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鸟巢蕨植物组织培养工厂化育苗技术



全 文 :+ A C 1 0 gl L
; 水 。 一个月后 , 把鸟巢旅新萌发的弯 曲幼 叶用手术剪刀剪取 , 再用 中性
★ 增殖培养签 洗衣粉浸泡清洗 , 然后用 自来水流水冲洗干净 。 在超净工作台无菌条件
M S 十 6 一 BA .O s m gl L+ A C .O s gl L ; 下 , 先用 7 5 % 酒精浸泡消毒 3 05 , 然后无菌水冲洗 3次 , 再放入 0 . 1% 的
★ 生根培荞基 升汞溶液中消毒6 一 s m ln , 再用无菌水冲洗 5次 , 用无菌纱布吸去材料表
1 / Z M S ( 大 t 元素减 半 ) + N A A O . 1 一 0 . 2 m g / L 面的水分 , 切成 l m m 左右的小块 。
+ 一s Ao . 1 一 o . Zm g zL ; 诱导分化情况
上述培养基高温 ( 121 一 12 6 弋 ) 高压灭菌前 p H值 将小块放入诱导培养基上培养 。 1 0天后切 口处开始膨大 , 3 0天后小
为 .5 9 一 6 . 0之间 , 初始诱导培养基和增殖培养墓中加入 块表面开始产生一些绿色球状小体 。 有的小块有些褐化 , 在无菌条件下
3 0 g/ L普通食用蔗糖 , 生根培养基中加入 2 0创 L普通食用 取出切去褐化部分再转移到新的诱导培养基上 。 随若绿色球状小体的逐
蔗格 , 初始培养和增殖培养培养温度为 2 5 士 2叱 , 光照 步增大 , 5 0天后有部分球状小体开始萌发出芽 , 然后变成丛生苗 , 表明
诱导分化成功 。
丛生苗扩井
将丛生苗切割成 2 一 3棵为一丛 , 分别接种在增殖培养荃上 , 大约 3 5
天左右每一小丛苗就增殖到 1 0 ~ 1 2棵左右 。 且丛生苗长势旺盛 , 颜色
翠绿 , 部分丛生苗还萌发少 t 的根 。 把新增殖的丛生苗继续切倒分块接
种 , 如此下去 , 可在短时间内获得大 t 快繁苗 。
鸟撰旅组培苗的诱导生根和炼苗
把丛生苗切成单棵小苗后接种到生根培养墓上 。 培养 2 5天左右鸟巢旅
萌发出很多细根 , 生根率可达 1 0 0% , 且组培苗叶片也迅速张大伸长 。 待根
系长至 Z c m左右即可移栽 。 移栽后的 1个月内 , 最重要的工作是要做好遮
阳 、 保温 、 保湿 、 通风这几方面的工作。 利用智能控温间歇喷雾育苗系统 ,
使生产出的组培苗炼苗成活率达到 9 5% 以上 。 炼苗成活后要及时用 1 14 M S营
养液进行施肥 , 以增强植株长势 , 待3 0天后即可出圃 。
本技术与常规生产方法的比较
★ 取材容易 、 极 易获得无菌材料 , 且保持品种特性
不变 。
以前有文献报道 , 采用 鸟巢藏抱子无菌播种的方式进
行繁殖 , 但由于鸟巢藤抱子细小且有绒毛 , 取材和消毒困
难 , 生产上可操作性差 , 且易发生变异 。 而本方法是采用
其新发的幼小嫩叶作为外植体 , 取材和消毒都比较容易掌
握 , 具有很强的可操作性和可重复性 , 且能保持品种特性
极少变异 。
* 增殖系数较高 , 月增殖达到 5 一 6倍 。 容易形成规
模 , 具有很强的工厂化生产前景 。
鸟巢旅传统繁殖方法主要采 用切割母株和抱子播种
两种方法 。 ① 切割法 : 鸟巢蔗没有甸甸 茎 , 也没有不定
芽 , 一般 只有一个顶芽 , 当顶芽受伤时生长点才会长 出
侧芽 , 所 以将其短缩茎纵 切 12/ 或 114 分别种植 , 二 、 三
个月 后在伤口近芽体处会长 出新的芽体 , 再将其分切就
可分离出许多植株 。 这种方法繁殖率很低 , 且容易伤害
母株 , 所 以很 少采用 。 ② 抱子播种法 : 鸟巢孩抱子着
生于叶背 , 当抱子成熟时会转成褐色 , 此时即可采集播
种 。 首先将已 有袍子成熟的叶片剪切 , 用 刀片小心将抱
子刮下收集起来 , 贮藏在干燥阴 凉处 , 或将带有抱子的
叶片部分切成块状并风干 。 播种使 用清洁且较细小的介
质如细蛇木属 、 泥炭土 、 炭化稻壳或水苔等 , 将介质装
在透明塑胶盒或水稻秧盘内 , 将抱子均匀地撒播在介质
上或者将带有抱子的叶片 以 抱子面朝上放 l , 然后盖上
盖子或用保鲜膜封好以保持较高 湿度 , 并皿于有遮阳的
温室种植床下或室内较 明亮处 。 抱子播种后约 1 0 天就可
发芽并开始形成配子体 , 经 3个月开始长出抱子叶 , 至 6
一 8个月 时才可陆续将较大的植株移植 。 所以抱子播种法
周 期也 比较长 , 更重要的是它对温度和 湿度要求很高 ,
在浙江地 区 自然条件下 , 采用抱子播种 法时袍子萌发率
很低 , 很难分化 出苗 , 不容易得到大 t 种苗 , 也难以被
生产采 用 。 而本 文提 出的组织培养方法 , 可在短时间 内
生产 出大 t 的种苗 , 且不受季节限制 。 以获得 3 0个无菌
外植体计算 , 在一年内至少可获得 5 千万株性状统一的种
苗 , 具有很强工厂化生产能力 。
★ 本技术在保证组培苗品 质的同 时 , 尽可能采取了植物
组织培养简化程序 , 与传统组培生产比较 , 节约了大 t 的
电能 , 极大地降低了生产成本 , 增加 了经济效益 , 具有很
大的使用和推广价值 。 如 : 整个生产过程采用 自来水取代
蒸馏水 , 普通食用蔗糖代替化学纯蔗糖 , 生根组培苗采用
袋式自然光培养 ( 即把将生根的组培苗放入组培育苗袋中 ,
然后在洁净的 p C 板温室中进行 自然光培养 )。
★ 采用本文研制的育苗系统 , 鸟巢旅组培苗炼苗成活率
可达到 9 5 % 以上 , 解决了组培苗炼苗成活率低的 问题 ,
为 鸟巢旅工厂化育苗生产提供 了新的途径 。
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