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红花酢浆草试管根茎诱导和快速繁殖研究



全 文 :2011年第 4期
云 南 农 业 科 技
Yunnan Nongye Keji
病虫枝、纤弱枝、过密枝及不利于发育的枝条。
3.5 病虫害防治
糯米香茶主要病害有白绢病、叶斑病,主要虫害
有蜗牛、剌蛾。白绢病用菌核菌液 600~800 μg/mL
喷雾,叶斑病用 50%多菌灵可湿性粉剂 800 倍液喷
雾;蜗牛用灭蜗灵 800~1 000 倍液或氨水 70~400
倍液喷洒,剌蛾用 25%灭幼脲乳油 1 000~2 000 倍
液喷雾。
3.6 采收
糯米香茶定植 2~3个月后,长至约 0.5 m可进行
采收,每次采收 15~20 cm,每年采收 5~6次。采后
24 h内进行初加工处理。
参考文献:
[1]陈鹏,张翠玲. 糯米香茶扦插繁殖技术研究[J]. 现代农业科
技,2009(1):159~160.
[2]刘明辉. 富锦市籽用南瓜间种向日葵技术研究[J]. 农业与科
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[3]孙云南,梁名志,夏丽飞,等. 不同间作物对茶园土壤养分
的影响[J]. 西南农业学报,2011,24(1):149~153.
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收稿日期:2011-03-28
基金项目: 中国西南野生生物种质资源库 (资助号
0802261411)。
作者简介: 李春芳(1982-),女,江西人,现为在读硕士
生,主要从事植物种质资源的离体保存,E-mial:lichunfang@
mail.kib.ac.cn。
*为通讯作者, E-mail:jbyang@mil.kib.ac.cn。
李春芳,罗吉凤,程治英,杨俊波
(中国科学院昆明植物研究所,西南野生生物种质资源库,云南 昆明 650204)
红花酢浆草试管根茎诱导和快速繁殖研究
摘 要:对观花地被植物红花酢浆草的快速繁殖方法和离体保存进行了试验观察和分析,研究了植物
生长调节剂对其诱导试管根茎和离体珠芽等的影响。结果表明,红花酢浆草的小芽在 MS+BA 0.5 mg/
L+NAA 0.2 mg/L的培养基上经过 3个月的培养可一次成苗,采用微型扦插的方式达到增殖目的。小芽
在 MS+BA 2 mg/L+NAA 2 mg/L的培养基上经过 60 d的培养丛生芽增殖率达 1∶10,该方法可用于规模
化生产种苗。芽条在MS+PP3331.5 mg/L的培养基上培养 30 d,所有茎的腋芽膨大形成珠状结构,珠芽
从母株上取下可生长为完整试管苗,另外,芽条在 MS+NAA 0.5 mg/L+AC 0.5 g/L+8%蔗糖的液体培养
基上培养 90 d可形成纺锤形的试管根茎。单个根茎在合适条件下,无休眠可以继续生长发育为试管
苗。试管苗和试管丛芽可以在温度为 12 ℃和相对湿度 60%条件下保存 10个月以上。
关键词:红花酢浆草;快繁;离体保存;丛芽;根茎;珠芽
红花酢浆草 (Oxalix rubra St. Hill) 为酢浆草科
(Oxalidaceae) 无茎直立的多年生草本植物,地下块状
根茎呈纺锤形。叶片丛生状具长柄,掌状复叶小叶 3
枚倒心脏形,昆明地区元旦前后开花,花大,每株有
花 8~12朵,深桃红色。植株整齐,叶色青翠,覆盖
地面迅速,能抑制杂草生长,是一种良好的观花地被
植物。花期长,花色艳丽,可作花坛、盆栽或装饰岩
石隙缝等。该物种从美国引进昆明只开花不结种子,
主要繁殖方式为分株,即分植根茎,繁殖速度慢,不
能满足市场需求,而且长期用根茎进行无性繁殖,生
长在土中的根茎病毒逐年积累致使植株开出的花变小
变少,品质下降。因此我们采用组织培养方法,对其
繁殖技术进行探讨,以求短期内大批量生产优质种
苗,满足市场需求。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试材料为地下纺锤形根茎,来源于昆明,经常
规无菌消毒后得到无菌材料供试验用。
1.2 培养条件
基本培养基为 MS,诱导根茎发芽的培养基:①
*
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Yunnan Nongye Keji2011年第 4期
MS+ BA 2 mg/L+NAA 0.2 mg/L,②MS+BA 1 mg/L+
NAA 0.5 mg/L,③MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;诱
导生根培养基:④1/2 MS+NAA 1 mg/L;诱导珠芽培养
基:⑤MS+PP333 1.5 mg/L;⑥MS+PP333 2 mg/L,⑦
MS+PP333 5 mg/L;诱导试管根茎的培养基:⑧
MS+NAA 0.05 mg/L+AC 0.5 g/L+蔗糖 8%,⑨MS+NAA
0.1 mg/L+蔗糖 8%,⑩MS+NAA 0.2 mg/L +AC 0.5 g/L+
蔗糖 8%,輥輯訛MS+NAA 0.5 mg/L+AC 0.5 g/L+蔗糖 8%。
培养基①~⑦均附加 0.56%琼脂固化,蔗糖浓度为 3%。
以上培养基 pH值 5.5~5.8,培养温度(25±3)℃,光
照强度为 40 μmol/m2/s,光照时间为 12 h/d。
2 结果与分析
2.1 微型扦插和丛生芽繁殖
将无菌块茎接种在培养基①上,根茎培养约 70 d
长芽,平均 6芽 /块,将生长出的芽割下,继代在培
养基①上的小芽经过 60 d培养,丛生芽增殖率为 1∶
10左右(见图 1)。这种丛生芽可反复切割继代,用
于丛生芽的增殖,也可切割成单个芽条在培养基④上
培养,约 20 d在长高的同时也长出带根的可移栽的完
整试管苗。当小芽接种在培养基②上,经过 60 d培养,
丛生芽增殖率约为 1∶6。将从根茎上切割的小芽培养
在培养基③上,经过约 3 个月培养可一次成苗且生
根,但无新芽产生,这种完整试管苗不仅可用于出瓶
移栽,还可以将植株茎切为 2个节 1段,用于微型扦
插,达到增殖目的。
2.2 珠芽繁殖
将切割的芽条接种在培养基⑤~⑦上培养,每种
培养基作为 1个处理,40个芽条 /处理,重复 3次。
培养 30 d 后,培养基⑤上培养的材料 100%长出珠
芽,培养基⑥、⑦上培养的芽条长出的根有黑化现
象,说明 PPP333浓度太高对根有伤害。此外,在这 2
种培养基上培养的芽条培养 30 d后,仅形成 75%的
珠芽。说明培养基⑤作为诱导珠芽的培养基较合适。
在茎的叶腋处诱导出的珠芽呈白色,长×宽 = 0.5
cm×0.3 cm,随着培养时间的延长变为绿色。珠芽产
生的部位在茎的叶腋处,在茎的基部也能形成丛生芽
(见图 2)。珠芽形成后无生长迹象,取下珠芽放在培
养基①~③上培养 5 d后均能形成芽,恢复生长,长大
成苗。笔者诱导出的珠芽是由芽条的腋芽肥大而形成的
珠状结构。由珠芽发育的植株健壮,移栽成活率也高。
2.3 试管根茎的诱导
将高约 4 cm的芽条接种在培养基⑧~輥輯訛上,每瓶
10个芽条,重复 6次,培养 90 d后统计芽条产生根
茎数。结果显示,培养基⑧~輥輯訛上的芽条均产生了根
茎,但培养基輥輯訛最佳,表现为每个培养瓶平均结根茎
数为 28个,并且根茎较大(长在 0.6 cm以上,宽在
0.5 cm以上)(见图 3)。根茎产生的方式为每个芽条先
生根然后根尖部分膨大,形成纺锤形的根茎(见图 4)。
图 2 丛生芽
图 1 珠芽诱导
图 3 试管根茎诱导
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图 4 根茎的发生过程
2.4 苗的生根和移植
将以上各种繁殖方法形成的试管芽条(除微型扦
插一次成苗和试管根茎可直接种入土中外) 切割成
2~3 cm 接种在培养基④上,培养 20 d 后开始生根,
约 30 d根诱导率在 95%以上,平均每株长根 3条左
右,当苗高 6~7 cm时便可移栽,移栽基质用腐叶
土∶生黄土 =1∶1,经过 5%甲醛水溶液消毒密封 24
h后打开 2~3 d便可移苗。试管苗从培养瓶中取出时
不要伤及植株的叶片和根尖,移后注意保湿和通风,
待新叶长出后去掉保湿用塑料布,可以按常规管理,
移栽成活率在 90%以上(见图 5、图 6)。
3 讨论
3.1 各种繁殖技术比较
本试验得到组培快繁的红花酢浆草试管苗近 2万
株,并在生产中推广应用。利用短枝微型扦插培养 90
d可一次成苗,方法简便。若用此法快繁,60 d增殖
速率为 1∶8。利用丛生芽增殖,增殖速度快(约 1∶
10),繁殖量大,1个繁殖周期仅要 80 d,可以作为规
模化生产的主要方式。珠芽繁殖和试管根茎诱导的技
术也可以利用,此法为笔者的创新技术。优点是移植
成活率高,缺点是手续复杂、成本加大。
3.2 母瓶保存
笔者选择红花酢浆草的丛生芽和试管苗作为离体
保存的培养物类型,于 8月放入温度为 12 ℃、相对
湿度为 60%的条件下保存母瓶,为防止母瓶培养基干
燥,在瓶盖口用保鲜膜密封,保存 10个月后培养物良
好。次年 5~6月取出母瓶用于快繁生产,6~7月供应
瓶苗移栽苗,当年可以开花。本试验为红花酢浆草持
续利用提供了技术支撑。关于红花酢浆草的离体珠芽
和试管根茎的诱导等繁殖技术和规模化生产未见报
道。
参考文献:
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西南农业学报,2010,23(4):1374~1376.
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图 5 移栽苗
图 6 试管苗规模化生产
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