全 文 ：·实验研究· 黄杞总黄酮活血化瘀作用研究1
钟正贤　周桂芬　陈学芬　袁阿兴
广西壮族自治区中医药研究所　530022　南宁市东葛路20-1号
摘要　目的:研究黄杞总黄酮(Total Flavone of Engelhardtia Roxburghiana TFER)的活血
化瘀作用 。方法:采用兔血浆复钙试验 、大鼠体外血小板聚集和体内血栓形成方法 、大鼠
急性“血瘀”证血液流变学指标 、高脂血症小鼠血脂含量和常压耐缺氧时间等 ,观察 TFER
的活血化瘀作用;用小鼠急性毒性试验 ,观察 TFER的毒性情况 。结果:TFER具有体外抗
凝 、抗血小板聚集和抗血栓形成作用;能降低血液粘度和血脂水平;延长耐缺氧时间。其
急性毒性的最大耐受量为 19.8g/kg.结论:TFER具有较明显的活血化瘀作用 ,可为临床
应用提供科学依据 。
关键词　黄杞总黄酮;活血化瘀;药理作用;毒性试验
Study on the Effects of Total Flavone of Engelhardtia Roxburghiana
on Promoting Blood Circulation to Remove Blood Stasis
Zhong Zhengxian , Zhou Guifen , Chen Xuefen , et al　Guangxi Reseach
Institute of Traditional Medical and Pharmaceutical Sciences　Nanning 530022
Abstract Purpose:To study the effects of the total flavone in Engelhardtia Roxburghiana (TFER)
on promoting blood circulation to remove blood stasis.Methods:The effects of TFER on promoting
blood circulation to remove blood stasis were observed through the test of calcium-restoration in rab-
bit plasma;platelet aggregation outside the rat body and thrombus formation inside the rat body;in-
dex of blood rheology in acute blood stasis syndrome in rat;the blood lipid content in hyperlipemia
mouse and hypoxia tolerance under the ordinary pressure.Besides , the toxicity of TFER was studied
through the acute toxicity test from the mouse.Results:TFER indicated the role of anti-coagulation
in vitro , anti-platelet aggregation and anti-thrombus formation.Furthermore , it could lower blood vis-
cosity and blood lipid level and prolong the duration for hyoxia tolerance.The maximum tolerance of
TFER for acute toxicity was 19.8g/kg.Conclusions:The total flavone in Engelhardtia Roburghiana
has significant clinical effects on promoting blood circulation to remove blood stasis.
Key Words 　TFER;promoting blood circulation to remove blood stasis;pharmacological action;
toxicity test
　　黄杞叶为胡桃科植物黄杞(Engelhardtia
roxburghiana wall)的干燥叶 ,分布于广东 、广西 、
云南等地 ,资源丰富。具有清热止痛之功效 ,
用于治疗感冒发热 、疝气腹痛〔1〕 。民间常作茶
饮 ,可预防高血压 ,并有降血脂作用 。国外报
道从该植物或同属植物中分离得到落新妇甙
和新黄杞甙等多种成分 ,具有抗癌作用〔2〕。袁
阿兴等从黄杞叶中分离得到黄杞总黄酮(Total
Flavone of Engelhardtia Roxburghiana TFER),其药
理作用国内尚未见报道。由于黄酮类化合物
具有强心 、降血压 、降血脂 、抗血栓等多种生理
活性 ,因此笔者以探讨黄杞总黄酮治疗冠心病
和动脉粥样硬化为目的 ,对其进行了活血化瘀
的中药药理研究 ,现将研究结果报
1广西壮族自治区卫生厅资助课题(9817) 道如下 。
钟正贤 ,周桂芬 ,陈学芬 ,袁阿兴:黄杞总黄酮活血化瘀作用研究 (总 207)·45 ·
1　实验材料
1.1　药物及试剂　黄杞总黄酮(TFER)由广西
壮族自治区中医药研究所植化室提供 ,实验时
用蒸馏水溶解稀释至所需浓度 。丹参注射液
(四川雅安制药厂 ,批号 970403),复方丹参片
(广州花城制药厂 ,批号 970512),心得安(上海
辛帕斯制药有限公司 , 批号 971001),安妥明
(扬州制药厂 ,批号 840327),二磷酸腺苷(ADP)
(中国科学院上海生物化学研究所 , 批号
920823),血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、
高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)测定试剂盒(均
为温州东瓯生物工程试剂厂产品)。
1.2　动物　新西兰种大白兔 ,由广西草业开发
中心提供 。SD大鼠 、NIH 种小鼠 ,雌雄兼用 ,均
由广西壮族自治区中医药研究所动物室提供 。
1.3　仪器　BS 631型血小板聚集仪(北京生化
仪器厂),MDK -3200 型双通道全自动血流变
测试分析仪(重庆市麦迪克科技开发有限公
司)。
2　方法与结果
2.1　对兔血浆复钙时间的影响〔3〕　取 2.3kg
大白兔 1只 ,从兔耳中央动脉取血 ,以 3.8%枸
橼酸钠抗凝 ,离心取上层血浆备用 。试验时取
0.1ml 血浆放入小试管内 , 空白对照组加入
0.1ml生理盐水 ,阳性对照丹参注射液组 ,TFER
大 、小剂量组分别加入0.1ml不同浓度的药液 ,
每组共做 10 管。置 37℃水浴温育 1min ,再加
入0.1ml 0.025mol/L 氯化钙 ,立即开动秒表记
时 ,再隔 10s缓缓侧动试管 1次 ,观察血浆凝固
情况 ,记录自加入Ca2+至纤维蛋白凝块形成所
需时间即为复钙时间 ,结果见表 1.空白对照组
与药物组比较 ,TFER大 、小剂量组和丹参注射
液组均能明显延长兔血浆复钙时间 ,表明TFER
具有体外抗凝作用。
2.2　对大鼠血小板聚集的影响〔4〕　取 200 ～
250g禁食大鼠 ,用戊巴比妥钠(35mg/kg)麻醉
后从腹主动脉取血(3.8%枸橼酸钠抗凝)。按
常规方法制备富血小板血浆(PRP)和贫血小板
血浆(PPP),以 PPP于血小板聚集仪上调100%幅
度 ,以PRP 调0%.准确吸取 300μlPRP ,对照组样
品管加 20μl 0.2mol/L磷酸缓冲液 ,药物组样品
管加 20μl 不同浓度的 TFER 或丹参注射液 。
37℃预温 3min 后 , 以 ADP 为诱导剂(剂量
2μmol/L),描记血小板聚集曲线 ,测量曲线下降
毫米数 ,比较药物组和空白对照组血小板聚集
抑制百分率 ,结果见表 2.与空白对照组比较 ,
TFER大 、小剂量组和丹参注射液组对 ADP 诱
导的大鼠血小板聚集均有明显的抑制作用。
表 1　TFER对兔血浆复钙时间的影响
组　别 样本数(管)
浓度
(mg.ml-1)
血浆复钙时间
(min , x ±s)
空 白 对 照 组 10 　0.66±0.04
丹参注射液组 10 3.60 　0.98±0.07③
TFER小剂量组 10 2.08 　0.94±0.07③
TFER大剂量组 10 4.16 　1.30±0.11③
　　注:与空白对照组比较:① P >0.05;② P <0.05;
③ P <0.01.下同
表 2　TFER对大鼠血小板聚集的影响
(n =10)
组　别 浓度(mg.ml-1)
血小板聚集曲线
幅度(mm , x ±s)
抑制百分率
(%)
空 白对 照 组 110.5±32.8
丹参注射液组 3.0 　34.5±16.6③ 68.7
TFER小剂量组 3.0 　47.0±15.1③ 57.5
TFER大剂量组 6.0 　32.2±12.3③ 70.8
2.3　对大鼠血栓形成的影响　取 200 ～ 250g
大鼠 32只 ,分为 4 组 ,每组 8只。TFER大 、小
剂量(0.5g/kg 和 0.25g/kg)组和复方丹参片
(0.66g/kg)组分别 i.g 给药 ,空白对照组给予等
体积蒸馏水 ,每天 1次 ,连续 10天 。末次给药
后 ,用戊巴比妥钠(35mg/kg)麻醉 ,按体内血栓
形成方法〔5〕进行 。切开颈部皮肤 ,分离颈外静
脉和颈总动脉 ,用肝素生理盐水充满聚乙烯套
管 ,自颈总动脉至颈外静脉联接形成体外旁路
循环 ,开放血流 15min后中断血流 ,迅速取出丝
线 ,置滤纸上吸去水份 ,称重 ,将总重量减去丝
· 46 ·(总 208) 广西中医药 1999年 8月第 22卷第 4期
线重量即得血栓湿重 ,结果见表 3.与空白对照
组比较 ,TFER大 、小剂量组及复方丹参片组均
能明显减轻大鼠血栓湿重 ,提示 TFER具有抗
大鼠血栓形成作用。
表 3　TFER对大鼠血栓形成的影响
(n =10)
组　　别 剂量(g.kg -1)
血栓湿重
(mg , x ± s)
抑制率
(%)
空 白 对 照 组 24.3±2.9
复方丹参片组 0.66 19.5±1.7③ 19.8
TFER小剂量组 0.25 21.6±1.8② 11.1
TFER大剂量组 0.50 20.1±1.7③ 17.3
2.4　对急性“血瘀”证大鼠血液流变学的影响〔3〕
　取 200 ～ 250g 大鼠 40 只 , 分为 5 组。TFER
大 、小剂量(0.5g/kg和 0.25g/kg)组和复方丹参
片(0.66g/kg)组 i.g给药 ,空白对照组和模型组
给予等体积水 ,每天 1次 ,连续 14天 。于第 14
天除空白对照组外 ,其余各组动物均皮下注射
0.1%肾上腺素 0.08ml/100g 体重 ,共 2次 ,每次
间隔 4h.在第 1 次注射后 2h 将大鼠置冰水中
浸泡 5min ,然后禁食 ,次日从腹主动脉取血 ,肝
素抗凝 ,于全自动血流变测试分析仪上测定大
鼠全血粘度 ,血浆粘度 ,红细胞压积和红细胞
电泳时间 ,结果见表 4.TFER大剂量组和复方
丹参片组能降低急性“血瘀”证大鼠的全血和血
浆粘度以及红细胞压积 ,缩短红细胞电泳时间 ,
具有一定的活血化瘀作用;但 TFER小剂量组作
用不够明显 ,各项指标仅比模型组略有降低。
表 4　TFER对“血瘀”证大鼠血液流变学的影响 (n =8 , x± s)
组　　别 剂量(g.kg-1)
全血粘度
　高切　　　　　　低切　 血浆粘度
红细胞电
泳时间(s) 　　 红细胞压积
空 白 对 照 组 6.20±0.63 18.54±2.23 1.71±0.21 23.26±2.36 0.48±0.04
模 型 组 8.36±0.92③ 21.59±1.94③ 1.90±0.13② 31.36±3.46③ 0.52±0.02②
复方丹参片组 0.66 6.97±0.81⑥ 19.64±0.81⑤ 1.76±0.06⑤ 26.57±2.54⑥ 0.48±0.03⑥
ERTF小剂量组 0.25 7.59±0.91④ 21.17±1.28 1.95±0.18 28.49±3.41④ 0.52±0.02
ERTF大剂量组 0.50 7.31±0.93⑤ 19.81±1.86④ 1.78±0.07⑤ 27.41±3.52⑤ 0.49±0.02⑥
　注:与模型组比较④ P >0.05;⑤P <0.05;⑥P <0.01.下同
2.5　对高脂血症小鼠血脂水平的影响　按单
爱莲等〔6〕介绍的方法 ,预先制备高脂乳剂:10%
胆固醇 , 2%去氧胆酸钠 , 1%甲基硫氧嘧啶 ,
20%猪油 ,吐温-80和丙二醇各 20ml助溶 ,加
水至 100ml装瓶备用。
取小鼠50只 ,分为 5组。TFER大 、小剂量
(0.5g/kg 和 0.25g/kg)和阳性对照药安妥明
(0.07g/kg)组 i.g 给药 ,空白对照组和模型组给
予等体积蒸馏水 ,每天 1次 ,连续用药 14 天。
每天上午给药后 ,下午除空白对照组外 ,其余
各组小鼠均给予高脂乳剂 0.5毫升/只 ,造成实
验性高脂血症。于第 14天用药后禁食过夜 ,次
日晨对小鼠摘眼球取血 ,按酶法检测血清总胆
固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固
醇(HDL-C)含量 ,结果见表 5.TFER可使高脂
血症小鼠 TC 和 TG 含量明显降低 , 特别是
TFER大剂量组与阳性药安妥明作用强度相近 ,
但对HDL-C 含量无明显影响 。提示 TFER具
有一定的降血脂作用。
2.6　对小鼠常压耐缺氧的影响〔4〕　取小鼠 40
只 ,分为 4 组 。TFER 大 、小剂量(0.5g/kg 和
0.25g/kg)组和阳性药心得安(0.02g/kg)组 i.g
给药 ,空白对照组给予等体积蒸馏水 ,每天 1
次 ,连续用药 7天 。末次给药 30min后 ,将小鼠
放入装有 5g钠石灰的 125ml广口瓶内 ,每瓶 1
只 ,加盖密封 ,观察并记录小鼠呼吸停止作为
缺氧死亡时间 ,结果见表 6.与对照组比较 ,
TFER大 、小剂量组和心得安组均能明显延长小
钟正贤 ,周桂芬 ,陈学芬 ,袁阿兴:黄杞总黄酮活血化瘀作用研究 (总 209)·47 ·
鼠常压耐缺氧时间。提示 TFER有提高小鼠因 缺氧引起心肌缺血的代偿能力 。
表 5　TFER对高脂血症小鼠血脂水平的影响 ( x± s)
　　组　别 剂量(g·kg-1)
动物数
(只)
TC
(mmol·L-1)
TG
(mmol·L-1)
HDL-C
(mmol·L-1)
空 白 对 照 组 10 　2.62±0.81 　1.25±0.59 　2.06±0.36
模 型 组 10 　8.95±2.19③ 　1.69±0.24② 　1.72±0.86
安 妥 明 组 0.07 10 　6.33±2.43⑤ 　0.79±0.56⑥ 　2.28±0.76④
TFER小剂量组 0.25 10 　6.97±1.49⑤ 　1.49±0.52④ 　1.68±0.86
TFER大剂量组 0.50 10 　6.09±2.36⑤ 　0.94±0.49⑥ 　1.72±0.96
表 6　ERTF 对小鼠常压耐缺氧的影响
组　　别 剂量(g·kg-1)
动物数
(只)
耐缺氧时间
(min , x ± s)
延长百分率
(%)
空 白 对 照 组 10 16.7±2.7
心 得 安 组 0.02 10 26.3±4.2③ 57.5
TFER小剂量组 0.25 10 21.1±3.8⑤ 26.3
TFER大剂量组 0.50 10 21.2±2.6③ 26.9
2.7　急性毒性试验　用 TFER给小鼠预试后 ,
选18 ～ 22g 小鼠 20只 ,雌雄各半 ,以最大浓度
(0.33g/ml)和最大体积(0.3ml/10g 体重)i.g 给
药 ,24h内给药 2次 ,观察 7 天 ,未见任何毒性
反应和动物死亡 ,表明 TFER毒性很小 ,计算其
最大耐受量为 19.8g/kg.
3　讨　论
冠心病和动脉粥样硬化均为常见病和多
发病 。脂质代谢紊乱所致的高脂血症 ,血粘度
增高 、血小板功能异常等引起的血液理化特性
异常与其发生有密切关系。活血化瘀药对治
疗冠心病 、血栓形成和动脉硬化等有较好的疗
效。因此 ,本文对 TFER设计了活血化瘀方面
的药理研究 ,试图寻找能防治动脉硬化 、冠心
病及脑血栓等的治疗药物。本实验结果表明 ,
TFER具有体外抗凝作用 ,抑制血小板聚集和血
栓形成 ,可改善急性“血瘀”证大鼠血液流变学
指标 ,降低高脂血症小鼠的血脂水平及延长常
压耐缺氧时小鼠生存时间 ,从而证实其具有较
好的活血化瘀作用 ,是一个值得开发利用的植
物药 。
参考文献
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人民出版社 , 1986.326.
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报 , 1986 , 21(3)∶141.
(1998-11 -27收稿/编辑　王健华)
· 48 ·(总 210) 广西中医药 1999年 8月第 22卷第 4期