全 文 ：野生大豆新基因GsDabb1的克隆及其异源表达
拟南芥的耐逆性分析
朱延明，杨欣兴，孙晓丽，罗 晓，纪 巍，才 华，柏 锡
（东北农业大学省高校农业生物功能基因重点实验室，哈尔滨 150030）
摘 要：Dabb类蛋白是2000年被发现的一类新蛋白家族，具体功能特征尚不明确。以耐盐碱能力极强的东北
野生大豆G07256为试材，根据前期得到的野生大豆碱胁迫基因芯片表达谱，从中筛选出一个碱胁迫处理下显著上
调表达的Dabb类基因（probe set为Gma.16010.1.S1_at），通过电子克隆和RT-PCR获得该基因全长 cDNA 序列，命
名为GsDabb1。序列分析表明，该基因在多个植物物种中均有同源基因，但功能尚不明确。通过实时荧光定量PCR
（Real-time quantitative PCR）分析该基因在野生大豆高盐、低温、干旱胁迫下的表达模式，表明该基因能够响应多
种非生物胁迫。为研究该基因在胁迫过程中的功能，将全长基因转化模式植物拟南芥，对转基因植株的表型分析
结果显示，转基因拟南芥的耐旱性得到增强，表明该基因参与植物的耐旱过程，并能够提高植物耐旱性。研究得
到对植物干旱胁迫抗性起重要作用的关键基因，为作物抗逆分子育种提供基因资源和奠定理论基础。
关键词：野生大豆；GsDabb1；非生物胁迫；基因表达谱；耐逆基因
中图分类号：S565.1；Q945.78 文献标志码：A 文章编号：1005-9369（2013）04-0001-07
朱延明,杨欣兴,孙晓丽,等.野生大豆新基因GsDabb1的克隆及其异源表达拟南芥的耐逆性分析[J].东北农业大学学报, 2013,
44(4): 1-7.
Zhu Yanming, Yang Xinxing, Sun Xiaoli, et al. Molecular characterization of GsDabb1, a Dabb homolog from Glycine soja,
and its heterologous expression to improve drought tolerance in Arabidopsis[J]. Journal of Northeast Agricultural University,
2013, 44(4): 1-7. (in Chinese with English abstract)
Molecular characterization of GsDabb1, a Dabb homolog from Glycine
soja, and its heterologous expression to improve drought tolerance in
Arabidopsis/ZHU Yanming, YANG Xinxing, SUN Xiaoli, LUO Xiao, JI Wei, CAI Hua, BAI Xi
(Key Laboratory of Agricultural Biological Functional Genes, Northeast Agricultural University, Harbin
150030, China)
Abstract: Dabb, a new protein family, was discovered in 2000, whose specific function is unclear for now.
In this study, a up-regulated gene (probe set as Gma.16010.1.S1_at) was selected, based on the wild soybean gene
chip expression profiling under alkaline stress. Full-length cDNA sequence of the gene was obtained by silico
cloning and RT-PCR, named as GsDabb1. Sequence analysis indicated that the gene had homologous genes in a
few plant species, but the gene function was unclear. Real-time quantitative PCR was used to analyze the
expression pattern of the gene was induced by high salinity, low temperrature, drought stresses. To study the gene
function in osmotic stress, the gene was thansformated into Arabidopsis plants. The results indicated that heterologous
expression GsDabb1 gene could improve plant tolerance to drought stress. This study will enrich gene resources
收稿日期：2011-03-02
基金项目：黑龙江省高校科技创新团队建设项目（2011TD005）；国家自然科学基金项目（31171578）；国家转基因育种重大专项（2011
ZX08004-002）
作者简介：朱延明（1955-），男，教授，博士，博士生导师，研究方向为植物基因工程与分子生物学。E-mail: ymzhu2001@yahoo. com. cn
Journal of Northeast Agricultural University
东 北 农 业 大 学 学 报第44卷 第4期 44(4): 1~7
2013年4月 April 2013
网络出版时间 2013-4-23 11:04:02 [URL] http://www.cnki.net/kcms/detail/23.1391.S.20130423.1104.005.html
干旱、盐碱、低温等胁迫是影响植物生长发
育的主要环境因素，植物在进化过程中形成耐逆
机制以抵御环境胁迫，研究全新的抗逆基因功能
可为耐逆新品种培育提供功能明确的基因资源，
对改良作物耐逆性、认识植物耐逆机理具有重
要意义[1-2]。Dabb类蛋白是2000年被发现的一类新
蛋白家族，该蛋白具有α/β结构域。胡杨（Populus
euphratica）盐胁迫转录组数据表明，该类基因参与
植物对盐胁迫的耐性[3]。Lee等克隆出拟南芥Dabb
类基因AtDabb1，分析该基因抗菌性，表明该基因
参与植物的抗病菌机制[4]。前人研究还发现，Dabb
类基因介导大叶钻天杨的盐胁迫反应。该蛋白在
噬氢菌中具有磷酸盐缩聚酶的活性。可见该类蛋
白参与多种生物过程，然而不同成员具体功能及
其分子机理尚不明确[3]。
近年来分子生物学与植物基因工程迅速发
展，通过分子育种提高作物的非生物胁迫耐性成
为培育耐逆作物品种的有效手段。然而，可用于
作物胁迫基因工程的基因资源较匮乏 [5-6]。本研究
以具有丰富耐逆基因资源、且已有基因信息较少
的耐盐东北野生大豆为试材[7]，利用野生大豆与栽
培大豆进化上和序列的同源性，借助商品化的大
豆表达分析芯片分析野生大豆EST的表达情况，并
选择在非生物胁迫早期表达量上调的基因进行克
隆和研究，因此，获得基因具有自主知识产权，
且基因与植物非生物胁迫反应关系密切[8-10]。关于
Dabb类蛋白与植物非生物胁迫的耐性关系的研究
非常少，通过对所得基因的分析，可丰富Dabb类
蛋白与植物非生物胁迫反应关系信息。
植物抗逆性不是由单基因决定，而是由一系
列相关直接或间接作用基因，形成一个复杂的调
控网络。在这个复杂调控网络中，任何一个环节
都至关重要。从某个或几个基因着手深入研究，
取得一定突破后，可以点带面，使全面认识了解
植物抗逆性功能机理成为可能 [11]。
本研究在前期构建的野生大豆碱胁迫芯片表
达谱中选取一个在碱胁迫中显著上调表达的Dabb
类基因，克隆获得该基因的全长编码区，并命名
为GsDabb1[12]。进一步检测其在不同非生物胁迫条
件下的表达模式，并转化模式植物拟南芥，研究
其功能，为研究GsDabb1基因在植物逆境胁迫应答
方面的功能及其作用机制奠定基础，也为综合改
良作物耐盐碱能力提供基因资源。
1 材料与方法
1.1 材料
野生大豆品种为耐盐碱材料 Glycine soja L.
G07256，拟南芥生态型为 Columbia-0。大肠杆菌
为 DH5α，用于拟南芥遗传转化的根癌农杆菌为
LBA4404。
1.2 方法
1.2.1 目的基因全长cDNA 克隆与序列分析
根据实验室前期所做的碱胁迫芯片探针序
列，对野生大豆表达序列进行电子克隆，组装成
重叠群（Contig），获得一条 1 300 bp 的野生大豆重
叠群序列，用该序列的ORF区在NCBI 数据库进行
核苷酸和氨基酸比对。利用Primer Premier 5.0 软件
在开放阅读框（Open reading frame，ORF）之外设计
PCR 引物如下：
GsDabb1-Sense 5GGCTAGTTGCTAGCTATGG
GGG 3，
GsDabb1-Antisense 5GAATATCTTTAGGATCA
TGCTGGGG 3
提取耐盐碱野生大豆株系G50109总RNA，用
M-MLV Reverse Transcriptase 反转录试剂盒合成
单链 cDNA。以 cDNA 为模板，用高保真 pfu 酶
（TaKaRa 公司）扩增目的基因。PCR 反应体系为：
ddH2O 17.3 μL、10×PCR Buffer 2.5 μL、Mg2 +（2. 5
mmol·L-1）1.0 μL、dNTP（10 mmol·L-1）2.0 μL、引
物（20 mmol·L-1）各0.5 μL、模板1.0 μL、高保真酶
0.2 μL。PCR 反应条件为：94 ℃预变性 10 min，
94 ℃ 30 s， 58 ℃ 30 s， 72 ℃ 30 s， 30 个循环，
72 ℃延伸 10 min。采用琼脂糖凝胶DNA片段回收
与纯化试剂盒（Bioteke 公司）提供方法回收与电子
延伸序列大小一致的PCR 扩增片段，并将其克隆
到pEASY-T1载体上，挑取阳性克隆，参照普通质
and theoretical basis for plant genetic engineering.
Key words: Glycine soja; GsDabb1; abiotic stress; gene expression profile; stress tolerance gene
东 北 农 业 大 学 学 报·2· 第44卷
粒提取方法提取质粒并测序。在NCBI 的GenBank
数据库中搜索与该基因同源的其他植物氨基酸序
列，分析目的基因保守结构域及同源性，并采用
MEGA软件构建系统进化树。
1.2.2 实时荧光定量 PCR 检测野生大豆中目的基
因表达量
取3周龄野生大豆幼苗，分别置于200 mmol·L-1
NaCl、30%（W/V）PEG 和 4 ℃条件下处理 0.5、1、
3、6 h后迅速剪取幼嫩的叶片和根，置于-80 ℃保
存 。 利 用 Trizol 法 提 取 样 品 总 RNA。 采 用
SuperScriptⅢ反转录酶（Invitrogen）合成 cDNA 第一
条链。根据目的基因 cDNA 序列设计实时荧光定量
PCR 引物如下：
GsDabb1-RTSense 5ATGGGGGATGGTCATCG
TCT 3，
GsDabb1-RTAntisense 5TTTCACCCCCTCTCC
TCACA 3
扩增目的片段长度为224 bp。采用25 μL 反应
体系：2×TransStart SYBRqPCR Supermix 12.5 μL，
3和 5端引物各 0.5 μL，cDNA模板 2.5 μL，去离
子水 9 μL。扩增条件为 94 ℃ 5 min；95 ℃ 30 s，
55 ℃ 30 s，72 ℃ 40 s（收集荧光信号），40 个循
环；72 ℃ 5 min。以GFPDH作为内参，每个样品3
次重复，利用 ABI PRISM7300 实时荧光定量 PCR
仪检测目的基因的表达模式。采用2-ΔΔCT方法计算目
的基因相对表达量，设目的基因在处理条件下的
表达量是对照的N倍，N=2-ΔΔCT，ΔΔCT_Target=（CT_
Target -CT_GFPDH）Time x-（CT_Target-CT_GFPDH）
Time 0。式中，CT_Target 和 CT_GFPDH 分别为目
的基因和内参基因的Ct 值，Time x 指胁迫处理的
不同时间点，即NaCl、低温、干旱处理的 0.5、1、
3、6 h，Time 0是对照时间点，即NaCl、低温、干
旱处理的 0 h[13]。每个时间点均做 3次生物学重复，
每次生物学重复均做3次技术重复。
1.2.3 对拟南芥的遗传转化及其表达验证
先构建目的基因的植物超量表达载体，将目的
基因的超量表达载体转化农杆菌 LBA4404，用
Floral dip法对拟南芥进行遗传转化。并筛选基因超
量表达转基因纯合体，用于表型分析。对转基因拟
南芥分子生物学检测采用的是 PCR 和 RT-PCR 方
法。PCR检测先提取转GsDabb1 基因拟南芥 DNA，
以DNA为模板，用 rTaq酶检测目的基因。采用半定
量 RT-PCR 方法对转基因拟南芥进行转录水平检
测。分别提取野生型拟南芥（Col 0）与转基因植株的
总RNA，反转录成 cDNA作为模板。调平内参基因
Actin2，对GsDabb1基因进行PCR扩增。检测引物，
PCR反应体系与反应条件均与克隆基因时一致。
1.2.4 转基因拟南芥的非生物胁迫耐性分析
转基因拟南芥的表型试验处理条件如下：
干旱：150、200、250、300 mmol·L-1甘露醇；
低温：4℃；
高盐：100、125、150 mmol·L-1 NaCl；
盐碱：7.5、8.5 mmol·L-1 NaHCO3。
将T2代拟南芥种子经表面消毒后，于4 ℃春化
2~5 d，在无菌条件下点播到含 3％蔗糖、1.2 g·L-1
MES、 0.7%琼脂的 1/2MS 培养基上（pH 5.8），萌
发期表型分析中，培养基中含 NaCl（100、 110
mmol·L-1）、碱（7.5、8.5 mmol·L-1 NaHCO3）、甘露
醇（250、300 mmol·L-1）。培养条件为 22 ℃、16 h
光照/8 h 黑暗的昼夜节律，光照强度为 4 000~
6 000 lx，每天统计萌发率，培养 14 d后观察拟南
芥生长情况。幼苗期表型分析先将种子点播到
1/2MS培养基上培养7 d，然后选取大小一致的4叶
期幼苗接种到含 NaCl（125、150 mmol·L-1）、碱
（7.5、8.5 mmol·L-1 NaHCO3）、甘露醇（250、300
mmol·L-1）培养基中竖直培养，观察拟南芥生长情
况，测量地上部分鲜重和根长。生物学重复 3次，
技术重复3次。
2 结果与分析
2.1 野生大豆GsDabb1基因的 cDNA克隆和序列
分析
根据 GsDabb1 电子延伸序列设计引物，进行
PCR 扩增，测序结果表明，包含一个 318 bp 的
ORF，编码 105 个氨基酸，软件分析显示目的基
因编码蛋白的分子质量为 53.4 ku，等电点为 8.94。
该氨基酸序列含有 Dabb super family 结构域（见
图 1），该氨基酸序列与大豆（ACU14842.1）、苜蓿
（ACJ86123.1）中功能未知的蛋白质相似性非常高，
分别为 100%和 97%。进化树分析表明，和大豆的
功能未知基因（BT090884.1）序列相似性为 100%，
和花生中预测的转录因子基因（EZ724028.1）、苜蓿
未知功能基因（BT053463.1）同源性为 96%（见图
2）。由于是首次在野生大豆中研究该基因，因此将
朱延明等：野生大豆新基因GsDabb1的克隆及其异源表达拟南芥的耐逆性分析第4期 ·3·
该基因命名为GsDabb1。目前在拟南芥当中仅发现
一 个 Dabb 家 族 基 因 ， 即 所 报 道 的 AtDabb1。
GsDabb1与AtDabb1虽然同属于Dabb家族基因，但
是序列相似性非常低，比对结果见图3。NCBI数据
库中指出该结构域的蛋白与植物响应盐胁迫密切
相关。
2.2 野生大豆中GsDabb1基因的表达特性分析
为了解幼苗叶片中GsDabb1在逆境胁迫条件下
的表达情况，以Tubulin 为内参，应用实时荧光定
量PCR方法检测目的基因相对表达量，结果如图4
所示，在NaCl处理下，GsDabb1在叶中短期上调到
对照的约 15 倍左右，在根中表达水平不显著，
GsDabb1 基因在根和叶中表达模式的不同说明该
基因可能在盐胁迫处理下在叶和根中的调控方式
不同[14]；在干旱处理下，GsDabb1表达水平在叶中
明显高于根中，且在根中和叶中均呈现先上调再下
调的趋势，只是在6 h时，该基因在叶中和根中表
达有所不同，6 h 时GsDabb1 在叶中下调，而在根
中显著上调；在冷处理下，GsDabb1在叶中和根中
的变化趋势基本一致，均呈现先上调后下调的趋
势，只是在 0.5 h 叶中表达量高于根中。综上所
述，GsDabb1基因参与到盐、干旱、低温三种胁迫
中，并且在这三种胁迫处理中均呈现在短期内显著
上调表达的模式。GsDabb1基因能够参与至少 3种
以上非生物胁迫过程，由此我们推测GsDabb1基因
在植物应答非生物胁迫反应中将起一定作用。
2.3 GsDabb1对拟南芥的遗传转化
根据获得的全长编码区序列，在上游引入
Bam HⅠ酶切位点，在下游引入 SacⅠ酶切位点，
测序正确后将基因连入植物表达载体 pBI121。酶
切鉴定结果见图5。将植物表达载体 pBIGsDabb1转
化根癌农杆菌 LBA4404，采用 Floral dip 法对拟
南芥侵染后，收获种子，经 Km 筛选得到 T0代抗
性植株，对 T0代种子继续进行 Km 筛选，并进行
PCR 跟踪监测，在 T2 代不发生分离的抗性植株
视为超量表达的纯合体。对 T1代植株 PCR 检测结
图1 GsDabb1基因保守结构域预测结果
Fig. 1 Analysis of protein conserved domains of GsDabb1
1 15 30 45 60 75 90 100
Dabb superfamily
Query seq.
Superfamilies
图2 野生大豆GsDabb1与其他相关序列的进化树分析
Fig. 2 Phylogenetic tree based on an alignment of Glycine soja GsDabb1 with other related sequences
GsDabb1
AK286054.1
BT090884.1
BT090772.1
BT053463.1
EZ724300.1
HP000246.1
EZ732673.1
XM 002268108.1
33
7299
99
47
98
图3 GsDabb1与AtDabb1序列多重性比对
Fig. 3 Amino acid sequence alignment between GsDabb1 and AtDabb1 CLUSTAL multiple sequence alignment
东 北 农 业 大 学 学 报·4· 第44卷
2.4 转基因拟南芥非生物胁迫下表型测定
通过转GsDabb1基因超表达拟南芥表型分析表
明，在低温、盐、碱胁迫下超表达植株与野生型
植株未表现出差别，但是在干旱胁迫下超表达植
株生长状态好于野生型（见图 8~11，图 8、10彩版
见封二）。
果见图 6。本试验 GsDabb1 提取 Southern 杂交呈阳
性的4株转基因拟南芥RNA，以其反转录产物为模
板进行 PCR。未转化植株的RT-PCR无扩增产物，
而转基因株系可以扩增出目的条带。结果表明外
源基因能够在转基因拟南芥中组成型表达，结果
见图7。
图4 野生大豆中GsDabb1基因在不同非生物胁迫处理的表达模式
Fig. 4 Expression pattern of GsDabb1 gene in response to various treatments
3.53.02.52.01.51.00.50-0.5-1 对照 0.5 1 3 6CK
时间（h）Time
▲
▲
▲
叶片 Leaf
根部 Root
◆
▲
◆ ◆
◆
◆
▲
◆
▲
低温 Cold treatment
35302520151050-5-10
▲▲
▲
◆ ◆
◆
◆▲◆ ▲
干旱 Drought treatment
20
15
10
5
0
-5
▲▲ ▲◆ ◆
◆
◆▲◆ ▲
NaCl处理 NaCl treatment
图5 GsDabb1基因植物表达载体构建
Fig. 5 Construction of plant expression vector pBIGsDabb1
图6 T1代转GsDabb1拟南芥PCR检测
Fig. 6 PCR result of T1 pBIGsDabb1
M-DNA分子质量标准DL2000；1-阴性对照；2-阳性对照；3-野
生型； 4~6-转 pBIGsDabb1 基因植株 16-1，16-2，16-4 RT-PCR
检测结果
M-DL2000 DNA ladder; 1-Negative control; 2-Positive control; 3-Wild
type control; 4-6-RT-PCR results of transgenic lines 16-1, 16-2 and 16-4
图7 转GsDabb1基因植株的RT-PCR检测
Fig. 7 RT-PCR result of pBIGsDabb1
WT 16-1 16-2 16-3 16-4
GsDabb1
GsDabb1
Actin
XbaⅠ
Bam HⅠ
SmaⅠ
Bam HⅠ SstⅠGSDabb
XbaⅠ
Bam HⅠ
SmaⅠ
SphⅠ
SstⅠ
GUS
RB
P35S
Tnos
Pnos
PnosRB
LB
Tnos
NPT II
NPT IIpBI12114 758 bp
NPT II
NPT
LB
Tnos GUS
P35S
pBIGsDabb1 rs
SstⅠ
Eco RⅠ
Eco RⅠ
HindⅢ
SphⅠ
PstⅠ
SphⅠ
HindⅢ
SphⅠ
PstⅠ
M 1 2 3 4 5 6 7
2000 bp
1000 bp750 bp500 bp
250 bp
100 bp
2000 bp
1000 bp750 bp500 bp
250 bp
100 bp
M 1 2 3 4 5 6
朱延明等：野生大豆新基因GsDabb1的克隆及其异源表达拟南芥的耐逆性分析第4期 ·5·
对照 0.5 1 3 6
CK 对照 0.5 1 3 6CK
叶片 Leaf
根部 Root
◆
▲
叶片 Leaf
根部 Root
◆
▲
GsD
abb
1表
达
量
GsD
abb
1e
xpr
ess
ion
rate
时间（h）Time 时间（h）Time
GsD
abb
1表
达
量
GsD
abb
1e
xpr
ess
ion
rate
GsD
abb
1表
达
量
GsD
abb
1e
xpr
ess
ion
rate
图8 野生型及超表达GsDabb1在干旱处理下的萌发情况，超表达GsDabb1增强对干旱的抗性
Fig. 8 Seed germination in response to drought with the overexpression of GsDabb1 in transgenic Arabidopsis plants
图9 野生型及超表达GsDabb1在甘露醇处理下随天数变化萌发情况
Fig. 9 Time-course seed germination ratio of WT and three independent transgenic
Arabidopsis lines in the presence of mannitol
萌
发
情
况
Ger
min
atio
n
35
30
25
20
15
10
5
0 1 2 3 4 5 6 7 8
时间（d）Time
▲
▲ ▲
■
■ 对照 CKGsDabb#1
GsDabb#2
GsDabb#4
■
◆
▲
×◆◆
◆◆
■
■▲
× ×
×
×
◆◆
× × × ×▲■■▲
▲
■
■
◆
◆ ▲
250 mmol·L-1甘露醇Mannitol
图10 转GsDabb1基因拟南芥在胁迫条件下的表型
Fig. 10 Phenotypes of transgenic GsDabb1 seedlings grown in stress medium
16-1 16-2 16-4
GsDabb1WT
对照Control
250 mmol·L-1甘露醇
Mannitol
300 mmol·L-1甘露醇
Mannitol
35
30
25
20
15
10
5
0 1 2 3 4 5 6 7 8
▲
▲ ▲
■
■ 对照 CKGsDabb#1
GsDabb#2
GsDabb#4
■
◆
▲
×
◆◆
◆
◆
■
■
▲
×
×
×
×
◆◆
× × × ×▲■■▲
▲
■
■
◆
◆
▲
300 mmol·L-1甘露醇Mannitol
对照Control 300 mmol·L-1甘露醇
Mannitol
东 北 农 业 大 学 学 报·6· 第44卷
萌
发
情
况
Ger
min
atio
n
时间（d）Time
图11 转GsDabb1基因拟南芥根长及鲜重数据分析
Fig. 11 Root length and fresh weight data analysis of Arabidopsis thaliana
3 讨论与结论
关于Dabb家族基因前人研究非常少，功能尚
不明确。本研究在前期构建的野生大豆碱胁迫基因
芯片表达谱中选取一个经生物信息学预测属于
Dabb家族的基因进行克隆，序列分析表明GsDabb1
氨基酸序列组成与多种植物序列高度同源，具有
Dabb super family 结构域。本研究阐明 GsDabb1 基
因在野生大豆中的表达模式，GsDabb1 基因参与
盐、干旱、低温三种胁迫，且在这三种胁迫处理
中均呈短期内显著上调表达的模式。GsDabb1 基
因能够参与至少 3 种非生物胁迫过程，由此推测
GsDabb1基因在植物应答非生物胁迫反应中将起到
一定作用。本研究中表型试验显示，该基因在高
盐、低温、碱胁迫下表型均不明显，但是在干旱胁
迫下，超表达GsDabb1生长状态好于野生型，说明
该基因在干旱胁迫反应过程中起更多作用，而在高
盐、低温胁迫过程中作用十分有限，未引起表型差
异。目前关于GsDabb类基因与非生物胁迫耐性关
系的报道较少，本研究表型实验中GsDabb1基因未
表现出对盐胁迫的耐性，可能由于基因序列上的差
异造成，或是由于表达的植物物种不同所致。
[ 参 考 文 献 ]
[ 1 ] Nakashima K, Ito Y, Yamaguchi S K. Transcriptional regulatory
networks in response to abiotic stresses in Arabidopsis and grasses
[J]. Plant Physiology, 2009, 149: 88-95.
[ 2 ] 李杰, 陈丽华, 朱延明. 植物抗渗透胁迫基因工程研究进展[J].
东北农业大学学报, 2005, 36(2): 241-248.
[ 3 ] Gu R, Fonseca S, Puskás L G, et al. Transcript identification and
profiling during salt stress and recovery of Populus euphratica[J].
Tree Physiology, 2004, 24: 265-276.
[ 4 ] Lee J R, Lee S S, Park S C, et al. Functional characterization of
pathogen-responsive protein AtDabb1 with an antifungal activity
from Arabidopsis thaliana[J]. Biochimica et Biophysica Acta, 2008,
1784: 1918-1923.
[ 5 ] 陈其军, 王学臣, 刘强. 植物逆境胁迫耐受性功能基因组研究进
展[J]. 生物化学与生物物理进展, 2001, 28(6): 797-801.
[ 6 ] 纪宗玲, 刘继中, 陈苏民. 基因功能的研究方法[J]. 生物工程学
报, 2002, 18: 116-120.
[ 7 ] 李向华, 王克晶, 李福山, 等. 野生大豆研究现状与建议[J]. 大豆
科学, 2005, 24(4): 305-309.
[ 8 ] Zhang G D. Studies on annual wild soybeans[J]. Journal of North-
east Agricultural University: English Edition, 1994, 1(1): 9-19.
[ 9 ] 池晓菲, 舒庆尧. 开放的差异基因表达技术研究进展[J]. 中国生
物化学与分子生物学学报, 2002, 18(3): 259-261.
[10] 刘占通, 文英会, 金喜新, 等. 基因芯片技术及其应用[J]. 生物
学通报, 2005, 40(2): 10-12.
[11] Yang L, Ji W, Zhu Y M, et al. GsCBRLK, a calcium/calmodulin-
binding receptor-likekinase, is a positive regulator of plant tole-
rance to salt and ABA stress[J]. Journal of Experimental Botany,
2010(10): 1-15.
[12] Ge Y, Li Y, Zhu Y Y, et al. Global transcriptome profiling of wild
soybean (Glycine soja) roots under NaHCO3 treatment[J]. BMC
Plant Biology, 2010(10): 153.
[13] 刘诗航, 王彩香, 毛新国, 等. 小麦蛋白磷酸酶 2A 调节亚基基
因TaBβ-1的克隆及其在非生物胁迫下的表达特性[J]. 中国农
业科学, 2010, 43(11): 2197-2208.
[14] Chen M, Xu Z S, Xia L Q, et al. Cold-inducedmodulation and
functional analyses of the DRE-binding transcription factor gene,
GmDREB3, in soybean[J]. Journal of Experimental Botany, 2009,
60: 121-135.
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