全 文 ： 生物技术 北方园艺 2007(2):150～ 151
藿香蓟组培快繁体系的建立
王 　莹 , 王 晓 磊 , 李 瑞 峰 , 徐 永 清 , 胡 宝 忠
(东北农业大学生命科学学院 ,哈尔滨 150030)
第一作者简介:王莹 , 女 , 1981 年生 , 东北农业大学在读博士 ,
研究方向为植物分子生物学与生殖生物学。
通讯作者:胡宝忠。
收稿日期:2006 - 09 - 05
　　摘　要:对藿香蓟组培快繁技术进行了研究 ,结果表明:叶片为组织培养的最佳外植体 ,
各培养阶段适宜培养基为:诱导愈伤组织培养基:MS +6-BA1mg /L+NAA0. 5mg /L;诱导
丛生芽培养基:MS+6-BA2mg /L;生根培养基:1 /2M S+NAA 0. 5mg /L。
关键词:藿香蓟;外植体;快繁体系;组织培养
中图分类号:S681. 903. 6　文献标识码:B　文章编号:1001 - 0009(2007)02 - 0150 - 02
　　藿香蓟(Ageratum houstonianum Mill. )别名胜红
蓟 、臭垆草 、咸虾花 、百花草 ,是菊科胜红蓟属一年生草
本植物 ,原产墨西哥 ,我国南方个别地方有野生 ,是药物 、肥料 、观赏花卉兼用的多功能植物 ,其全株具有抗
炎 、消肿 、镇痛的功效[ 1] ;藿香蓟作为绿肥有机质丰富 ,
而且是各类螨虫天敌捕食螨的中间寄主植物 ,能有效
地控制害螨的危害[ 2] ;另外藿香蓟的花有兰色和紫色
品种 ,是花卉中备受青睐的颜色 ,现主要作为夏秋季节
绿化花卉栽培 。目前对于藿香蓟的研究多集中在栽培和药用成分 ,而再生体系的建立尚未见报道。组织培
养技术能够提高植株的繁殖系数 ,为规模化生产及培
育优质的新品种奠定基础[ 3] 。因此 ,研究藿香蓟的组
织培养技术具有很高的应用价值 ,为利用生物技术手
段开发和利用藿香蓟奠定了理论和实践基础。
1　材料与方法
1. 1　材料
试验材料为东北农业大学绿化科赠藿香蓟幼苗。
1. 2　方法
1. 2. 1　最佳外植体的筛选　取藿香蓟的茎 、腋芽 、叶
为外植体 ,用流水冲洗干净 , 75%酒精浸泡消毒 30s ,
无菌水冲洗 1次 ,0. 1%的升汞加 0. 1%吐温 - 20灭
菌 3min ,最后用无菌水冲洗 4 ～ 5次 ,切割成 5mm 长
的小块 ,接种到愈伤组织诱导培养基中 ,暗培养。
1. 2. 2　愈伤组织诱导　愈伤组织诱导以 MS 为基本
培养基 ,添加不同浓度的 6 - BA 和 NAA , 6 - BA 设
0 、0. 5 、1 、2 mg /L 4 个浓度梯度 , NAA 为 0 、0. 2 、
0. 5 、1 mg /L 4个梯度 ,共 16个处理 。附加 8g /L 琼
脂 ,30g /L 蔗糖 ,pH5. 8 , 3次重复 。
1. 2. 3　丛生芽诱导　将生长状态好的愈伤组织转入分化培养基中 ,诱导芽的生成。分化培养基为 MS 附
加 6 - BA 和 NAA , 6 - BA 设 0. 5 、1 、2 3 个梯度 ,
NAA 设0 、0. 2 、0. 5 3个梯度 ,共 9个处理 。附加8g /
L 琼脂 ,30g /L 蔗糖 ,pH5. 8 ,3次重复 。
1. 2. 4　生根移栽　当无菌苗长至 4 ～ 5cm 高时 ,移
入生根培养基 1 /2MS 、MS 附加 NAA0. 2 、0. 5mg /L ,
蔗糖 30g /L ,琼脂 8g /L ,pH5. 8 ,当须根长至 2 ～ 3cm
时进行练苗移栽 。
2　结果与分析
2. 1　不同外植体的愈伤组织诱导将 3种外植体分别接种于不同植物生长调节剂(PGR)浓度的愈伤组织诱导培养基中 ,一周后观察 ,
部分茎 、叶切口处开始膨大形成愈伤组织 ,而腋芽只
在不含 PGR的培养基中伸长 ,但没有芽丛的分化 。
四周后腋芽上仍没有愈伤组织生成 ,茎上生成的愈伤
组织大部分玻璃化 ,叶片在不同 PGR浓度培养基中的生长状态不同 ,有生长状态好 、适宜分化的愈伤组
织形成 。因此叶片为诱导愈伤组织的最佳外植体。
培养基中没有 NAA 时叶片上无愈伤组织产生 ,
NAA 浓度为 1mg /L 时生成的愈伤组织全部玻璃化;
在不含 6-BA 的培养基中 ,很多叶片上有不定根生
成 。因此只有叶片在 6-BA 为 0. 5 、1 、2mg /L 及
NAA 为 0. 2 、0. 5mg /L 的 6 个处理中有愈伤组织生成 ,愈伤组织诱导情况见表 1 。
表 1 不同 6-BA及 NAA 浓度对
愈伤组织诱导的影响
PGR浓度
NAA 6-BA 接种叶片数 形成愈伤数
愈伤诱导率
(%)
0. 2 0. 5 120 76 63. 3
0. 2 1 120 94 78. 3
0. 2 2 120 86 71. 7
0. 5 0. 5 120 104 86. 7
0. 5 1 120 112 93. 3
0. 5 2 120 114 95　
　　由表 1可见 ,叶片在培养基 MS+6-BA1mg /L +
NAA 0. 5mg /L 和 MS + 6-BA2mg /L + NAA
0. 5mg /L中愈伤组织的诱导率高 ,生长速度快 , 而
6-BA为 1mg /L 比 2mg /L 时生长状态好 ,为黄绿色
的颗粒状 ,因此适宜转入分化培养基中进行芽丛的诱
导 。另外 ,在相同 6-BA 及 NAA 浓度的培养基上可
进行愈伤组织的继代培养 。
2. 2　芽丛的诱导将愈伤组织转入不同激素浓度的分化培养基中 ,一
周后观察 ,只有在 MS +6-BA1mg /L 和 MS +6-BA
2mg /L两种培养基中的愈伤组织上有绿色芽点分化 ,其
它处理均未分化。40 d后统计MS+6-BA1mg /L和MS+
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图 1　藿香蓟组织培养过程
A　愈伤组织;B　芽点的分化;C　丛生芽;D　生根培养
6-BA2mg /L中芽丛诱导率分别为 94%和 89. 4%,平均每块愈伤组织的出芽数为 23 和 27个 ,在相同 6-
BA 浓度的培养基中继代增殖培养 ,当幼苗长至 2 ～
3cm 长时观察 ,MS+6-BA 1mg /L 中诱导生成的幼苗
较纤弱 ,而 MS+6-BA2mg /L 中的幼苗较粗壮 ,叶色
浓绿 ,株高和叶片大小都优于 MS +6-BA1mg /L 培
养基 ,不需壮苗可直接进行生根培养。
2. 3　生根移栽
将 4 ～ 5cm 高的幼苗转移到生根培养基中 ,30 d
左右观察 ,在幼苗基部生长出许多不定根 ,生根率可
达到 100%,且根系已达到 2 ～ 3cm长 ,不同培养基生
根情况见表 2。
表 2　不同培养基对生根的影响
培养基 生长状态
MS+NAA0. 2mg /L 细弱
MS+NAA0. 5mg /L 细弱
1 /2MS+NAA0. 2mg /L 粗壮 ,数量少
1 /2MS+NAA0. 5mg /L 粗壮 ,数量多
　　由表 2 可见 1 /2M S +NAA0. 5mg /L 为适宜的生根培养基。此时 ,可进行练苗移栽 ,打开培养瓶盖 ,
将培养瓶置于自然环境中一周 ,以使无菌苗适应外界
环境 ,洗净根系上的培养基 ,移栽到草炭土∶蛭石=
1∶1的培养基质中 , 注意浇水保湿 , 成活率可达
92%。
3　讨论
由于藿香蓟的表皮上有很多表皮毛 ,不宜灭菌消
毒 ,因此要对外植体进行严格的灭菌处理 。首先选取表面干净的外植体先用酒精擦拭表面 ,增加流水冲洗
的时间 ,在升汞消毒时加入吐温 ,吐温是一些表面活
性剂 ,主要作用是使药剂更易于展布 ,可使消毒药剂
更好地与材料表面接触 , 促进消毒药剂与材料的粘
合 ,加快消毒进程 ,增强消毒效果 。加用吐温后灭菌
剂活力大为提高 ,但对材料的伤害也在增加 ,因此吐温的用量不宜过多。
植物生长调节剂的浓度和配比是影响植物组织
培养最重要的因素。生长素促进愈伤组织的生成 ,细
胞分裂素促进芽的分化 ,其浓度配比对不同植物影响
差异较大。在藿香蓟的组培过程中 , NAA 的浓度过
低影响愈伤组织的诱导效率 ,一定浓度的 6-BA 配合
NAA 可促进愈伤组织的诱导 、提高生长速度并改善
生长状态;6-BA是芽丛诱导的必要条件 ,在藿香蓟芽
诱导过程中少量的 NAA 就会产生抑制作用 ,因此在
分化培养基中不添加 NAA 。
参考文献:
[ 1] 　方留焰 ,林石羡石 ,叶树范. 胜红抗炎素治疗盆腔炎血淤症 144
例临床观察和试验研究[ J] .中西医结合杂志 , 1991 , 11(7):411 - 412.
[ 2] 　王立峰. 害螨克星藿香蓟的栽培和利用[ J] . 中国南方果树 ,
2001 , 30(2):18.
[ 3] 　王秀丽 ,杨 煜 ,徐平丽 ,等. 植物组织培养的应用及进展[ J] .山
东农业科学 , 2005 ,(3):78- 80.
Establish of Tissue Culture and Rapid Propagation System
of Ageratum houstonianum Mill
WANG Ying , WANG Xiao-lei , LI Rui-feng , XU Yong-qing , HU Bao-zhong(Life Science Co llege , Northeast Agricultural Univer sity , Harbin 150030)
Abstract:Studied on tissue culture and rapid propagation of Ageratum houstonianum Mill. The resul ts show ed
that the best explant in tissue culture w as leaf. The best media for each stag es we re as fo llow s:(1)Callus
inducing medium:MS +6-BA1mg /L +NAA0. 5mg /L;(2)Buds inducing medium:MS +6-BA2mg /L ;(3)
Roo ting medium:1 /2M S+NAA0. 5mg /L.
Key words:Ageratum houstonianum Mill. ;Explant;Rapid propaga tion sy stem;Tissue culture
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