作 者 :李成磊
期 刊 :四川农业大学 2012年 07期 页码:128
关键词:苦荞;黄酮;黄酮合成相关酶类;RACE;半定量RT-PCR;原核表达;酶学分析;
摘 要 :苦荞是一种富含芦丁(槲皮素3-O-rutinoside)的药食两用小杂粮,因其具有降脂、降糖和抗氧化等保健作用而成为研究热点。现有研究集中在苦荞产品的开发、黄酮种类的鉴定和黄酮合成相关基因的克隆方面。但由于苦荞黄酮合成途径较为复杂,大多数参与黄酮(芦丁)合成相关基因在苦荞中并未得以克隆、生物学活性未得到验证、其参与逆境胁迫的研究较为薄弱。本研究通过同源克隆和RACE技术,克隆获得11个苦荞黄酮合成相关基因ORF序列;通过不同逆境胁迫,研究其黄酮合成相关基因表达与苦荞总黄酮含量的关系,分析影响苦荞总黄酮含量的关键基因;采用原核表达技术,重点分析了关键酶基因FtPAL和FtFLS编码蛋白的酶学特性...