全 文 ：苹 1期
198 2年 3月
福 建 农 学 院 学 报
J O UE N A L O F F UJ IA N A G R IC U LT UA R L C O LE G E LM r e al l 9 8 2 1
中国水仙组织培养快速繁殖研究初报 `
陈 振 光
耳
中国水仙是福建特产 , 驰名中外 , 其花莹韵清香 , 茎叶青翠娇嫩 , 为冬季室内主要观赏
花卉 , 畅销国内外市场 。 但长期以来 , 水仙花发展很慢 , 繁殖系数低 , 一般一个大鳞茎仅在
两侧形成 3 一 4个分生小球几叼 。 分离小球经过三年培养方可供栽培观赏 , 其营养 期 长 , 不
能适应当前生产需要 。 为此 , 我们近两年来进行了水仙花组织培养快速繁殖研究 。 初步试验
结果 , 应用组织培养大大提高水仙花的繁殖系数 。 一个大鳞茎通过一年切块萦殖 , 可获得以
万计的小鳞茎 , 为发展水仙花生产提供大量种苗 。
材 料 与 方 法
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供试验用的中国水仙 ( 坦旦犷j互丝呈 生丝旦鱼 v a r . 鱼 j旦旦些i笋 R oe ln ) 系来自漳 州 和 平
潭两地的鳞茎 。 先将鳞茎外部枯干的鳞片削掉 , 切除根部 。 在 0 . 1%升汞中消毒 10 分钟 , 然
后用无菌水冲洗数次 , 消毒过的鳞茎在无菌条件下剖开 , 把鳞片切掉三分之二以上 , 仅留下
极短的鳞片基部及鳞茎盘 。 然后将鳞茎盘切成 0 . 5厘米长 , 每块鳞茎盘带有二枚鳞片 基 部 ,
分别接种于不同附加物的培养基上 。
基本培养基有 : N 。 〔 1 〕, M T 厂5 〕, M S 大元素 , 铁盐 , N i t s e h微量元素和维 生素〔 3 J。
附加成分有玉米素 ( Z e ) , 6 一竿基腺嘿吟 ( B A ) , 2 , 4一 D , 腺素 ( A d) , 茶乙酸 ( N A A. ) ,
叫噪乙酸 ( I A A ) , 叫噪丁酸 ( 工B A ) 等 , 单独或混合使用 。 琼脂 0 . 8% , 蔗 糖 2 一 5 % 。
p H调至 5 . 4 , 培养基分装于三角烧瓶 , 在 。 . 9一 1公斤 /厘米: 高压灭菌20 分钟 。 培养室 温度
保持在 25 ℃左右 。 用 2 支 40 瓦日光灯 , 每天光照约 16 小时 。
当诱导的小鳞茎开始抽生绿叶时 , 即可移入土中栽培 。 土城用泥炭土和园土按 1 与 3 比
例调配。 在松软肥沃湿润的土壤中 , 移植的小鳞茎给于精心管理 , 很快便适应于外界环境条
件并正常生长。
丫 结 果 与 分 析
一 、 鳞芽的诱发繁殖
水仙花鳞茎盘不是所有腋部都能形成腋芽 , 一般仅在鳞茎两侧形成几个小鳞茎 。 但在离
1 9 8 1年 10月 13 日收至 ,1.
。 参加 本试脸工作的还有课题组 成 员。
DOI : 10. 13323 /j . cnki . j . f af u( nat . sci . ) . 1982. 01. 002
0 1福 建 农 学 院 孕一 报
体培养条件下 · 则完全改变了这种状况 。 外植体在合适的培养基上经过 3一 4周培养之后 ,
便可以诱导产生大量腋芽 ( 图版 I 一 1 ) , 个别外植体在一个鳞片腋部 , 可以发生多至 9一
1 0个鳞芽 ( 图版 I 一 2 ) 。 可见鳞茎盘发生腋芽潜力之大 。 但不同附加物的 N 。基 本培养基
对腋芽的诱导频率不一 。 据我们初步试验表明 , 附加 B A ( 2 毫克 ) 与 2 , 4一 D ( 0 . 1毫 克 )
的培养基组合 , 对鳞茎盘腋芽的诱导频率最高 , 为 1 15 % , 无激素的 N 。基本培养基诱导率最
低 , 仅 4 7 . 2 % 。 含激素组合均比无激素组合诱导率高 。 可见激素对鳞茎盘腋芽诱导 有 促进
作用 。 此外 , B : 、 浓度不同其诱导率也有明显差别 , 似乎 B A浓度高些有利于腋芽的萌 发 。
但按种的鳞茎盘外植体没有全部萌发腋芽 。 有些外植体由于切割不妥 , 保留多层鳞片基
部 , 因为顶端优势的缘故 , 这样的外植体仅在先端部位抽生一个鳞芽 , 其余鳞片腋部均不抽
生腋芽 。 有些鳞茎盘切片太薄 , 也会影响鳞茎盘腋芽的发生 。 但如果将不发芽的外植体 , 经
过整理进行第二次诱导培养 , 仍然可以继续抽生腋芽 。
小鳞芽可以进行重复培养促进再生小鳞芽 , 但培养基的不同激素组合 , 其诱导小鳞芽的
频率不一 。 其中以 N 。基本培养基附加 6 一某基腺嘿吟 ( 2毫克 ) 和 2 , 4 一 D ( 0 . 1毫 克 ) 组 合
诱导新芽能力最强 , 诱导率为 n 3 。 8 8 ; `。 试验中除 B A ( 1 毫克 ) 和 2 , 4 一 D ( 0 . 2 毫克 ) 组
合外 , 所有激素组合诱导率均在 90 % 以上 .
此外 , 我们还采用花器进行切片繁殖 。 用子房和花柄切片接种于 “ N S ” 大元素 、 铁盐 、
N it s c h的微量元素和维生素的 基本培养基 , 附加 B A ( 5 毫克 ) , N A A ( 2 . 0毫 克 ) , 经
过二个多月培养之后 , 陆续从外植体上产生许多不定芽 ( 图版 I 一 3 ) 。
二 、 小球状体的诱导与植株再生
水仙花鳞茎外植体在 B A 和 2 , 4一 D 各 2毫克 /升的 N 。基本培养基上 , 经过 1一 2 周培养
之后便形成愈伤组织 , 并进一步分化出许多表面光滑的小球状体 ( 图版 I一 4 ) 。 对小球状
体的组织切片观察 , 可以看到许多初生导管 ( 图版 I 一 5 ) 。 这些小球状体继代培养可以产
生新的球状体。
当小球伏体转移到各种不同激素组合的分化培养基上 , 经过一个多月培养 , 即开始分化
出小鳞芽 ( 图版 I 一 6 ) 。 经过两个月左右在各种不同附加物的培养基上培养 , 统计小球状
体分化小鳞芽的结果见表 1 。
从表 1 表明 , 小球状体 (不带鳞茎盘组织 ) 可以分化再生小鳞芽 , 其分化频率与基本培
养基关系不大 , 但不同附加物的影响却较为明显 。 试验结果附加 Z e ( 2毫克 ) + N A A ( 。 . 5
毫克 ) + IA A ( 。 . 5毫克 ) 十谷氨酞胺 ( 5 0。毫克 ) 诱导率高达 95 % , B A ( 1毫克 ) 十 N A人
( 0
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5毫克 ) , Z e ( 2 毫克 ) + N A A ( 0 . 0 5毫克 ) + 谷氨酞胺 ( 5 0 0毫克 ) 与 B A . ( 2毫克 )
+ N A A ( 0
.
02 毫克 ) 的激素组合诱导率次之 , 分别为 6 6 。 6 6% , 65 %与 6 4 。 8 6% ; B A ( 0 . 1
毫克 ) + 2 , 4 一 D ( O。 1毫克 ) 与 B A ( 0 . 5毫克 ) + N A A ( 0 . 5毫克 )组合诱导率最低仅 15 % 。
上述小球状体分化植株的频率是一段时间内的统计资料 , 其实将小鳞芽从球状体分离之
后 , 小球状体仍可以增殖并继续分化小鳞芽 。 因此 , 水仙花鳞茎培养 , 通过愈伤组织诱导小
球状体再生植株 , 无疑是提高水仙花繁殖系数的有效方法之一 。 但通过愈伤组织分化植株的
途径 , 可能会引起染色体变异〔 4 〕。 因此需要进一步研究繁殖后代的变异情况及其利弊 , 以便
确定其利用价值 。
将小鳞芽移入含0 . 1毫克 /升 I B A的 N 。培养基 , 便可以进一步生根 形 成完整的植株 ( 图
1
陈振 光 :中国水仙组 织培养快速繁技研究初报 1 1
表 1
Tal b e
不同基本培养基及附加物对小球状体分化小鳞芽的影响
.
E f fe et o fth e di f fer ent ba s nl m e di a a n da d do n da o nb ul bl et,
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基本培 养基及 附加物 ( 毫克 z升 )
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外植体总数
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小 峰茅教 目
N u m 与e r o f b一: l飞 l e t ,
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B A Z + N A A 0
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版 I 一 7 ) , 小鳞芽抽生绿叶后 (未长根 ) 便可移入松软肥沃涅润土壤栽培 ( 图版 I 一 8 ) 。
移植于土壤中的水仙花鳞茎将继续长根成苗 , 并按照通常栽培方法进行管理 。
参 考 文 献
( 1 〕朱至清 . 1 9 7 5。 中国科学 , ( 5 ) : 4 8 4一49 0 。
( 2 〕藤整利重 . 康仲洋译 , 19 79 。 植物 营养繁殖最新技术 。 晰兴图书公 司 . 151 一 15 50
〔 3 〕加古舜治 · 19 7 8 。 园 艺植 物O 器官 乙 组织因 培养。 诚文 堂新光社 · 2 4 7一2 4 8 。
〔 4 〕D ` A m a t o , 19 7 9 。 第四 汤国际植物组 织 与细 胞 J吝养大会论丈选择专样 , 1 7了一 19 0 。
〔 5 〕R a n g a n . T . S . , T . M : r a s l , i g e , W . P . B i t t o r 、 , 1 9 6 9 . P r o e e e d i n g , F i r s门 n t e r n a t i o n a I C i t r u s s y m p o s i u m
(
e 」· b y . H D . C I: a p m a n ) . 1 9 6 9 ( 一 ) : 22 5一 2 29 .
冲
福 建 农 学 院 学 报1 2
.
图 版 说 明
〔 1〕从解茎盘切 块诱发出小解茅 .
〔 2〕从 0 . 5及米长的娜盆盘切 块讲发出多达 1 0个小娜芽 .
〔 3〕从子房切 片产生不定苹。
( 4〕从愈 伤组 织诱 导出球状体 。
( 5〕球状 体 切 片可 见初生导管 ( V。 ), 表示 已分化 了的愈伤组 织 。
〔 6 〕从球状体分化出小鲜 茅。
〔 7 〕从水 仙 花铸茎盘诱导的小植株 。
〔 8 〕水仙 花小苗正常生 长于土攘中 .
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( 1 〕 B lb l e t s i n d u C e d fr o m t h e s e e t i o n s o f b u l b一d i s e .
〔 2 〕 \/ 、 rn a n y a s 10 b u l b l e t s m a y b e p r o d u e e d f r o m t h e s e e t i。 n s o f b u l b d i s c a 卜o u t 0 . s e m in
〔 3 〕 A 注v e 。 t L t i o n : b o d g r o w n f r o m t h e s : e t i o n o f o v a r y .
〔 4 〕 G l o b u le ; i n l : c e d f r o m e a l l : 5 .
〔 5 〕 T h e p : i m 、 r y v e s , e l 一 t i s s u e , ( V o ) 、 1 0 , e d f r o m t h e , e e t i。 n 。 f g lo b。 l e i n d i。 a t i n g t h e c : 11。 s
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.
〔 6 〕 B o l b l , t , i n d u e e d f r o m t h e g lo b u le s .
〔 7 〕 P la n t le t , i n 」u e e d f r o nt b u l b一d i , e o f n a r e i 、 s二 5 .
〔 8 〕 T h e p z a n t le t , o f n a r c : 、 s u , g r o , n n o r m a l l y i n t h。 、 。 i一
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陈振光 :中国水仙组织培养快速繁位研究初报2 3
—一 一一 , ~一 - 一一~一一一. A P R E L I M I N A R Y I N V E S T I G A T I O N O N T H EP R O PA G A T IO N O F N 月R C I及义lS 侧Z E T T A V A RC H I N E 入客1 5 R O E M B Y T l S S U E C U L r FLJR E
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