全 文 ：药学学报A e t a h Pa r m a e o u t i e a s i n i e a 199 0 ; 2 5 (5) : 38 7~ 39 0
乌头类生药中主要牛物碱的薄层光密度法测定
王 坷 童玉爵
(中国医学科学院药物研究所 , 北京 10。。5 0 )
乌头为常用中药 ,有祛风 、 散寒 、 止痛的功效 。 除正品 乌 头 A 。。耐 t。 , c al 。 “ h ae il D e b x
和北乌头 A co 成 , “ ` l “ S” e” f “ R“ ic h b 外 , 同 属一些其它品秒: 亦在民间广泛使用 “ 该属
植物多含有双醋类生物碱剧毒成分 , 主要为乌头碱 ( a c o in it ne ) 、 、中乌头碱 ( m e s ac o in t in e )和
次乌头碱 ( h y p a co n it ne ) 等 , 多须经过加工炮制后才可使用 。对于此类成分 的定量分析 ,文献
报道的有纸层析法川 、 气相色谱法 ()z 、 高压液相色谱法 ( 3 , ` )等 ,本文采用薄层光密度法对 8种
15 个乌头样品中上述三种生物碱的含量进行了测定 。
实 验 部 分
一 仪器 、 药品和试剂
双波长薄层扫描仪 岛津 C S一 91 0型 ; 数据处理机 岛津 C 一E I B 型 ; 微 量 注 射器 上
海分析仪器厂 ; 高效硅胶 G F 肠 ; 板 ( 10 x 1 0 c m ) 青岛海洋化工厂 ; 标准品 乌头碱 、 中乌
头碱 、 次乌头碱 , 由本所植化室提供 , 用二氯甲烷配制成标准溶液 ( l m g / m l) ; 生药样品 由
童玉豁鉴定 ; 样品溶液 生药样品 约 1 9 , 加 l m l l 。帕氨溶液 、 10 m l 乙醚 , ; 冷 浸 24 h , 得
冷浸液 , 挥干 , 残渣用二氯甲烷洗入 1 m l 容量瓶中 , 定容 ; 试剂 均为分析纯 。
二 . 薄层层析条件
将一定量的标准品和样品溶液分别用微量注射器间隔地点于同一块薄层板上 , 点样原点
直径一致 , 约为 Zm m , 用环己烷一乙酸乙醋一二乙胺 ( 8 : 1 : l) 立式上行展开 9 c m , 挥去溶
剂 , 紫外灯下观察 , 对其中三个标准品点进行扫描 , 三种标准品均在 2 36 n m 有 最大吸收 。
在 3 5 0 n m 有最小吸收 。
仪器参数 : 入s = 2 3 6 n m , 入R = 3 50 n m , 反射法直线扫描 , 狭缝 1 . o x o . s m m , 灵 敏度
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, 扫描速度及纸速为 40 m m / m in 。 标准品和样品的薄层层析图谱见图 1 。
三 . 标准曲线的绘制及稳定性实验
取三种不同浓度的标准溶液进行薄层扫描。 以手点峰乒积为…缈座标 、 点样浓度为横座标
作图 , 得三条通过原点的直线 , 线性范围为 2心 6 卜以图 2 ) 。 于不 同时间 测 定各点的峰面积
值 , 在 24 h 内测定结果不变 .
四 . 提取方法的比较
乌头类生药中的生物碱 , 曾用 乙醚 、 氯仿和二氯甲烷提取 , 结果相似 , 用 乙醚提取则溶
剂易于挥去 , 便于操作 , 故用 乙醚作为提取溶剂 .
提取方法 : 取同一生药粉末 , 加 10 呱氨溶液后 , 用乙醚按下述方 法 提取 。 1 . 冷浸不同
时间 ( 8 . ; 6 , : ; h ) ; : . 回流提取 : 将生药粉末置于 s o x hl e t 提取器中用 乙醚回流 约 5一 6成
.3 超声波提取 30 m in . 取上述 不同提取方法所得的乙醚提取液, 挥干 , 溶于二 氯甲 烷 ,
. 本文于 198 ,年辱月 5日收到。 ·
DOI : 10. 16438 /j . 0513 -4870. 1990. 05. 015
88 3药学学报 Ae t a P h a r m a e e u t i e a S i n i e a 19 90 ; 2 5 (5 ): 8 37~ 9 30
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由以上结果确定采用 乙醚冷浸 24 h 的方法提取样品 。
五 . 回收率的浏定
取混合标准溶液 9 0时 , 三种标准溶液各 30 时 , 加入 1 9 生药样品中 , 按样品 的 测定方
法提取及测定 , 计算得回收率 (表 2 ) 。
六 . 贡现性试验
在高效薄层板上重复点 4 川 标准溶液 , 点三块板 , 每种标准品在每块板上点三个点 , 分
别展开 , 扫描测定 , 变异系数分别为 : 中乌头碱 1 . 8 1肠 , 乌头碱 1 .理肠 ,次乌头碱 1 · 邓听 .
药学学报Ae t aP h arm ae e u t ie aS in ie a1 990 ;5 2(5 ) , 387~ 390 389
T a b 2
.
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七 . 样品测定
取生药 1 9 , 按拟定条件测定 , 结果见表 3o
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七
讨 论
一 由样品含量测定结果可 以看出 , 不同种 的乌头 , 其生物碱含量不同 , 同种不同产地
的乌头 , ` 其生物碱含量也不相同 , 这对了解乌头 的毒性 , 提供质量控制资料是很有意义的 。
二 . 黄花乌头仅含有次乌头碱 `5 ) , 铁棒锤 中测出乌头碱和次乌头碱 , 伏毛铁棒锤 ` , ) 、 多
根乌头 邝 ) 、 宾川乌头 `” )中测出乌头碱 , 均与文献报道一致 。 含量略有差别 。
关键词 乌头类 , 中乌头碱 ; 乌头碱 ; 次乌头碱 ; 薄层光密度法
3 90 药学学报 、 A et a P ha rma e o ut 宜e a Sin i e a 1990 ; 2 5 ( 5 )3 8呀~ 3 9D
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T h e p o w d` r e d s a o p l e w a s a l k a l i n i z e d b y a m m o n i a a n d m a e e r a t e d w i t h e tha r
f o r 2 4 h : T h
e 甩 i x t u r e w a s t h e n e e n t r i f u g e d , t h e r e s id u e w a s w a s h e d t h r e e t i m e s
e a e h w i t h Z 沮1 o f f r e s h e t h e r , t h e e o 皿 b i n e d e t h e r e x t r a e t w a s e v a P o r a t e d t o d r y n e s s
a n d t h e n d i s s o l v e d i n l 扭1 o f d i e il l o r o m e t h a n e .
S t a n d a r d s o l u t i o n a n d s a 皿p l e s o l u t i o n w e r e s p o t t e d o n a s i l l e a g e l G F 2 5 4 p l a t e ,
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T h e s p o t s w e r e s t a b l e f o r m
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K e y w o r d s A e o n i t e ; M e s a e o n i t i n e ;
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.
A e o n i t i n e : H y p a e o n i t i n e ; T L C一 d e n s i t o m e t r y