全 文 ：湖 北 农 业 科 学 2013 年
收稿日期：2012－04－17
作者简介：刘 洋（1979－），女，吉林吉林人，讲师，硕士，从事花卉植物栽培方面的教学与研究工作，（电话）18943540228（电子信箱）
82642444＠qq．com。
鸟巢蕨（Neottopteris nidus），又称巢蕨、山苏花、
王冠蕨等，为铁角蕨科巢蕨属的一种多年生阴生草
本观叶植物。 近年来鸟巢蕨在观叶植物的应用中深
受人们的喜爱。 除了自然盆栽供人们观赏外，鸟巢
蕨还可以人工加工形成各种各样的形态，根据需要
配置在不同位置形成不同的景观效应，表现出丰富
多彩的美感。 目前鸟巢蕨繁殖方式主要以分株繁殖
和孢子繁殖为主，本研究以鸟巢蕨孢子为原材料进
行组培快繁，探索孢子离体快繁方案，为促进鸟巢
蕨的市场化生产提供参考［1］。
1 材料与方法
1．1 实验材料
鸟巢蕨材料取自吉林农业科技学院花卉温室
大棚，取含有成熟孢子囊的孢子叶，在花卉组培实
验室中将孢子叶切成面积 1 cm×1 cm的小块备用［2］。
1．2 实验方法
1．2．1 孢子的处理 接种前将孢子叶用 1 g ／ L 的
HgCl2 溶液浸泡 5 min，蒸馏水冲洗 6～8 次，用消过
毒的滤纸吸干水分，分 3种方式切割：A．将带孢子囊
的孢子叶直接接到培养基上；B．解剖镜下把孢子囊
从孢子叶上分离后接种；C．解剖镜下将孢子囊分离
后放在小块滤纸（2 cm×2 cm）上，压碎取出孢子，连
同滤纸一起接种［3］。
1．2．2 培养过程 ①孢子培养。 3 种方式处理的孢
子分别接种到初代培养基（1 ／ 2MS＋20 g ／ L 糖＋6 g ／ L
琼脂，pH 5．8）中，每处理接种 50 瓶。 培养条件为白
天温度 25 ℃、夜间 21 ℃，散射光，光照度 300 lx，光
照时间 12 h ／ d，湿度 80％。观察孢子萌发情况。②原
叶体增殖培养。 将萌发的原叶体团切成直径 0．5 cm
鸟巢蕨组培快繁技术研究
刘 洋
（吉林农业科技学院植物科学学院，吉林 吉林 132101）
摘要：以鸟巢蕨（Neottopteris nidus）孢子为原材料进行组培快繁，考察了孢子处理方式、基本培养基、激素
及孢子体诱导方式等条件对培养效果的影响。 结果表明，把经过消毒灭菌的孢子囊从孢子叶上切下，破
碎取出孢子后接种到 1 ／ 2MS 培养基上，孢子萌发较快，萌发率高。 萌发后的原叶体接种到不添加激素的
MS 培养基上能得到较大的增殖系数。 原叶体在试管内诱导孢子体难度较大，可采用 1 g ／ L 的 KH2PO4溶
液作诱导剂在试管外诱导，有利于原叶体向孢子体的转化。
关键词：鸟巢蕨（Neottopteris nidus）；孢子；培养基；离体快繁
中图分类号：S682．35 文献标识码：A 文章编号：0439－8114（2013）05－1188-02
Study on Rapid Propagation of Neottopteris nidus
LIU Yang
（Department of Plant Science， Jilin Agricultural Science and Technology University， Jilin 132101， Jilin， China）
Abstract： The rapid propagation of Neottopteris nidus by in vitro spore culture was researched． The effects of spore treat-
ment， base medium， plant hormone and sporophyte inducement method on culture efficient were studied． The results showed
that if cut off the the sporangia after disinfection from sporophyll， and crushed to release the spores， which were inoculated
in 1 ／ 2 MS medium， spore germination was with higher rate and faster speed than derect inoculation of sporophyll or sporan-
gia． The propagation coefficient of prothallus was bigger when inoculated in MS medium without any addition of hormone． It
was difficult to induce the sporophyte from prothallus by tube culture． However， the transformation of prothallus to sporophyte
could be realized by cultivating in substrate in pot with spraying of 1 g ／ L KH2PO4 inducer．
Key words： Neottopteris nidus； spore； medium； in vitro rapid propagation
第 52卷第 5期
2013年 3月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol． 52 No.5
Mar．，2013
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2013.05.064
第 5 期
的小块， 每块含 5～8 片原叶体， 接种到以 MS 或
1 ／ 2MS 为基本培养基， 添加了不同浓度 6－BA（0、
0．5、1．0、1．5、2．0 mg ／ L） 或 KT （0、0．5、1．0、1．5、2．0
mg ／ L）的增殖培养基上，每处理接种 50 瓶，每瓶接
种 10 块，培养条件同①，观察原叶体的增殖情况。
③孢子体诱导。 孢子体诱导分试管内和试管外两种
方式，试管内诱导方法同原叶体增殖培养；试管外
诱导是将直径 0．5 cm 左右的原叶体团从瓶中取出，
在解剖镜下均匀分成 10 小块， 移入盆栽基质 （草
炭）中，每盆移入 20 小块，喷施 H2O、1 g ／ L KH2PO4
溶液、Fe 盐 （MS 培养基中的铁盐成分：Na2·EDTA
37．3 mg ／ L＋FeSO4·7H2O 27．8 mg ／ L） 和 MS （不添加
糖）4 种不同的诱导剂， 用小喷壶每天均匀喷施一
次，喷到基质表面湿润为止，待到有孢子体形成时
停止喷施。 培养条件为温度 20～25 ℃，散射光，光照
度 500 lx，遮阴率 60％，覆膜保湿，膜内湿度 100％，
观察孢子体的诱导情况［4，5］。
2 结果与分析
2．1 孢子处理方式对孢子萌发情况的影响
不同孢子处理方式对鸟巢蕨孢子萌发的影响
结果见表 1。由表 1可知，处理 C孢子萌发的时间最
短，能较早地形成原叶体团，且萌发后的长势也明
显优于处理 A 和处理 B，培养 27 d 时形成的原叶体
直径为 0．3～0．5 cm，54 d 左右时形成的原叶体团直
径为 1．5～2．0 cm，而这时处理 A 和处理 B 中还未有
原叶体形成， 另由于处理 A 和处理 B 培养时间过
长，形成的原叶体团表现出松散、发黄、干枯现象，
可见在接种时从孢子囊中取出孢子比连同孢子囊
一起接种效果好。
2．2 不同培养基对原叶体增殖的影响
添加不同浓度 6－BA 或 KT 的培养基中原叶体
的增殖情况见表 2。从表 2可以看出，各处理的增殖
系数都在 4．5 以上， 说明各培养基配方都可以较快
地增殖出大量的原叶体。 其中不添加任何激素的
MS培养基中增殖系数最高，为 5．5，添加 6－BA 的处
理比添加 KT 的处理中增殖系数要高。 采用新复极
差法对各处理原叶体的增殖系数进行显著性检验，
结果显示各处理增殖系数间的差异不显著。 在实际
的增殖过程中还要考虑到诱导出的原叶体质量，一
般密实、生长慢、不平展的原叶体很难用于再次诱
导增殖和诱导孢子体。 综合来看，在诱导原叶体增
殖过程中采用不添加任何激素的 MS 培养基效果最
好。
2．3 孢子体的诱导情况
2．3．1 试管内诱导情况 原叶体能否向孢子体转
化是鸟巢蕨苗木繁殖的关键， 在试管内诱导孢子
体，MS 培养基中添加不同浓度的 6－BA 和 KT，均没
有任何原叶体转变为孢子体，可见原叶体向孢子体
的转化不适合在试管内进行。
2．3．2 试管外诱导情况 试管外孢子体诱导情况
见表 3。 由表 3 可以看出，喷施不同的诱导剂，各处
理中均有孢子体形成。其中 1 g ／ L的 KH2PO4溶液作
诱导剂时诱导率最大，达到了 90％，其他 3 种诱导
剂的诱导率均低于 50％。 因此在进行原叶体试管外
盆栽诱导时， 可在盆中喷施 1 g ／ L 的 KH2PO4溶液，
以增强原叶体向孢子体的转化。
3 小结与讨论
综上所述，最佳的鸟巢蕨孢子离体繁殖途径为
把经过消毒灭菌的孢子囊从孢子叶上切下，破碎取
出孢子后接种到 1 ／ 2MS 培养基上， 孢子萌发较快。
将萌发的原叶体接种到不添加激素的 MS 培养基
上，增殖系数较大，原叶体团生长状态较好。 增殖培
养后将获得的原叶体团切下移栽到室外盆中，喷施
1 g ／ L 的 KH2PO4 溶液作诱导剂，加强管理，可促进
原叶体向孢子体的转化，再进一步培育便可获得大
表 3 不同诱导剂对孢子体试管外诱导效果
诱导剂
H2O
1 g/L KH2PO4
Fe 盐
MS
栽植原叶体数
520
510
510
520
孢子体个数
210
460
120
180
孢子体诱导率//%
40
90
24
35
表 1 不同孢子处理方式下孢子的萌发情况
处理
方式
A
B
C
孢子萌发时间
d
45
37
18
原叶体形成时间
d
67
58
27
原叶体团形成时间
d
92
89
54
表 2 不同培养基上原叶体增殖情况
基本
培养基
1/2MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
6-BA
mg/L
0
0
0.5
1.0
1.5
2.0
0
0
0
0
KT
mg/L
0
0
0
0
0
0
0.5
1.0
1.5
2.0
接种
数
63
62
64
61
63
60
72
64
62
67
原叶
体数
330
342
341
318
317
302
344
311
306
307
增殖
系数
5.2
5.5
5.3
5.2
5.0
5.0
4.8
4.9
4.9
4.6
原叶体
生长状态
较大，多数平展
大，大多平展
大，大多平展
大，有些密实
大，有些密实
生长慢，密实
大，少数平展
大，少数平展
生长慢，疏松
较大，疏松
（下转第 1195页）
刘 洋：鸟巢蕨组培快繁技术研究 1189
第 5 期
量的鸟巢蕨苗木。 在本实验中，诱导阶段只考察了
1 ／ 2MS 基本培养基的培养效果，并仅就孢子的切割
方式对孢子萌发的影响进行了研究，关于是否有更
快速高效诱导的方式还有待研究。 另关于 4种诱导
剂为何诱导率出现大的差异， 还需要进一步的探
讨。
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（责任编辑 向 闱）
（上接第 1189页）
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