全 文 ：第 3 :卷 第 1期
1992 年 l月
厦门大学学报 (自然科学版 )
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· 研究简报 ·
杜氏藻N DA 酶活性比较研究①
李庆顺 楼士林 刘广发 赖瑞仰
(生 物 学 系 )
杜氏镶 (Du na i i eu a, 常称盐藻 )是一属耐高盐度的单细胞绿藻 , 生长迅速 , 不具纤维素细胞
壁 , 是基因工程潜在的 D N A (基因 )受体 , 而其 D N A 酶活性高低是衡 t 能否作为受体细胞的重
要指标 , 越低越好 . 本研究中 , D N A 醉指能降解 D N A 的多种酶的总称 .
采用 三聚 乙醛一二苯胺法〔’ .z] 分别侧定 了杜氏藻属 6 个种的 D N 人 醉活性 . 从测定结果
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1) 看出 ,杜氏镶细胞的 D N人 酶活性偏低 , 并且不同种之间存在明显差异 . 其中 D . 二袖 ,
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. 尹 似`涵邻坛 和 D二`俪 的 D N A 酶活性较低 , 是做为外源 D N A 转化受体的较好候选者 . 外源
。 N A 转化时 , 须与受体细胞的原生质体共培养 . 在此过程中 , 原生质体可能向外分 泌 D N A
酶 t 3〕 ,或部分原生质体破碎使胞内 D N A 酶游离到原生质体悬液中 , 降解外源 D N A , 影响转化
率 . 因此 , 参照 w 0 L K 的方法闭 , 用琼脂搪凝胶电泳检测上述 6 个种的原生质体悬液中的 D N A
酶活性 ( aT .b l .)
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结果表明原生质体悬液均有不同程度的 D N A 酶活性 . 这必然会影响外源 O N A 的转化率 .
因此 , 运用柠檬酸钠分析它对 D . 二“ . 原生质体悬液中 D N A 酶活性的抑制作用 . 从 F返 . 1 中可
以看出 , 10 m m ol l/ 棕檬酸钠即可有效地抑制原生质体悬液中的 O N A 酶活性 . 这无疑有利于外
撅 O N A 的转化 , 但也有可能影响转化后的原生质体的再生 . 因此 , 把徐檬酸钠处理过的原生质
① 19 1 · 。6一 2 6 收到 ; 国家自然科学荃金和厦门大学育苗基金资助项目
1 10
· 厦门大学学报 ( 自然科学版 ) 12 9 9年
体悬液涂布在琼脂固体培养基上 ,光照培养 7 d 后 , 观察藻落生长情况 , 结果例于 aT b . 2 . 测定
表明 , 有效抑制原生质体悬液 D N A 酶活性的棕橄酸钠浓 度 ( 10 m 。 。盗八 ) 对原生质体再生的影
响不大 .
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9
综上所述 ,鉴于 D . ,n , 山 , D . 尹俪。加她 和 D . 耐“ 等细胞内 D N A 酶活性较低 , 配合转化体
系中加入适量的棕檬酸钠 . 它们作为外源 D N A 的转化受体是可行的 .
参 考 文 献
1 M o D幻 n a ]d M R . 刀门认 . 召` 铆诫 . 1 , 1 9 6 2 : 4 3 7一 4 4 7
2 R ie ha r出 G M . 为汉 . 刀众加m ` , ] 9 7 4 , 57 : 3 69 ~ 3 7 4
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厄奸。阮汉 . , 1 9 82 , 1 3 1 : 3 02 ~ 3 0 7
C o m P a r a t iV e S t u d y o n D N a s e A e t i v i
L i Q i n g s h u n 切u S h i l孟n L j u G u a n s f a
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