免费文献传递   相关文献

元江芦荟根腐病病原菌的分离及鉴定



全 文 :南 方 农 业 学 报 46卷
Isolation and identification of aloe root rot pathogen
DINGYa-di1,MIAOFu-jun2,WANGMing-yue1,MAODe-chang1,XIEEn-lai1,
WANGJin-hua1,3,XIONGZhi1*
(1Southwest Forestry University,Kunming 650224,China;2Yunnan Academy of Forestry,Kunming 650201,China;
3Yunnan Agricultural University,Kunming 650201,China)
Abstract: 【Objective】The present experiment was conducted to investigate taxonomical status of aloe root rot
pathogens in order to provide scientific basis for controlling root rot and breeding disease-resistant seedings. 【Method】Us-
ing tissue isolation methods, the pathogens of aloe root rot was isolated, purified and identified. Then, by inoculating in-
cised wound of aloe root with pathogen, the pathogenicity of pathogen were determined. 【Result】The results showed that
43 strains of pathogenic fungi were isolated from rotting root, which were identified to be 7 species belonging to two genera
based on morphological characteristics and rDNA ITS sequence. Among 7 species, six species viz., Fusarium oxysporum,
F. equiseti, F. proliferatum, F. verticillioides, F. solani in turn were named as YJLH01, YJLH02, YJLH03, YJLH04,
YJLH05 and YJLH06, respectively. Only one species viz. Rhizopus oryzae was named as YJLH07. 【Conclusion】The aloe
root rot may be caused by these seven pathogens together, and pathogenic strains of Fusarium may be dominant microflora.
Key words: aloe; root rot; pathogen; ITS identification; Yuanjiang
收稿日期:2015-02-03
基金项目:西南林业大学科技创新基金项目(C14116)
作者简介:*为通讯作者,熊智(1965-),教授,主要从事微生物学和分子生物学、农林产品二次资源利用研究工作,E-mail:zhix@
swfu.edu.cn。丁雅迪(1989-),研究方向为资源微生物开发利用,E-mail:1203685364@qq.com
元江芦荟根腐病病原菌的分离及鉴定
丁雅迪1,缪福俊2,王明月1,毛德昌1,谢恩来1,王金华1,3,熊 智1*
(1西南林业大学,昆明 650224; 2云南省林业科学院,昆明 650201; 3云南农业大学,昆明 650201)
摘要:【目的】明确元江芦荟根腐病病原菌的种属地位,为其病害防治及抗病育苗奠定理论基础。【方法】采用组织
分离法对芦荟根腐病病原菌进行分离、纯化及鉴定,并采用根部切伤接种法对其致病性进行测定。【结果】从芦荟病株
根部共分离得到43株病原真菌,依据形态结构特征和rDNA-ITS序列测序,43株病原菌初步鉴定为7个种,归属于2个
属,分别为镰刀菌属的Fusarium oxysporum、F. equiseti、F. proliferatum、F. verticillioides、F. solani和F. sambucinum等6个
种(依次命名为YJLH01,YJLH02,YJLH03,YJLH04,YJLH05和YJLH06)和根霉属的Rhizopus oryzae(命名为YJLH07)。
【结论】元江芦荟根腐病可能由7种病原菌共同引发,镰刀菌属可能为优势菌群。
关键词:芦荟;根腐病;病原菌;ITS 鉴定;元江
中图分类号:S435.4 文献标志码:A 文章编号:2095-1191(2015)06-1018-06
0 引言
【研究意义】芦荟为百合科(Liliaceae)芦荟属
(Aloe)多年生常绿多肉质草本植物,原产于非洲、地
中海,多年来一直受到世界各地人民的推崇和广泛使
用(刘兵等,2013)。我国栽培的芦荟品种主要有库拉
索芦荟(A. barbadensis Mill.)、中华芦荟[A. vera L.var
Chinese(Haw berg)]和元江芦荟(A. yuanjiangensis
Xiong & Zheng),主要分布于海南、福建、云南等省,
其中元江芦荟主要分布于云南省元江流域的干热河
谷(尹建雯等,2004;姬广海等,2007),然而随着元江
芦荟种植面积的扩大和栽培年限的增加,芦荟根腐病
发生严重,并呈逐年恶化的趋势。该病主要侵染芦荟
根系,造成根部褐色腐烂,随着病害由下至上发展,引
起芦荟整株萎蔫死亡。据何忠俊等(2009)报道,仅
2008年元江芦荟根腐病发病率即高达74%,死亡率达
56%。根腐病病害已严重制约元江芦荟产业的发展。
因此,开展芦荟根腐病病原菌相关研究,可为芦荟根
腐病的防治提供科学依据,进而提高芦荟品质及其
DOI:10.3969/j:issn.2095-1191.2015.6.1018
南方农业学报 Journal of Southern Agriculture 2015,46(6):1018-1023
ISSN 2095-1191;CODEN NNXAAB http://www.nfnyxb.cn
6期
在食用(李竹君等,2010;王丽娟和李再贵,2014;李
艳红,2014)、美容(任海毅等,2013)、保健(黄友琴等,
2010;韩宏伟,2014)、医药(李天东等,2007;张俊莉
等,2014;漆平强等,2014)及观赏等方面的利用价值。
【前人研究进展】目前针对不同作物根腐病病原菌的
研究已有较多报道。姬广海等(2007)对云南省芦荟进
行根腐病病原菌分离及鉴定,将其病原菌鉴定为茄病
镰孢[F. solani(Mart)Sacc]。张萍(2008)的研究结果
表明,宁夏葫芦巴根腐病由茄镰刀菌[F. solani(Mart.)
Sacc.]、尖孢镰刀菌(F. oxysporum Schlesht.)、立枯丝
核菌(Rhizoctonia solani Kuhn.)和终极腐霉(Pythium
ultinum Trow.)等病原真菌复合侵染引起。陈垣等
(2011)研究表明,甘肃渭源蒙古黄芪根腐病病原菌为
尖孢镰刀菌(F.oxysporum Schlecht.)、腐皮镰孢菌[F.
solani(Mart.) Sacc]、立枯丝核菌(Rhizotonia solani
Kühn)和链铬孢属(Alternaria spp.)。曹雪梅等(2014)
的研究结果表明,宁夏甘草根腐病病原菌为茄类镰刀
菌(F. solani)和尖孢镰刀菌(F. oxysporum)。【本研究
切入点】目前关于芦荟根腐病病原菌鉴定虽有报
道(姬广海等,2007),但仅采用形态特征鉴定病原菌
为茄病镰孢菌,未见有关芦荟根腐病由多种病原菌侵
染引发的研究报道。【拟解决的关键问题】对元江芦荟
根腐病病原菌进行分离,利用科赫法则,结合形态与
ITS序列测序方法鉴定其病原菌,并采用回接方法对
其致病性进行测定分析,筛选出引起芦荟根腐病的病
原菌,判定芦荟根腐病病原菌的种属地位,以期为元
江芦荟根腐病的防治及抗病育苗奠定理论基础。
1 材料与方法
1.1 供试植物
供试芦荟采自云南元江。分别采集具典型根腐病
病症和健康元江芦荟各10株的根段(5 cm),连同泥土
带回实验室,置于4℃冰箱内保存备用,并观察记载芦
荟田间症状表现。
1. 2试验方法
1. 2. 1 病原菌分离纯化及致病性测定 采用朱丹等
(2013)的方法对病原菌进行分离。以健康芦荟的根段
为对照。采用根部切伤接种法(方中达,1998;张萍,
2008)进行病原菌的致病性测定。重复试验每株菌处
理30株苗,设置3组重复。
1. 2. 2 病原菌形态观察 采用点接种法(牛莉娜
等,2011)观察菌落形态;采用插片培养法(钱存柔和
黄仪秀,2005) 观察病原菌形态特征。参照Booth
(1971)镰刀菌属的分类系统和真菌鉴定手册(魏景
超,1979),初步确定病原菌的种属地位。
1. 2. 3 菌株DNA提取及系统发育进化树构建 采用
Ezup柱式基因组DNA抽提试剂盒(真菌)提取芦荟病
原菌基因组DNA,经1.2%琼脂糖凝胶电泳检测合格
后,将其作为ITS序列DNA扩增的模板。ITS序列PCR
扩增体系及条件参照李家敏等(2014)的方法。PCR扩
增产物送至生工生物工程(上海)股份有限公司测序。
所测得菌株ITS-rDNA序列通过NCBI的BLAST检索系
统进行序列同源性比对。采用MEGA 5.1软件进行多
序列比对,并根据比对结果构建系统发育进化树。
2 结果与分析
2.1 芦荟根腐病危害症状
根腐病主要危害芦荟茎基部和根部。根腐病发生
时,主根出现黑褐色和黄褐色病斑,严重时腐烂或坏
死,容易拔出;病害由下至上发展,肉质茎基部叶的边
缘开始变为红褐色,并逐渐脱落,严重时可导致植株
萎蔫死亡(图1)。
图 1 芦荟根腐病症状
Fig.1 Symptom of aloe root rot
丁雅迪等:元江芦荟根腐病病原菌的分离及鉴定 1019· ·
南 方 农 业 学 报 46卷
2.2 病原菌的分离纯化及致病性鉴定
从芦荟病株根部共分离得到43株真菌,经形态学
观察,将43株真菌初步归为2个属7个种,分别为镰刀
菌属的 F. oxysporum、F . equiseti、F . proliferatum、F .
verticillioides、F. solani、F. sambucinum和根霉属的Rhi-
zopus oryzae,依次命名为YJLH01、YJLH02、YJLH03、
YJLH04、YJLH05、YJLH06和YJLH07。其中,F. oxys-
porum 14株、F. proliferatum 11株,F. verticillioides 6
株,其余菌株各3株,出现频率分别为32.6%、25.6%、
14.0%和7.0%。对照健康芦荟根部未分离出上述菌株,
说明43株真菌是芦荟病株特有菌株。
从7个类群的菌株中各选择1株代表菌株进行致
病性测定。从表1可以看出,7个代表菌株均表现出不
同的致病性,菌株F. oxysporum(YJLH01)、F. solani
(YJLH05)致病性较强,3组重复试验的平均致病率分
别高达96.7%和90.0%。菌株R. oryzae(YJLH07)平均
致病率最低,为26.7%。说明菌株F. oxysporum对芦荟
根腐病致病性最强,菌株R. oryzae致病性最弱。7个类
群菌株均能引起芦荟典型根腐病症,且与初次分离病
根发病情况相似,从发病根部分离出的病菌与初次接
种病菌一致。对照芦荟生长正常,未表现出任何病症。
试验结果符合科赫法则,说明这7个类群菌株均为芦
荟根腐病的病原菌。
2. 3病原菌形态鉴定
2. 3. 1 F. oxysporum 菌落初呈白色,后菌落中间变
为紫色,分泌紫色色素,正反面颜色差异较大,背面呈
暗紫色。周围多气生菌丝,绒毛状,平铺生长,生长时
间5 d。小型分生孢子较多,多为单孢,卵圆形至肾形,
散生于菌丝间,大小(5.0~26.0)μm×(2.0~3.5)μm;大
型分生孢子较少,多胞,多有3个隔膜,纺锤形至镰刀
形,大小(19.6~39.4)μm×(3.5~5.0)μm;厚垣孢子球
形。初步鉴定病原菌YJLH01为F. oxysporum(图2-1、
图3)。
2. 3. 2 F. solani 菌落初呈白色,后呈土黄色,正反
面颜色差异较小,背面颜色微黄,分泌土黄色色素。菌
落圆形,边缘整齐,平铺生长,菌丝分布不均匀,中心
多气生菌丝,外周部分少气生菌丝,生长时间7 d。小
型分生孢子较多,单孢或双胞,卵圆形、椭圆形至肾脏
形,假头状着生,大小(5.0~9.0)μm×(2.1~3.6)μm;大
型分生孢子较少,纺锤形,粗壮,稍弯曲,多有3个隔
膜,大小(19.0~50.0)μm×(3.5~7.0)μm,初步鉴定病原
菌YJLH05为F. solani(图2-2、图3)。
2. 3. 3 F. equiseti 菌落初呈白色,后菌落中间逐渐
变为黄褐色,正反面颜色差异较小,背面呈褐色,分泌
褐色色素。菌落形状不规则,边缘锯齿状,菌丝致密,
平铺生长,生长时间5~7 d。无小型分生孢子形成,大
型分生孢子较多,顶包钩状,较其他种类镰刀菌弯曲,
大小(28.0~110.0)μm×(5.0~10.0)μm,初步鉴定病原
菌YJLH02为F. equiseti(图2-3、图3)。
2. 3. 4 F. verticillioides 菌落初呈白色,后逐渐变为
深紫色,正反面颜色无差异,分泌紫色色素。菌落圆
形,绒毛状,平铺生长,生长时间5~7 d。小型分生孢子
多,棒槌型,多无隔膜,大小(4.0~8.7)μm×(1.5~3.5)
μm;大型分生孢子少,略弯曲,多有3个隔膜,大小
(23.0~43.0)μm×(3.0~4.4)μm,初步鉴定YJLH04为
F. verticillioides(图2-4、图3)。
2. 3. 5 F. proliferatum 菌落初呈白色,后中心逐渐
变为淡紫色,分泌紫色色素,正反面颜色差异较大,背
面呈橘黄色。菌落圆形,边缘整齐,绒毛状,平铺生长,
生长时间4 d。小型分生孢子较多,多为串生,卵形至
椭圆形,多无隔膜,大小(2.5~9.1)μm×(1.7~3.0)μm;
大型分生孢子较少,略弯曲,细长,多有3个隔膜,大小
(25.3~43.1)μm×(2.4~4.4)μm,初步鉴定病原菌YJLH03
为F. proliferatum(图2-5、图3)。
2. 3. 6 F. sambucinum 菌落初呈白色,后变洋红
色,菌落中心颜色稍黄,外周洋红色,正反面颜色差异
较大,背面中心呈褐色,外周呈洋红色。菌落边缘锯齿
状。大型分生孢子散生于孢子堆,梭形至镰刀形,多有
5个隔膜,大小(22.0~53.0)μm×(3.5~6.0)μm,初步鉴
定病原菌YJLH06为F. sambucinum(图2-6、图3)。
2. 3. 7 R. oryzae 菌落初呈白色,后产生大量黑色
孢子,菌丝生长较快,生长3 d可长满整个培养皿。菌
落正反面颜色无差异,质地疏松,呈放射性生长。孢囊
梗与假根相对,生于匍匐丝节上,单生或丛生,孢子囊
近球形,囊轴头状,内含大量胞囊孢子,胞囊孢子为单
孢,扁球状,直径为2.1~13.6 μm,初步鉴定病原菌
YJLH07为R. oryzae(图2-7、图3)。
表 1 7个代表菌株致病性测定结果
Tab.1 Pathogenicity determination of 7 representative strains
分离真菌
Isolated
fungi
YJLH01
YJLH05
YJLH02
YJLH04
YJLH03
YJLH06
YJLH07
CK
每组接种数量(株)
Inoculated number
of each group(strains)
30
30
30
30
30
30
30
30
平均致病菌株(株)
Average pathogenic
bacteria(strains)
29
27
25
23
22
14
8
0
平均发病率(%)
Average
incidence
96.7
90.0
83.3
76.7
73.3
46.7
26.7
0
1020· ·
6期
图 2 病原菌菌落形态特征
Fig.2 Morphology characteristics of pathogenic fungi colony
图 3 典型菌丝体显微特征
Fig.3 Microscopic characteristics of typical mycelium
A:小型分生孢子假头状着生;B:具两个横隔的分生孢子;C:厚垣孢子(实线箭头);D:孢子囊和孢囊孢子
A:Microconidia insertion in form of false heads;B:Conidium with two diaphragms;C:Chlamydospore(solid arrow);D:Sporangium and
sporangiospore
2.4 病原菌ITS区的PCR扩增及序列测定
芦荟根腐病病原菌rDNA-ITS区段PCR扩增,获得
PCR产物700 bp左右(图4)。扩增产物送至生工生物工
程(上海)股份有限公司测序。
2. 5病原菌系统发育进化树分析
序列提交至GenBank进行BLAST同源比对,选取
同源性最高序列进行多序列比对,通过MEGA 5.1构
建系统发育进化树,确定菌株的种属地位,结果见图
5。从图5可看出,YJLH01与F. oxysporum(KJ439154.1)
在同一系统发育分支,相似度为99.5%;YJLH02与F.
equiseti(KF624787.1)在同一系统发育分支,相似度为
98.8%;YJLH03、YJLH04、F. proliferatum(AF291061.1)、
F. verticillioides(KF624791.1)在同一系统发育分支,
YJLH03与F. proliferatum(AF291061.1)、F. verticillioides
(KF624791.1)相似度为100.0%,YJLH04与 F . pro-
liferatum(AF291061.1)、F. verticillioides(KF624791.1)
相似度为 99.1%;YJLH05与 F. solani(KJ019827.1)
在同一系统发育分支,相似度为99.8%;YJLH06与F. sam-
bucinum(X65480.1),YJLH07与R. oryzae(AB109756.1)
在同一系统发育分支,相似度为100.0%。
结合形态特征观察判定YJLH01是F. oxysporum,
图 4 病原菌的rDNA-ITS区段PCR产物电泳结果
Fig.4 Electrophoresis of rDNA ITS section amplified from
pathogenic fungi by PCR
M:Marker;1~7:分别对应YJLH01~YJLH07
M:Marker;1-7 corresponded to YJLH01-YJLH07,respectively
1 2 3 4
5 6 7
A B C D
1500 bp
1000 bp
500 bp
200 bp
100 bp
丁雅迪等:元江芦荟根腐病病原菌的分离及鉴定 1021· ·
南 方 农 业 学 报 46卷
YJLH02是F. equiseti,YJLH03是F. proliferatum,YJLH04
是 F. verticillioides,YJLH05是 F. solani,YJLH06是
F. sambucinum,YJLH07是R. oryzae。
3 讨论
病原真菌传统分类鉴定方法主要依据致病性测
定、生理生化实验及形态结构特征观察,但表型特征
易随环境发生改变,具有不确定性(周志明等,2011),
因此采用形态学与分子生物学相结合的方法对病原
真菌进行鉴定更具说服力。如病原菌YJLH03、YJLH04
仅从分子生物学角度无法辨别是F. proliferatum还是
F. verticillioides,结合形态特征观察就会发现这两株
病原菌菌落大小、质地、颜色及小型分生孢子和大型
分生孢子的分隔数、大小、形状均存在明显差异,这
些差异有利于两株病原菌的鉴定。因此,遗传物质结
合表型特征能够更准确地判断病原真菌的系统发育
地位。
采样地域、时间、病症根部表面消毒方法、培养基
配方等因素都可能引起芦荟根腐病病原菌菌株种类
或数量发生改变。如姬广海等(2007)对云南元江地区
芦荟根腐病病原菌进行分离,确定其致病菌为
F. solani。本研究的芦荟同样采自云南元江,但因采样
时间、病症根部处理方式、培养基配方的差异,使得分
离获得的致病菌有F. oxysporum、F. equiseti、F. prolif-
eratum、F. verticillioides、F. solani、F. sambucinum和R.
oryzae。因此,芦荟根腐病病原菌种类会随着外部条件
的变动而发生改变,也为根腐病的生物防治带来更多
挑战。
前人研究表明,根腐病通常由多种病原菌复合侵
染引起,如陈庆河等(2004)对福建省漳州、福州等地
豌豆的根腐病植株进行病原菌鉴定,证明福建豌豆根
腐病主要由茄镰刀菌、尖孢镰刀菌、立枯丝核菌、终极
腐霉、根腐丝囊菌、根串珠霉和一种未鉴定镰刀菌等
复合侵染引起。王多成等(2005)对苜蓿根腐病病原菌
进行鉴定,证明苜蓿根腐病是由尖孢镰刀菌、串珠镰
刀菌和腐皮镰刀菌复合侵染引起。本研究仅对各病原
菌单独进行侵染试验,未对病原菌做复合侵染试验,
芦荟根腐病是否由这7株病原菌复合侵染引起、病原
菌复合侵染表现病症是否与单独侵染表现症状一致、
与田间症状表现是否一致等均有待于深入分析研究。
4 结论
本研究结果表明,引起元江芦荟根腐病的病原菌
为镰刀菌属的6个种及根霉属的1个种,分别为F. oxys-
porum、F. equiseti、F. proliferatum、F. verticillioides、F.
solani、F. sambucinum和R. oryzae,其中镰刀菌属可能
为优势菌群。致病性测定发现,镰刀菌属中F. oxyspo-
rum的致病性最强,F. sambucinum的致病性最弱。
参考文献:
曹雪梅,李生兵,张惠玲,胡小平. 2014. 甘草根腐病病原菌鉴
定[J]. 植物病理学报,44(2):213-216.
Cao X M,Li S B,Zhang H L,Hu X P. 2014. Identification of
the pathogens causing root rot of Glycyrrhiza uralensis
Fisch[J]. Acta Phytopathologica Sinica,44(2):213-216.
陈庆河,翁启勇,何玉仙,赵健. 2004. 福建省豌豆根腐病病原
及致病性测定[J]. 福建农业学报,19(1):28-31.
Chen Q H,Weng Q Y,He Y X,Zhao J. 2004. Pathogeny and
pathogenicity of root disease of peas in Fujian province[J].
Fujian Journal of Agricultural Sciences,19(1):28-31.
陈垣,朱蕾,郭凤霞,武志江. 2011. 甘肃渭源蒙古黄芪根腐病
病原菌的分离与鉴定[J]. 植物病理学报,41(4):428-
431.
Chen Y,Zhu L,Guo F X,Wu Z J. 2011. Isolation and identifi-
cation of the pathogens causing Astragalus membranaceus
var.mongholicus root rot in Weiyuan of Gansu province[J].
Acta Phytopathologica Sinica,41(4):428-431.
方中达. 1998. 植病研究方法[M]. 第 3版. 北京:中国农业出
版社.
Fang Z D. 1998. Plant Pathology Research Methods[M]. The 3rd
Edition. Beijing:China Agricultural Press.
韩宏伟. 2014. 芦荟保健饮料生产技术方案[J]. 科学创新与
应用,(14):288.
Han H W. 2014. Aloe health drinks production technology solu-
tions[J]. Technological Innovation and Application,(14):
288.
何忠俊,周琼,张忠萍,董艳,范茂攀,洪常青. 2009. 库拉索芦
荟根腐病与土壤—植株养分状况的关系研究[J]. 云南农
业大学学报,24(2):255-259.
He Z J,Zhou Q,Zhang Z P,Dong Y,Fan M P,Hong C Q.
2009. Study on the relationship between root-rot incidence
and soil-plant nutrient status for Aloe vera(L.)Burm.f.[J].
Journal of Yunnan Agricultural University,24(2):255-259.
图 5 基于rDNA-ITS序列构建的病原菌系统发育进化树
Fig.5 Phylogenetic tree based on rDNA-ITS sequences of
pathogenic fungal
1022· ·
6期
黄友琴,潘嫣丽,黄卫萍,李泽璇,潘江球. 2010. 芦荟叶肉悬
浮饮料的研制[J]. 安徽农业科学,38(20):10884-10886.
Huang Y Q,Pan Y L,Huang W P,Li Z X,Pan J Q. 2010.
Development of the suspended beverage of the aloe meso-
phyll[J]. Journal of Anhui Agricultural Sciences,38(20):
10884-10886.
姬广海,吴亚鹏,张乃明,杨云亮. 2007. 芦荟根腐病病原菌的
鉴定[J]. 植物病理学报,37(2):207-209.
Ji G H,Wu Y P,Zhang N M,Yang Y L. 2007. Identification
of the pathogen associated with root-rot disease of aloe[J].
Acta Phytopathologica Sinica,37(2):207-209.
李家敏,姜琼,汪剑鸣. 2014. 广东紫珠核糖体 DNA ITS序列
分子鉴定[J]. 湖北农业科学,53(10):2435-2439.
Li J M,Jiang Q,Wang J M. 2014. Identification of Callicarpa
kwangtungensis chun with ITS sequences of nuclear ribo-
somal DNA[J]. Hubei Agricultural Sciences,53(10):
2435-2439.
李天东,罗英,韩文君. 2007. 芦荟的药理作用及其应用研究
进展[J].中国现代医学杂志,17(23):2881-2886.
Li T D,Luo Y,Han W J. 2007. Development in the research of
the pharmacological action of aloe and its application[J].
China Journal of Modern Medicine,17(23):2881-2886.
李艳红. 2014. 芦荟啤酒加工工艺研究[J]. 合作经济与科技,
(14):180-181.
Li Y H. 2014. Aloe beer processing technology[J]. Co-operative
Economy & Science,(14):180-181.
李竹君,刘晓娟,张挚旋,温柔,陈文通,赵俊峰. 2010. 芦荟红
枣奶的制作工艺研究[J]. 安徽农业科学,38(25):13822-
13824.
Li Z J,Liu X J,Zhang Z X,Wen R,Chen W T,Zhao J F.
2010. Study on production process of aloe-red date milk[J].
Journal of Anhui Agricultural Sciences,38(25):13822 -
13824.
刘兵,于荣贤,孙会喜,张勇,余玉芳,李建. 2013. 芦荟多糖的
保健功能研究进展[J]. 中国新技术新产品,(2):35-36.
Liu B,Yu R X,Sun H X,Zhang Y,Yu Y F,Li J. 2013.
Function of the progress of health care aloe polysaccharide
China New Technologies and Products,(2):35-36.
牛莉娜,杨婧,汪洋,裴华,饶朗毓,林英姿. 2011. 海南红树林
真菌 WC1018的鉴定及免疫活性研究[J]. 山东医药,51
(43):17-19.
Niu L N,Yang J,Wang Y,Pei H,Rao L Y,Lin Y Z. 2011.
Study on the identification and immunity activity of man-
grove fungi strain WC1018[J]. Shandong Medical Journal,
51(43):17-19.
漆平强,杨莉,郑慧凝,张之弥,周雪萍,麦沥丹,杨勇军,孙魏
巍. 2014. 芦荟汁对小鼠腹部伤口愈合情况影响的研究
[J]. 中国卫生产业,(15):28-30.
Qi P Q,Yang L,Zheng H N,Zhang Z M,Zhou X P,Mai L
D,Yang Y J,Sun W W. 2014. What is the impact of re-
search on aloe juice to abdominal wound healing in mice
[J]. China Health Industry,(15):28-30.
钱存柔,黄仪秀. 2005. 微生物学实验教程[M]. 第 2版. 北京:
北京大学出版社:24-25.
Qian C R,Huang Y X. 2005. Microbiology Experiment Course
[M]. The 2nd Edition. Beijing:Peking University Press:24-
25.
任海毅,董银卯,孟宏,王巧娥. 2013. 芦荟保湿活性成分筛选
及皮肤适应性研究[J]. 中国实验方剂学杂志,19(3):
252-256.
Ren H Y,Dong Y M,Meng H,Wang Q E. 2013. Research on
screening of active ingredient from aloe moisturizing and
skin adaptability[J]. Chinese Journal of Experimental Tra-
ditional Medical Formulae,19(3):252-256.
王多成,孟有儒,李文明,李万苍. 2005. 苜蓿根腐病病原菌的
分离及鉴定[J]. 草业科学,22(10):78-81.
Wang D C,Meng Y R,Li W M,Li W C. 2005. Isolation and
identification of the pathogens causing root rot disease of
Medicago sativa[J]. Pratacultural Science,22(10):78-81.
王丽娟,李再贵. 2014. 芦荟白酒功能性成分及体外抗氧化性
研究[J]. 中国酿造,33(3):57-61.
Wang L J,Li Z G. 2014. Functional ingredients and in vitro an-
tioxidative activity of aloe liquor [J]. China Brewing,33
(3):57-61.
魏景超. 1979. 真菌鉴定手册[K]. 上海:上海科学技术出版
社:609-638.
Wei J C. 1979. Fungal Identification Manual[K]. Shanghai:
Shanghai Science and Technology Press:609-638.
尹建雯,陈有为,杨丽源,李治滢,周斌,李绍兰. 2004. 芦荟植
物内生真菌的研究Ⅰ.内生真菌的分离及鉴定[J]. 微生
物学杂志,24(1):25-26.
Yin J W,Chen Y W,Yang L Y,Li Z Y,Zhou B,Li S L.
2004. Study on endophytic fungi in Aloe versaⅠ. Isolation
and identification of endophytic fungi[J]. Journal of Micro-
biology,24(1):25-26.
张俊莉,蔡淑敏,李涛,曾振华,高友光,陈仲清. 2014. 芦荟减
阻剂对烧伤休克大鼠微循环的影响[J]. 实用医学杂志,
(10):1537-1540.
Zhang J L,Cai S M,Li T,Zeng Z H,Gao Y G,Chen Z Q.
2014. Effects of drag-reducing polymer derived from Aloe
vera on microcirculation in burn rats[J]. The Journal of
Practical Medicine,(10):1537-1540.
张萍. 2008. 葫芦巴根腐病病原菌的鉴定[J]. 西北农业学报,
17(6):202-204.
Zhang P. 2008. Identification of the pathogens associated with
root-rot disease of Trigonella Foenum-graecum[J]. Acta
Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,17(6):202-204.
周志明,曹铮,沈锦玉,潘晓艺,顾志敏,尹文林,朱俊杰. 2011.
河川沙塘鳢致病真菌的特性及分子生物学鉴定[J]. 淡水
渔业,41(2):69-72.
Zhou Z M,Cao Z,Shen J Y,Pan X Y,Gu Z M,Yin W L,
Zhu J J. 2011. Molecular biology identification and charac-
terization of pathogenic fungi in Odontobutis potamophilus
[J]. Freashwater Fisheries,41(2):69-72.
朱丹,陈卫国,杜婵娟,付岗,黄兴振,付书婕,赵有林,蒋伟哲.
2013. 金线莲菌根真菌的分离和鉴定[J]. 环球中医药,6
(4):241-244.
Zhu D,Chen W G,Du C J,Fu G,Huang X Z,Fu S J,Zhao
Y L,Jiang W Z. 2013. Isolation and identification of myc-
orrhizal fungus from Anoectochilus roxburghii[J]. Global
Traditional Chinese Medicine,6(4):241-244.
Booth C. 1971. The Genus Fusarium[M]. Farnham Royal:Com-
monwealth Mycological Institute.
(责任编辑 麻小燕)
丁雅迪等:元江芦荟根腐病病原菌的分离及鉴定 1023· ·