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热 带 农 业 科 学%$$% 年 +% 月 第 %% 卷第 , 期
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海南白桫椤孢子组织培养的研究!
蒋胜军 曾 霞 王胜培 庄南生
<华南热带农业大学农学院 6=>=?5@@6 A6B>C
摘要 对海南白桫椤的孢子组织培养技术进行了研究。结果表明：先用质量浓度 ’$)-.*/ 的赤
霉素01234预处理孢子囊 ’)-56，孢子萌发时间为 (78，比未经预处理的减少 ++)8；将预处理 ’)
-56 的孢子囊置于添加低浓度 922、:;、<2 的培养基中培养，可以使孢子萌发时间缩短至 =)D >!
8。在构建培养体系中，目前已得海南白桫椤的配子体增殖物。+?%!@A 培养基中添加 <2!%B$7
-.?/，9227$B+7-.?/，琼脂 ’7.?/ 有利于海南白桫椤的配子体增殖。
关键词 海南白桫椤；孢子；组织培养
中图法分类号 C(D(B3,’；C>+3B+%
7777桫椤科0!EFGH2F32F2 *2I3H2JK4植物是
真蕨纲植物中一个十分独特的类群。蕨类
植物一般为草本，但桫椤科植物的绝大部
分种类却具有树状的直立茎而呈乔木状，
故又称之为 “树蕨”。桫椤科植物是一种起
源古老和孑遗的植物，自然条件下，其繁
殖主要靠叶背产生的孢子进行E+F。目前桫椤
科植物仅残存于热带亚热带中某些环境特
别适宜的地区。由于生态环境的破坏，尤
其是森林资源的破坏，往往导致桫椤世代
交替受阻，再加上人们的不合理采挖，使
得桫椤的种群逐渐缩小，有些种类甚至处
于濒危状态E%F。
组织培养作为一种有效的快速繁殖手
段，对于满足桫椤科植物资源需求具有重
要意义，利用无菌保存0配子体或孢子体4技
术，可以不受自然条件影响，以有限空间
保存大量种质资源，既可满足人们观赏、
药用等方面的需求，还有助于缓解对野生
桫椤资源需求的压力，满足森林桫椤种群
的恢复对用苗的需要。
目前关于研究桫椤科植物组织培养技
术的报道少见。G5665H&IG0+(>=4、程治英
0+((+J7+((%4、
对桫椤科植物孢子组织培养特性进行了研
究 E3)D (F。@ULQVW5.HO+(=D4和 XQLYHLO+(=,4曾
用 !#$%&# #’($)#*+#( 的根茎尖成功诱导出不
定苗E+$F。毕世荣以桫椤O,*(-.%+*# (.+/’*-(#4
的嫩叶为外植体，获得了桫椤孢子体 E++F。
笔者选用海南特有的桫椤种———海南白桫
椤O0.%#&)-.$&)+( %#+/#/&/(+(4进行孢子组织
培养研究，以期为海南桫椤种质资源保护、
保存及利用提供新途径E+%F。
!材料与方法
!#!))材料
海南白桫椤于 +((( 年 , 月取自海南省
(& &
热带农业科学 第 !! 卷第 期!##! 年 $! 月
乐东县尖峰岭，海拔约 %&&’! (’&&&’)。
!#’’方法
采用孢子囊为接种外植体。第 ( 步，
孢子囊接种前进行 *&’)+,-’./0 预处理 &、
!、*、$&、!&’)12。预处理后的孢子囊先用
体积分数为 3#4的酒精浸泡 !&’! 0&’5，无菌
水冲洗 $ 遍，再用体积分数为 &6$4氯化汞
溶液消毒 7! %’)12，最后用无菌水冲洗 *
遍。接种于孢子萌发培养基：(,%’89’:’蔗糖
!6*’+,-’:’葡萄糖 !6*’+,-’:’琼脂 ;6%’+,-<=>7
*6%?，以观察不同预处理时间孢子囊中孢子
萌发的时间。第 ! 步，在上述培养基中再
添加 ;种生长调节剂 !@;AB、C//、DE、F/，
每种生长调节剂有 * 种质量浓度，分别为
&、&6$、&6*、$6&、!6&7)+,-，以观察各种
不同质量浓度生长调节剂对孢子囊内孢子
萌发的影响。第 0 步，配子体增殖培养基
设计为 $,!7897:7C//7&6$7)+,-7:7F/7&、&6$、
&6*、!6&7)+,-7:7琼脂 *7+,-<=>7*6%?，以观察
F/不同浓度对配子体增殖的影响。第 ;步，
配子体分化培养基为 $,!、$,;、$,%7897:7琼
脂 *7+,-<=>7*6%?。整个培养过程中温度 !07!
!%7，光照度 $7&&&7! $7*&&7GH，时间 $&7!
$!7I,J。
#$$结果与分析
#!77#$%预处理对孢子囊中孢子萌发的影
响
海南白桫椤孢子囊经 *&7)+,-7./0预处
理不同时间后接种培养，不同预处理时间
对孢子囊中的孢子萌发天数的影响如表 (
所示。
从表 ( 可以看出，在没有预处理的情
况下，海南白桫椤孢子囊内的孢子能在 !&7
J 萌发，而用 *&7)+,-7./0 预处理 !7! (&7
)12，均可不同程度地促进萌发，*7)12 为
最佳预处理时间，可将孢子囊内孢子的萌
发时间缩短至 K7J。试验结果同时表明，预
处理时间过长则会对孢子萌发产生抑制作
用。
##77孢子萌发培养基中生长调节剂对孢子
囊中孢子萌发的影响
在上一步结果的基础上，探讨孢子萌
发培养基中添加不同质量浓度生长调节剂
对孢子囊内孢子萌发时间的影响。从表 !
可以看出，在培养基中加入不同质量浓度
的 !@;AB 对孢子囊内孢子的萌发均有一定
程度的抑制作用，而低质量浓度的 C//、F/
和 DE<&6(7! &6*7)+,-?则都有一定程度的促进
作用。
#%77配子体的增殖和分化
配子体增殖培养基设计为 (,!7897:7C//7
&6(7)+,-7:7F/7&、&6(、&6*、!6&7)+,-7:7琼脂
*7+,-<=>7*6%?。结果表明：海南白桫椤由孢
子萌发形成的配子体在 F/ 质量浓度为 !6&7
)+,- 时增殖最佳，月增殖率达 (6*47! !4
<见图 (?。但目前还未得到海南白桫椤的分
(&A A
蒋胜军 等 海南白桫椤孢子组织培养的研究
化孢子体。
!讨论
孢子组织培养具有取材容易、不损害
母株、繁殖系数大等优点，是蕨类植物生
产上使用最广泛的繁殖途径。海南白桫椤
的孢子囊采用 !#预处理 $%&’(，在孢子萌
发培养基中添加 )*+,&-./,0、1*+,&-./,
2 或 134,&-./,56，可以促进孢子囊内孢子
的萌发，使萌发时间从 789 缩短至 :,! ;,9。
孢子萌发后形成的配子体可以进一步增殖
形成配子体丛<图 +=，但这个增殖过程仍显
较慢<月增殖率仅达 +*4>8! ?@=，还需进一步优化
培养基成分以使配子体的月增殖率提高。
虽通过不同无机盐浓度的 AB 培养基试验，
但均未能得到分化孢子体，这说明海南白
桫椤孢子体分化并不象见诸报道的其它蕨
类植物那么简单，除基本培养基的成分需
求外，可能还需要某些生长调节剂的诱导。
因此，对海南白桫椤孢子体分化的培养基
成分还需作进一步研究。
参考文献
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$$**毕世荣，苏成端，徐正兰，等H*桫椤组织培养
的研究H*植物生理学通讯，$5S6，!$9$;：=S
$!**吴兆洪，秦仁昌H*中国蕨类植物科属志H*北
京：科学出版社，$55$H*$5?*! $5S**
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