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甘松不同溶剂提取物的抗氧化活性研究



全 文 :第 10 期 谢 昊,等:煤基碳基固体酸催化合成 1,2 取代苯并咪唑类衍生物
第 26 卷第 10 期
2 14 年 10 月
化 学 研 究 与 应 用
Chemical Research and Application
Vol. 26,No. 10
Oct.,2014
文章编号:1004-1656(2014)10-1591-06
甘松不同溶剂提取物的抗氧化活性研究
景临林1,马慧萍1,范小飞1,2,杜亮亮3,彭晓霞3,贾正平*
(1.兰州军区兰州总医院药剂科,甘肃 兰州 730050;2.兰州大学药学院,甘肃 兰州 730000;
3.甘肃中医学院,甘肃 兰州 730000)
摘要:采用 DPPH、ABTS、羟自由基、超氧阴离子和还原力五种体外抗氧化测定方法对甘松 95%乙醇提取物以
及石油醚萃取物,乙酸乙酯萃取物,正丁醇萃取物和水萃取物等 4 个不同极性部位的抗氧化活性进行评价,同
时分析抗氧化活性与其总多酚和总黄酮含量的相关性。研究结果表明,除水和石油醚萃取物外,甘松其他 3
个萃取物均表现出一定的抗氧化活性,且与总多酚和总黄酮含量呈显著相关。其中,乙酸乙酯萃取物中总黄
酮和总多酚含量最高,分别为(157. 22 ± 1. 89)mg·g -1和(99. 43 ± 1. 23)mg·g -1,其清除 DPPH、ABTS、超氧阴
离子和羟自由基的 IC50分别为(0. 20 ± 0. 02)mg·mL
-1、(0. 15 ± 0. 01)mg·mL -1、(0. 29 ± 0. 02)mg·mL -1和
(0. 35 ± 0. 02)mg·mL -1。甘松的乙酸乙酯萃取物具有显著的抗氧化活性,可以成为天然抗氧化活性化合物的
良好来源。
关键词:甘松;抗氧化活性;总黄酮;总多酚
中图分类号:O629. 9 文献标志码:A
Study on the antioxidant activity of different extracts
from Nardostachys chinensis batal
JING Lin-lin1,MA Hui-ping1,FAN Xiao-fei1,2,DU Liang-liang,PENG Xiao-xia3,JIA Zheng-ping1*
(1. Department of Pharmacy,Lanzhou General Hospital,Lanzhou Command of CPLA,Lanzhou 730050,China;
2. Department of Medicinal Chemistry,Lanzhou University,Lanzhou 730000,China;
3. Gansu college of Traditional Chinese Medicine,Lanzhou 730000,China)
Abstract:The antioxidant activity of the 95% ethanol crude extracts and their four solvent fractions(petroleum ether,ethyl acetate,
normal butyl alcohol and aqueous)of Nardostachys chinensis batal were evaluated using five free radical scavenging assay,including
DPPH radical,ABTS radical,hydroxyl radical,superoxide scavenging effect and reducing power. The relationship between the an-
tioxidant activity and the content of total phenolic and total flavonoid were analyzed. The results showed that all fraction except water
and petroleum ether fraction had great antioxidant activity and the content of total phenolic and total flavonoid had a highly signifi-
cant correlation with the activity. The ethyl acetate fraction was the most effective fraction with the highest content of total phenolics
(157. 22 ± 1. 89 mg·g -1)and total flavonoid(99. 43 ± 1. 23 mg·g -1). The IC50 values of ethyl acetate fraction based on DPPH,
ABTS,hydroxyl radical and superoxide were(0. 20 ± 0. 02)mg·mL -1,(0. 15 ± 0. 01)mg·mL -1,(0. 29 ± 0. 02)mg·mL -1 and
(0. 36 ± 0. 02)mg·mL -1. Ethyl acetate fraction of Nardostachys chinensis batal,a strong ability to act as antioxidant,might be con-
sidered as a natural source of active compounds.
收稿日期:2014-03-25;修回日期:2014-06-15
基金项目:国家自然科学基金项目(81202458)资助;全军医药科研“十二五”面上项目(CLZ12JA04)资助;中国博士后科学基金项目
(2012M521926)资助
联系人简介:贾正平(1957-),男,主任药师,主要从事天然产物化学。E-mail:lfjinglinlin@ 163. com
化 学 研 究 与 应 用 第 26 卷
Key words:Nardostachys chinensis batal;antioxidant activity;total flavonoid;total phenolic
自由基是人体组织有氧代谢过程中的代谢产
物,在正常生理状态下,自由基的产生和清除处于
动态平衡,发挥着起着重要的生理作用[1]。但在
某些病理条件下,生物机体内自由基代谢紊乱,浓
度升高,机体抗氧化系统遭到破坏;高浓度自由基
攻击蛋白质和酶,使其结构破坏,功能丧失,导致
物质代谢和能量代谢障碍;攻击 DNA 分子,使其
发生突变甚至发生断裂,从而诱发机体病变。越
来越多的证据表明:心血管疾病,神经退行性疾
病,癌症和衰老等疾病的发生发展与自由基代谢
异常密切相关[2]。抗氧化剂能够保护身体免受自
由基诱导的氧化应激损伤,但是传统的人工合成
抗氧化剂存在一定的毒副作用,可能会引起肝脏
损伤,甚至诱发癌症[3]。因此,从天然产物,尤其
是可食用或药用植物中寻找高效、低毒、安全、有
效的天然抗氧化剂成为科研工作者研究热点。
甘松为败酱科 Valerianaceae 植物甘松 Nar-
dostachys chinensis Batal 的带根全草,主要生长在
海拔 3500 ~ 4100 米以上的草原、山坡和高山草
甸,为藏医常用植物药,又名赤青、推马尔、然巴
问、玖布伟热巴,咱帝热问、赤青推玛尔[4],分布在
我国西藏、青海、四川、云南、甘肃等省,具有理气
止痛、开郁醒脾、安神等功效,现代药理研究表明:
甘松具有镇静、抗癫痫、抗抑郁、降血压、抗心律失
常、抑菌、抗疟[5]和抗氧化[6]等多种药理活性,主
要活性成分有萜类、黄酮类、香豆素类、木脂素类
和多糖等。本文采用 DPPH、ABTS、羟自由基、超
氧阴离子和还原力五种体外抗氧化测定方法对甘
松 95%乙醇提取物以及石油醚萃取物,乙酸乙酯
萃取物,正丁醇萃取物和水萃取物等 4 个不同极
性部位的抗氧化活性进行研究,并测定其总多酚
和总黄酮含量,进行相关性分析,为进一步研究甘
松的抗氧活性及资源开发利用提供依据。
1 材料与方法
1. 1 材料与仪器
甘松购自青海西宁三江宝商贸有限公司,并
经兰州大学药学院生药研究所杨永健教授鉴定为
甘松(Nardostachys chinensis batal)。
1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、菲啰嗪
(Ferrozine)、2,2'-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-
磺酸)二铵盐(ABTS)sigma 公司;抗坏血酸(VC)、
还原型辅酶 I(NADH)、钼酸铵、吩嗪硫酸甲酯
(PMS)、硫代巴比妥酸(TBA)、氯化硝基四氮唑蓝
(NBT)阿拉丁试剂公司;水杨酸标准品、芦丁标准
品中国食品药品检定研究院;硝酸铝、氢氧化钠、
过硫酸钾、钨酸钠、钼酸钠、亚硝酸钠、磷酸钠、三
氯乙酸(TCA)、硫酸、盐酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二
钠等均为市售分析纯试剂。
RE52CS型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器
厂);DJ-04B小型中药粉碎机(上海鼎广机械设备
有限公司);Spectramax i3 多功能酶标仪 Molecular
Devices公司;AE204 型电子天平(梅特勒-托利多
仪器有限公司);SK3300L 超声清洗器(上海精密
仪器仪表有限公司);UV2800SPC紫外可见分光光
度计(上海舜宇恒平科学仪器有限公司)。
1. 2 实验方法
1. 2. 1 提取方法 甘松干药材用粉碎机粉碎,准
确称量 100g 药材粉末,用 500mL 95%乙醇浸泡
12h,超声提取 30min,再回流提取 2h,趁热过滤,
重复上述操作两次,合并滤液,减压浓缩得到棕色
浸膏,为甘松 95%醇提部位(14. 58g)。提取物加
5 倍量的蒸馏水超声 30min后得到悬浮液,将其移
置 500mL分液漏斗中,依次用等体积的石油醚、乙
酸乙酯、正丁醇分别萃取 3 次,合并各自萃取液并
保留水相,减压除去溶剂后,真空干燥至恒重,得
到不同溶剂萃取物,分别为石油醚萃取物
(2. 85g),乙酸乙酯萃取物(3. 36g),正丁醇萃取物
(2. 10g)和水萃取物(3. 06g)。
1. 2. 2 抗氧化活性的测定 (1)DPPH 自由基清
除实验:不同浓度(0. 05-0. 6mg·mL -1)的 95%乙
醇样品溶液 125μL,分别加入 125μL 0. 1mmol·L -1
DPPH 95%乙醇溶液中,暗处室温反应 30min,以
95%乙醇溶剂做空白对照,测量其在波长 517nm
处的吸光度(Ai)。用 125μL 95%乙醇溶液代替样
品溶液,测定吸光度(A0);用 125μL 95%乙醇溶液
代替 DPPH,测得吸光度(Aj)。按(1)式计算其清
除率[7],并计算其 IC50。
清除率(%)=[1 -(Ai - Aj]/A0]× 100 (1)
(2)ABTS +·自由基清除实验:将 7mmol·L -1
ABTS 溶液与 2. 45mmol·L -1过硫酸钾等体积混合
2951
第 10 期 景临林,等:甘松不同溶剂提取物的抗氧化活性研究
后,暗处反应 12 - 16h,制备 ABTS +·。用 95%乙醇
将 ABTS +·溶液稀释至其在波长734nm 处吸光度
为 0. 70 ± 0. 02。将 100μL不同浓度(0. 05-0. 6mg·
mL -1)95%乙醇样品溶液加入 3. 9mL ABTS +·溶
液中,室温放置 10min,测量其在波长 734nm 处的
吸光度(Ai)。用 100μL 95%乙醇代替样品溶液,
测得吸光度(A0);3. 9mL 95% 乙醇溶液代替
ABTS +·溶液,测得吸光度(Aj)。按(1)式计算其
清除率[8],并计算其 IC50。
(3)超氧阴离子自由基清除实验:不同浓度
(0. 1 - 1. 6 mg·mL -1)95%乙醇样品溶液 100μL,
依次加入 50μL 500μmol·L -1的 NADH(溶解于
0. 2mol·L -1 磷酸盐缓冲液,pH = 7. 4)、50μL
200μmol·L -1的 NBT和 50μL 20μmol·L -1的 PMS。
置于 25℃条件下反应 8min,测量其在波长 560nm
处的吸光度(Ai)。向 100μL 95%乙醇中依次加入
50μLNADH、50μLNBT 和 50μLPMS,测定吸光度
(A0);向 100μL 样品溶液中依次加入用 50μL
NADH、50μL NBT 和 50μL 蒸馏水,测得吸光度
(Aj)。按(1)式计算其清除率
[9],并计算其 IC50。
(4)羟自由基清除实验:不同浓度 95%乙醇
样品溶液(0. 062 5 - 1. 0mg·mL -1)500μL,依次加
入 28mmol·L -1 脱氧核糖(溶于 PH = 7. 0 的
0. 2mmol PBS 磷酸缓冲液)中 50μL、1mmol·L -1的
EDTA 50μL、1mmol·L -1 的氯化亚铁 50μL 和
1mmol·L -1的 H2O250μL,最后加入 1mmol·L
-1的
抗坏血酸 50μL启动反应,37℃水浴孵育 1h,加入
10%三氯乙酸 250μL终止反应,再加入 0. 5% TBA
(溶于 25mmol·L -1的 NaOH溶液)250μL,105℃孵
育 0. 5h,于 532 nm 处测得吸光度(Ai),500μL 蒸
馏水中依次加入 50μL 脱氧核糖、50μL EDTA、
50μL氯化亚铁、50μL H2O2 和 50μL 抗坏血酸,最
后加入 250μL三氯乙酸和 TBA,操作同前,测得吸
光度(A0),500μL样品溶液中依次加入 50μLPBS、
50μL EDTA、50μL 氯化亚铁、50μL H2O2 和 50μL
抗坏血酸,最后加入 250μL三氯乙酸和 TBA,操作
同前,测得吸光度(Aj)。按(1)式计算其清除
率[10],并计算其 IC50。
(5)还原力测定实验:不同浓度 95%乙醇样
品溶液(0. 1-0. 5mg·mL -1)1. 0mL,加入 0. 2moL·
L -1的磷酸盐缓冲液(pH = 6. 6)2. 5mL和 1%的铁
氰化钾溶液 2. 5 mL,50℃水浴孵育 20min,快速冷
却,然后加入 2. 5mL 10%(W/V)三氯乙酸溶液,混
合溶液 3000 rpm 离心 10min,精密吸取上清液
2. 5mL,加入 2. 5mL蒸馏水和 0. 5mL 0. 1%的三氯
化铁溶液,在 700nm 处测吸光度 A,吸光度值越
大,还原力越强[11]。
1. 2. 3 含量测定 (1)总黄酮含量测定:将
0. 5mL的不同浓度的芦丁标准品溶液(0 - 140μg·
mL -1)置于一 2mL 离心管中,加入 5%NaNO2 溶液
50 μL,摇匀,静置 6min,加入 10% Al(NO3)3 溶液
50μL,摇匀,静置 6min,最后加入的 1mol·L -1
NaOH溶液 250μL,摇匀,静置 15min,510nm 波长
处测吸光值,重复三次,取平均值。以芦丁的质量
浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲
线。根据芦丁标准曲线,按照相同方法求得各样
品中总黄酮含量[12]。
(2)总酚含量的测定:将 0. 1mL 的不同浓度
的没食子酸标准品溶液(0-140μg·mL -1)置于一
4mL 离心管中,加入 1mL 福林-薛多卡(Folin-Cio-
calteu)试剂,振荡 5min后加入 1mL 7% Na2CO3 溶
液充分混匀,室温放置 5h,760nm 波长处测吸光
值,重复三次,取平均值。以没食子酸的质量浓度
为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。根
据没食子酸标准曲线,按照相同方法求得各样品
中总多酚含量[13]。
1. 3 数据处理
实验数据采用 Excel 处理、SPSS19. 0 软件进
行双变量相关性分析和线性回归,所有数据均以
平均数 ±标准偏差(x ± s)表示。
2 结果与分析
2. 1 甘松乙醇提取物不同溶剂萃取物对 DPPH
自由基的清除作用
DPPH 是一种稳定的紫色自由基,在波长
517nm处有最大吸收。当其遇到自由基清除剂
时,DPPH自由基浓度减小,紫色变浅,吸光度值变
小,且成一定的化学计量关系,该方法简便、灵敏
可靠,广泛应用于水果、蔬菜和天然中药材提取物
中抗氧化活性物质的筛选。
由图 1 和表 1 可知,乙醇提取物不同溶剂萃
取物对 DPPH 自由基清除能力存在显著差异,且
在 0. 05 - 0. 6mg·mL -1浓度范围内呈明显的量效
关系。其中,乙酸乙酯萃取物的 IC50为(0. 20 ±
0. 02)mg·mL -1,虽显著高于 VC的 IC50(0. 025 ±
3951
化 学 研 究 与 应 用 第 26 卷
0. 003)mg·mL -1,但仍然表现出较高的自由基清
除能力。正丁醇萃取物和 95%醇提物清除 DPPH
自由基能力相当,IC50分别为(0. 38 ± 0. 07)mg·
mL -1和(0. 39 ± 0. 04)mg·mL -1,而石油醚萃取物
和水萃取物对 DPPH清除作用较弱。
图 1 甘松乙醇提取物不同溶剂萃取物
对 DPPH自由基的清除率
Fig. 1 DPPH radical scavenging activity of different
extract from N. chinensis batal
2. 2 甘松乙醇提取物不同溶剂萃取物对 ABTS 自
由基的清除作用
ABTS +·是稳定的绿色自由基,最大吸收波长
在 734nm。抗氧化物质与 ABTS +·反应后吸光度的
变化,直接反应出样品抗氧化能力的大小。由图 2
和表 1可知,除石油醚和水萃取物外,其他三个极性
部位对 ABTS +·自由基均表现出一定的清除能力,
且有明显的量效关系。其中乙酸乙酯萃取物对
ABTS +·清除能力最强,在质量浓度 0. 6mg·mL -1
时,清除率可达 98. 64%。不同极性部位清除 ABTS +
·自由基的能力顺序为:乙酸乙酯萃取物 >95%醇提
物 >正丁醇萃取物 >石油醚部位 >水萃取物。
图 2 甘松乙醇提取物不同溶剂萃取物
对 ABTS自由基的清除率
Fig. 2 ABTS radical scavenging activity of different
extract from N. chinensis batal
2. 3 甘松乙醇提取物不同溶剂萃取物对超氧阴
离子(O2
-·)的清除作用
超氧阴离子自由基(O2
-·)是机体产生的一
种有害自由基,可诱发脂质过氧化,导致细胞膜结
构和功能的改变,造成器官组织损伤。文中采用
PMS-NADH-NBT体系测定超氧阴离子清除能力。
PMS与 NADH作用产生超氧阴离子,超氧阴离子
与 NBT反应生成蓝色物质 formazane,该化合物在
560nm 处具有强吸光度,还原性物质可减少
formazane的生成,降低 560nm波长处的吸光度,从
而反映出对超氧阴离子清除能力。图 3 和表 1 的
结果表明:乙酸乙酯萃取物对超氧阴离子自由基
有较强的清除能力,且活性与 Vc 相当。正丁醇萃
取物和 95%醇提物对超氧阴离子自由基清除能力
相当,均较弱,石油醚萃取物与水萃取物对超氧阴
离子自由基清除作用最弱。清除能力顺序为:乙
酸乙酯萃取物 >正丁醇萃取物 = 95%醇提物 >水
萃取物 =石油醚萃取物。
图 3 甘松乙醇提取物不同溶剂萃取物
对 O2
-·的清除率
Fig. 3 Superoxide radical scavenging activity of different
extract from N. chinensis batal
2. 4 甘松乙醇提取物不同溶剂萃取物对羟自由
基(·OH)清除作用
·OH是 ROS家族的重要一员,其能杀死红细
胞,降解 DNA、细胞膜和多糖化合物,造成生物大
分子的损伤和遗传的变异。从图 4 和表 1 可知,
在测试浓度范围内,甘松不同极性部位清除羟基
自由基的能力随样品浓度增大而逐渐增强,但均
弱于 Vc对羟基自由基的清除作用。各极性部位
对羟基自由基清除能力强弱顺序为:乙酸乙酯萃
取物(IC50 = 0. 29 ± 0. 02mg·mL
-1)> 95%醇提物
(IC50 = 0. 66 ± 0. 03mg·mL
-1)> 正丁醇萃取物
(IC50 = 0. 80 ± 0. 03mg·mL
-1)>水萃取物(IC50 =
4951
第 10 期 景临林,等:甘松不同溶剂提取物的抗氧化活性研究
8. 75 ± 0. 17mg·mL -1)> 石油醚萃取物(IC50 =
20. 18 ± 0. 14mg·mL -1)。
图 4 甘松乙醇提取物不同溶剂萃取物对·OH的清除率
Fig. 4 Hydroxyl radical scavenging activity of different
extract from N chinensis Batal
2. 5 甘松乙醇提取物不同溶剂萃取物的还原力
测定
物质的还原能力与其抗氧化活性之间有一定
的相关性,铁氰化钾被还原性物质还原成亚铁氰
化钾,亚铁氰化钾与三价铁离子反应,生成普鲁士
蓝,其在最大吸收波长在 700 nm。吸光度越大,还
原能力越强。从图 5 可以看出:乙酸乙酯萃取物
还原能力最强,正丁醇萃取物和 95%醇提物的还
原能力相当,表现出弱的还原力,而石油醚萃取物
和水萃取物几乎没有还原能力。
图 5 甘松乙醇提取物不同溶剂萃取物部位的还原力
Fig. 5 Reduce power of different extract
from N chinensis Batal
表 1 甘松乙醇提取物不同溶剂萃取物对 4 种抗氧化评价方法的清除率 IC50(mg·mL
-1)
Table 1 The IC50 of different extracts from N. chinensis batal by four antioxidant assays
有效部位 DPPH ABTS ·OH O2
-·
95%醇提部位 0. 39 ± 0. 04 0. 34 ± 0. 02 0. 66 ± 0. 03 2. 76 ± 0. 05
石油醚部位 7. 56 ± 0. 18 1. 55 ± 0. 12 20. 18 ± 0. 14 4. 90 ± 0. 67
乙酸乙酯部位 0. 20 ± 0. 02 0. 15 ± 0. 01 0. 29 ± 0. 02 0. 35 ± 0. 02
正丁醇部位 0. 38 ± 0. 06 0. 44 ± 0. 03 0. 80 ± 0. 03 3. 15 ± 0. 04
水提部位 5. 66 ± 0. 13 4. 34 ± 0. 23 8. 75 ± 0. 17 4. 56 ± 0. 03
Vc 0. 025 ± 0. 003 0. 016 ± 0. 004 0. 044 ± 0. 003 0. 58 ± 0. 02
2. 6 甘松乙醇提取物不同溶剂萃取物总黄酮含
量测定
样品中的总黄酮含量由芦丁标准曲线:Y =
6. 939 9X-0. 002 3(R2 = 0. 999 8)换算得来,各极
性部位的总黄酮含量如表 2 所示:乙酸乙酯萃取
物中黄酮类化合物含量最高,为(157. 22 ± 1. 89)
mg·g -1,石油醚萃取物的含量最低,仅(10. 47 ±
0. 18)mg·g -1;95%醇提物和正丁醇萃取物中黄酮
含量较多,分别为(67. 58 ± 0. 63)mg·g -1和(71. 73
± 1. 84)mg·g -1,然后是水萃取物,为(21. 64 ±
0. 35)mg·g -1。
2. 7 甘松乙醇提取物不同溶剂萃取物总多酚含
量测定
样品中的多酚含量由没食子酸标准曲线:Y =
5. 834 3X + 0. 008 6(R2 = 0. 998 8)换算得来,各提
取部位的多酚含量如表 2 所示:乙酸乙酯萃取物
中多酚类化合物含量最高,为(99. 43 ± 1. 23)mg·
g -1,然后依次是 95%醇提物、正丁醇萃取物和石
油醚萃取物,分别是(50. 09 ± 1. 07)mg·g -1、(34. 86
±1. 71)mg·g -1、(23. 52 ±0. 94)mg·g -1。水萃取物多
酚含量最低,仅为(12. 10 ±1. 65)mg·g -1。
表 2 甘松乙醇提取物不同溶剂萃取物中总黄
酮和总酚含量测定(mg·g -1)
Table 2 Total flavonoid and phenolic content in
different extracts from N. chinensis batal
有效部位 总黄酮含量 总酚含量
95%醇提部位 67. 58 ± 0. 63 34. 86 ± 1. 71
石油醚部位 10. 47 ± 0. 18 12. 10 ± 1. 65
乙酸乙酯部位 157. 22 ± 1. 89 99. 43 ± 1. 23
正丁醇部位 71. 73 ± 1. 84 50. 09 ± 1. 07
水提部位 21. 64 ± 0. 35 23. 52 ± 0. 94
2. 8 多酚、黄酮含量与抗氧化活性相关性分析
研究表明:植物的抗氧化活性与其多酚和黄
酮含量有密切相关,通过对甘松不同极性部位的
5951
化 学 研 究 与 应 用 第 26 卷
多酚和黄酮含量进行测定,并进行相关性分析,通
过统计学分析甘松产生抗氧化活性的物质基础。
表 3 甘松抗氧化活性与其总黄酮含量和
多酚含量的相关系数(r)
Table 3 Correlations between the antioxidant activity and
total phenolics and flavonoids content of N. chinensis batal
抗氧化能力
相关系数(r)
总黄酮含量 多酚含量
DPPH(IC50值) - 0. 795* - 0. 727*
ABTS(IC50值) - 0. 641* - 0. 547
·OH(IC50值) - 0. 736* - 0. 689*
O2
-·(IC50值) - 0. 994** - 0. 962**
由表 4 可见,甘松各极性部位对 O2
-·的清除
能力与总黄酮和总多酚含量高度相关,对 ABTS 的
清除能力与总黄酮含量的相关性大于总多酚。总
的来说,各极性部位对四种自由基的清除能力与
总多酚和总黄酮含量均显示出正相关性,但是与
总黄酮相关性更高。综合抗氧化实验结果可以看
出:甘松的乙酸乙酯萃取物抗氧化活性最好,应与
其总多酚和总黄酮的含量最高有关;而甘松水和
石油醚萃取物中总黄酮和总多酚含量均较小,其
抗氧化活性也最差。这就说明:甘松 95%乙醇提
取物抗氧化的物质基础可能是具有中等极性的黄
酮和多酚类化合物。
3 结 论
甘松提取物不同极性部位的体外抗氧化研究
结果表明:除了石油醚和水萃取物外其他三个极
性部位对 DPPH、ABTS、·OH、O2
-·和还原力均表
现出一定的抗氧化能力,其活性部位主要集中在
中等极性化合物上。其中以乙酸乙酯萃取物的活
性较强,而极性较小的石油醚萃取物和极性较大
水萃取物抗氧化作用相对较弱,这提示乙酸乙酯
萃取物和正丁醇萃取物是甘松 95%乙醇提取物抗
氧化活性的主要部位。经抗氧化活性与多酚和黄
酮含量相关性数据分析显示,甘松抗氧化活性与
总黄酮和多酚含量密切关系相关,提示黄酮和多
酚类化合物可能是甘松 95%乙醇提取物抗氧化作
用的物质基础。总的来说:甘松中等极性部位提
取物,特别是乙酸乙酯部位提取物,含有大量的黄
酮和多酚类化合物,表现出较好的抗氧化活性,具
有开发成为天然抗氧化物的潜力,可将其作为分
离甘松中抗氧化活性成分的重点。
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(责任编辑 罗 娟)
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