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糖种类和浓度及pH值对长白山笃斯越桔组培苗增殖和生根的影响



全 文 :第34卷 第1期
2012年3月        
延 边 大 学 农 学 学 报
Journal of Agricultural Science Yanbian University     
Vol.34No.1
 Mar.2012
收稿日期:2011-12-30
作者简介:宗长玲(1983—),女,吉林榆树人,延边大学农学院,在读硕士。宗成文为通讯作者,
     Tel:0433-2435572,E-mail:zongchengwen@yahoo.com.cn
糖种类和浓度及pH值对长白山笃斯越桔组培苗增殖和生根的影响
宗长玲, 宗成文*, 赵巍巍, 金炳奎, 曹后男
(延边大学农学院,吉林 延吉133002)
摘要:以长白山笃斯越桔组培苗为试材,研究糖及pH值对笃斯越桔组培苗继代增殖及生根的影响,结果表
明,30g/L的蔗糖浓度适宜于继代和生根,继代培养30d后的增殖倍数可达5.7倍,生根培养50d后的生根
率可达80%;pH值4.2的培养基适宜笃斯越桔继代增殖及生根,继代培养30d后的增殖倍数可达5.9倍,生
根培养50d后的生根率可达80%。
关键词:糖;pH值;笃斯越桔;增殖;生根
中图分类号:S663   文献标识码:A   文章编号:1004-7999(2012)01-0055-05
笃斯越桔(Vaccinium uliginosumLinn.)又称笃斯、黑豆树(大兴安岭)、甸果、地果(吉林、临江)、龙果、
蛤塘果(吉林)、讷日苏(蒙古族语)、鄂温克(jigda),是杜鹃花科落叶小灌木,浆果酸甜适口,可生食,也是制
果酒、果醋、果酱、速冻果及提取天然食用色素的良好原料。笃斯越桔是野生观赏植物和珍稀濒危药用植
物[1~4],其中的黄酮类化合物、花色素类物质[5]、花青素[6,7]和槲皮素[8]等,具有很强的抗氧化活性[5,7],且对
视网膜有特异性功效[9]。由于乱摘乱挖,野生资源遭到极大破坏,并且因有性繁殖发芽率低[10],无性繁殖扦
插时间要求严格[11,12],资源的开发和利用受到极大的限制。目前,组织培养技术已成功应用于笃斯越桔繁
殖[3],但糖种类、浓度及pH值对组培苗增殖和生根的影响尚未见报道。培养基组分中除培养基种类、激素
配比外,培养基中蔗糖浓度可以调节内源激素的水平和比例,从而影响器官的分化和生长[13];基质初始pH
值是植物组织和细胞培养的主要影响因子,直接影响培养物的生长、分化和物质积累。本文研究了糖及pH
值对长白山笃斯越桔组培苗增殖和生根的影响,拟为笃斯越桔的工厂化育苗提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
试验材料为本实验室保存的笃斯越桔组培苗。
1.2 方法
1.2.1 糖的种类及浓度对笃斯越桔组培苗继代增殖的影响
以改良 MS(Fe盐加倍)为基本培养基,附加玉米素(ZT)0.5mg/L,吲哚丁酸(IBA)0.2mg/L,白糖、蔗
糖和葡萄糖分别为20,30和40g/L,琼脂8.3g/L,pH值为5.2。将继代培养试管苗剪成1~2cm,每个处
理培养基接种5瓶,每瓶接种4丛,每丛接种3株,每个处理重复3次。接种30d后,统计增殖倍数(增殖倍
数=增殖芽数/接种芽数,下同),观察苗的生长状况。
培养条件:培养温度(25±2)℃,光照强度1 500~2 000lx,光照时间14h/d(下同)。
1.2.2 不同蔗糖浓度对笃斯越桔组培苗生根的影响
以1/4改良 MS(Fe盐加倍)为基本培养基,附加IBA 0.1mg/L,蔗糖20,30,40g/L,琼脂8.3g/L,pH
值为5.2。每个处理培养基接种5瓶,每瓶接种4丛,每丛接种3株,每个处理重复3次。接种50d后观察
苗的生根情况,接种60d后统计生根率。
延 边 大 学 农 学 学 报 第34卷 
1.2.3 不同pH值对笃斯越桔组培苗继代增值的影响
以改良 MS(Fe盐加倍)为基本培养基,附加ZT 0.5mg/L,IBA 0.2mg/L,蔗糖30g/L,琼脂8.3g/L。
pH值分别为3.2、3.7、4.2、4.7、5.2、5.7、6.2。每个处理培养基接种5瓶,每瓶接种4丛,每丛接种3株,每
个处理重复3次。接种30d后,观察苗的生长状况,统计增殖倍数。
1.2.4 不同pH值对笃斯越桔组培苗生根的影响
以1/4改良 MS(Fe盐加倍)为基本培养基,附加IBA 0.1mg/L,蔗糖30g/L,琼脂8.3g/L。pH值分
别为3.2、3.7、4.2、4.7、5.2、5.7、6.2。每个处理培养基接种5瓶,每瓶接种4丛,每丛接种3株,每个处理
重复3次。接种50d后,观察生根情况,统计生根率。
1.2.5 统计方法
利用SPSS for Windows 11.5对平均值之间的显著性差异进行了邓肯(Dancan)检验分析。
2 结果与分析
2.1 糖种类及浓度对笃斯越桔组培苗继代增殖的影响
由表1可知,培养基中添加30g/L蔗糖效果最好,组培苗增殖倍数为5.7倍;其次为添加30g/L白糖,
与其余糖浓度有显著差异。同时还可以看出,培养基中糖的含量和组培苗的生长及增殖并不呈正相关。由
图1也可知,添加30g/L蔗糖后苗呈现浓绿,长势良好。
表1 糖种类及浓度对笃斯越桔增殖培养的影响
Table 1 Effect of sugars type and concentration on Vaccinium uliginosum multiplication culture
糖种类
Sugars type
糖浓度/(g/L)
Sugars concentration
增殖倍数
Multiplication coeficient
生长情况
Growth situation
蔗糖
葡萄糖
白糖
20
30
40
20
30
40
20
30
40
4.5c
5.7a
4.2d
4.6c
4.5c
4.4c
4.5c
4.9b
4.5c
长势较好,植株矮小,叶片绿色
长势好,植株健壮,叶片浓绿
长势差,植株矮小,叶片黄绿
长势较好,植株长高明显,叶片绿色
长势较好,叶片绿色,叶片面积较大
长势差,植株矮小,叶片黄绿
长势一般,植株长高不明显,叶片绿色
长势较好,叶片绿色,
长势差,植株矮小,叶片黄绿
图1 组培苗在添加30 g/L蔗糖培养基上的生长情况     图2 组培苗在添加30 g/L蔗糖培养基上的生根情况
Fig.1 The plantlet growth situation on the medium     Fig.2 The plantlet rooting condition on the medium 
  supplemented with 30 g/L sucrose             supplemented with 30 g/L sucrose
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 第1期 宗长玲,等:糖种类和浓度及pH值对长白山笃斯越桔组培苗增殖和生根的影响
2.2 蔗糖浓度对笃斯越桔组培苗生根的影响
由表2可知,蔗糖浓度对笃斯越桔生根培养有显著影响。当在培养基中添加20,30g/L蔗糖时,笃斯越
桔生根率随蔗糖浓度升高而增加,但根径无显著变化。当培养基中蔗糖添加量为40g/L时,生根率较低,仅
为30%,且根数较少,根较短,说明此时蔗糖浓度过高,已对笃斯越桔生根培养产生负面影响。因此,生根培
养适宜的蔗糖浓度为30g/L(图2)。浓度太高则会因导致诱导材料生长不良而产生抑制作用。
表2 蔗糖浓度对笃斯越桔生根培养的影响
Table 2 Effect of different sucrose concentration on rooting of Vaccinium uliginosum
蔗糖/(g/L)
Sucrose
 生根率/%
Rooting rate
根的生长状况
Status of root growth
20
30
40
60b
80a
30c
生根较多
根系发达
生根少
2.3 pH值对笃斯越桔增殖培养的影响
笃斯越桔组培苗在不同pH值条件处理下,表现不同生长状态(表3)。由表3可知,笃斯越桔组培苗的
最佳生长pH值为4.2,生长状态良好,苗粗壮,新芽长势较快(图3),与其它pH值条件下的增殖系数存在
显著差异,随pH值的升高,叶片出现部分黄化现象,苗细弱,且新芽生长有缓慢的趋势。
表3 不同pH值对笃斯越桔增殖培养的影响
Table 3 Effects of different pH on Vaccinium uliginosum multiplication culture
pH值
pH value
增殖倍数
Multiplication coefficient
生长状况
Growth conditions
3.2
3.7
4.2
4.7
5.2
5.7
6.2
5.4c
5.6b
5.9a
5.7b
5.2d
4.8e
3.8f
苗粗壮,新芽长势较慢
苗粗壮,新芽长势快
苗粗壮,新芽长势较快
苗细弱,新芽长势慢
苗细弱,新芽长势缓慢
苗细弱,新芽长势慢
苗细弱,新芽长势慢
图3 组培苗在pH值4.2的环境下培养的生长情况
Fig.3 The plantlet growth condition on the medium of pH4.2
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延 边 大 学 农 学 学 报 第34卷 
2.4 pH值对笃斯越桔组培苗生根的影响
由表4可知,不同pH值对笃斯越桔苗的出根和根的伸长有一定的影响,但没有表现出一致的规律。组
培苗在pH值为4.2的培养基培养45d后最先生出小根,且生根率最高,显著高于其余pH值条件。
表4 不同pH值对笃斯越桔组培苗生根的影响
Table 4 Effect of different pH value on rooting culture of Vaccinium uliginosum
pH值
pH value
生根率/%
Rooting rate
根的生长状况
Status of root growth
3.2
3.7
4.2
4.7
5.2
5.7
6.2
20d
64b
80a
76b
74b
63b
40c
根数少
根数少
根系发达
根数较多
根数较多
根数少,叶片黄
根数少
3 讨论与结论
据罗天宽等报道[14],一定程度范围内的糖浓度对生姜芽增值都有明显的促进作用,但浓度太高对继代
和生根都有抑制作用。有关糖类对组培苗的作用机理也有不少学者作出了解释,如孙书伟推测[15],低浓度
蔗糖培养基可能不足以提供香花槐生根所需要的能量,因此发根晚,根生长缓慢。本课题经过对笃斯越桔的
研究也发现了这一点,适量的蔗糖促进植株的生长,过高或过低的蔗糖浓度会导致植株生长不健壮,叶片发
黄,生根少且根系不发达。
长白山笃斯越桔生长在泥碳藓沼泽草甸中,与苔草、落叶松、油桦、细叶杜香、越桔、蔓越桔等植物种混
生,土壤pH值为4.7~5.1[4]。据顾地周等报道[16],笃斯越桔组培苗适宜pH值为5.5,唐晓杰等[17]报道,
北土越桔组培苗适宜pH值为5.2,而林宝山和杜凤国报道[18],越桔组培苗适宜pH值为4.8。本文通过实
验确定笃斯越桔组培苗适宜pH值为4.2,此时繁殖系数明显上升,而pH值过高或过低使笃斯越桔组培苗
叶片发黄。
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Effect of sugar types,concentration and pH value on multiplication and
rooting of Vaccinium uliginosumin vitro
ZONG Chang-ling, ZONG Cheng-wen*, ZHAO Wei-wei, JIN Bing-kui, CAO Hou-nan
(Agricultural College of Yanbian University,Yanji Jilin 133002,China)
Abstract:In vitro shoots of Vaccinium uliginosum were used as experimental material to study effect of
sugar types,concentrations and pH value on proliferation and rooting of Vaccinium uliginosumin vitro.
The results showed that 30g/L sucrose concentration are suited for Vaccinium uliginosumsubculture mul-
tiplication and the root,the propagation coefficient reached 5.3times and rooting rate of over 80%;pH
4.2is the most suitable for Vaccinium uliginosumsubculture multiplication and the root,the propagation
coefficient reached 5.9times and rooting rate of over 80%.
Key words:sugar;pH value;Vaccinium uliginosum;multiplication;rooting
檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭檭
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Study on the land use dynamic changes by the RS and GIS of Yan-Long-Tu area
MAN Wei-dong, LI Chun-jing!
(Geography Department,Sciences College of Yanbian University,Yanji Jilin 133002,China)
Abstract:According to the TM images in 2000and 2009,and the spatial analysis methods of remote sens-
ing and GIS,the dynamic changes of land use in Yanji,Longjing and Tumen during the period from 2000
to 2009was researched.The results showed that the quantity of the agricultural lands changs is the most
signifiant and the water changes stands out in Yanji City,and the quantities of the agricultural lands and
green lands significant are most of al.The change of water stands out in Longjing and the agricultural land
changes standeol out in Tumen.During al kinds of land-use types,it is the only green lands that reduces.
The others increase from the green lands,and the agricultural lands increased the most of al.
Key words:Yan-Long-Tu area;the changes of land use;RS;GIS
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