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香茅精油对桔小实蝇产卵驱避作用及其化学成份分析



全 文 :环 境 昆 虫 学 报 Journal of Environmental Entomology,March 2012,34 (2) :249 - 253 ISSN 1674-0858
doi:10. 3969 / j. issn. 1674 - 0858. 2012. 02. 020
香茅精油对桔小实蝇产卵驱避作用及其化学成份分析
胡黎明1,曾 玲2,申建梅1,宾淑英1,陆永跃2,林进添1*
(1. 仲恺农业工程学院农学院,广州 510225;2. 华南农业大学昆虫生态研究室,广州 510642)
摘要:研究了香茅 Cymbopogon nardus精油对桔小实蝇 Bactrocera dorsalis (Hendel)的产卵驱避作用及其化学成分。
结果表明,香茅精油对桔小实蝇产卵具有一定的驱避作用,不同浓度香茅精油处理芒果上的产卵量均显著低于
对照,且随着香茅精油浓度的提高其产卵量逐渐减少,当浓度为 10000 μg /mL时,产卵驱避率为 70. 06%。采用
气相色谱—质谱联用 (GC - MS)技术分析了香茅精油的化学成份,结果发现该精油挥发物中含量较高的是 3 -
蒈烯,香茅醛,香叶醇,香茅醇,柠檬烯。
关键词:桔小实蝇;香茅;精油;驱避作用
中图分类号:Q968 文献标识码:A 文章编号:1674 - 0858 (2012)02 - 0249 - 05
基金项目:公益性行业 (农业)科研专项经费项目 (200903047)
作者简介:胡黎明,男,1978 年生,博士,讲师,研究方向为昆虫行为学,E-mail:hlm66@ eyou. com
* 通讯作者 Author for correspondence,E-mail:linjtian@ 163. com
收稿日期 Received:2011 - 12 - 20;接受日期 Accepted:2012 - 02 - 16
Oviposition deterrent effects and chemical constituents of essential oils
from Cymbopogon nardus on Bactrocera dorsalis (Diptera:Tephritidae)
HU Li-Ming1,ZENG Ling2, SHEN Jian-Mei1,BIN Shu-Ying1,LU Yong-Yue2,Lin Jin-Tian1*
(1. College of Agriculture,Zhongkai University of Agriculture and Engineering,Guangzhou,510225,
China;2. Laboratory of Insect Ecology,South China Agricultural University,Guangzhou 510642,China)
Abstract:Oviposition deterrent effects and chemical constituents of essential oils from Cymbopogon nar-
dus on Bactrocera dorsalis were studied. The results suggested that the essential oil from C. nardus had
oviposition deterrent effect on B. dorsalis,the numbers of eggs that B. dorsalis laid on Mangi feraindica
dipped in the different concentrations essential oils of C. nardus were significantly lower than the control
and the number of eggs decreased gradually with concentrations of essential oil. The oviposition deterrent
rate was 70. 06% under the concentration 10000 μg /mL. The chemical components of the essential oil
from Cymbopogon nardus were analyzed by GC - MS. The results revealed that the higher content of the
essential oil were 3 - carene,citronellal,geraniol,citronellol,limonene. So,it is speculated that these
compounds possibly are main oviposition deterrent active components.
Key words:Bactrocera dorsalis;Cymbopogon nardus;essential oil;deterrent effects
桔小实蝇 Bactrocera dorsalis (Hendel) ,属双
翅目 Diptera害虫,其在国内分布广泛、寄主范围
广,可危害 40 多科 250 多种水果和蔬菜 (梁广勤
等,1993;邓志声,2001;李志红等,2001;肖枢
等,2001;梁广勤等,2003)。桔小实蝇主要的危
害方式是其雌虫将卵产于果皮下,孵化后的幼虫
蛀食果肉,造成烂果、落果,为害相当严重 (林
进添等,2004;许瑞德,2009)。目前对桔小实蝇
的防治主要采取化学防治为主,但由于化学农药
的频繁使用,某些地区桔小实蝇已对有机磷杀虫
剂、拟除虫菊酯和阿维菌素等农药产生了严重的
抗药性 (Hsu and Feng,2000;章玉苹等,2007) ,
使其防治更加困难。诱杀桔小实蝇是一种安全有
效的防治措施,但目前主要使用的甲基丁香酚引
环境昆虫学报 Journal of Environmental Entomology 34卷
诱剂却不能引诱雌虫 (施伟等,2003) ,这仍将无
法控制桔小实蝇雌虫的产卵。由桔小实蝇的危害
习性可知,产卵是桔小实蝇危害果蔬的主要切入
点,有效控制其产卵将是可持续治理桔小实蝇危
害的重要措施。因此,寻找桔小实蝇产卵驱避剂
显得尤为重要。
非寄主植物精油对昆虫有产卵驱避作用,它
们可以阻止昆虫在植物上产卵,从而使植物免遭
为害 (张茂新等,2003;黎卓维等,2007)。研究
表明,香茅精油对多种昆虫具有较强的驱避效果
(徐汉虹和赵善欢,1994;钟平生,2005;宋湛谦
等,2006) ,因此本文在室内测定了香茅精油对桔
小实蝇雌虫的产卵驱避作用,并利用气相色谱 -
质谱联用 (GC - MS)技术对香茅精油的化学成份
进行分析,为筛选对桔小实蝇雌虫产卵具有驱避
活性的挥发性物质,开发桔小实蝇产卵驱避剂提
供科学依据。
1 材料与方法
1. 1 供试材料
供试虫源:桔小实蝇幼虫采自广州市杨桃公
园,室内人工饲料饲养。饲养条件为:温度 25 ±2℃,
相对湿度 60 ± 10%,光周期 L∶ D = 14 h∶ 10 h。本
试验挑选腹部隆起的产卵期雌虫作为供试虫源。
香茅精油:试验用香茅精油购自广州国威芳
香科技有限公司,纯度 95%。
1. 2 实验方法
1. 2. 1 不同浓度香茅精油对桔小实蝇的产卵驱避
作用
用丙酮将香茅精油稀释至 1000、2000、4000、
8000 和 10000 μg /mL 等 5 个不同质量浓度。取 1
个成熟、表面光滑的芒果在上述不同质量浓度的
香茅精油溶液中浸泡 5 s后取出,晾干供试,对照
为丙酮处理。分别将对照和精油处理的芒果悬挂
在 50 cm ×40 cm ×50 cm养虫笼的对角线位置,放
入桔小实蝇雌、雄虫各 20 头,蜜糖水补充营养,
设 3 个重复。24 h 后取出果实,调查统计着卵量。
试验在温度 25 ± 2℃、光周期 14L∶ 10D、相对湿度
75% ~90%的室内条件下进行。
1. 2. 2 香茅精油化学成分分析
精油成份分析在美国 Thermo Finnigan 公司
GC—MSTM气质联用仪 (型号:TRACE GC—2000)
上进行。利用计算机标准质谱图库 (NIST)并辅
助以人工识别确定化合物,以质谱离子峰面积百
分数表示各成分的相对含量。
色谱条件:DB -5 石英毛细管柱 (柱长 30 m,
内径 0. 25 mm,膜厚 0. 25 μm) ;载气为 He,进样
口温度 220 ℃。柱温采用程序升温,初始温度
60℃,保留 5 min,然后以 5℃ /min 升温至120℃,
保持 5 min,再以 5 ℃ /min 升温至 200℃,保留
5 min;
质谱条件:接口温度 220℃,电离方式 EI,电
子能量 70 eV,检测器电压 350 V,扫描质量范围
35 ~ 335 amu。
分析方法:精油样品未经稀释直接进样,进
样量 0. 2 μL,采取分流进样,分流比为 1∶ 30,流
速 1 mL /min。
1. 2. 3 产卵驱避效果的评价方法及数据分析
采用产卵驱避率评价香茅精油对桔小实蝇产
卵的驱避作用。计算公式为:产卵忌避率 (%)
= [(C - T)/ (C + T) ]× 100%。式中,C 为对
照组卵量,T为处理组卵量。所有试验数据均采用
Excel统计,并采用 DPS 8. 0 软件进行差异显著性
分析。
2 结果与分析
2. 1 香茅精油对桔小实蝇产卵的影响
香茅精油产卵驱避测定结果表明 (表 1) ,不
同浓度的香茅精油处理后,桔小实蝇雌虫的产卵
量均显著低于对照,表明香茅精油对桔小实蝇具
表 1 不同浓度香茅精油对桔小实蝇产卵的影响
Table1 Influence of different concentration of essential
oils on oviposition of Bactrocera dorsalis
浓度
(μg /mL)
Concentration
产卵量 (粒 /果)
No. of eggs
产卵驱避率 (%)
Oviposition
deterrent rate
处理
Treatment
对照
Control
1000 126. 67 ± 3. 18 144. 33 ± 6. 17 6. 52
2000 99. 00 ± 3. 51* 141. 00 ± 3. 21 17. 50
4000 79. 00 ± 2. 08* 154. 67 ± 3. 05 32. 19
8000 40. 67 ± 0. 67* 161. 67 ± 3. 17 59. 80
10000 31. 33 ± 1. 20* 178. 00 ± 3. 78 70. 06
* :表示处理与对照差异显著 (P < 0. 05) ;* :signif-
icant difference between treatments and control (P < 0. 05).
052
1 期 胡黎明等:香茅精油对桔小实蝇产卵驱避作用及其化学成份分析
有显著的产卵驱避活性。且随着香茅精油浓度的
不断提高,雌虫产卵量逐渐减少,产卵驱避率逐
渐升高,当精油浓度为 1000 μg /mL 时产卵驱避率
最低,为 6. 52%;而当浓度为 10000 μg /mL 时产
卵驱避率最高,为 70. 06%。
2. 2 香茅精油的化学成分分析
应用 GC - MS 对香茅精油化学成份进行了检
测。采用相应质谱图计算机检索的方法进行检索,
并用面积归一法计算其相对含量,将相对含量大
于 0. 6%的物质列于表 2。
烯萜类物质约占所列物质的 65. 91%,其中香
叶醇含量最高,为 11. 68%,香茅醇次之,含量为
8. 45%;香茅醛占 15%;烯萜类物质约占所列物
质的 30. 23%,其 中 3 -蒈 烯 含 量 最 高,为
16. 71%,柠檬烯次之,含量为 3. 26%。从中可以
看出含量大于 5%的主要化学物质分别为3 -蒈烯
(16. 71%) ,香茅醛 (15%) ,香叶醇 (11. 68%) ,
香茅醇 (8. 45%)等 4 种物质。
表 2 香茅精油挥发性化学物质及其相对含量
Table 2 Volatile chemicals from Cymbopogon nardus and their relative contents
保留时间
Retention time (min)
化合物
Compounds
分子式
Molecular formula
CAS#
相对含量
Relative content (%)
11. 68 3 -蒈烯 3 - Carene C10H16 13466 - 78 - 9 16. 71
12. 14 莰烯 Camphene C10H16 79 - 92 - 5 0. 62
13. 64 β -蒎烯 beta - Pinene C10H16 18172 - 67 - 3 2. 83
16. 22 柠檬烯 Limonene C10H16 5989 - 27 - 5 3. 26
18. 92 芳樟醇 Linalool C10H18O 78 - 70 - 6 1. 07
20. 48 异蒲勒醇 Isopulegol C10H18O 89 - 79 - 2 4. 50
20. 88 香茅醛 Citronellal C10H18O 106 - 23 - 0 15. 0
22. 33 a -松油醇 Alpha - Terpineol C10H18O 98 - 55 - 5 4. 29
22. 55 γ -松油醇 Gamma - Terpineol C10H18O 586 - 81 - 2 0. 89
23. 86 香茅醇 Citronellol C10H20O 106 - 22 - 9 8. 45
24. 6 香叶醇 Geraniol C10H18O 106 - 24 - 1 11. 68
26. 51 丁香酚 Eugenol C10H12O2 97 - 53 - 0 1. 26
26. 69 乙酸香茅酯 Citronellyl acetate C12H22O2 150 - 84 - 5 2. 59
27. 18 乙酸香叶酯 Geranyl acetata C12H20O2 105 - 87 - 3 2. 58
27. 60 β -榄香烯 Beta - Elemene C15H24 515 - 13 - 9 2. 14
27. 85 长叶烯 Longifolene C15H24 475 - 20 - 7 1. 26
28. 98 香叶烯 D Germacrene D C15H24 23986 - 74 - 5 1. 88
29. 54 delta -杜松烯 Delta - Cadinene C15H24 483 - 76 - 1 1. 53
31. 00 T -毕橙茄醇 T - Cadinol C15H26O 5937 - 11 - 1 0. 65
31. 15 Α -毕橙茄醇 Α - Cadinol C15H26O 481 - 34 - 5 1. 06
36. 56 香叶基香叶醇 Geranylgeraniol C20H34O 7614 - 21 - 3 3. 09
3 结论与讨论
桔小实蝇主要通过雌虫将卵产于寄主成熟果
实中,幼虫在果实内取食、危害。桔小实蝇的产
卵习性导致了药剂防治上的困难。因此,控制桔
小实蝇产卵便成为防治其危害的重要措施。本试
验测定了香茅精油对桔小实蝇的产卵驱避活性,
结果表明随着精油浓度的递增,对桔小实蝇的产
卵驱避作用也逐步增强,测试结果与王玉赞等
152
环境昆虫学报 Journal of Environmental Entomology 34卷
(2009)的研究结果一致。香茅精油对桔小实蝇的
雌虫具有一定的产卵驱避作用,说明香茅精油的
挥发性物质中可能有驱避桔小实蝇雌虫产卵的特
异性化学物质。但不同来源的精油,其主要化学
成分具有一定的差异。例如,董晓敏等 (2009)
采用水蒸气蒸馏法对广西的香茅精油分成分分析
表明,其主要成分为月桂烯 (15. 65%)、橙花醛
(31. 97%)和柠檬醛 (37. 40) ;而陈集双等
(2000)从非洲引种到杭州的香茅叶水蒸气蒸馏提
取物中主要成分为 β -香叶烯 (14. 16%)、香叶
醛 (35. 75%)、橙花醛 (28. 70%)。本研究对香
茅精油的分析结果表明,其中主要成分为 3 -蒈烯
(16. 71%)、香茅醇、香茅醛 (15. 0%)、香叶醇
(11. 68%)等成分,香茅精油主要成分之间差异
可能是来自于提取方法的不同或取样品种、取样
时间不同造成。不同精油来源,其主要成分具有
较大的差异,因此对香茅精油中的单个成分进行
产卵趋避活性测定显得尤为重要。确定这些化合
物对桔小实蝇雌虫具有产卵驱避活性,将对开发
新型驱避剂具有显著的实践意义。本试验从香茅
精油中鉴定出的主要化合物中部分物质或其类似
物质已报道对昆虫具有驱避作用。比如香茅醛、
香茅醇和香叶醇为驱蚊剂主要成分,具有较强驱
蚊效果 (曲金柱等,2005;杜永均等,2007)。苗
振旺等 (2004)研究发现柠檬烯对红脂大小蠹
Dendroctomus valens 具有显著的驱避作用。因此,
笔者推测这些物质可能是香茅精油驱避桔小实蝇
雌虫产卵的主要物质。有关这些化合物单体或混
合物对桔小实蝇雌虫的产卵驱避活性尚在研究中,
本文将后续报道。
本试验通过初步测定香茅精油对桔小实蝇雌
虫产卵的驱避活性,并进一步通过 GC - MS 分析
香茅精油的化学成分,以期能设计开发桔小实蝇
产卵驱避剂来干扰该虫的产卵行为,这将对桔小
实蝇的控制具有重要的指导意义。
参考文献 (References)
Chen JS,Peng CS,Du QZ,Zhang YZ,2000. Analysis of chemical
components of essential oil from the leaf of Cymbopogon citratus
(DC.). Chin. Pharm. J. ,35 (7) :462. [陈集双,彭崇胜,
杜琪珍,张耀洲,2000. 香茅叶挥发油化学成分的研究 . 中国
药学杂志,35 (7) :462]
Deng ZS,2001. Research progress in the control of oriental fruit fly Da-
cus (Bactrocera)dorsalis (Hende1) in tropical orchards. Chinese
Journal of Tropical Crops,22 (4) :91 - 95. [邓志声,2001. 热
带果园桔小寡鬃实蝇防治研究进展 . 热带作物学报,22 (4) :
91 - 95]
Dong XM,Liu BM,Lin X,Mo JG,2009. GC - MS analysis of chemical
components of essential oil from Cymbopogon citratus (DC.)Stapf
in Guangxi. Guangxi Sciences,16 (3) :302 - 304. [董晓敏,
刘布鸣,林霄,莫建光,2009. 广西产香茅草挥发油的化学成
分分析 . 广西科学,16 (3) :302 - 304]
Du YJ,Wu ZN,2007. Olfaction in chemically mediated host seeking and
oviposition behavior of mosquitoes. Acta Entomologica Sinica,50
(10) :1060 - 1069. [杜永均,吴仲南,2007. 蚊虫搜寻吸血
寄主和产卵行为的调节因子及相关嗅觉机理 . 昆虫学报,50
(10) :1060 - 1069]
Hsu JC,Feng HT,2000. Insecticide susceptibility of the oriental fruit
fly Bactrocera dorsalis(Hendel) (Diptera:Tephritidae)in Taiwan.
Chinese Journal Entomology,20 (2) :109 - 118
Li ZH,Gong P,Chen HJ,Chen NZ,2001. The research advances of
molecular biology on Bactrocera dorsalis. Plant Quarantine,16
(3) :165 - l66. [李志红,龚鹏,陈洪俊,陈乃中,2001. 桔
小实蝇分子生物学研究进展 . 植物检疫,16 (3) :165 - l66]
Li ZW,Zeng XN,Luo S,Wang MQ,Luo JB,2007. Deterrent effect es-
sential oils on oviposition of Conopomorpha sinensis Bradley. Natural
Enemies of Insects,2007,29 (3) :97 - 102. [黎卓维,曾鑫
年,罗诗,汪茂卿,罗建斌,2007. 植物精油对荔枝蒂蛀虫的
产卵驱避效果 . 昆虫天敌,29 (3) :97 - 102]
Liang GQ,Liang F,Wu JJ,Li HH,2003. The first report of the study
on sterile treatment for oriental fruit fly,Bactrocera dorsalis (Hen-
del). Acta Agriculture Universitatis Jiangxiensis,25 (6) :904 -
905. [梁广勤,梁帆,吴佳教,李惠河,2003. 桔小实蝇不育
处理试验研究初报 . 江西农业大学学报,25 (6) :904 - 905]
Liang GQ, Liang GZ, Lin M, Liang F, 1993. Fruit Fly and
Control. Guangzhou:Guangdong Science and Technology Press.
93 - 104. [梁广勤,梁国真,林明,梁帆,1993. 实蝇及其防
除. 广州:广东科学技术出版社 . 93 - 104]
Lin JT,Zeng L,Lu YY,Liang GW,Xu YJ,2004. Research advances
in biology and control of Bactrocera dorsalis (Hendel). Journal of
Zhongkai Agrotechical College,17 (1) :60 - 67. [林进添,曾
玲,陆永跃,许益镌,2004. 桔小实蝇的生物学特性及防治研
究进展 . 仲恺农业技术学院学报,17 (1) :60 - 67]
Miao ZW,Zhang ZN,Wang PX,Guo YY,Sun JH,2004. Response of
the red turpentine beetle,Dendroctonus valens LeConte (Coleopter-
a:Scolytidae) to host semiochemicals and its implication in man-
agement. Acta Entomologica Sinica,47 (3) :360 - 364. [苗振
旺,张钟宁,王培新,郭玉永,孙江华,2004. 外来入侵害虫
红脂大小蠹对寄主挥发物的反应 . 昆虫学报,47 (3) :360 -
364]
Qu JZ,Ma J,Zhang XY,Cui B,2005. Plant regeneration from petiole
calli of Pelargonium citrosum. Henan Science,23 (6) :816 -
818. [曲金柱,马杰,张仙云,崔波,2005. 驱蚊香草愈伤组
织再生植株的诱导与培养 . 河南科学,23 (6) :816 - 818]
Shi W,Zhang ZY,Ye H,2003. Taxis responses of three oriental fruit
fly (Bactrocera dorsalis Hendel)populations to the odors of three
host fruits. Journal of Yunnan University,25 (1) :77 - 80. [施
252
1 期 胡黎明等:香茅精油对桔小实蝇产卵驱避作用及其化学成份分析
伟,张智英,叶辉,2003. 桔小实蝇对寄主水果气味的趋向反
应测试 . 云南大学学报 (自然科学版) ,25 (1) :77 - 80]
Song ZQ,Wang ZD,Jiang ZK,Zhou YH,2006. Prospects and status
of the green insecticide chemicals developed from turpen-
tine. Scientia Silvae Sinicae,42 (10) :117 - 122. [宋湛谦,宗
德,姜志宽,周永红,2006. 由松节油开发绿色杀虫化学品的
现状与展望 . 林业科学,42 (10) :117 - 122]
Xiao S,Jiang XL,Zhang CL,Ying XS,Yang YX,2001. The observe of
biology character of Bactrocera dorsalis and Bactrocera cucurbritae in
Ruili. Plant Quarantine,15 (6) :332 - 336. [肖枢,蒋小龙,
张朝良,应雪松,杨雁雄,2001. 瑞丽桔小实蝇、瓜实蝇生物
学特性的观察 . 植物检疫,15 (6) :332 - 336]
Xu HH,Zhao SH,1994. Application of essential oils for the control of
insect pests. Natural Product Research and Development,6 (1) :
82 - 88. [徐汉虹,赵善欢,1994. 植物精油在害虫防治上的
应用 . 天然产物研究与开发,6 (1) :82 - 88]
Xu RD,2009. The occurrence and integrated control of Bactrocera dor-
salis (Hendel)in Xiamen. Plant Protection,10:50 - 52. [许瑞
德,2009. 厦门桔小实蝇发生为害及综合防治概述 . 植物保
护,10:50 - 52]
Zhang MX,Ling B,Pang XF,2003. Progress and application of ovipo-
sition deterrents of non - preferable plants on insect. Natural Ene-
mies of Insects,25 (1) :28 - 36. [张茂新,凌冰,庞雄飞,
2003. 非嗜食植物中的昆虫产卵忌避物及其利用 . 昆虫天敌,
25 (1) :28 - 36]
Zhang YP,Zeng L,Lu YY,Liang GW,2007. Monitoring of insecticide
resistance of Bactrocera dorsalis adults in South China. Journal of
South China Agriculture University,28 (3) :20 - 23. [章玉苹,
曾玲,陆永跃,梁广文,2007. 华南地区桔小实蝇抗药性动态
监测 . 华南农业大学学报,28 (3) :20 - 23]
Zhong PS,2005. Research and development of non - chemical control a-
gainst health pests. Journal of Huizhou University (Nat. Sci) ,25
(6) :34 - 40. [钟平生,2005. 卫生害虫的非化学防治研究
进展 . 惠州学院学报 (自然科学版) ,25 (6) :34 - 40]
Wang YZ,Lin B,Lu YY,Zeng L,Xu YJ,2010. Oviposition deterrent
effects of several plant essential oils on Bactrocera dorsalis (Diptera:
Tephritidae). Journal of South China Agricultural University,31,
(2) :22 - 26. [王玉赞,凌冰,陆永跃,曾玲,许益镌,2010.
几种植物精油对桔小实蝇的产卵忌避作用 . 华南农业大学学
报,31 (2) :22 - 26
櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋

(上接第 235 页)
张学坤,刘任重,2001. 渍涝与干旱对不同转 Bt 基因
抗虫棉的影响. 棉花学报,13 (2) :87 - 90]
Wermelinger B,Rigling A, Schneider MD,Dobbertin M,
2008. Assessing the role of bark-and wood-boring insects
in the decline of Scots pine (Pinus sylvestris)in the Swiss
Rhone valley. Ecol. Entomol.,33 (2) :239 - 249.
White TCR,1974. A hyphotesis to explain outbreaks of looper
caterpillars,with special reference to populations of Selido-
sema suavis in a plantation of Pinus radiata Newealand.
Oecologia,16 (4) :279 - 301.
White TCR,1984. The abundance of invertebrate herbivores in
relation to the availability of nitrogen in stressed food
plants. Oecologia,63 (1) :90 - 105.
Wollenweber E,1985. Exudate flavonoids in higher plants of
arid regions. Plant Syst. Evol.,150:83 - 88.
Yu FY,Xu XZ,Robert DG,2004. Effects of water and heat
stress on the needle sugar content of four coniferous tree
seedlings. J. Nanjing For. Univer.,28 (5) :1 - 5.
[喻方圆,徐锡增,Robert DG,2004. 水分和热胁迫对
苗木针叶可溶性糖含量的影响 . 南京林业大学学报,
28 (5) :1 - 5]
352