全 文 ：




第 38卷第 4期
2013年 12月

广 州 化 学
Guangzhou Chemistry

Vol. 38 No. 4
Dec. 2013

文章编号：1009-220X(2013)04-0011-05
明日叶水溶性总糖含量的测定
郭晓青 1， 张晓春 1， 陈晓靓 1， 吴金鸿 2*
（1. 贵阳护理职业学院，贵州 贵阳 550081；
2. 上海交通大学 农业与生物学院 陆伯勋食品安全研究中心，上海 200240）

摘 要：采用苯酚―硫酸比色法测定明日叶水溶性总糖含量。以葡萄糖为标准品，6%
苯酚溶液和浓硫酸作显色剂，应用分光光度法在 490 mn波长处测定样品的吸光度，
按标准曲线计算总糖含量。实验结果表明，明日叶水溶性总糖提取物中总糖含量（质
量分数）为 17.82%，实验精密度及重复性好。高、中、低三种不同浓度加样量加标回
收率分别为 101.55%、100.42%、101.26%，相对标准偏差（RSD）分别为：1.67%、
0.76%、1.38%，回收率高。此方法操作简便，重复性、稳定性好，准确度高，可为明
日叶水溶性总糖含量测定提供可靠的定量检测方法，为明日叶进一步研究开发提供科
学依据。
关键词：明日叶；水溶性总糖；苯酚―硫酸法；含量测定
中图分类号：O629.9 文献标识码：A

明日叶（Angelica keiskei Koidzumi）原产于日本八丈岛，属芹科类 2年生或多年生草本
植物[1-2]。明日叶含多种天然活性物质[3-6]，具有增强免疫力、防癌抗癌、降血脂、治疗糖尿
病、抗炎消炎等功效[7-9]。作为一种药食兼用的蔬菜，营养丰富均衡，具有较高食用价值。
现今在韩国、台湾以及我国海南、云南、山东等地已广泛种植。目前国内明日叶总黄酮含量
的测定已有文献报道[10-11]，对明日叶总糖含量测定尚未见文献报道。本实验采用苯酚―硫酸
比色法测定明日叶水溶性总糖含量，为明日叶的进一步开发利用提供理论依据。
1 实验
1.1 材料与试剂
明日叶，来自上海交通大学农业与生物学院种植实验基地；浓硫酸，苯酚，葡萄糖标准
品均为分析纯试剂。
1.2 仪器与设备
RT-25粉碎机（北京兴时利和科技发展有限公司）；DK-S26电热恒温水浴锅（上海精宏

收稿时间：2013-06-04
基金项目：国家自然科学基金青年科学基金项目（31000814；31000800）；国家自然科学基金面上项目
（31171642）；上海市科学技术委员会项目（10DZ0504000；1052NM06700）。
作者简介：郭晓青（1964~），女，副教授；主要研究方向：食品化学。
* 通讯作者：吴金鸿（1978~），女，副研究员，博士；研究方向：功能食品和食品加工。wujinhong@sjtu.edu.cn

DOI:10.16560/j.cnki.gzhx.2013.04.015






12

广 州 化 学

第 38卷

实验设备有限公司）；EPPENDOF 5810R离心机（上海肯强仪器有限公司）；DU 800 UV/Vis
分光光度计（美国 Beckman Coulter公司）；旋转蒸发器（上海青浦沪西仪器厂）；FD-1A-50
冷冻干燥机（北京博医康实验仪器公司）。
2 实验
2.1 明日叶水溶性总糖提取物的制备[12-14]
将明日叶用水洗净，置于－20℃冷冻 24 h，然后冷冻干燥 22 h，得到脱水明日叶。采用
超低温液氮粉碎的方法将脱水明日叶粉碎，并过 100目筛，得到干燥的明日叶粉末。按质量
体积比为 1∶30的比例将干燥明日叶粉与双蒸水混合，在 45℃水浴加热 15 min浸提。浸提
液在 4℃、8 000 r/min下离心 20 min，取上清液置于圆底烧瓶中，在 45℃、0.1 MPa条件下
进行旋转蒸馏除去一部分水分（刚有结晶析出停止蒸馏）。将剩余浸提液冷冻干燥，得到明
日叶水溶性总糖浸提物粉末。取 1 mg浸提物粉末配成 25 mL样液备用。
2.2 提取物中糖类化合物的定性鉴别
2.2.1 莫立许（Molisch）实验
在试管中加入 2 mL样液，加两滴莫立许试剂，摇匀。把试管倾斜成 45°角，沿管壁缓
慢加入浓硫酸 1 mL后，浓硫酸与样液之间有明显分层，交界面出现紫色环。所有糖都能发
生莫立许反应，莫立许反应可用于糖类物质鉴别。上述反应现象说明样液含有糖类化合物。
2.2.2 与斐林试剂的反应
在试管中加入 1 mL斐林试剂，再加入 5滴样液，在 80℃水浴加热 2～3 min，溶液出现
红色沉淀。此反应用于还原性糖鉴别。上述实验现象说明样品含有还原性糖。
2.3 提取物水溶性总糖含量的测定
2.3.1 标准曲线
葡萄糖标准溶液配制：准确称取标准葡萄
糖 20 mg，定量转移至 500 mL容量瓶中，加
蒸馏水至刻度，摇匀，得到 0.04 mg/mL葡萄
糖标准溶液。6%苯酚溶液配制：称取 6 g苯酚
定量转移至 100 mL容量瓶中，加蒸馏水至刻
度，摇匀备用。
分别吸取 0.4、0.6、0.8、1.0、1.8 mL标准葡萄糖溶液于试管中，各以蒸馏水补至 2.0 mL，然
后加入 6%苯酚 1.0 mL及浓硫酸 5.0 mL，摇匀室温放置 20 min，以 2.0 mL蒸馏水按同样显色操
作为空白，测定 490 nm处吸光度，以葡萄糖显色终点质量浓度（μg/mL）为横坐标、吸光度为纵
坐标绘制标准曲线（如图 1所示）。
其回归方程为： 0.0076 0.0034y x= + ，R2=0.9967，总糖质量浓度在 0～40 μg/mL的范
围内呈良好的线性关系。

0
0.06
0.18
0.24
0.12
0 10
0.3
20 30
OD
49
0 n
m

总糖质量浓度（mg/mL）
y＝0.007 6 x＋0.003 4
R2＝0.996 7
40
图 1 苯酚硫酸法测定总糖浓度标准曲线






第 4期

郭晓青等：明日叶水溶性总糖含量的测定

13

2.3.2 仪器的精密度
精确量取葡萄糖标准溶液 1.0 mL，按标准曲线测定方法测定吸光度，进行 5次平行实验，
相对标准偏差（RSD）为 0.56%，结果表明仪器精密度良好。
2.3.3 测试结果的稳定性
取样液显色后在室温下放置，按标准曲线测定方法测定吸光度，每隔 20 min测定一次，
测定 5次，RSD为 0.68%。结果表明样液显色后在 120 min时间内稳定性良好。
2.3.4 测试结果的重现性
精确取 5 份样液，按标准曲线测定方法测定吸光度，RSD 为 1.6%，结果表明样液的重
现性良好。
2.3.5 样品的测定结果
取 1 mg总糖浸提物粉末配成 25 mL样液，吸取 0.2 mL样液，按标准曲线建立的方法测
定吸光度，根据式（1）计算出总糖质量分数。
1
3
2
/ % 100
10 0.2
V
m V
r ´
= ´
( ´ / )´
总糖质量分数 （1）
在式中r为标准曲线计算出的总糖质量浓度（μg/mL），V1 为显色反应终点体积（mL），
V2为配制样液总体积（mL），m 为样品质量（mg），0.2 为显色反应加入的样液体积（mL）。
总糖含量测定结果见表 1，由表 1可知，明日叶水溶性总糖提取物中，总糖质量分数为 17.82%。
表 1 苯酚硫酸法测定总糖含量
实验号 总糖质量分数/ % 平均值 RSD/ %
1 17.25
2 18.24 17.82 0.51
3 17.98

2.3.6 加标回收率
由表 2 可知，高、中、低三个不同浓度加样量加标回收率分别为 101.55%、100.42%、
101.26%，RSD分别为 1.67%、0.76%、1.38%，结果表明，该方法具有较高的回收率。
表 2 加标回收率实验结果
1 2 3 实验号
平衡实验 平衡 1 平衡 2 平衡 3 平衡 1 平衡 2 平衡 3 平衡 1 平衡 2 平衡 3
样品质量/ μg
样品测定值/ μg
加标样量/ μg
加标样后测定值/ μg
加样回收率/ %
平均回收率/ %
RSD/ %
8.0 8.0 8.0
1.382 1.451 1.412
1.0 1.0 1.0
2.414 2.450 2.428
103.2 99.86 101.6
101.55
1.67
8.0 8.0 8.0
1.398 1.445 1.472
1.4 1.4 1.4
2.816 2.846 2.870
101.3 100.1 99.89
100.43
0.76
8.0 8.0 8.0
1.396 1.408 1.432
1.6 1.6 1.6
3.025 3.045 3.067
101.8 102.3 99.69
101.26
1.38








14

广 州 化 学

第 38卷

3 结论
明日叶水溶性总糖浸提物中总糖质量分数为 17.82%。实验稳定性、重现性好。低、中、
高三个浓度加标回收率分别为 101.55%、100.43%、101.26%，RSD分别为 1.67%、0.76%、
1.38%，回收率高。明日叶含有多种功效活性成分，其水溶性总糖含量的测定可为明日叶提
取、分离有效活性物质提供一定的科学依据。
参考文献：
[1] 韩曙, 张云选, 张宏, 等. 珍稀蔬菜: 明日叶[J]. 长江蔬菜, 2002(2): 11.
[2] 赵国平, 新关稔, 石川隆二, 等. 中日当归属药用植物 ITS序列分析[J]. 中草药, 2006, 37(7): 1072-1076.
[3] 韩嘉义. 长寿菜: 明日叶[J]. 植物杂志, 2001(4): 16.
[4] Toshihiro A, Harukuni T, Motohiko U. Chalcones, coumarins, and flavanones from the exudate of Angelica
keiskei and their chemopreventive effects[J]. Cancer Letters, 2003, 201(2): 133-137.
[5] Ogawa H, Okada Y, Kamisako T, et al. Beneficial effect of xanthoangelol, a chalcone compound from
Angelica keiskei, on lipid metabolism in stroke-prone spontaneously hypertensive rats[J]. Clin Exp Pharmacol
Physiol, 2007, 34(3): 238-243.
[6] 王亦敏, 马场贵美江. 明日叶中查尔酮诱导人胃癌细胞 MGC-803 凋亡的研究[J]. 中医临床研究, 2011,
3(5): 67-68
[7] Sugamoto K, Matsushita Y, Matsui T, et al. Chalcones from Angelica keiskei induce apoptosis in stomach
cancer cells[J]. Journal of Herbs, Spices & Medicinal Plants, 2008, 14(3/4): 166-174.
[8] Jing Hui, Zhou Xinglu, Dong Xiaowu, et al. Abrogation of Akt signaling by isobavachalcone contributes to its
anti-proliferative effects towards human cancer cells[J]. Cancer Letters, 2010, 294(2): 167-177.
[9] Hsu Y L , Kuo P L, Tzeng W S, et al. Chalcone inhibits the proliferation of human breast cancer cell by
blocking cell cycle progression and inducing apoptosis[J]. Food and Chemical Toxicology, 2006, 44(5):
704-713.
[10] 邓锐, 邹毓兰, 单虎 , 等. 明日叶中总黄酮的提取工艺优化和检测方法的对比研究[J]. 食品工业 ,
2012(2): 44-47.
[11] 郭晓青, 吴金鸿, 周焱富, 等. 明日叶叶水溶性总黄酮提纯工艺[J]. 食品科学, 2012, 33(22): 28.
[12] 樊懿娜, 赵婷, 周叶, 等. 苯酚―硫酸法测定灰树花中多糖含量的研究[J]. 安徽农业科技, 2011, 39(25):
15256-15257.
[13] 莫峥嵘, 陈光英, 古翰林, 等. 海南栽培长裙竹荪中总糖含量的测定[J]. 食品科技, 2013, 37(5): 270-271.
[14] 夏永刚, 梁军, 杨炳友, 等. 苯酚―硫酸法测定麻黄多糖含量研究[J]. 中医药信息, 2011, 28(1): 33-35.
（下转第 38页）









38

广 州 化 学

第 38卷

Study on the Microwave-Assisted Extraction
of b-carotine from Persimmon
ZHAO Shao-dan, ZHANG Lu, LIU Jun-hai*
（School of Chemical & Environment Sciences, Shananxi University of Techonlogy, Hanzhong 723001, China）

Abstract: The microwave-assisted extraction conditions of b-carotine from the persimmon were
studied through the orthogonal test based on the single factor experiment. The results showed that
the optimum conditions were as follows: microwave temperature 25℃ microwave time 60 s, ratio
of liquid to material 17∶1 mL/g, microwave power 500 W, the extraction rate can reach to
31.25%.
Key words: persimmon; microwave-assisted; extraction; b-carotene


（上接第 14页）
Determination of the Souble Total Suger Content
of Angelica keiskei Koidzmi
GUO Xiao-qing1, ZHANG Xiao-chun1, CHEN Xiao-jing1, WU Jin-hong2*
（1. Guiyang Nursing Vocational College, Guiyang 550081, China;
2. BorLuh Food Safety Center, School of Agriculture and Biology, Shanghai Jiao Tong University,
Shanghai 200240, China）

Abstract: The souble total suger content of Angelica keiskei Koidzmi were measured by phenol-
sulferic acid method. With the glucose was as reference standand, 6% phenol solution and
concentrated sulfuric acid as chromogenic agent, the absorbance of test solution was determined at
490nm and the content of glucose was calculated by using the standand curve. The experimental
results show that the content of the souble total suger in Angelica keiskei Koidzmi was 17.82%,
the experimental precision and good repeatability. Three different concentrations of sample
amount recovery rate were 101.55%、100.42%、101.26%. Relative standard deviation (RSD) were
1.67%、0.76%、1.38%. This method is simple and accurate. It will provide an excellent
quantitative method and to provide the scientific basis for Angelica keiskei Koidzmi’s the further
research.
Key words: Angelica keiskei Koidzmi; the souble total suger; phenol-sulferic acid method;
determination of content