全 文 ：文章编号:1004—5570(2004)04-0019-03
大岩桐叶柄诱导再生植株

王家远 ,罗荣芬 ,周大刚 ,田　蕾 ,张宇斌 ,龚　宁
(贵州师范大学 生物技术与工程学院 , 贵州 贵阳　550001)
摘要:用大岩桐叶柄作为外植体 , 分别对试管苗诱导 、增殖和生根条件进行了初步研究。结果表明:适宜诱导培
养基以MS+6-BA 2.0mg·L-1+NAA 0.2mg·L-1+3%蔗糖+0.7%琼脂最佳 , 35d 其诱导率为 1.324 ,增殖培养基
以MS+6-BA 2.0mg·L-1+NAA 0.1mg·L-1+3%蔗糖+0.7%琼脂为最好 , 30d 其增殖倍数可达 5.3 倍。生根培
养基以 1/2MS+NAA 0.6mg·L-1+3%蔗糖+0.7%琼脂为最好 , 生根率可达 89.7%。
关 键 词:大岩桐;叶柄;再生植株;NAA;6-BA
中图分类号:S722　　文献标识码:A
Abduction and plantet regeneration of leafstalk of Sinningia speciosa
WANG Jia-yuan ,LUO Rong-fen ,ZHOU Da-gang ,TIAN Lei ,
ZHANG Yu-bin ,GONG Ning
(School of Biological Technology and Enginering , Guizhou Normal University , Guiyang , Guizhou 550001 , China)
Abstract:The explant was leafstalk of Sinningia speciosa.The conditions of abduction , multiplication and
rooting were studied.The results show that the optimum medium for abduction is MS with 2.0mg·L-16-
BA ,0.2mg·L-1NAA ,3% sucrose and 0.7% agar ,which makes the abduction rate reach 1.324 times dur-
ing 35 days , The optimum medium for shoot buds multiplication is MS with 2.0mg·L-16-BA ,0.1mg·L-1
NAA ,3% sucrose and 0.7% agar ,which makes the multiplication rate reach 5.3 times during 30 days.The
optimum medium for rooting is 1/2Ms with 0.6mg·L-1NAA ,3% sucrose , 0.7% agar , which makes the
rooting rate reach 89.7%.
Key words:Sinningia speciosa;leafstalk;plantet regeneration;NAA;6-BA
0　引言
大岩桐(Sinningia speciosa Benth.et Hook)又称
落雪泥 ,原产巴西 ,是苦苣苔科大岩桐属多年生块
茎植物。大岩桐花大而美丽 ,用于节日点缀和室内
装饰 ,具有较高的园艺观赏价值。
对大岩桐育种方面的研究工作开展比较深入 。
早在 19世纪 20年代到40年代德国就连续进行大
岩桐原种与其各变种间杂交 ,获得了蔷薇色 、洋红
色 、淡蓝紫色 、蓝色等各种花色植株[ 1] 。但大岩桐
一般多采用种子繁殖 ,由于它为异花授粉植物 ,优
良种子后代很快发生变异。因此 ,通过组织培养途
径来保持原有品种的优良性状和大批生产优质
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收稿日期:2004-06-07
基金项目:国家教育部专项基金(教计司[ 2000] 65 号)和贵州师范大学学生科研基金支助
作者简介:王家远(1978.9-),男 , 贵州印江人 ,研究方向:植物生理及组织培养。
　第 22 卷 第 4期
2004 年 11 月 　　　　　　　
贵州师范大学学报(自然科学版)
Journal of Guizhou Normal University(Natural Sciences)　　　　　　　　
Vol.22.No.4
Nov.2004
DOI :10.16614/j.cnki.issn1004-5570.2004.04.005
苗[ 2] 。
国内外对大岩桐组织培养作了大量的研究 。
Haramaki(1971)采用茎尖增殖获得了不定苗[ 3] ,并
取得一定的进展;此后祝清俊等用大岩桐茎尖进行
组织培养获得植株[ 4] ,王鸿鹤等用幼叶片进行液体
悬浮振荡培养获得植株[ 5] 。本文在前人工作的基
础上 ,用大岩桐的叶柄作为外植体 ,研究了叶柄的
诱导 、增殖 、生根等获得完整植株的全过程 ,并探讨
大岩桐快速繁殖所需条件 ,为建立大岩桐快速繁殖
体系和工厂化育苗提供一定技术参数。
1　材料与方法
1.1　材料
大岩桐(Sinningia speciosa Benth.et Hook)
1.2　方法
1.2.1　材料处理
取大岩桐健壮叶柄 ,自来水洗净后 ,用 70%酒
精消毒 30s 及自来水漂洗 1 次 , 0.1%HgCl2 消毒
10min至无菌水漂洗 5次 ,将叶柄切成约 0.5cm长
的小段。
1.2.2　培养条件
诱导培养基:以MS 为基础培养基 ,不同浓度 6
-BA附加NAA 0.2mg·L-1对其诱导的影响;
增殖培养基:以MS 为基础培养基 ,不同浓度 6
-BA附加NAA 0.1mg·L-1对其增殖的影响;
生根培养基:以 1/2MS 为基础培养基 ,不同浓
度NAA对试管苗生根的影响;
培养基 pH 值均为 5.8 ,培养温度 25±2℃,光
照强度1 000lx ,光照时间12h·d-1。
2　结果与分析
2.1　不同浓度 6-BA对大岩桐叶柄诱导的影响
表 1　不同浓度的 6-BA对大岩桐诱导的影响
激素 浓度/(mg·L-1)
外植体数
/棵
诱导数
/棵
诱导率
/ %
6-BA
0 37 2 0.054
0.6 34 31 0.911
1.0 33 35 1.061
1.8 42 40 0.952
2.0 38 51 1.324
2.5 35 38 1.086
　　注:诱导数为每棵外植体培养 35d 后形成的侧芽或不
定芽的数目 ,诱导率为诱导总数数与外植体总数数的比值
　　生长素(NAA)和细胞分裂素(6-BA)对大岩桐
诱导分化有很大的影响 ,实验设计了 6-BA 浓度
分别为 0 、0.6 、1.0 、1.8 、2.0 、2.5mg/L 附加 NAA 浓
度均为 0.2mg·L-16个处理 ,把消毒好的外植体接
种于 MS 的培养基上 , 35d 后记录结果 ,实验结果
(表 1):大岩桐叶柄诱导培养基以 MS +6 -BA
2.0mg·L-1+NAA 0.2mg·L-1+3%蔗糖+0.7%琼
脂为最佳 ,其诱导率为 1.324。
2.2　不同浓度 6-BA对试管苗增殖的影响
本实验用不同浓度 6-BA对大岩桐试管苗增
殖阶段效果进行了比较 ,试验共设计 6个处理 ,6-
BA浓度分别为 0 、0.5 、1.2 、1.8 、2.0 、2.5mg/L。把
诱导出的同一批芽分别转接在含上述 6-BA 的
MS培养基上培养 , 30d后记录结果 ,实验结果(表
2):大岩桐试管苗增殖培养基以 MS+6-BA 2.0mg
·L-1+NAA 0.1mg·L-1 +3%蔗糖+0.7%琼脂为
最佳 ,其增殖倍数为 5.3倍 ,试管苗长势良好 。
表 2　不同浓度的6-BA 对大岩桐增殖的影响
激素 浓度/(mg·L-1)
接种数
/棵
增殖
倍数
无菌苗
长势
6-BA
0 32 0.219 +
0.5 39 0.769 ++
1.2 33 2.424 +
1.8 42 3.029 +
2.0 39 5.3 ++
2.5 42 4.7 ++
　　注:增殖倍数 ,表示每个芽增殖培养 30d 后形成不定芽
的数目 , ` + 表示较好 , ` ++ 表示好 , NAA 浓度均为
0.1mg·L-1
2.3　不同生长素对试管苗生根的影响
表 3　不同浓度的 NAA对大岩桐生根的影响
激素 浓度/(mg·L-1)
接种数
/棵
生根率
/ %
无菌苗
长势
NAA
0 32 21.9 +
0.1 39 38.5 +
0.3 42 35.6 ++
0.5 46 41.4 +
0.6 39 89.7 ++
0.8 44 68.2 ++
1.2 40 75 ++
　　注:`+ 表示较好 , ` ++ 表示好 , 生根率表示生根总
数与接种总数的比值。
　　生根阶段是大岩桐生长的重要阶段 ,为炼苗和
移栽做好准备 ,本阶段生根好与否 ,将直接影响移
栽成活。生长素(如NAA)对促进细胞伸长和试管
苗生根有重要作用 ,实验设计了 NAA 浓度分别为
20
　　　　　　　　　　　　　　　　　　贵州师范大学学报(自然科学版)　　　　　　　　　　　　　　　第22卷　
0 、0.1 、0.3 、0.5 、0.6 、0.8 、1.2mg·L-1共 7个处理 ,把
苗转接在含不同浓度 NAA 的上述培养基上培养
25d ,实验结果表明(表 3):大岩桐生根培养基以 1/
2MS+NAA 0.6mg·L-1+3%蔗糖+0.7琼脂上效果
最好 ,生根率达 89.7%,且无菌苗长势良好。
3　讨论
激素是调节植物生长不可缺少的物质 ,激素
(如生长素 、细胞分裂素)对外植体愈伤组织的诱导
和器官分化起重要作用。
细胞分裂素(如 6-BA)诱导芽的分化 ,促进侧
芽生长 ,当细胞分裂素与生长素的比例高时 ,外植
体主要分化出侧芽或不定芽 ,当二者比例低时则分
化出愈伤组织。本实验用大岩桐叶柄作为外植体
时 ,诱导芽的培养基以 MS+6-BA 2.0mg·L-1+
NAA 0.2mg·L-1+3%蔗糖+0.7%琼脂为最佳 。
6-BA对芽的增殖起重要作用 ,而 NAA主要
使芽长高 ,两者按一定的比例使用在完成各自的功
能时 ,又起到相互抑制作用 ,不但达到增殖的目的 ,
而且无菌苗长势良好 。本试验中以 2.0mg·L-16-
BA与 0.1mg·L-1NAA 搭配使用 ,对大岩桐试管苗
增殖效果最佳。
NAA促进试管苗生根起重要作用。生长素浓
度高 ,试管苗在根着生处易形成愈伤组织 ,使得水
分和营养物质运输受阻 ,不能及时运输到其它部
位 ,试管苗移栽成活率低;生长素浓度低 ,试管苗不
易生根;生长素适当 ,试管苗粗壮 ,不易在根着生处
形成愈伤组织 ,根能够很好的把水分和营养物质运
输到其它部位 ,试管苗成活率较高 。大岩桐生根培
养基以 1/2MS +NAA 0.6mg·L-1 +3%蔗糖+0.7
琼脂效果最好 。
综上所述 ,大岩桐诱导培养基为 MS+6-BA
2.0mg·L-1+NAA 0.2mg·L-1+3%蔗糖+0.7%琼
脂为最佳 ,增殖培养基以 MS+6-BA 2.0mg·L-1+
NAA 0.1mg·L-1+3%蔗糖+0.7%琼脂为最好 ,生
根培养基以 1/2MS +NAA 0.6mg·L-1+3%蔗糖+
0.7琼脂效果最好 。
致谢:2002 级研究生罗在柒提出宝贵的修改意见。
参考文献:
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殖[ J] .莱阳农学院学报 , 1995 , 12(Ⅰ):47-49.
[ 5] 王鸿鹤 ,葛欣 , 吴绎云.液体悬浮振荡培养快速繁殖重
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　第 4 期　　　　　　　　　　　王家远 ,罗荣芬 ,周大刚 , 等:大岩桐叶柄诱导再生植株