免费文献传递   相关文献

尖叶假龙胆中的雏菊叶龙胆酮提取分离



全 文 :* 基金项目:国家科学自然基金项目(81160504) ;内蒙古教育厅科学技
术研究项目(NJ09161) ;包头市医药卫生基金项目
(2009S1001 - 31)
通讯作者:李旻辉
尖叶假龙胆中的雏菊叶龙胆酮提取分离*
龙 平1 李旻辉2 霍东升2 李虔全2 崔占虎2
(1.包头医学院药学院 2008 级本科,内蒙古 包头 014060;2.包头医学院)
摘 要 目的:建立尖叶假龙胆中雏菊叶龙胆酮提取分离方法。方法:用 95 %乙醇对尖叶假龙胆进行提取,浓缩后
再以硅胶为载体进行柱色谱分离。结果:从尖叶假龙胆中分离得到大量雏菊叶龙胆酮。结论:该方法简单、实用、高效。
关键词 尖叶假龙胆;雏菊叶龙胆酮;提取分离
尖叶假龙胆(Gentianella acuta) ,又名苦龙胆,蒙
药名为阿古特 -其其格,是龙胆科一年生草本植物,广
泛分布于我国的河北、东北、内蒙古、山西等地区。全
草入蒙药,味苦、性凉,具有清热、利湿的功效,与同科
植物肋柱花(Lomatogonium carinthiacum)等同入药,可
用于治疗黄疸性肝炎、头痛、发烧[1]。据调查,敖鲁古
雅鄂仑春族猎民长期用其治疗心绞痛等疾病,疗效极
为显著。该植物主要含口山酮及裂环烯醚萜等化合物,
据相关药理报道,雏菊叶龙胆酮(Bellidifolin)具有降
低心率、降血糖等活性[2 - 3]。因此,尖叶假龙胆中雏菊
叶龙胆酮的提取工艺对该化合物的药理研究和开发利
用有着重要的意义。我们在对尖叶假龙胆的研究过程
中发现了简单、实用、高效分离雏菊叶龙胆酮的方法,
现报道如下。
1 材料与方法
1. 1 材料与试剂 尖叶假龙胆于 2008 年 7 月采自内
蒙古自治区根河市,样品经包头医学院药用植物教研
室王振旺老师鉴定为龙胆科植物尖叶假龙胆;薄层硅
胶 G、柱层析硅胶(100 ~ 200、200 ~ 300 目)购自青岛
海洋化工厂;所用试剂(甲醇,无水乙醇,乙酸乙酯,石
油醚)均为分析纯。
1. 2 提取和分离 粉碎干燥尖叶假龙胆地上部分
500 g,用 95 %乙醇回流提取 3 遍,合并提取液浓缩至
浸膏,得浸膏 107 g;将浸膏与硅藻土 1 ∶ 1 拌样,置于
索式提取器中,分别用石油醚(60 ~ 90 ℃)、乙酸乙酯、
甲醇提取至无色,合并相同萃取液;取少量石油醚、乙
酸乙酯、甲醇的萃取液与雏菊叶龙胆酮对照品点于同
一硅胶薄层 G板,以石油醚 -乙酸乙酯(1 ∶ 1)为展开
剂,展开,取出晾干,用碘显色。发现乙酸乙酯萃取液
与对照品 Rf值相同的斑点十分明显,表明雏菊叶龙胆
酮主要集中在乙酸乙酯萃取部分。将乙酸乙酯萃取液
减压浓缩至 300 mL后加入等体积的无水乙醇溶液,出
现不溶物黄色沉淀,过滤;分别取少量沉淀溶于乙醇,
与滤液和雏菊叶龙胆酮对照品点于同一硅胶薄层 G
板,用石油醚 -乙酸乙酯(1 ∶ 1)展开后晾干,用碘蒸
汽显色。发现沉淀部分与对照品 Rf 值相同的斑点十
分明显,表明雏菊叶龙胆酮主要集中在沉淀部分。称
取干燥后沉淀部分 25 g,用乙酸乙酯溶解后,取等量的
100 ~ 200 目硅胶拌至干燥且为均匀的颗粒;将样品用
硅胶柱色谱(150 g,200 ~ 300 目硅胶)分离,用石油醚
-乙酸乙酯(7 ∶ 3)洗脱 2 ~ 3 个柱体积,收集流份并减
压回收溶剂即得目标化合物 2 g。
2 结果
化合物为黄色粉末,与标准品共薄层层析,Rf值一
致,故鉴定为雏菊叶龙胆酮。经高效液相色谱纯度检
验,此方法分离得到的雏菊叶龙胆酮纯度达到 95 %以
上。
3 讨论
尖叶假龙胆中的雏菊叶龙胆酮含量相对较少,使
得雏菊叶龙胆酮的大量分离在技术上比较复杂、繁琐。
本实验首次用简单的萃取和硅胶柱色谱分离方法,得
到了大量的雏菊叶龙胆酮,为雏菊叶龙胆酮的进一步
研究提供了相对简单、可行的方法,也为尖叶假龙胆的
药理研究与开发利用提供了实验参考。
参考文献
[1] 朱亚民.内蒙古植物药志[M].呼和浩特:内蒙古人民出
版社,2000:81 - 85.
[2] 武海军,李旻辉. Bellidifolin 对麻醉大鼠心电图的影响
5
2012 年第 28 卷第 2 期
Vol. 28 No. 2 2012
包 头 医 学 院 学 报
JOURNAL OF BAOTOU MEDICAL COLLEGE
[J].包头医学院学报,2011,27(1) :22.
[3] 文莉,陈家春.降血糖活性成分 Bellidifolin遗传毒性研究
[J].医药导报,2008,27(11) :1317 - 1319.
(收稿日期:2011-09-22)
血液灌流联合血液透析抢救尿毒症患者地高辛中毒 1 例
薛 蕾 陆驰浩 马瑞玲
(包头市第四医院血液透析室,内蒙古 包头 014030)
地高辛是临床上治疗充血性心力衰竭的常用药
物,其治疗量与中毒量相差很小,地高辛成人致死量为
10 mg,短时间大剂量服用此药会出现一系列严重的不
良反应,甚至危及生命。因其主要从肾脏排泄,所以慢
性肾衰竭患者更易发生中毒。本例患者短期内服用大
剂量地高辛,经多次血液灌流(HP)联合血液透析
(HD)治疗,得以痊愈,现报告如下。
1 临床资料
患者,女,72 岁,尿毒症规律透析 3 年,每周 3 次。
因恶心、呕吐、不思饮食 3 d 于 2011 年 9 月 6 日入院。
仔细追问病史,近一周误服地高辛,每日 4 ~ 6 片
(0. 25 mg /片) ,总量约 7 ~ 10 mg。入院后查体:T
36. 3 ℃,P 50 次 /min,R 17 次 /min,Bp 140 /80 mmHg。
神志清,回答切题,贫血貌,口唇略苍白。双侧瞳孔等
大圆形,对光反射灵敏,双瞳直径约 3. 5 mm,无黄绿
视。双肺呼吸音清,无啰音,心率 50 次 /min,律偶不
齐,双膝以下浮肿。腹部未见异常,神经系统未见异
常。实验室检查:WBC 3. 33 × 109 /L,NEUT 77. 2 %,
LYM 14. 4 %,HGB 80 g /L,PLT 85 × 109 /L;血肌酐
345. 9 μmol /L,BUN 9. 86 mmol /L,CO2 结 合 力
23. 6 mmol /L,血钾 3. 8 mmol /L,血钠 130 mmol /L,血
氯 100 mmol /L。心电图报告:窦性心律,Ⅲ°房室传导
阻滞,ST - T 改变。地高辛血药浓度:5. 46 μg /L。诊
断:慢性肾衰竭尿毒症期地高辛中毒。
入院后共进行 4 次 HP 联合 HD 治疗,隔日 1 次,
用珠海健帆生物科技股份有限公司生产的 HA230 型
血液灌流器(吸附剂为苯乙烯 /二乙烯苯聚合而成的
大孔树脂) ,日机装 DBB -27 透析机,以动静脉内瘘为
血液通路,低分子肝素钙 5 000 U 抗凝,每次 HP 时间
2 h,血流量 150 mL;HD时间 4 h,血流量 220 mL。同
时给予阿托品静脉注射,异丙肾上腺素持续静脉点滴,
口服心宝丸。
第一、二、三、四次 HP 前地高辛血药浓度分别为
5. 46 μg /L、6. 85 μg /L、3. 22 μg /L、2. 18 μg /L,第一次
HP后心率 55 ~ 63 次 /min,第二次 HP 后恶心、呕吐症
状消失,饮食增加,第四次 HP 后心率 66 ~ 78 次 /min,
心电图报告:窦性心律,Ⅰ°房室传导阻滞,ST 段改变。
2 周后出院。
2 讨论
地高辛是广泛使用的治疗心力衰竭的药物,口服后
经小肠吸收,吸收率 50 % ~ 70 %,血浆蛋白结合率约
20 % ~30 %,药物向组织分泌缓慢而广泛,80 %经肾小
球滤过或肾小管分泌,其清除半衰期为 36 h,清除率与肌
酐清除率成线性正相关,当肾功能受损时,其清除率随肌
酐清除率下降而下降。地高辛中毒剂量与治疗剂量相差
很小,有效血药浓度为 0. 8 ~ 2. 2 μg /L,潜在中毒浓度为
2. 4 μg /L,口服 10 mg 即可致死[1]。对于肾功能衰竭患
者,因其排泄减少,易蓄积,常规血液透析仅能清除一小
部分,因此更易中毒。HA230 型血液灌流器的吸附剂是
由苯乙烯/二乙烯苯聚合而成的大孔高分子聚合物,属中
性大孔树脂,对与蛋白质紧密结合或脂溶性高的毒物具
有较强的吸附作用,在清除血液中药物的作用上优于单
纯血液透析。由于血液灌流能直接清除血液内药物,使
血药浓度快速降低,随着血液中药物浓度的下降,组织中
的药物会再次释放入血,使血药浓度升高,因此间隔一定
时间,反复多次进行血液灌流能较彻底地清除体内多余
地高辛,使血药浓度达安全范围[2]。本例患者经 4 次血
液灌流加血液透析治疗后地高辛血药浓度逐渐下降,症
状随之减轻,直至消失,说明血液灌流联合血液透析治疗
地高辛中毒快速有效。
参考文献
[1] 王质刚.血液净化学[M]. 2 版.北京:科学技术出版社,
2003:997 - 1013.
[2] Calvo R,Rosa R,Manuel LR,et al. Report of a suicidal
digoxin intoxication:a case report[J]. Med Sci Law,2002,
42(3) :265 - 268.
(收稿日期:2011-12-15)
6 包 头 医 学 院 学 报 第 28 卷