶总灰分限度不得过
7. 0%,酸不溶性灰分限度不得过 1. 0%。
2. 6 浸出物测定[6] 浸出物测定参照中国药典2010
年版一部附录ⅩA浸出物测定法,以 70%乙醇为溶
剂,采用热浸法测定,结果见表 1。根据测定结果,
新疆圆柏叶热醇法浸出物含量平均 29. 01%,幅
度 23. 85% ~ 40. 69%,建议制定新疆圆柏叶醇
溶性浸出物限度为不得少于 23. 0%。
2. 7 挥发油含量测定[6] 挥发油含量测定参照中
国药典 2010 年版一部附录ⅩD挥发油测定法测定,
结果见表 1。根据测定结果,新疆圆柏叶挥发油含
量平均 2. 33%,含量幅度 0. 60% ~ 4. 20%,以平
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均值的 80%设限,建议制定新疆圆柏叶挥发油含 量限度为不得少于 1. 8% (mL /g)。
表 1 新疆圆柏叶水分、灰分、浸出物和挥发油含量测定结果
NO 批号 水分 /% 总灰分 /% 酸不溶性
灰分 /%
醇溶性浸
出物 /%
挥发油
/mL /g
1 20140604 7. 99 5. 31 0. 43 26. 57 1. 80
2 20140605 - 1 6. 00 3. 80 0. 28 26. 38 2. 40
3 20140605 - 2 5. 49 4. 06 0. 38 27. 36 0. 60
4 20140605 - 3 5. 49 4. 23 0. 29 28. 57 0. 80
5 20140605 - 4 6. 34 4. 17 0. 33 24. 37 1. 80
6 20140608 - 1 6. 97 3. 89 0. 37 25. 53 2. 40
7 20140608 - 2 5. 99 4. 67 0. 44 23. 85 1. 60
8 20140609 - 1 7. 97 5. 62 0. 54 30. 24 1. 20
9 20140609 - 2 5. 95 5. 76 0. 30 30. 00 3. 00
10 20140610 - 1 6. 89 4. 43 0. 26 26. 52 3. 20
11 20140610 - 2 6. 99 4. 54 0. 44 24. 90 2. 80
12 20140402 5. 92 4. 73 0. 32 35. 71 3. 20
13 20140508 - 1 5. 99 4. 40 0. 46 40. 69 3. 60
14 20140508 - 2 7. 98 4. 33 0. 36 35. 48 4. 20
平均值 6. 57 4. 57 0. 37 29. 01 2. 33
3 讨论
3. 1 新疆圆柏为裸子植物,在显微鉴别中,新疆
圆柏叶的气孔比较特殊,当做粉末制片,加入间
苯三酚时,气孔可以染成红色,原因为新疆圆柏
叶为沙地荒山植物,喜干旱,保卫细胞侧壁较厚,
凹陷型,为了防止水分蒸发,略为木质化。
3. 2 张文斌等[2]在文献中记载新疆圆柏叶槲皮素的
含量测定,流动相为乙腈 -0. 4%磷酸 (45∶55),槲皮
素平均含量为 1. 04%。李晨阳等[6]在文献中记载,对
新疆圆柏叶中槲皮苷的含量测定,流动相为乙腈 -
0. 0036mol /L磷酸。结果,槲皮苷 2. 2 ~88. 0μg /mL与
峰面积的线性关系良好 (r =0. 9999),样品在 32h 稳
定。两者都采用乙腈 -磷酸为流动相对新疆圆柏叶的
不同成分进行了测定,实验结果稳定、可行,为新疆
圆柏叶的进一步研究提供了一定的数据基础。
3. 3 黄酮类化合物是新疆圆柏中所含的主要化学成
分之一,其中芦丁和槲皮苷在是其中含量较高的成
分。芦丁具有抗炎、抗病毒等作用,在临床用于防
治脑溢血、高血压、视网膜出血、紫瘢和急性出血
性肾炎[8 - 10];槲皮苷具有抗炎、抗菌、抗氧化、抗
病毒等多种生物活性[11 - 12];两者药理活性与新疆圆
柏叶抗炎、活血止痛的功能主治相符合。在薄层色
谱鉴别中,以芦丁和槲皮苷为对照品进行新疆圆柏
叶药材质量标准的研究。本文通过对不同展开剂的
筛选,优选出了适合新疆圆柏叶药材中芦丁和槲皮
苷的薄层色谱鉴别方法。
参考文献
[1]中国科学院中国植物志编辑委员会. 中国植物志 (第
7 卷)[M]. 北京:科学出版社,1978:360.
[2]张文斌,赵汝海,程斌. HPLC 法测定新疆圆柏叶中
槲皮素的含量 [J]. 解放军药学学报,2004,20
(3):223 - 224.
[3]田旭平,胡开峰. 不同季节新疆圆柏总黄酮含量的变
化 [J] 生物科技通讯 [J],2006,17 (3) :387
- 388.
[4]江苏新医学院. 中药大辞典 (下册)[M]. 上海:上
海科学技术出版社,1977:1886.
[5]玛依拉·买买提明,满而哈巴·海如拉,于睿,等.
新疆圆柏叶药材质量标准的探讨 [J]. 时珍国药医
药,2010,21 (7):1686 - 1687.
[6]国家药典委员会. 中华人民共和国药典 (一部)[S].
北京:中国医药科技出版社,2010:附录 52,53,
62,63.
[7]李晨阳,高慧,陈燕,等,HPLC法测定不同产地新疆
圆柏叶中槲皮苷 [J]. 华西药学杂志,2015,30
(6):720 - 721.
[8]黄尚荣. 药用芦丁化学成分提取方法及其药理学研究
进展 [J]. 现代农业科技,2009 (23):100 - 103.
[9]孟祥颖,郭良,李玉新,等. 芦丁的来源、用途及提
纯化方法 [J]. 长春中医学院学报,2003 (2):61
- 64.
[10]徐魁,孙兆伟,蔡艳丽. 荷花中芦丁含量测定方法研
究 [J]. 药学研究,2013 (8):452 - 454.
[11]刘丽,侯立强,满莹. 槲皮苷对扑热息痛诱导的大树
急性肝损伤的保护作用研究 [J]. 中国现代医生,
2007,8 (10):98.
[12]杨琳. 槲皮苷药理活性研究进展 [J]. 亚太传统医
药,2015,3 (6):61 - 62.
(编辑:穆丽华)
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