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芦荟植物茎尖培养与种苗快繁技术



全 文 :芦荟植物茎尖培养与
种 苗 快 繁 技 术
王  瑛 ,肖  龙
芦荟 , 作为一种药用观赏植物 , 其美容 、抗菌 、消炎等功
效已引起人们的重视 ,多种有效提取物越来越多地用于日用
化工 、制药 、食品等行业。芦荟常规繁殖采用分株法 , 繁殖速
度慢 ,无法满足芦荟生产基地建设的需要。茎尖培养是一种
快速 、有效的繁殖方法 , 本试验对几种芦荟植物茎尖培养及
组培苗驯化方法进行探索 ,现总结成文 , 供同行参考 , 并为芦
荟产业化生产服务。
1 材料和方法
1.1 供试材料名称
库拉索芦荟(Aloe vera L innaeus);木立芦荟(Aloe ar-
borescens miller);中华芦荟(Aloe vera var.Chinensis)
1.2 方法
取植株地上部 , 去掉叶片 ,冲洗环剥 , 用 70%酒精擦洗。
在无菌条件下用 0.1%升汞灭菌 10 min(分),无菌水冲洗4 ~
5 次 , 切段 , 然后分别接种在以下培养基上:A Ⅰ .MS +
NAA0.3 mg/ L+KT0.1 mg/ L;A Ⅱ.MS +IBA0.1 mg/ L +
BA2 mg/ l;A Ⅲ.MS+IAA0.2 mg/ L+BA2 mg/ L;AⅣ.MS+
KT0.5 mg/ L+2 , 4-D0.1 mg/ L 。上述培养基均含有 3%蔗
糖 , 6.5 g/ L(克/升)琼脂 , pH5.5-5.7。 培养条件为 3 000
lux 每天光照 14 h(小时),培养温度 25 ℃~ 27 ℃。
2 生长和分化情况
2.1 库拉索芦荟生长及分化情况
a.接种 2 周后 , 四种培养基接种的顶芽及切段的不定芽
均已诱导出。其中 A Ⅰ —茎尖变大变绿 , 外植体基部长出 9
条不定根;AⅠ —茎段长出一圈不定根 , 并有 2 个不定芽;A
Ⅱ —茎段诱导出 1~ 2 个不定芽 , 其中一个侧芽已长至 2 cm
(厘米);AⅢ —茎段诱导出 1 ~ 2 个不定芽 ,长约 1 ~ 3 mm(毫
米);AⅣ茎段诱导出 1~ 2 个不定芽 , 长约 0.5 mm(毫米)。
b.接种4 周后 , 各培养基诱导出不定芽数目如下:A Ⅰ —
茎尖 2个不定芽 , A Ⅱ —茎段 6 个不定芽 , A Ⅲ —茎段 8 个不
定芽 , AⅣ—茎段 4 个不定芽。
c.初培 4 周后 , 将丛生芽切割分离 ,无菌条件下转接入
上述培养基 , 生长 4 周后 , 再次转接 , 三代培养后 , 单芽平均
每代分化繁殖率如下:A Ⅰ —茎段 3 ~ 4 倍 , A Ⅱ —茎段 6 ~ 8
倍 , AⅢ —茎段 6 ~ 8 倍 , AⅣ—茎段 6~ 8 倍。
d.库拉索芦荟培养过程中 ,外植体根部有轻微褐变老化
现象。
2.2 木立芦荟生长及分化情况
  a.接种 1 d(天)后 , 木立芦荟茎尖及茎段变褐 ,一周后 ,
收稿日期:2002-01-23
接种于 AⅠ 、A Ⅱ 、AⅢ培养基的茎尖均已由褐转绿 ,顶芽生长
至 0.1~ 0.3 cm(厘米);接种于 AⅣ培养基的顶芽生长较差 ,
茎尖接种 2 周后 ,边缘逐渐出现芽原基突起。
b.接种 4周后 , 接种于各培养基的顶芽及茎段都有 4~ 6
个不定芽。
c.接种 4 周后 , 将丛生芽切割分离 , 无菌条件下分别转
接入上述培养基 ,生长 4 周后 , 再次转接 , 三代培养后 , 单芽
平均每代分化繁殖率为:A Ⅰ 5 倍 , A Ⅱ5 倍 , A Ⅲ4 倍 , AⅣ4
倍。
d.木立芦荟培养过程中 , 外植体根部褐变老化 , 周围培
养基变褐严重。
2.3 中华芦荟生长及分化情况
a.接种 2 周后 , 接种于 4 种培养基上的茎尖均已长出
0.3~ 0.5 cm(厘米)。
b.初培 4 周后 ,将丛生芽切割分离 , 再培养 , 单芽平均每
代分化繁殖率如下:AⅠ 2 倍 , A Ⅱ4 倍 , AⅢ4 倍 , AⅣ3 倍。
3 活性炭在芦荟植物组织培养中的应用
3.1 针对库拉索 、木立芦荟培养过程中 , 外植体根部褐变老
化现象 ,于培养基中加入活性炭(1 g/ L(克/升), 其它成分不
变), 外植体褐变老化现象减轻 ,但分化率未见增加。
3.2 加入活性炭培养基生根情况
生根培养基为 MS 或 MS+1 g/ L(克/升)活性炭。
未加活性炭的芦荟根老化且短 , 加入活性炭的芦荟根长
度是前者的 2 倍 ,且未老化 , 根的数目二者之间无显著差异。
3.3 加入活性炭培养基可增加成苗率
MS 与 MS+1 g/ L(克/升)活性炭两种培养基 ,相同条件
下库拉索芦荟进行相同时间的培养 ,后者成苗率增加 100%,
前者幼苗地上部>3 cm(厘米)幼苗占 50%, 后者幼苗地上部
皆为 3~ 4 cm(厘米)。
4 芦荟组培苗炼苗及移栽情况
4.1 生根瓶苗在自然光条件下炼苗 3~ 5 d(天),栽植。
4.2 炼苗基质为草炭∶珍珠岩∶沙=2∶1∶1 , 栽植库拉索 、木
立 、中华组培苗 , 用 1 000 倍甲基托布津溶液浇灌 , 每天喷水
2次 , 2 周后每天喷水 1 次 , 4 周后每 1 ~ 2 d(天)喷水 1 次。 4
周后检查成活率 ,库拉索 、中华芦荟成活率 100%, 木立80%。
4.3 于沙壤土直接定植组培苗 , 栽植后用 1 000 倍甲基托布
津浇灌 ,清水浇透 , 1 周后再浇 1 次 , 6 周后 , 库拉索芦荟成活
率 95%,木立芦荟成活率 70%,中华芦荟成活率 85%。
5 结论
5.1 库拉索 、木立 、中华三种芦荟茎尖培养分化率不同 , 其
中库拉索芦荟分化率最高 ,木立次之 ,中华最低。
5.2 芦荟植物在寄代培养中 , A Ⅱ 、A Ⅲ两种培养基交替使
用 ,可保持较高的分化率。
5.3 培养基中加入活性炭可减轻外植体老化现象 , 但未见
分化率增加;同时 , 加入活性炭可增加成苗率及促进根系正
常生长。
5.4 库拉索 、木立 、中华生根苗可直接定植于沙壤土 , 成活
率分别为 95%、70%、85%。
(西安现代农业综合开发总公司 710021)
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·生物技术·                         北方园艺 2002(3):60