全 文 ：· 888· Ch ina Pharmacy 2007 Vo l.18 No.12 中国药房 2007年第 18卷第 12期
Δ四川省卫生厅科研项目(050267)
*副主任中药师。研究方向:中药药理及药品质量控制。电话:
0816-2281067
灰绿黄堇生物总碱抗炎镇痛作用的研究 Δ
张 莉 *,张 芳 ,王继生 ,胡尚久 ,刘太圣(四川省绵阳市第三人民医院 ,绵阳市 621000)
中图分类号 R285.5 文献标识码 A 文章编号 1001-0408(2007)12-0888-02
摘 要 目的:研究灰绿黄堇生物总碱的药理活性及毒性 ,为进一步开发新药提供药理学依据 。方法:对实验鼠分别以二甲苯 、琼脂
致肿 , 观察灰绿黄堇的抗炎作用;采用扭体法观察灰绿黄堇的镇痛作用;用改良寇氏法计算半数致死量(LD 50)及 95%可信限 。结
果:灰绿黄堇生物总碱制剂小鼠灌胃给药能抑制二甲苯所致耳肿胀和琼脂所致足肿胀 , 并能抑制酯酸所致小鼠扭体反应 。其 LD 50
为 1.833g ·kg -1 ,95 %可信限为 1.18 ～ 2.06g ·kg -1 。结论:灰绿黄堇总生物碱具有抗炎和镇痛作用 。
关键词 灰绿黄堇总生物碱;抗炎;镇痛;半数致死量;95%可信限
Study on Anti-inflammatory and Analgesic Effects of Alkaloids of Corydalis Adunca Maxim
ZHANG Li , ZHANG Fang ,WANG Jisheng , HU S hang jiu , LIU Taisheng(The Third Hospital of M ian_
yang , M ianyang 621000 ,China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To study the pharmacological ac tivities and tox icity of the crude alkalo ids o f Corydalis adunca
max im and to prov ide pharmaco logical data fo r fur ther deve lopment o f t his herbal m edicine.M ETHODS:The anti-inflam-
matory effects of the crude alkaloids of Corydalis adunca m axim w ere observed by using xylol and agra to induce the turgidness
in the rats.The analgesic effects were observed by body disto rtion methods.The LD 50 and 95% creditability were ca lcula ted
wit h developed Karber Method.RESULTS:T he administ ration of alkaloids o f Corydalis adunca m axim had the func tion o f
inhibiting the auricle sw elling caused by xylol and joint sw elling caused by agar , and of decreasing the body -distor tion of the
ra ts.T he LD50 o f the crude alkaloids o f Corydalis adunca max im w as 1.833g.kg -1 and the 95% credit ability w as 1.18 ～
2.06g ·kg -1.CONCLUSIONS :The crude alkaloids of Corydalis adunca m ax im has anti-inflamm ato ry and analgesic ef fects in
ra ts.
KEY WORDS Alkaloids o f Corydalis adunca max im;Anti-inflamm ation;Analgesia;LD 50;95%creditability
灰绿黄堇又名蛇含七 , 在藏药中又称为巴牛丝哇 , 为罂粟
科植物灰绿黄堇 Corydalis adunca maxim 的干燥块根 , 主要
分布于内蒙古 、宁夏 、甘肃 、陕西 、青海 、四川 、西藏 , 生于海
拔 1 000 ～ 3 900m的干旱山地 、河滩或石缝中 ,资源丰富 [1 ] ,具
有较好的消炎 、利胆 、排石 、止痛作用 [ 2 ]。王继生等 [ 3 ]对灰绿黄
堇的水提物进行了镇痛 、抗炎作用的研究 , 发现其具有明显的
镇痛 、抗炎作用 。笔者对灰绿黄堇水提物镇痛抗炎的有效部位
进行筛选 , 发现其有效部位为灰绿黄堇总生物碱 (T he crude
alkaloids o f Corydalis adunca max im ,ACAM)。本文采用不同
的镇痛抗炎模型 , 对 ACAM 的药效学及急性毒性等进行了研
究 。
1 材料
1.1 仪器
UV -2401紫外分光光度计(日本岛津公司);MP1002电
子天平(上海精密仪器仪表有限公司)。
1.2 试药
灰绿黄堇购于成都五块石药材市场 ,经绵阳市食品药品检
验所聂盛贤主任中药师鉴定为灰绿黄堇的干燥块根 。将药材粉
碎后用甲醇提取 ,经生物碱处理 ,得到灰绿黄堇生物总碱 ,并制
备成棕褐色粉末制剂 , 每 1g 相当于生药 200g , 临用时以蒸馏
水配成所需浓度 ,并以吐温-80助溶 ,药液 pH 值为 5 ～ 6。
1.3 动物
昆明种小白鼠 , (20±2)g ,清洁级;SD 大鼠 , (200±10)g ,
清洁级 , 均由第三军医大学大坪医院实验动物中心提供 (动物
合格证号:SCXK(渝)2001003)。
2 方法
2.1 ACAM的抗炎作用
2.1.1 对二甲苯及琼脂所致肿胀的影响:小鼠 60只 , 随机分
为 6组:ACAM 低 、中 、高剂量组 (药量分别为 0.1 、 0.2 、
0.4g ·kg -1)和阿司匹林组(0.2g ·kg -1)、溶剂对照组(1mL
蒸馏水加 0.05mL 吐温-80 ,下同)、生理盐水组 。每组 10只 ,
均每日同体积灌胃 1次 ,连续 5d 。末次给药 1h后 ,于小鼠右耳
廓滴二甲苯 0.02mL ·只 -1致肿 , 15 min后 ,小鼠脱颈椎处死 ,
以直径 8mm 的打孔器取双耳对称的耳片 ,电子天平称重 ,以左
右耳片重量差作为肿胀程度的指标 。末次给药 2h 后 ,于小鼠右
后足腱膜下注射 2%琼脂 0.03mL ·只 -1致肿 , 4h后于踝关节
上 0.5mm 处剪下后足称重 , 以左右后足重量差异为衡量肿胀
度的指标 。
2.1.2 对海绵肉芽肿的影响:取 SD大鼠 50只 ,乙醚麻醉后 ,
切开腹部皮肤 , 将已称重的医用无菌海绵 , 植大鼠两侧腹股沟
皮下。次日 ,随机分为 5组 ,每组 10只 ,分别为 ACAM 低 、中 、
高剂量组和阿司匹林组及生理盐水组 , 各组用药剂量同
“2.1.1”项 。各组灌胃受试药液 , 连续 7d , 第 8天将大鼠处死 ,
中国药房 2007年第 18卷第 12期 China Pharm acy 2007 Vol.18 N o.12 · 889·
表 2 ACAM对大鼠海绵肉芽肿的影响(x ±s , n=10)
Tab 2 Effect of alkaloids of Corydalis adunca maxim on
sponge granulomatous of rats(x ±s , n=10)
组别 剂量/ g· kg -1 海绵肉芽肿/mg生理盐水组 - 180.32±18.20
ACAM低剂量组 0.1 163.48±28.20*
ACAM中剂量组 0.2 147.35±22.74**
ACAM高剂量组 0.4 152.38±18.59**
阿司匹林组 0.2 161.18±29.28**
与生理盐水组比较:*P<0.05 , **P<0.01
vs.no rmal saline group:*P<0.05 , **P<0.01
表 3 ACAM对小鼠扭体反应的影响(x ±s , n=10)
Tab 3 Effect of alkaloids of Corydalis adunca maxim on
the body-distortion of rats(x ±s , n=10)
组别 剂量/ g· kg -1 扭体次数/次
生理盐水组 - 47.3±8.4
溶剂对照组 - 45.2±5.3
ACAM低剂量组 0.1 30.8±9.7*
ACAM中剂量组 0.2 23.4±6.3*
ACAM高剂量组 0.4 20.6±3.2**阿司匹林组 0.2 29.2±5.3
与生理盐水组比较:*P<0.05, **P<0.01
vs.normal saline group:*P<0.05, **P<0.01
剥离并取出医用无菌海绵 , 于 60 ～ 90℃烘箱干燥 1h后称重 ,
减去原医用无菌海绵重量 , 即为肉芽肿净重 。比较各组肉芽肿
重量 ,并计算抑制率 。
2.2 ACAM的镇痛作用———小鼠扭体反应
小鼠 60只 , 随机分为 6组:ACAM 低 、中 、高剂量组和阿
司匹林组 、溶剂对照组 、生理盐水组 。每天同体积灌胃给药 1
次 , 给药剂量同前 , 连续 5d。末次给药 30min后 , 腹腔注射
0.6%冰醋酸 0.2 mL ·只 -1 ,观察 10min内出现的扭体次数 。
2.3 ACAM急性毒性实验
取小鼠 50只 , ♂♀各半 , 随机分为 5个剂量组 , 每组 10
只 ,各组用药剂量分别为 0.5 、1.0 、2.0 、4.0 、8.0g ·kg -1。实验
前禁食不禁水 , 观察 7d , 并记录实验数据 。另取小鼠 50只 , 随
机分为 5个溶剂对照组 , 用药剂量分别为 0.02 、 0.04 、 0.06 、
0.08 、0.10mL ·kg -1 ,观察 7d 。
2.4 统计学方法
实验数据用 SPSS10.0统计分析软件进行分析 , 根据方差
齐性与否分别采用参数检验和非参数检验 , 即齐性资料用单因
素方差分析(ANOVA),两两比较用 LSD 检验 , P <0.05为差
异显著 。
3 结果
3.1 ACAM抗炎作用
3.1.1 对二甲苯及琼脂所致肿胀的影响:ACAM 中剂量组能
明显抑制二甲苯所致耳肿胀 , 与生理盐水组比较有显著性差异
(P <0.05);ACAM 中 、高剂量组能明显抑制琼脂所致小鼠足
肿胀 , 与生理盐水对照组比较有显著性差异(P <0.01), 结果
详见表 1。
表 1 ACAM对小鼠耳肿胀、足肿胀的影响(x ±s , n=10)
Tab 1 Effects of alkaloids of Corydalis adunca maxim on
auricle and joint swelling of rats(x ±s , n=10)
组别 剂量/ g· kg -1 两耳重量之差/mg 两足重量之差/mg
生理盐水组 - 20.2±10.5 95.3±26.9
ACAM低剂量组 0.1 17.3±8.6 89.6±15.8
ACAM中剂量组 0.2 12.6±8.1* 62.3±28.08*
ACAM高剂量组 0.4 6.5±3.2** 58.6±22.5**
阿司匹林组 0.2 8.3±4.6* 76.4±22.8*
与生理盐水组比较:*P<0.05 , **P<0.01
vs.norm al saline g roup:*P<0.05 , * *P<0.01
3.1.2 对海绵肉芽肿的影响:ACAM 中剂量组能显著抑制大
鼠海绵肉芽肿 , 与生理盐水组比较有显著性差异 (P <0.05),
结果详见表 2。
3.2 ACAM的镇痛作用
溶剂对照组与生理盐水组比较无显著性差异 , 说明溶剂对
其无影响;ACAM 低 、中剂量组能显著减少小鼠扭体反应的次
数 ,与生理盐水组比较有显著性差异(P<0.05);ACAM 高剂
量组能显著减少小鼠扭体反应的次数 , 与生理盐水组比较有显
著性差异(P<0.01),结果详见表 3。
3.3 ACAM急性毒性研究
用寇氏法计算得出 ACAM 半数致死量 (Lethal dose ,
LD 50)为 1.833g ·kg -1 , 相当于原生药 228.7g ·kg -1;95%可
信限为 1.18 ～ 2.06g ·kg -1 。5个溶剂对照组观察 7d后 , 结果
无动物死亡 ,说明溶剂对动物并无影响 。
4 讨论
药效学研究结果表明 , ACAM 具有抗炎作用 , 能抑制二甲
苯所致小鼠耳肿胀 、琼脂所致小鼠足肿胀 , 并能抑制大鼠海绵
肉芽肿;同时具有镇痛作用 , 能减少冰醋酸所致小鼠扭体反应
的次数和增加痛阈值 。
灰绿黄堇的水提物具有明显的镇痛 、抗炎作用 [3 ] , 经过药
理筛选 ,发现 ACAM 是灰绿黄堇镇痛 、抗炎的有效部位 。本植
物中主要化学成分为生物碱 , 从灰绿黄堇中已经分离出原阿片
碱、二氢血根碱 、四氢非洲防己胺、1 ,2 ,3 , 4-四氢-7-甲氢基-
1-[ 4-甲氧基苯基] 甲基-8-异喹啉醇 、6-丙酮基-5 , 6-
二氢血根碱 5种生物碱 [4 ] , 可能是其镇痛抗炎的主要成分 , 值
得进一步研究 。
参考文献
[ 1] 张 莉 , 刘 玮 .灰绿黄堇的鉴别 [ J] .基层中药杂志 ,
2002 , 16(4):39.
[ 2] 杨永昌.藏药志[ M ] .西宁:青海人民出版社 , 1991:358.
[ 3] 王继生 ,张 莉 ,邱宗荫 ,等.灰绿黄堇镇痛抗炎作用的
实验研究[ J] .中药药理与临床 , 2005 , 21(5):33.
[ 4] 唐艳丽 , 杨爱梅 , 张樱山 ,等 .灰绿黄堇生物碱化学成分
的研究[ J] .中国中药杂志 , 2005 ,30(16):195.
(收稿日期:2006-09-12 修回日期:2006-11-25)
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