全 文 ：药 物 研 究
The medicine study
基金项目:广西科技攻关项目 (桂科攻 0815005 － 2 － 16)。
作者简介:梁干君，男，助理农艺师，从事科技情报研究。
通讯作者:刘元，女，高级实验师，从事中药药理学研究与新药开发。E － mail:liuyuan0821@ vip． 163． com。
湿唇兰无菌播种与快速繁殖技术
梁干君1 李星宇2 胡琦敏2 刘 元2*
1． 广西壮族自治区金秀县科学技术情报研究所，广西 金秀 545700;
2． 广西壮族自治区中医药研究院，广西 南宁 530022
【关键词】 药用植物栽培;湿唇兰
【中图分类号】R282. 2 【文献标识码】A 【文章编号】1007 － 8517 (2011)24 － 0065 － 01
Asepsis Sowing and in vitro Propagation of Hygrochilus parishii (Rchb． f．)Pfitz
Liang Ganjun1 Liu Yuan2 Li Xingyu2 Hu Qimin2
Guangxi Institute of Chinese Medicine ＆ Pharmaceutical Science，Nanning 530022 ，China
1 植物名称
湿唇兰 ［Hygrochilus parishii (Rchb． f．)Pfitz．］。
2 材料类别
湿唇兰的成熟种子。
3 培养条件
(1)原球茎诱导培养基:MS + 6 － BA 0． 2mg·L －1 +
NAA 0． 5mg·L －1 +蔗糖 3% +琼脂 0. 7%，pH5. 5; (2)原
球茎的增殖培养基:MS + 6 － BA1. 0 mg·L －1 + NAA 0. 5 mg
·L －1 + 60g /L香蕉 +蔗糖 3% +琼脂 0. 7%，pH5. 5; (3)
原球茎的分化培养基:MS + 6 － BA 1. 5 mg·L －1 + NAA
0. 2mg·L －1 + + 60g /L香蕉 +蔗糖 3% +琼脂 0. 7%，pH5．
5; (3)壮苗生根培养基:1 /2MS + NAA 0. 5 mg·L －1 + 6 －
BA 0. 1mg·L －1 + 0. 1%活性碳 + 蔗糖 2% + 琼脂 0. 7%，
PH5. 6 培养温度为 (25 + 2)℃，光照时间 12 h·d －1，光
强为 40 umo1·m －2·S －1。
4 生长与分化情况
4. 1 外植体的选择
于湿唇兰种子成熟期，取未开裂的湿唇兰荚果，放入
保鲜袋中，密封冷藏，尽快带回组培室进行灭菌处理。记
录荚果的种植地、取材时间等。
4. 2 外植体灭菌
将未开裂的湿唇兰荚果在自来水下冲洗，肥皂水浸泡
10min，清水冲洗，用无菌解剖刀将荚果两端修整好后放入
无菌玻璃瓶中，在超净工作台上用 75%酒精浸泡 1min，无
菌水冲洗 2 次，再用 0． 1%升汞溶液加两滴吐温 － 20 灭菌
15 min，无菌水冲洗 4 ～ 5 次，并浸泡在无菌水中备用。在
消毒和冲洗过程中要不断的摇动瓶子，让消毒液与材料充
分接触。
4. 3 种子萌发
将灭好菌的湿唇兰荚果在培养皿中切开，均匀的将种
子播种于种子萌发培养基中，暗培养两周，再转到光照培
养。原球茎的诱导培养基为 MS + 6 － BA 0． 2mg·L －1 +
NAA 0． 5mg·L －1 +蔗糖 3% +琼脂 0． 7%，pH5． 5。培
养温度为 (25 + 2)℃，光照时间 12 h·d －1，光强约为 40
umo1·m －2·S －1。统计污染率，及种子萌发率。35 天后种
子膨胀，45 天后转绿，种子萌发率达 90%。
4. 4 原球茎的增殖
当种子萌发的原球茎转绿，便可将其转接到原球茎的
增殖培养基中进行培养。原球茎的增殖培养基为 MS + 6 －
BA1． 0 mg·L －1 + NAA 0． 5 mg·L －1 + 60g /L 香蕉 +蔗糖
3% +琼脂 0. 7%，PH5. 5。培养温度为 (25 + 1)℃，光照
时间 12 h·d －1，光强约为 40 umo1·m －2·S －1。
4. 5 原球茎的分化
40 天后，便可以将增殖的原球茎转接到原球茎分化培
养基中进行分化培养。原球茎的分化培养基为 MS + 6 － BA
1. 5 mg·L －1 + NAA 0. 2 mg·L －1 + + 60g /L香蕉 +蔗糖 3%
+琼脂 0. 7%，PH5. 5。培养温度为 (25 + 2)℃，光照时
间 12 h·d －1，光强约为 40 umo1·m －2·S －1。
4. 6 生根壮苗
当芽长出 2 ～ 3 片叶时，便可转接到生根壮苗培养基上
进行生根培养。生根壮苗培养基为 1 /2MS + NAA 0． 5 mg·
L －1 + 6 － BA 0. 1mg·L －1 + 0. 1%活性碳 +蔗糖 2% +琼脂
0. 7%，PH5． 6。培养温度为 (25 + 2)℃，光照时间 12 h
·d －1，光强约为 40 umo1·m －2·S －1。50 天后可长出 3 ～ 4
条根。
4. 7 炼苗移栽
当无菌苗长出 3 ～ 4 片叶，具 3 ～ 5 条根时，将装有无
菌苗的培养瓶移出培养室，置于自然环境中，避免阳光直
晒，一周后打开培养瓶瓶盖，便可炼苗移栽。炼苗移栽时，
将小苗从培养瓶中轻轻夹出，尽量避免伤到小苗，自来水
洗去根系上的培养基，稍微晾干小苗表面水分后移植于经
0. 2%高锰酸钾消毒过的苔藓中，保持适宜湿度，小苗成活
率可达 95%。
5 意义与进展
湿唇兰为国家二级保护植物。分布于广西、云南西双
版纳、印度东北部、缅甸、泰国、老挝、越南。海拔下限
700 海拔上限 1300 附生于山地疏林中大树干上。湿唇兰的
香气会随着温度而改变，低温和高温时花的芳香不同，因
此特质而具有较高的观赏价值，是重要的兰花育种亲本。
进一步开发利用湿唇兰资源，通过湿唇兰种子的无菌播种
进行快速繁育是一种有效途径。
(收稿日期:2011. 11. 18)
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中国民族民间医药
Chinese journal of ethnomedicine and ethnopharmacy