全 文 ：研究报告
Research Report
拟南芥H+-ATPase AHA11蛋白与钙结合蛋白 CBL10的互作关系分析
杨莹 周扬 洪莎 江行玉 *
海南大学农学院 /海南省热带生物资源可持续利用重点实验室,海口, 570228
*通讯作者, jiangxingyuhu@163.com
摘 要 采用分子克隆技术，从拟南芥中分离到一个质膜 H+-ATPase基因 AtAHA11和一个钙结合蛋白基因
AtCBL10。采用酶切连接的方法构建 AtAHA11-C-ter-pGADT7 和 AtCBL10-pGBKT7酵母双杂交载体，用
PEG/LiAc 法将 AtAHA11-C-ter-pGADT7 转化到酵母菌 Y187 中，AtCBL10-pGBKT7 转化到酵母菌
Y2HGold中。发现融合的二倍体酵母(AtAHA11-C-ter-pGADT7×AtCBL10-pGBKT7)可以在酵母选择性培养
基 SD-A-H-L-T+X-α-Gal+AbA中生长。说明 AtCBL10蛋白可与 AHA11蛋白的 C末端互作，便于我们进一
步研究它们的调节位点，为深入探讨 CBL10调控细胞膜 AHA11蛋白的功能提供一个技术平台。
关键词 质膜 H+-ATPase,钙结合蛋白,酵母双杂交,拟南芥
Interaction Analysis of Arabidopsis H+-ATPase AHA11 and Calcium-binding
Protein CBL10
Yang Ying Zhou Yang Hong Sha Jiang Xingyu *
College of Agriculture/National Key Laboratory for Sustainable Utilization of Tropical Bioresources, Hainan University, Haikou, 570228
* Corresponding author, jiangxingyuhu@163.com
DOI: 10.13417/j.gab.035.000957
Abstract An H+-ATPase gene AtAHA11 and a calcium-binding protein gene AtCBL10 were isolated from Ara-
bidopsis by molecular cloning technique. The yeast two hybrid expressing vectors AtAHA11-C-ter-pGADT7 and
AtCBL10-pGBKT7 were constructed using enzyme digestion and ligation methods, and then transformed into the
Y187 and Y2HGold yeast strains by PEG/LiAc methods, respectively. The diploid yeast fused by the transformed
Y187 and Y2HGold yeast strain could grow on the selective yeast plates (SD-A-H-L-T+X-α-Gal+AbA). The res-
ults illustrated that AtCBL10 protein could interact with the C-terminal of AHA11 protein, which was convenient
for studying the regulation sites of AtCBL10 protein, and found a technical platform for researching the
mechanism of CBL10 protein regulated plasma membrane AHA11 protein.
Keywords Plasma membrane H+-ATPase, Calcium-binding protein, Yeast two hybrid system, Arabidopsis tha-
liana
基金项目：本研究由国家自然科学基金(31260218, 31160185)资助
基因组学与应用生物学，2016年，第 35卷，第 4期，第 957-962页
Genomics and Applied Biology, 2016, Vol.35, No.4, 957-962
植物在生长过程中经常会遇到各种逆境胁迫，
例如：高盐、干旱、低温、强酸、营养不均衡等，植物
细胞会采取一系列的措施来保持正常的生长发育。
H+-ATPase是广泛存在于植物细胞中的一类膜蛋白，
在细胞新陈代谢过程中起到非常重要的作用。根
据在细胞中的位置和功能不同，可以将植物体内的
H+-ATPase分为三类：位于质膜上的 P型 H+-ATPase，
位于线粒体和叶绿体上的 F型 H+-ATPase以及位于
液泡膜、内质网膜、高尔基体膜等内膜系统上的 V型
H+-ATPase。P型 H+-ATPase可以分解 ATP产生跨细
胞膜的 H+梯度，并形成跨膜的电化学势梯度，这为植
物体内的各种主动运输过程以及营养物质和离子的
跨膜转运等生理生化代谢提供能量(Morsomme and
Boutry, 2000; Sondergaard et al., 2004)，从而调控植物
的生长发育和植物体对外界环境刺激的反应。
植物质膜 H+-ATPase 是一个多基因编码的酶
基因组学与应用生物学
Genomics and Applied Biology
类，拟南芥质膜 H+-ATPase由 11个基因编码组成，
烟草中发现了 9 个编码 H+-ATPase 的基因，番茄
中的 H+-ATPase蛋白有 7个成员组成。研究发现，
H +-ATPase 家族中的成员的表达具有组织特异性
(Sussman, 1994)，拟南芥 AtAHA2基因只在根毛中表
达(Sussman, 1994)，AtAHA3基因是拟南芥花粉发育
所必需的，它只在韧皮部中表达(Dewitt and Sussman,
1995; Oparka and Turgon, 1999)，AtAHA9 基因在花
药中特异性表达(Houlné and Boutry, 1994)，而 AtA-
HA10基因的表达只能在发育的种子中检测到(Harp-
er et al., 1994)。质膜 H+-ATPase的调节方式有三种：
蛋白的磷酸化作用和去磷酸化作，以及自身的自抑
制作用。自抑制作用是由其 C末端的抑制区调节的，
植物质膜 H+-ATPase 的 C 末端含有约 100 个氨基
酸，它们构成了一个自抑制区从而抑制酶的活性
(Palmgren et al., 1991)，C 末端的倒数第二个氨基酸
残基(苏氨酸, Thr)在体内发生磷酸化，能被 14-3-3
蛋白调控，实现信号转导(Fuglsang et al., 1999; Mau
doux et al., 2000)。植物细胞中，Ca2+作为第二信使联
系着胞外刺激与胞内的各种应答反应(DeFalco et al.,
2009)。当植物细胞受到外界刺激时，细胞内的 Ca2+浓
度会增加，Ca2+结合蛋白(又称钙调蛋白或者 Ca2+感
受器)可以感知细胞内 Ca2+浓度的变化从而调节下游
的应激反应(孙芳等, 2009)。植物体内的钙结合蛋白
与其下游的蛋白激酶 CIPK蛋白互作，参与调控一系
列的非生物胁迫反应，构建了植物细胞内的
CBL-CIPK调控途径。在拟南芥和水稻中均发现了
10个 CBL基因(Kudla et al., 1999; Kolukisaoglu et al.,
2004)，它们参与了不同的信号途径。当植物受到盐
胁迫危害时，细胞内的钙结合蛋白 CBL4 或者
CBL10会活化细胞内的蛋白激酶 CIPK24并结合形
成复合体，它们共同调节质膜上的 Na+/H+逆转运蛋
白 SOS1，将细胞内过多的 Na +排出去 (Zhu, 2002;
Quan et al., 2007)，这一过程是在质膜 H+-ATPase提
供质子推动力的作用下完成的(Zhou et al., 2015)。
液泡膜上的 CBL2 和 CBL3 蛋白通过调控液泡膜
V-ATPase的活性来调控拟南芥的生长和体内的离
子平衡(Tang et al., 2012)。拟南芥 CBL1蛋白通过与
蛋白激酶 CIPK7的互作，参与拟南芥应对低温胁迫
的调控(Huang et al., 2011)。
本研究从模式植物拟南芥中克隆到一个 H+-AT-
Pase 基因 AtAHA11 和一个钙结合蛋白基因
AtCBL10，利用酵母双杂交技术研究它们的互作关
系，发现 AtCBL10蛋白可以与 AtAHA11蛋白 C末
端互作，这为进一步研究 AtCBL10 调控细胞膜
ATPase的功能提供了研究基础。
1结果与分析
1.1 AtCBL10和 AtAHA11基因克隆
采用 Trizol法从拟南芥中提取叶片总 RNA，在
2%琼脂糖凝胶上电泳检测，RNA的 28 S、18 S、5.8 S
较完整(图 1A)，说明 RNA质量较好。按照反转录试
剂盒上的操作步骤将 RNA 反转录为 cDNA，用
ACT2 内标基因引物进行扩增，PCR 产物目的带较
亮，而且没有非特异扩增带和引物二聚体的产生
(图1B)，说明反转录的效果较好。
用 AtAHA11-F和 AtAHA11-R 引物以及 AtC-
BL10-F 和 AtCBL10-R 从 cDNA 中扩增 AtAHA11
和 AtCBL10基因，扩增产物片段大小正确(图 1C)，测
序结果表明序列正确，可以进行后续实验。
1.2生物信息学分析
测序结果显示 AtCBL10 基因 CDS 区域全长
741 bp，编码 246 个氨基酸的多肽；AtAHA11 基因
CDS区域全长 3 271 bp，编码 956个氨基酸的多肽。
用 ExPASy ProtParam 软件分析 AtCBL10 和 AtA-
HA11蛋白的理化性质，结果表明 AtCBL10蛋白的
元素组成为 C1274H1960N318O388S11，分子量为 28.29 kD，
等电点 (pI)为 4.59；AtAHA11 蛋白的元素组成为
图 1 AtAHA11基因和 AtCBL10基因克隆
注: A:拟南芥叶中的 RNA; B: cDNA扩增; C: AtAHA11基因
和 AtCBL10 基因全长扩增 ; M1: DL 2 000 Marker; M2: 1 kb
Marker; 1,2: 叶中的 RNA; 3,4: 内标基因 ACT2 扩增产物; 5:
AtAHA11全长基因扩增产物; 6: AtCBL10全长基因扩增产物
Figure 1 Cloning of AtAHA11 and AtCBL10 gene from Ara-
bidopsis
Note: A: RNA in leaves of A. thaliana; B: PCR amplification of
cDNA; C: PCR product of AtAHA11 gene and AtCBL10 gene;
M1: DL 2 000 Marker; M2: 1 kb Marker; 1,2: RNA in leaves; 3,4:
PCR amplification of the housekeeping gene ACT2 from cDNA;
5: PCR product of the AtAHA11 gene; 6: PCR product of the
AtCBL10 gene
958
C4739H7551N1269O1352S37，分子量为 105.12 kD，等电点(pI)
为 6.14。用 TMHMM 软件预测 AtCBL10 和 AtA-
HA11 蛋白的跨膜区，发现 AtCBL10 不含跨膜区
(图2A)，而 AtAHA11蛋白含有 9个跨膜区(图 2B)。
1.3酵母双杂交载体构建
生物信息学分析可知，AtAHA11蛋白的 N端含
有较长的跨膜区，为了便于研究它与 AtCBL10蛋白
的互作关系，我们采用 PCR的方法将 AtAHA11蛋
白游离在细胞质中的 C 末端对应的基因扩增出来
(图 3A)，并构建到酵母表达载体 pGADT7中，得到重
组质粒 AtAHA11-C-ter-pGADT7，同时将 AtCBL10
基因构建到酵母表达载体 pGBKT7中，得到重组质
粒 AtCBL10-pGBKT7。质粒 DNA酶切均切下了目
的基因带和对应的载体带，酶切结果正确(图 3B)。
1.4 AtCBL10与 AtAHA11的酵母双杂交分析
采用 PEG/LiAc 的方法，将构建好的 AtA-
HA11-C-ter-pGADT7 质粒转化到酵母菌株 Y187
中 ，AtCBL10-pGBKT7 质 粒 转 化 到 酵 母 菌 株
Y2HGold 中，分别在 SD-L和 SD-T 培养基中生长
2~3 d后，挑取阳性克隆在 2×YPDA培养中共培养，
在 DDO和 QDO/X/A培养基上点板后，于 30℃培养
箱中生长 3~5 d至蓝色菌斑出现。结果发现，所有的
二倍体酵母在 DDO 培养中都可以生长，而只有
pGADT7-T和 pGBKT7-53的阳性对照以及目的蛋
白 AtCBL10 和 AtAHA11-C 可以在 QDO/X/A培养
基上生长且菌斑显蓝色(图 4)，说明 AtCBL10蛋白可
以和 AtAHA11蛋白的 C末端互作。
图 2 AtCBL10蛋白和 AtAHA11蛋白的跨膜区分析
Figure 2 Transmembrane analysis of AtCBL10 and AtAHA11
proteins
图 3酵母双杂交载体构建
注 : A: AtAHA11 3 末端缺失突变基因克隆 ; B: AtA-
HA11-C-ter-pGADT7 和 AtCBL10-pGBKT7 重组质粒构建 ;
M1: DL2 000 Marker; M2: 1 kb Marker; 1: AtAHA11 3末端缺
失突变基因 PCR 扩增 ; 2: pGBKT7 空载体双酶切检测 ; 3:
AtCBL10-pGBKT7质粒 DNA双酶切检测; 4: pGADT7空载体
双酶切检测; 5:AtAHA11-C-ter-pGADT7质粒DNA双酶切检测
Figure 3 Construction of yeast two hybrid vectors
Note: A: PCR product of 3-deleted mutant gene of AtAHA11;
B: Plasmid construction of AtAHA11-C-ter-pGADT7 and AtC-
BL10-pGBKT7; M1: DL2 000 Marker; M2: 1 kb Marker; 1:
PCR amplification of the 3-deleted mutant gene of AtAHA4; 2:
Double enzyme digestion of the pGBKT7 vector; 3: Double en-
zyme digestion of the AtCBL10-pGBKT7 plasmid; 4: Double
enzyme digestion of the pGADT7 vector; 5: Double enzyme di-
gestion of the AtAHA11-C-ter-pGADT7 plasmid
图 4 AtCBL10和 AtAHA11-C酵母双杂交
注: DDO: 二缺培养基 , SD-L-T; QDO/X/A: 含有 X-α-Gal 和
Aureobasidin A 的四缺培养基 ; Negative: pGADT7-T 和 pG-
BKT7-lam 两个蛋白的酵母双杂交 , 阴性对照 ; Positive:
pGADT7-T 和 pGBKT7-53 两个蛋白的酵母双杂交, 阳性对
照; AtCBL10+AtAHA11-C: AtCBL10 蛋白和 AtAHA11 蛋白
的酵母双杂交
Figure 4 Yeast two hybrid of AtCBL10 and AtAHA11-C protein
Note: DDO: Double dropout medium, SD-L-T; QDO/X/A: Quad-
ruple dropout medium supplementing with X-α-Gal and AbA;
Negative: Yeast two hybrid assay of pGADT7-T and pG-
BKT7-lam protein, negative control; Positive: Yeast two hybrid
assay of pGADT7-T and pGBKT7-53 protein, positive control;
AtCBL10+AtAHA11-C: Yeast two hybrid analysis of the AtC-
BL10 protein and AtAHA11-C protein
拟南芥 H+-ATPase AHA11蛋白与钙结合蛋白 CBL10的互作关系分析
Interaction Analysis of Arabidopsis H+-ATPase AHA11 and Calcium-binding Protein CBL10 959
基因组学与应用生物学
Genomics and Applied Biology
2讨论
自 1972年人们在质膜微囊中发现了 H+-ATPase
的活性开始 (Hodges et al., 1972)，有关植物质膜
H+-ATPase的研究很多，它在植物细胞内物质的跨膜
运输、细胞内 H+浓度的调节等多种生理过程中都起
到重要的作用。质膜 H+-ATPase通过将胞质内的 H+
泵到细胞外侧，产生跨膜的 H+电化学势梯度，这为物
质的跨膜运输提供质子推动力，并能为营养物质的
次级主动运输提供能量。研究发现，盐生植物海马齿
质膜上的 H+-ATPase 能为质膜 Na+/H+逆转运蛋白
SpSOS1运输 Na+提供质子推动力，进一步提高 SOS1
的 Na+/H+交换活性，从而可能提高海马齿的耐盐性
(Zhou et al., 2015)。
植物体的 CBL-CIPK信号途径在植物逆境调控
过程中起到非常重要的作用，当植物受到外界环境
刺激时，细胞内的 Ca2+浓度增强，产生钙信号，此时
细胞内的钙结合蛋白 CBL会识别钙信号，进而与
CIPK蛋白的 FISL基元结合，解除 CIPK蛋白的自抑
制作用，形成 Ca2+-CBL-CIPK信号通路。这一信号途
径参与多种植物逆境调控：拟南芥中的 CBL4/
CBL10-CIPK24-SOS1调控途径是目前研究最为清
楚的耐盐调控途径，盐胁迫下，CBL4或者 CBL10蛋
白会与 CIPK24 蛋白结合并将其招募到质膜上，调
节质膜 Na+/H+逆转运蛋白 SOS1的活性，将细胞质
内过多的 Na+排出细胞(Quan et al., 2007; Quintero et
al., 2011)。这一调控途径在水稻，硬粒小麦，杨树中
也都得到了证明(Martínez-Atienza et al., 2007; Tang
et al., 2010; Feki et al., 2011)。拟南芥 CBL1或者CBL9
能够与 CIPK23蛋白结合，调控细胞膜 K+通道蛋白
AKT1，响应低钾胁迫(Xu et al., 2006)。此外，CBL1
和 CBL9 还能够与 CIPK1 或者 CIPK3 等其它激酶
蛋白结合，应答干旱、低温等其他逆境信号。植物的
根暴露在土壤里，土壤中矿物质营养成分和有毒离
子的浓度变化，导致了土壤中的 pH发生变化，不利
于植物生长，而植物细胞中的质膜 H+-ATPase能够
建立跨膜的 H+浓度梯度，调节细胞内外 H+的浓度平
衡。Fuglsang等(2007)研究发现，在高 pH胁迫下，细
胞中的钙结合蛋白 CBL2 可以与蛋白激酶 CIPK11
结合，负调控质膜上的 H+-ATPase。CBL2-CIPK11复
合体作用于质膜 H+-ATPase的 C末端第 931个的氨
基酸丝氨酸位点，这一位点的结合能够阻止 H+-AT-
Pase与 14-3-3蛋白结合中，使得 H+-ATPase处于失
活状态。尽管 CBL通过与 CIPK互作调节目标蛋白
的报道很多，但 CBL蛋白不经过 CIPK直接调节功
能蛋白的研究较少。本研究中，我们从拟南芥中分离
到一个钙结合蛋白基因 CBL10和一个质膜 H+-AT-
Pase基因 AHA11，利用酵母双杂交系统，我们研究了
CBL10蛋白与 AHA11 蛋白 C 末端的互作关系，发
现 CBL10 蛋白可以与 AHA11 蛋白互作，说明
CBL10参与了质膜 H+-ATPase调控 H+平衡的过程。
这为我们下一步研究质膜 H+-ATPase的调控途径奠
定基础。
3材料与方法
3.1拟南芥 RNA提取及基因克隆
本研究采用Trizol法(Thermo Fisher, No. 155960
26 )从哥伦比亚型拟南芥中提取幼苗 RNA，用
TaKaRa公司的反转录试剂盒(PrimeScript RT Reagent
Kit with gDNA Eraser, DRR047A)对提取的 RNA进
行反转录，具体操作步骤参照说明书。反转录得到的
cDNA第一条链用 ACT2内标基因引物进行 PCR，来
检测 cDNA 质量，ACT2 引物序列为：ACT2-F：
GTCGTACAACCGGTATTGTG，ACT2-R：GAGCTG
GTCTTTGAGGTTTC。
根据 GenBank中公布的拟南芥 AtAHA11 基因
(登录号: NM_125662)和 AtCBL10基因(登录号: NM_1
79154)的序列，设计引物扩增全长，引物序列如下：
AtAHA11-F：CGGGATCCATGGGGGACAAGGAAG
AAGT，AtAHA11-R：CCCTCGAGTCAGACGGTGTA
AGCTTGTTG；AtCBL10-F：CGGGATCCGTATGGAA
CAAGTTTCCTCTAG；AtCBL10-R：ATAGTCGACTC
AGTCTTCAACCTCAGTGT，为了方便 AtCBL10基
因构建 pGBKT7 表达载体，在其上游引物中引入
BamHⅠ酶切位点，下游引物中引入 SalⅠ酶切位点。
由于 AtAHA11蛋白较长，我们克隆了 AtAHA11蛋
白 C末端的突变基因，并将其构建到 pGADT7表达
载体上，引物序列为：AtAHA11-C-ter-F：CG GAATT
CATGAAGTTCTTGATTCGTTATGC；AtAHA11-C-
ter-R：CCCTCGAGTCAGACGGTGTAAGCTTGTTG，
其中上游引物引入 EcoRⅠ酶切位点，下游引物中引
入 XhoⅠ酶切位点。
3.2酵母双杂交表达载体构建
将 克 隆 到 的 AtAHA11-C-ter 突 变 基 因 和
pGADT7质粒分别用 EcoRⅠ和 XhoⅠ进行双酶切，
AtCBL10 基因和 pGBKT7 质粒分别用 BamHⅠ和
SalⅠ进行双酶切，酶切产物分别胶回收后，按照基因
960
摩尔数：载体摩尔数=10:1的比例，用 NEB公司的
T4连接酶(NEW ENGLAND BioLabs, M0202V)进行
连接。连接产物分别命名为AtAHA11-C-ter-pGADT7
和 AtCBL10-pGBKT7。
3.3重组质粒转化酵母菌
采用 PEG/LiAc 法将 AD表达载体的质粒转化
到酵母菌 Y187中，将 BD表达载体的质粒转化到酵
母菌 Y2HGold中。本实验中同时转化 pGADT7-T，
pGBKT7-53 和 pGBKT7-lam 质粒作为实验的正负
对照。转化方法参照 Clontech公司的说明书。
3.4酵母双杂交实验
将 SD-L和 SD-T 培养基中筛选到的阳性克隆
在 2 ×YPDA 培养中共培养，将菌液涂于 DDO
(SD-L-T)培养基中，30℃生长 3~5 d，挑取阳性克隆。
在 DDO液体培养基中培养后，分别稀释 10倍、100
倍和 1 000倍，取 6 μL点在 QDO/X/A (SD-L-T-H-L+
X-α-Gal+AbA)固体培养基中，30℃培养 3~5 d观察
菌落是否显蓝色。
作者贡献
杨莹和周扬共同完成了该基因的克隆与分析，
并撰写了论文的初稿；洪莎参与部分实验数据的分
析和处理；江行玉负责本实验的指导工作与论文修
改工作。
致谢
本 研 究 由 国 家 自 然 科 学 基 金 (31260218,
31160185)资助。
参考文献
DeFalco T.A., Bender K.W., and Snedden W.A., 2009, Breaking
the code: Ca2+ sensors in plant signaling, Biochem. J., 425
(1): 27-40
Dewitt N.D., and Sussman M.R., 1995, Immunocytological local-
ization of an epitope-tagged plasma membrane proton pump
(H+-ATPase) in phloem companion cells, Plant Cell, 7(12):
2053-2067
Feki K., Quintero F.J., Pardo J.M., and Masmoudi K., 2011, Reg-
ulation of durum wheat Na+/H+ exchanger TdSOS1 by phos-
phorylation, Plant Mol. Biol., 76(6): 545-556
Fuglsang A.T., Guo Y., Cuin T.A., Qiu Q.S., Song C., Kris-
tiansen K.A., Bych K., Schulz A., Shabala S., Schumaker K.
S., Palmgren M.G., and Zhu J.K., 2007, Arabidopsis protein
kinase PKS5 inhibits the plasma membrane H +-ATPase by
preventing interaction with 14-3-3 protein, Plant Cell, 19
(5): 1617-1634
Fuglsang A.T., Visconti S., Drumm K., Jahn T., Stensballe A.,
Mattei B., Jensen O.N., Aducci P., and Palmgren M.G.,
1999, Binding of 14-3-3 protein to the plasma membrane
H +-ATPase AHA2 involves the three C-terminal residues
Tyr946-Thr-Val and requires phosphorylation of Thr947, J. Bi-
ol. Chem., 274(51): 36774-36780
Harper J.F., Manney L., and Sussman M.R., 1994, The plasma
membrane H+-ATPase gene family in Arabidopsis: genomic
sequence of AHA10 which is expressed primarily in devel-
oping seeds, Mol. Gen. Genet., 244(6): 572-587
Houlné G., and Boutry M., 1994, Identification of an Arabidopsis
thaliana gene encoding a plasma membrane H+-ATPase wh-
ose expression is restricted to another tissues, Plant J., 5(3):
311-317
Huang C.L., Ding S., Zhang H., Du H., and An L.Z., 2011,
CIPK7 is involved in cold response by interacting with
CBL1 in Arabidopsis thaliana, Plant Sci., 181(1): 57-64
Hodges T.K., Leonard R.T., Bracker C.E., and Keenan T.W.,
1972, Purification of an ion-stimulated adenosine triphos-
phatase from plant roots: association with plasma mem-
branes, Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 69(11): 3307-3311
Kolukisaoglu U., Weinl S., Blazevic D., Batistic O., and Kudal J.,
2004, Calcium sensors and their interacting protein kinases:
genomics of the Arabidopsis and rice CBL-CIPK signaling
networks, Plant Physiol., 134(1): 43-58
Kudla J., Xu Q., Harter K., Gruissem W., and Luan S., 1999,
Genes for calcineurin B-like proteins in Arabidopsis and dif-
ferentially regulated by stress signals, Proc. Natl. Acad. Sci.
USA, 96(8): 4718-4723
Martínez-Atienza J., Jiang X.Y., Garciadeblas B., MendozaⅠ.,
Zhu J.K., Pardo J.M., and Quintero F.J., 2007, Conservation
of the salt overly sensitive pathway in rice, Plant Physiol.,
143(2): 1001-1012
Maudoux O., Batoko H., Oecking C., Gevaert K., Vandekerck-
hove J., Boutry M., and Morsomme P., 2000, A plant plas-
ma membrane H+-ATPase expressed in yeast is activated by
phosphorylation at its penultimate residue and binding of
14-3-3 regulatory proteins in the absence of fusicoccin, J.
Biol. Chem., 275(23): 17762-17770
Morsomme P., and Boutry M., 2000, The plant plasma mem
brane H+-ATPase: structure, function and regulation, Bio-
chim. Biophys. Acta, 1465(1-2): 1-16
Oparka K.J., and Turgeon R., 1999, Sieve elements and compan-
ion cells-traffic control centers of the phloem, Plant Cell, 11
(4): 739-750
Palmgren M.G., Sommarin M., Serrano R., and Larsson C., 1991,
拟南芥 H+-ATPase AHA11蛋白与钙结合蛋白 CBL10的互作关系分析
Interaction Analysis of Arabidopsis H+-ATPase AHA11 and Calcium-binding Protein CBL10 961
基因组学与应用生物学
Genomics and Applied Biology
Identification of an autoinhibitory domain Ⅰ the C-terminal
region of the plant plasma membrane H +-ATPase, J. Biol.
Chem., 266(30): 20470-20475
Quan R., Lin H.X., Mendoza I., Zhang Y.G., Cao W.H., Yang Y.
Q., Shang M., Chen S.Y., Pardo J.M., and Guo Y., 2007,
SCABP8/CBL10, a putative calcium sensor, interacts with
the protein kinase SOS2 to protect Arabidopsis shoots from
salt stress, Plant Cell, 19(4): 1415-1431
Quintero F.J., Martinez-Atienza J., Villalta I., Jiang X.Y., Kim
W.Y., Ali Z., Fujii H., Mendoza I., Yun D.J., Zhu J.K., and
Pardo J.M., 2011, Activation of the plasma membrane Na/H
antiporter Salt-Overly-Sensitive 1 (SOS1) by phosphorylation
of an auto-inhibitory C-terminal domain, Proc. Natl. Acad.
Sci. USA, 108(6): 2611-2616
Sondergaard T.E., Schulz A., and Palmgren M.G., 2004, Ener-
gization of transport processes in plants, roles of the plasma
membrane H+-ATPase, Plant Physiol., 136(1): 2475-2482
Sussman M.R., 1994, Molecular analysis of proteins in the plant
plasma membrane, Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Bi-
ol., 45(1): 211-234
Sun F., Xia X.L., and Yin W.L., 2009, The mutual regulations
between ABA and calcium signal transduction pathways un-
der abiotic stress, Jiyinzuxue Yu Yingyong Shengwuxue
(Genomics and Applied Biology), 28(2): 391-397 (孙芳,夏
新莉,尹伟伦, 2009,逆境胁迫下 ABA与钙信号转到途径
之间的相互调控机制 , 基因组学与应用生物学 , 28(2):
391-397)
Tang R.J., Liu H., Bao Y., Lv Q.D., Yang L., and Zhang H.X.,
2010, The woody plant poplar has a functionally conserved
salt overly sensitive pathway in response to salinity stress,
Plant Mol. Biol., 74(4-5): 367-380
Tang R.J., Liu H., Yang Y., Yang L., Gao X.S., Garcia V.J., Lu-
an S., and Zhang H.X., 2012, Tonoplast calcium sensors
CBL2 and CBL3 control plant growth and ion homeostasis
through regulating V-ATPase activity in Arabidopsis, Cell
Res., 22(12): 1650-1665
Xu J., Li H.D., Chen L.Q., Wang Y., Liu L.L., He L., and Wu W.
H., 2006, A protein kinase, interacting with two calcineurin
B-like proteins, regulates K+ transporter AKT1 in Arabidop-
sis, Cell, 125(7): 1347-1360
Zhou Y., Yin X.C., Duan R.J., Hao G.P., Guo J.C., and
Jiang X.Y., 2015, SpAHA1 and SpSOS1 coordinate in
transgenic yeast to improve salt tolerance, PloS One, 10
(9): e0137447
Zhu J.K., 2002, Salt and drought stress signal transduction in
plants, Annu. Rev. Plant Biol., 53: 247-273
962