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毛冬青的形态组织学与高效液相色谱法鉴别



全 文 :鉴别
毛冬青的形态组织学与高效液相色谱法鉴别
广东药学院 (广州 5 1 02 4) 0罗集鹏
香港中文大学 毕培曦
摘要 本文描述了毛冬青的形态组织学特征 , 同时对其根和茎的甲醉提取液进行高效液相 色 谱分
析 , 结果表明 , 根和茎中主要成分的保留时间 、 相对峰面积 、 最大吸收波长以及相对含量有显著差别 。
关键词 毛冬青 形态组织学 高效液柑色谱 鉴别
毛冬青为冬青科植物毛冬青 lI ex p bU esc -
份绍 H co k et A rn
· 的根 , 是我国南 方 常 用中
草药 , 有清热解毒 、 活血通脉与消肿止痛之功
效 。 商品调查结果表明 , 目前使用的毛冬青多
数混有地上茎枝 , 有的样品几全为茎枝 , 并见
有混入非冬青科植物的根 。 某些药厂生产毛冬
青干浸膏所用原料亦为其茎枝和根 。 此外 , 毛
冬青在产地均被加工成大小不等的片 、 块 , 形
状极不完整 , 很难鉴别 。 对于毛冬青的生药鉴
别虽有一些零星记 载〔` , ” , 但 均 不 深 入 。 为
此 , 我们对本品进行了较为深入的形态组织学
和高效液相色谱法鉴别研究 , 可作为生产 、 使
用及其它研究工作的鉴别依据 。
本研究所有实验材料购 自广东 、 广西及香
港各药店 , 并有自采于上述地区的对照标准药
材与原植物标本 。
飞 药材性状
根呈圆柱形 , 稍弯曲 , 有分枝 , 多数直径
1 一钾m , 表面灰棕色 、 灰褐色或棕褐 色 , 有
纵皱纹及支根痕 , 有的具皮孔样突起 。 商品多
为大小不等的横切或斜 切 片 , 或 短段 。 皮 部
薄 , 有时脱落 , 内表面浅黄色或褐色 ; 木部宽
阔。类 白色或浅黄色 ,可见致密的放射状纹理及
环纹 。 气微 , 皮部味苦 , 微涩而后甘 , 木部味
淡。
茎枝表面呈灰褐色 , 有纵皱纹 , 有的可见
灰白色地衣斑或细小皮孔 。 皮部菲薄 , 木部宽
阔 , 类白色 , 中央具髓 。 其余与根相似 。
2 显微特征
根横切 面观 木栓层为 3 一 7 列浅棕色扁
平薄壁细胞 , 栓内层仅 1 列 。 皮层窄 , 宽 3 ~
9列细胞 , 细胞多呈切向延长 , 内含淡黄色团
块状物质 。 皮层中有少数石细胞群 。 中柱鞘石
细胞群多呈连续的环层 , 石细胞带较窄 , 1 ~
4 列细胞宽 , 有的石细胞中含方晶 ; 有的样品
则石细胞稀少 , 断续稀疏排列 。 韧皮部有少数
石细胞 , 方品及含晶石细胞偶见 ; 韧皮射线向
外逐渐扩展 , 多略向一侧倾斜 。 形成层明显 ,
成环 。 木质部宽阔 , 占根的大部分 , 常呈偏心
性 , 年轮明显 。 导管多角形 , 单个或 2 一 10 佘
个成群 , 多呈径向排列 。 木纤维众多 , 被木射
线分隔成径向行列 , 其间有少数木薄壁细胞 。
木薄壁细胞较少 , 傍管或离管夹杂于径向木纤
维带中 。 木射线多数平直 , 宽 1 一 8 列细胞 ,
细胞呈径向或切向延长 , 壁具单纹孔 。 有的射
线细胞中含草酸钙方晶 , 含品 射 线 细胞常较
大 , 壁较厚 , 木化较深 。 所有的木质部分子均
木质化 。 皮层 、 韧皮部 、 木射线和木薄壁细胞
中均含多量的淀粉粒 , 前二者的薄壁细胞电尚
含淡黄色团块状物质 , 该物质易溶于 95 % 乙醇
和水合氯醛试液中 , 可被苏 丹 l 试 液染成红
色 。 如将材料保存于沉% 乙醇中 , 数 日后可见
该物质表面析出众多小针晶 。 ( 图 1 一 A 、 B 、
C )
根解离组 织与粉末 石细胞多呈长方形 、
方形 、 类三角形或长条形 , 少数形状不规则 ,
长 2 3一 12 7 ( 1 6 1冲 m , 宽 2 3一 7 0协m , 壁厚 7 一
23 终m , 壁孔极明显 , 少数石细饱 中 含草酸钙
方晶 。 具缘纹孔导管分子众多 , 长 ( 2 0 0 ) 3 1。一
1 7 0 0卜Lm ,宽 2 8一 5 0 ~ 8 1卜m , 壁厚 3 ~ 5终m , 纹
中药材第 1 7卷第 6 期 1 9 9 4 年 6 )」
DOI : 10. 13863 /j . i ssn1001 -4454. 1994. 06. 006
孔 长圆形 , 心数类圆形 , 纹孔 口 裂 隙 状 , 内
含 , 内壁具螺纹状三生增厚 , 端壁倾斜 , 具梯
状穿孔板 , 多数延伸呈长尾状或尾状 , 尾长可
达 3迄5卜: m 。 木纤维众多 , 细 长 , 长 7 4 3~ 2 4 2 0
协m , 宽 1 4~ 2 3一 3 6件m , 壁厚 5 ~ 1二件m , 纹孔
内口呈斜裂隙状 , 内壁具螺纹状三生增厚 , 两
头渐尖或斜尖 , 偶见叉状 , 外壁平滑 , 有的呈
波齿状 。 木薄壁细胞长条形 , 外壁常呈浅波状
图 1 毛冬青根的组织显微图
. 横切面简图 ( x s ) B 、 C . 横切面详图
。 部分解离组织与粉末 ( 以上均 x 10 o )
c
. 形成层 ck . 木检组织 ( 细胞 ) c o . 皮层
c p
. 皮层薄壁细胞 fe . 脂肪物质
gr
· 年伦 p e · 中柱梢 p h . 韧皮部
p p
. 韧皮薄壁细胞 sc . 石 细胞 st . 淀粉拉
xf
· 木纤维 x p . 木薄壁细胞 x r . 木针线
( 细 胞 ) v . 导管
表 毛冬青根与茎的高效液相色谱分析结果
最 强 峰 第 二 强 峰
R T P A % 口蕊a l R A T IO R T P A
。 入二 : x R A T IO
:
勺一门`Q]ó l工
:
厅`,土月了一公根 1 0 . 4 4 4 3 . 5 9
茎 1 4 。 2 9 1 8 。 0 9
2 9 5 2 0 3 3 1 6
2 2了
3 5 9

6 5

3 3 1 0 2 9 1 2 3 3 3 0

3 2 5

8 2 4

6
3 1 6 3 3 7 〕 3 3 。 3 2 3 。
2 3 1 9

3 8
0 3 1 2

3 9 3 1石 3 1 3 2 0 8 2 1 。 6 2 1 。 6 1 8 。 7
第 三 强 峰 第 四 强 峰
R T P A % 皿 , X R A
T IO R T P A % 口 l a l R A T I O
一一—一一 ~ 一一一一一一- -一- - - ~ ~ ~ ~ -né1`:128nUI今曰自O叮白八舀上`门卫乙根 2 0 。 2 8 8 。 4 3 3 1 1 3 1 5茎 2 3 。 1 8 2 1 。 6 6 2 0 2 3 1 7 3 1 73 1 3 2 1。 1 4 4 。 7 3 3 1 4 3 16 2 97 1 3 。 2 1 3 。 2 11 。 4注 : 强峰的划分是 以峰高为标准 , R T保留时间 , P A % 百分峰面积 , 久二: 最 大 吸收波长 , R A T I O 最 大 吸 收波长与最小吸 收波长的吸收度比 位2 0 中药材第 17 卷第 6 期 1 9 9 4 年 6 月
式波齿状弯曲 , 具单纹孔 。 木射线细胞长条形
或长方形 , 直立 或 横 卧 , 长 邺~ 1了3件m , 宽
指~ 70 卜m , 壁厚 2 一 3林m , 具 细小单纹 孔 。 含
品木射线细胞常较大 , 壁较厚 。 木栓细胞浅棕
色 , 一长方多角形 。 长 1 2 ~ 9 0件m , 宽 1 2 ~ 3 5卜m ,
壁具细小单纹孔 。 淀粉粒众多 , 多为单粒 , 直
径 2 ~ 1 8件m , 多数呈盔形 、 卵状三 角 形 、 球
形或多面体形 , 脐点多数可见 , 呈裂隙状 、 星
状或点状 。 复粒由 2 ~ 5 分粒组成 , 具 2 分粒
者 , 常 1 个特小 。 皮层与韧皮薄壁细胞中含淡
黄色物质 , 溶解后呈油珠状 。 ( 图 1一 D 、 图
艺一 D )
茎横切 面观 表皮部分残存 , 外切向壁极
厚 。 周皮发生于表皮层 , 木栓层为数列扁平细
胞 , 径向整齐排列 , 其外切向壁和径向壁常增
厚 , 微木化 ; 栓内层为 1 ~ 4 列薄壁细胞 , 内
含叶绿体 。 皮层窄 , 宽 4 ~ 8 列细胞 , 细胞内
含叶绿体 , 有少数石细胞散在 。 中柱鞘石 细胞
群呈连续的环层 , 宽 飞一 3 列细胞 , 其间有少
数纤维 , 常数个成群了壁极厚 , 胞腔细小 ; 有的
石细胞 含方品 。 韧皮部较窄 , 外侧有少数石细
胞 。 形成层明显 , 成环 。 木质部宽阔 , 木射线
平直 , 宽 1一 4 列细胞 , ’ 有的单列木射线细胞
中含方晶 。 髓偏心性 , 悦细胞多角形 , 排列紧
密 , 壁略增厚 , 木化 , 具单纹孔 , 细胞中常含
草酸钙簇品或方品 , 簇品的晶瓣易离散 。 有的
髓细胞含少量淀粉粒 。 皮层和韧皮薄壁细胞中
含浅黄刨勿质 , 尚含少量淀粉粒 。 ( 图 2一 A 、
B )
茎解离组 织与粉末 与根相似 , 不 同点在
于 : 中柱鞘纤维细长 , 常与石细胞伴存 , 长可
达 25 0 0拼m , 宽 丫 、一 2 3件m , 壁 厚 5 ~ 工2林m ,
具小点状单纹孔 , 胞腔多呈缝状 , 外壁平滑或
略呈浅波状 , 先端渐尖或钝尖 。 石细胞多呈长
图 2 毛冬膏茎与根的组织显微图
( 茎 八一 C , 根O )
A
. 横切面简图 ( )、 1 0) B . 横切面详图
C

D
. 解离组织与粉末 ( 以上均 x 1 0 0 )
c
. 形成层 c k . 木检组织 ( 细胞 ) co . 皮层
cr
. 草酸钙结 晶 c p . 皮层薄垒细胞
几 髓 ( 细胞 ) p e · 中柱稍 p f . 中柱 稍纤维
bP
. 韧皮部 r . 升线 sc . 石细胞 v c . 梯
纹导管 v p . 具缘纹孔导管 vs . 螺纹导替
x f
. 木纤维 x p . 木薄壁细胞 x r . 木射 线
x y
. 木质部
,
2 1
方形 ,方形 、 梭形 .、 长条形或类三角形 , 有的
形状不规则或细长纤维状 , 长 23 一 1 9 6件m , 宽
9一 5即 m , 壁厚 5 一 1 8 }、 m , 外壁常 呈乳突状
或分枝状 , 壁孔明显 。 木纤维长 6 14 ~ 14 8 6件m ,
宽 2 1~ 护 3 5林m , 壁厚 3 ~ 9林m , 纹孔 内 口 呈纵
裂隙状 。 木栓细胞多角形或 长 方 多 角形 , 长
24~ 5 8卜m , 宽 1 4一 2 8协m , 壁稍增厚 , 约 3拼m ,
内含棕色物质 。 髓细胞呈长方形 、 方形或类圆
形 , 长 4 8 ~ 9艺林m , 宽 左6~ 7 0卜m , 壁稍增厚 ,
3 ~ 7林m , 具单纹孔 , 胞腔内常含大型方晶或
簇晶 。 ( 图 2 一 e )
3 高效液相色谱法鉴别
仪器 、 试药与方法均与文献〔 3 ’相 同 , 分析
结果见表与图 3 。
胞多呈连续或断续的环层 , 有的石细胞中尚含
草酸钙方靛、 。 导竹主具缘纹孔 , }勺砰 典三二廷螺
纹状增厚 , 端 壁多延伸成长尾状或尾状 , 具柳
状 穿孔板 。 茎的木栓细胞的外比向壁常增厅 ,
微木化 ; 中栓鞘石细胞带中尚 有 少 数 纤维伴
存 , 髓细胞常含簇晶或方晶 。
毛冬青根和茎的 H P L C 色谱 图虽然相似 ,
但各色谱峰的相对百分含量相差甚远 , 根的最
强峰和次强峰为 R T 10 . 妞 和 2 2 . 肠 , 而 茎 的
则为 R T 州 . 29 和 1 7 . 0 6 , 两者极易 区 别 。 根
据我们对多种冬青属植物的 H P L C 分 析结果 ,
毛冬青的 H P L C 特征峰为 R T I C一货 之 间 的
色谱峰 。 上述分析结毕提示 , 毛冬青的不同药
用部分所含成分的量差别极为显著 , 必然影响
它们的药效 ; 因此 , 不可互相混用 。
参 考 文 献
1 中国医学科学院药物研究所等 .
二册 ) . 北京 : 人 民卫生出版社 ,
中药志 ( 第
] 9 8 2 : 2 8 3
2 赵达文主编 . 常用中药材组织粉末图解 . 北
京 : 人民卫生出版社 , 19 9 1 : 6 5
3 罗集鹏 , 等 . 救必应的形态组织学与高效液
相色谱法鉴别 . 中药材 , 1 9 , 2 , 15 ( 12 ) : 24
( 1 9 9 4一 0 3一 3 0收稿 )
图 3 毛冬青高效液相色谱图
A
. 城及 B . 茎
色谱柱 : E e o n o s P h e r e C . 。 厂卜: m ,
中 4 。 6 x 2 5 Cm m
溶剂 系统 : A . 乙睛 一 0 . 0 石m of / L
N a H Z P O `
·
H s P O 一( 1 : 1 )
B
.
0

0 5mo l,/ L
N a H: P O 。 · H a P O . ( P H 3 )
梯度 洗脱程序 : B % 5 0、 z e ( i n 4 om i n )
流速 l m l /m in , 检 汉J波长 3 e omn
4 小结与讨论
毛冬青根与茎的组织构造特点是 , 皮层和
韧皮薄壁细胞中均含淡黄色物质 , 中柱鞘石细
△ 《 广东省栽培药用植物真菌病窖志 》 本书介绍
12 0种栽培药用植物 土的侵染性病害近 60 0种 , 其中国
内未正式报道过的侵染性病害 30 0 多个 ; 真菌病容近
50 0 种 ,其中国内未正式报道过的病原真菌 5 6个 ,真菌
的新种 、 新组合 、 新专化型 86 个 。 绝大多数病原真菌附
有形态图 , 共 朋 3幅 ; 病状彩色图照 4仁幅 。 书价 ( 含
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编辑部购买 。
,
2 2
· 中药材第 17 卷第石期至万 可了葡丽
Mo r p ho lo gie a l
,
H is t o lo g ie a l a n d H P L C Id e n t i f ie a t i o n o f R a d i x Ili e i s P u b e s c e n t is
L u o J IP e n g
(G u a n g d o n g P h a r m a e e t ie a l C o ll e g e 5 2 0 2 2 4 )
B u t P u i h a y
(C h in e se U n i v e r s it y o f H o n g K o n g )
M o r P lz o l o g ic a l a dn h i s t o l o g i e a l e h a r a e t e sr o f R a d i x I li e i s P ub e s e e n t了5 w e r e d e s e r i b e d , a n d i l l u s t ar t e d
w i t h Ii n e d r a w i n g s
.
H i g h P e r f o r m a n e e liq ul d e h r o m a t o g r a P h i e a n a l y s i s
o f t h e m e t h a n o l e x t r
a e t s o f t h e
r
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s a n d s t e m s o f t l份 d r u g w a s a ls o un d e r t a k e n . T h e r e s u l t , s h o w e d t h a t t h e r e w e r e o b v i o u s
d i f f e r e n e e s i n r e s P e e t
o f r e t e n t io n t im e
, r e la t i v e P e a k a r e a
,
m a x im u m a b so r P t io n w a v e le n g t h a n d r a t io o f
m a in e o m P o n e n t s o f t h e a b o v e m e d i e i n a l P a r t s
.
K e y W
o r d s I Ze 戈 P u b e s e e 儿凡 M o r p h o ] o g ie a l: H is t o lo g i e a l a n d H P L C i d e n t i f i e a t io n
( o r i g in a l a r t i e l e o n P a P e 1 9 )
Id e n t i f ie a t io n o f G a s tr o d£a e乙Q t a a n d l t s P s e u d o M a t e r ia l s by N M R SP e e t r u m
Q i n H a i l jn
,
Z h a o T i a n z e n g
,
(H e n a n I n s t i t 公t e o f C h e m is t r y , Z h e n g z h o u , 4 5 0 0 0 3 )
D u H e n g q in g
,
Z h a o X i
,
Z h a n g T
,
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(H e n a n A e a d e m y o f T r a d i t io na l C h i ne s e M e d i e i ne
,
Z h e n g z h o u )
T h e a le o h o l e x t r a e t s o f e i g h t s a m P l e o f G a s t r o d i a e乙a t a a n d f o u r s P e e记5 o f e o m m o n P s e du o G a s t r o d ia
e la t a w h i e h e o m e f r o m d if f e r e n t p l a e e s
,
h a v e b e e n d e t e r m i n e d b y m e a朋 o f I H N M R s p e e t r u m , a ] 1 o f
t h e s e G a s t r o d i a e Za才a e a n s h o w t h e e h a r a e t e ir s ti e r e so n a n e e P e a k s o f g a s t r o d i n , b u t t h e p s e u d o G a s t r o d ia
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, o n t h e o t h e r h a dn
,
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,
t t h e s e P e ak
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.
T il e s P e e t r a l f ig u r e a n d d
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o r d s G a s t r o d云a e Za t a : G a s t r o d in ; IH N M R
( o r i g i n a l a r t i e l e o n P a Pe 2 3 )
E f f e e t s o f Di f f e r e n t W i
n e o n P r o e e s s i n g o f R a川 x S e u t e lla r i a e
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,
D a i L u a n e h u n
(N a n ji n g C o ll e g e o f T C M
,
N a n ji n g
,
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B ia n C h o n g a n
( A n A f f i l全a t e d P h a r m a e e u t i e a l F a e t o r y , N a n ji n g U n i v e r s i t y , N a n ji n g , 2 1 0 0 0 8 )
T h e e o n t e n t o
o f b a i e a l in a 力 d b a ic a la i n i n t h e R a d ix S e u t e l la r i a e p r o e e s s e d b y d i f f e r e n t w i n e w e r e
d e t e r m in e d b y r e v e r s e d H P L C i n o r d e r t o i n v e s t i g a t巴 t h e q u a li t y o f t h e P r o e e s s e d s a m P l e s . T h e r e s u l t s
in d i e a t e d t h a t t h e t w o m a i n e o m P o n e n t s i n th e P r o e e s s e d s a m P l e s w e r e r e l a t e d i n q u a nt it y t o k i n d s o f
w i n e u s e d in P r o e e s s i n g
.
T h e e
o n t e n t i n s a l n P l e s w a s h i g h e r f o r t h e P r o e e s s i n g w ih t s p i f i t s o f w in e t h月 n
w i t h y e l l o w r i e e w i n e
.
Ke y W o r d s B a i e a li n ; B a i e a l a i n : P r o e e s s e d R a d i x S e u t e l a r i
a e ; W i n e ; H p L C
( o r i g i
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S t u d ie s o n t h e C h e m ie a l C o n s t计u e n t s o f P e 乙f o 伶 i ;乙 s e ` 乙r a
Z h u G u i d a n
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T h r e e e r y s t a l l ln e e o n s t it u e n t s w e r e i s o la t e d f r o m P e乙不乞o n云n s e a乙r a . 0 几 t h e b a s is o f s P e e t r a l a n a l y s i s
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e h e m ie a l i d e n ti f i e a t i o n
,
t h e i r s t r 一e t u r e s w e r e id e成 i f i e d a s K N 0 s , eho l e s t e r i n a耐 d a u e o t e r o l .
中药材第 17 卷第 6 期 1 9 9 4 年 6 月 气 5 5 气