全 文 ：文章编号:　1672-6146(2004)01-0043-02
大岩桐的组培快繁技术研究
王树耀1 ,黄白红2
(1.湖南文理学院 生命科学系 ,湖南 常德 , 415000;
2.常德职业技术学院 生物系 ,湖南 常德 , 415000)
摘　要:　用大岩桐的叶柄为材料 , 接种于MS 附加不同激素
组合的培养基上 ,成功地经愈伤组织至不定芽途径形成大量
再生植株并移栽成活.实验表明 , MS +6 -BA2.0 mg/ L+
NAA0.2 mg/ L对诱导叶柄形成苗较好 ,MS+NAA 0.2 mg/ L对
诱导生根较好.
关键词:　大岩桐;叶柄;组培快繁
中图分类号:Q 945　　文献标识码:A
大岩桐(Sinningia hybrid Hort)原产南美巴西 ,又
名新宁治花 、落雪泥 ,属苦苣苔科苦苣苔属多年生草
本植物 ,是著名的观赏花卉之一.花大 ,阔钟形 ,花瓣
有丝绒质感 ,杂交新品种较多 ,色彩丰富 ,有深墨红 、
瑰红 、蓝色 、紫色 、各色镶边等[ 1] .大岩桐在我国需温
室人工授粉采种 ,采种量少 ,成本高 ,而插叶又难成
活 ,因此利用组培快繁有较大的实用价值.近年来 ,
对大岩桐的试管快繁有相关文献报道[ 2 ,3] ,在其研究
基础上 ,本文系统研究了大岩桐的组培快繁.
1　材料和方法
1.1　取材 、消毒
供试材料采自常德市高新科技园 ,移到温室盆
栽养护 2个月 ,取生长健壮的叶柄为外植体;70%酒
精浸泡30 s ,再以 0.1%升汞消毒 10 min ,无菌水冲
洗3遍后 ,无菌滤纸吸干 ,用灭菌过的刀片切成长
0.5 cm的小段 ,置于培养基上培养.
1.2　培养基和培养条件
基本培养基为MS ,芽诱导培养基有:
M0:MS+BA0+NAA0
M1:MS+BA1.0+NAA0.2
收稿日期:2003-10-31
第一作者:王树耀(1963-), 男 , 讲师 , 研究方向为植物组织培
养.
　　M2:MS+BA1.5+NAA0.2
　　M3:MS+BA2.0+NAA0.2
M4:MS+BA2.5+NAA0.2
M5:MS+BA3.0+NAA0.2
M6:MS+BA4.0+NAA0.2.
生根培养基有:
M7:MS+NAA0.1;
M8:MS+NAA0.2;
M9:MS+BA1.0+NAA0.2.
蔗糖浓度为 3%,琼脂 0.8%, PH5.8 ,全部培养
过程在 25 ～ 28 ℃,80 W/m2 日光灯 ,12 ～ 14 h/d光照
条件下进行.
2　结果和讨论
2.1　不同激素组合对芽分化的影响
将叶柄外植体分别接种在不同激素组合的 MS
培养基上 ,观察外源激素对愈伤组织诱导 、生长及芽
分化的影响(见表 1).
外植体在不含外源激素的 M0上无愈伤组织形
成 ,也没有芽的分化.在 M1、M2、M3、M4 、M5 、M6 上均
有愈伤组织产生 ,在 BA浓度大于 2.0 mg/L 时 ,外植
体愈伤诱导率均为 95%以上 ,而且在 BA1.0 ～ 4.0
mg/L的 MS培养基上 ,愈伤组织生长速度与 6-BA
浓度成正比.芽诱导率随 6-BA的浓度增大而增高 ,
在6-BA2.0mg/L达到高峰 ,随后芽分化减少.从愈
伤组织诱导率 、芽分化率两项指标结合来看 ,M3 是
愈伤组织诱导和芽分化的最适培养基.在 M3 上 ,叶
柄外植体 1周后明显增厚变绿 ,且叶柄愈伤组织化 ,
切口部位慢慢出现淡黄绿色愈伤组织 , 3周后愈伤
组织大量生长 ,且开始出现芽分化现象 ,芽开始伸长
生长 ,在继代培养过程中 ,有愈伤组织继续分化出大
量丛生芽 ,也有芽又愈伤组织化.
第 16 卷第 1 期 湖 南 文 理 学 院 学 报(自 然 科 学 版) Vol.16 No.1
2004 年 3月 Journal of Hunan University of Arts and Science(Natural Science Edition) Mar.2004
表 1　不同激素组合对芽分化的影响(培养 3 个月)
Tab.1　Effects of different 6-BA/NAA concentration on induction and differentiation of shoot
培养基 激素浓度/ mg·L-1 接种外植体 愈伤组织块数 平均愈伤分化率/(个/块)
M0 BA0+NAA0 30 0 0
M1 BA1.0+NAA0.2 30 5 1.7
M2 BA1.5+NAA0.2 34 24 4
M3 BA2.0+NAA0.2 35 35 7
M4 BA2.5+NAA0.2 31 30 3
M5 BA3.0+NAA0.2 30 38 3
M6 BA4.0+NAA0.2 30 38 2
2.2　芽继代培养和增殖
将带有丛生芽的愈伤组织块转入含有6-BA1.0
mg/L+NAA0.5 mg/L 的 MS 培养基上增殖培养 ,愈
伤组织基本不再生长 ,原有丛生芽长大 ,在丛生芽基
部又产生大丛生芽 ,在增殖培养过程中 ,继代周期和
继代次数对试管苗增殖的速度和试管苗的质量均有
影响 ,继代周期太短时生长减慢 ,继代周期太长 ,多
出现褐化现象 ,而且继代次数超过 5代时 ,玻璃化[ 4]
无效苗明显增多.
2.3　根的诱导
将2 ～ 3 cm 高的分化芽切下 ,转接到 3种不同
的生根培养基上 ,3 周后小苗基部切口处产生不定
根.3种生根培养基中 ,MS8生根效果最好 ,生根率达
100%(见表 2).
表 2　不同激素及配比诱导生根结果比较
Tab.2　Comparison of induced root production under different 6-BA/ NAA
培养基 激素成分/mg·L-1 接种茎芽体 生根株数 生根率/ %
M7 0.1 NAA 30 20 67
M8 0.2 NAA 30 30 100
M9 1.0 LBA+0.2 NAA 30 2 6.9
2.4　移栽
选择根系发达 ,不定根粗短 ,茎叶健壮 ,没有玻
璃化现象的小苗炼苗 ,打开瓶盖 ,并加少量水 ,5 d后
即可移栽.将带根的试管苗用水冲干净 ,并移栽到蛭
石中加塑料袋保湿 ,15 d后成活率达87.1%.定植于
腐殖土中并移入温室栽培 ,大约 2 ～ 3个月后可以开
花 ,最终成活率达 85%.
综上所述 ,MS+6-BA2.0+NAA0.2对诱导大岩
桐叶柄外植体的愈伤组织形成和芽丛分化效果最好.
MS+NAA0.2生根率最高达100%,试管苗移栽后最终
成活率达 85%,以叶柄外植体启动培养和每月一次的
继代培养 ,可大规模连续增殖芽丛 ,每代增殖倍数达
25倍 ,按每年进行 10 ～ 12代计算 ,增殖倍数可达 2510
～ 2512 ,从而实现大岩桐的快速繁殖和批量生产.
参　考　文　献
[ 1] 　孙可群 ,张应麟 , 龙雅宜 ,等.花卉及观赏树木栽培手册
[ M] .北京:中国林业出版社 , 1985:500-501.
[ 2] 　祝清俊 ,周钟信 , 张宗江 ,等.大岩桐组织培养和快速繁
殖[ J] .莱阳农学院学报 , 1995 , 12(1):47-49.
[ 3] 　刘本叶 ,张艳萍 , 张喜春 ,等.大岩桐叶片培养再生植株
的研究[ J] .生物技术 , 1995 , 5(2):22-24.
[ 4] 　卜学贤 ,陈维伦.试管植物的玻璃化现象[ J] .植物生理
学通讯 , 1987 , 23(5):13-18.
THE RAPID MULTIPLICATION OF SINNI-
NGIA HYBRID HORT BY TISSUE CULTURE
WANG SHu-yao1 , HUANG Bai-hong2
(1.Department of Life Science ,Hunan University
of Arts and Science , Changde ,Hunan , 415000;
2.Department of Biology , Changde Vocational Technical
College , Changde ,Hunan , 415000)
　　Abstract:By the leaf stalks of Sinningia hybrid Hort as the ex-
plant , the rapid multiplication by tissue culture ,MS+6-BA2.0mg/
L+NAA0.2mg/ L was more available for inducing formation of the
shoots from the leaf stalks ,MS+NAA0.2mg/L was more available
for inducing formation of the roots.
　　Key words:Sinningia hybrid Hort ;leaf stalk;rapid propagation
in;vitro
(责任编校:江　河)　　
44　 湖南文理学院学报(自然科学版) 2004年