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东北鹤虱胶囊的抗炎 、镇痛 、抗菌作用实验研究 *
[摘 要]目的:观察东北鹤虱胶囊的抗炎 、镇痛及抗菌作用 。方法:以小鼠耳廓二甲苯致炎法 ,观察其抗炎作用;以化
学致痛法 , 观察其对小鼠的止痛作用;并通过体外抑菌实验观察其抗菌作用 。结果:该药明显抑制二甲苯所致的小
鼠耳廓肿胀(P <0.05),显著减少醋酸引起的小鼠扭体反应次数 (P <0.01);该药对球菌的作用相对较明显 , 尤以
金黄色葡萄球菌最显著 。结论:该药具有镇痛 、抗炎和抗菌作用 ,但对肠道菌群影响不明显 。
[关键词] 东北鹤虱胶囊;抗炎;镇痛;抗菌
张 卉 ,高建华 ,孟 林
(天津医科大学基础医学院药理教研室 ,天津 300070)
*天津市自然科学基金项目(编号:003608511)
作者简介:张卉(1970-),女 ,副主任药师 ,学士学位 ,研究方向:中药
开发;孟林(1953-),女 ,副教授 ,学士学位 ,研究方向:中药药理。
[中图分类号] R961 [文献标识码] A [文章编号] 1006-8147(2004)04-0492-04
Experimental study of anti-inflammatory , analges ic
and antibiotic effects of dongbei heshi capsule
ZHANG Hui ,GAO Jian-hua ,MENG Lin
(Depar tment o f Pharmacology , School o f Basic Medicine , Tianjin Medical Unive rsity , Tianjin 300070 , China)
ABSTRACT Objective:To obse rve the anti-inflammatory , analgesic and ant ibio tic effects o f
Dongbei Heshi Capsule.Methods:The ef fects o f Dongbei Heshi Capsule on xy lene-induced
mouse ear acute inf lamma to ry reaction and acid-induced w ri thing we re studied in control mice
and treated mice w i th Dongbei Heshi Capsule in three do ses.The inhibi to ry ef fect on bacteria
w as studied in vi t ro.Results:This drug could signif icant ly suppress x ylene-induced mouse ear
edema(P <0.05)and markedly decrease the w rithing t imes of mice induced by ace tic acid
(P<0.01) .T his drug had antibacterial ef fects to cocci in vit ro , especially best to staphylo-
coccus aureus(s.aureus).Conclusion:T he resul ts show tha t Dongbei Heshi Capsule has anti-
inflammatory , analgesic and antibio tic ef fects , but it s anti-infestinal flo ra ef fect is notpromi-
nent.
KEY WORDS Dongbei Heshi Capsule;Anti-inf lammato ry ef fect;A nalgesic effect;Antibi-
ot ic effect
东北鹤虱 , 又名异刺鹤虱 , 属紫草科鹤虱属植
物 , 以其干燥成熟果实入药 [1 ] ,未被收集在《中华人
民共和国药典》 2000年版一部中 , 目前对其研究很
少。但民间用其果实或全草水煎治疗各种腹痛 、 腹
泻 , 尤其对顽固性腹泻有良好的疗效。由天津医科
大学基础医学院药理教研室及药学院中草药化学教
研室联合研制的东北鹤虱胶囊制剂 , 在动物实验中
已经证实其良好的抗腹泻作用 。本文对其抗炎 、 镇
痛及抗菌作用进行实验研究 , 从另一侧面探讨该药
抗腹泻作用的多面性。
1 材料与方法
1.1 药物及试剂 东北鹤虱胶囊剂:由天津医科大
学基础医学院药理教研室及天津医科大学药学院中
草药化学教研室联合制备 (2.3 g 生药/粒);阿司
匹林片 , 山东烟台西苑制药厂 , 批号:021102;二甲
苯 ,天津化学试剂二厂(分析纯),批号:021210;药敏
纸片(6.3 mm):氟哌酸 、丁胺卡那 、庆大霉素 、先锋
Ⅴ 、氯霉素 、环丙沙星 、复方新诺明 、红霉素 、链霉素 、
氨苄青霉素 、青霉素。
第 10 卷 天津医科大学学报 Vo l.10
第 4 期 J TM U 2004 No.4
493
表 1 东北鹤虱胶囊剂对二甲苯致小鼠耳炎症的影响度
对照组
阿司匹林组
东北鹤虱胶囊
组别 剂量(g/kg) 肿胀度(mm) 抑制率(%)
-
44.94
28.33
24.72
13.86
与对照组比较*P<0.05, **P<0.01 , 与阿司匹林组比
较#P<0.05
0.2
0.2
10
5
1
(x ±s)
1.2 动物 昆明种小鼠 150只 , 体重 18 g ～ 22 g ,
雌雄各半 ,由天津市利居生物用品供应中心提供。
1.3 菌种与培养基 杆菌:肠炎沙门氏菌 、伤寒沙
门氏菌 、甲型副伤寒沙门菌 、乙型副伤寒沙门菌 、阴
沟肠杆菌 、大肠埃希菌 、肺炎克雷伯菌 、沙雷氏菌 、痢
疾杆菌 、福氏志贺菌 、耶尔森菌 、雷极菌 、奇异变形杆
菌 、摩根菌 、绿脓杆菌 、洋葱假单胞菌;球菌:金黄色
葡萄球菌 、表皮葡萄球菌 、腐生葡萄球菌 、A群链球
菌 、草绿色链球菌 ,由中国药品生物制品检定所和天
津医科大学检验系病原生物教研室提供。培养基:
营养肉汤 、 MH 培养基 、普通培养基 , 均按文献方
法 [ 2]配制 。
1.4 仪器 电光分析天平 TG 3288 ,上海天平仪器
厂;恒温培养箱 ,天津市中环实验电炉有限公司 。
1.5 方法
1.5.1 小鼠耳廓二甲苯致炎法 [ 3] 取小鼠 100
只 ,随机分为 5组 ,对照组 、阿司匹林组(0.2 g/kg)、
东北鹤虱胶囊剂 3个剂量组(相当生药量 1 、5 、10 g/
kg)。动物连续灌胃给药 7天 ,于最后一次给药后 30
m in ,在小鼠右耳前 、后两面涂布致炎剂二甲苯 0.02
m l/只 , 左耳不做任何处理 。15 min后拉颈处死动
物 , 以直径 6 mm 打孔器将小鼠双侧耳朵相同部位
等面积切下 ,电光分析天平称重 。以左 、右耳重量之
差为肿胀度 ,比较各组肿胀度及肿胀抑制率。
1.5.2 小鼠化学致痛法 [3 ] 取健康小鼠 50只 , 随
机分为 5组 ,对照组 、阿司匹林组(0.2 g/kg)、东北
鹤虱胶囊剂 3个剂量组 (相当生药量 1 、 5 、 10 g/
kg)。动物连续灌胃给药 7天 ,于最后一次给药后 30
m in腹腔注射 0.6%醋酸溶液 0.2 ml/只。醋酸引起
腹腔脏层和壁层较大面积的炎性疼痛 , 致使小鼠出
现腹部内凹 、躯干与后肢伸张 、臀部高起等行为反
应 。为便于记录 , 腹部和后肢因刺激而伸长一次定
义为一次扭体反应 , 该反应在注射 15 min 内最明
显 , 故记录注射后 15 min内各鼠扭体次数 , 并进行
统计学处理 。计算抑制百分率:对照组平均扭体数
减去给药组平均扭体数除以对照组平均扭体数乘以
100%,并以此观察该药的镇痛作用。
1.5.3 体外抑菌实验 初筛东北鹤虱胶囊对各菌
的敏感程度 ,实验分前后两轮进行 ,所采用的方法相
同 , 均先将各菌种接种至普通培养基 , 温箱 37 ℃孵
育过夜 ,以分离出单个菌落 。各菌分别挑取 3 ～ 4菌
落接种至营养肉汤中 ,温箱 37℃,培养 4 h 。测定该
药及各药敏纸片对各菌的敏感程度 , 其中待测药液
以打孔法将药液加至 MH 培养基上 , 其它药敏纸片
直接粘于 MH 培养基上。
首轮所用球菌为金黄色葡萄球菌 、 表皮葡萄球
菌 、腐生葡萄球菌;药物为环丙沙星 、复方新诺明 、红
霉素 、链霉素 、氨苄青霉素 、待测药液;杆菌为肠炎沙
门氏菌 、伤寒沙门氏菌 、甲型副伤寒沙门菌 、乙型副
伤寒沙门菌 、阴沟肠杆菌 、大肠埃希菌 、肺炎克雷伯
菌 、沙雷氏菌 、痢疾杆菌 、福氏志贺菌 、耶尔森菌 、雷
极菌 、奇异变形杆菌 、摩根菌;药物为氟哌酸 、丁胺卡
那 、庆大霉素 、先锋Ⅴ、氯霉素 、待测药液 。
二轮所用球菌为金黄色葡萄球菌 、 表皮葡萄球
菌 、草绿色链球菌 、A群链球菌;药物为环丙沙星 、复
方新诺明 、红霉素 、链霉素 、氨苄青霉素 、青霉素 、待
测药液;杆菌为痢疾杆菌 、福氏志贺菌 、大肠埃希菌 、
伤寒沙门氏菌 、洋葱假单胞菌 、绿脓杆菌;药物为氟
哌酸 、丁胺卡那 、庆大霉素 、先锋Ⅴ 、氯霉素 、氨苄青
霉素 、待测药液 。
每个菌种接种于 2个 MH 培养基进行药敏试
验 , 将接菌 、加药的培养基置 37 ℃培养 18 h , 测量
抑菌环(药敏纸片直径 6.3 mm , 打孔器孔径约为 7
mm)。
1.6 统计学方法 实验数据以 x ±s 表示 , 应用
SPSS 11.0统计软件包 One -Way ANOVA 进行
统计学分析。
2 结果
2.1 东北鹤虱胶囊剂对二甲苯致小鼠耳炎症的影
响 表 1结果表明 , 二甲苯可致小鼠耳出现炎症反
应 , 阿司匹林能明显减轻小鼠的炎症反应 (P <
0.01),东北鹤虱胶囊剂大剂量组也能抑制小鼠出现
炎症反应 (P <0.05), 且与阿司匹林组无明显
差别 。
2.2 东北鹤虱胶囊剂对醋酸致小鼠疼痛作用的影
响 表 2结果表明 ,腹腔注射醋酸后可引起小鼠疼
8.02±3.59
4.41±3.01* *
5.74±2.99*
6.03±3.22
6.17±3.55#
494
表 3 东北鹤虱胶囊首轮抑制杆菌情况
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
肠炎沙门氏菌
伤寒沙门氏菌
甲型副沙门氏菌
乙型副沙门氏菌
阴沟肠杆菌
大肠埃希菌
肺炎克雷伯菌
沙雷氏菌
痢疾杆菌
福氏志贺菌
耶尔森菌
雷极菌
奇异变形杆菌
摩根菌
34
24
35
33
36
28
29
35
30
-
30
35
14
30
21
20
20
21
22
22
23
21
22
20
26
22
17
20
26
20
22
24
24
22
23
22
22
11
28
22
-
22
20
22
23
24
11
23
24
-
24
20
15
23
19
-
28
30
27
25
24
26
24
26
30
15
30
27
-
12
12
9
16
14
-
13
-
-
16
-
-
17
-
-
编号 菌名
13(可疑)
10(可疑)
-
-
12
9/8
-
-
12/12
11/12
12/12
-
-
10/9
表 4 东北鹤虱胶囊首轮抑制球菌情况
编号 菌名 药物抑菌环直径(mm)环丙沙星 复方新诺明 红霉素 链霉素 氨苄青霉素 待测药
25
26
26
金黄色葡萄球菌
表皮葡萄球菌
腐生葡萄球菌
24
24
22
26
30
26
20
26
22
26
16
20
15
16
17
13/18
11/11
9/9
痛并出现扭体反应。阿司匹林能明显减轻小鼠的疼
痛反应(P <0.01), 各给药组也均能抑制小鼠出现
疼痛反应 (P <0.01), 且与阿司匹林组无明显差
别。东北鹤虱胶囊对疼痛的抑制率可超过 60%,根
据H.Gernard Vogel的镇痛药筛选方法 ,认为东北
鹤虱胶囊剂具有镇痛作用 。
2.3 东北鹤虱胶囊剂抑菌情况的观察 表 3 ～ 6结
果表明两轮实验中 , 同一菌种对同一药物的敏感或
耐药程度基本相似 , 说明实验结果较为可靠;首轮
中可看出 , 甲型副伤寒沙门菌 、乙型副伤寒沙门菌 、
肺炎克雷伯菌 、沙雷氏菌 、雷极菌 、奇异变形杆菌 6
种菌对该药物不敏感;首轮中 , 肠炎沙门氏菌 、伤寒
沙门氏菌二菌的抑菌环不够明显 , 而二轮中伤寒沙
门氏菌对该中药具有耐药性 , 说明该中药对伤寒沙
门氏菌无抑制作用;两轮比较 , 福氏志贺菌首轮抑
菌环不规则 , 二轮抑菌环几乎没有 , 因此一轮的抑
菌环也有可能是由药液扩散所致;对洋葱假单胞
菌 , 氟哌酸可能具有促进该中药抑菌作用;二轮中 ,
痢疾杆菌药环形状可疑 , 可能为先锋Ⅴ与该中药具
有相加作用所致;该中药对球菌的作用相对较明
显 , 尤以金黄色葡萄球菌为显著 , 但作用不及其它
抗生素。该中药对草绿色链球菌 、A 群链球菌两菌
的抑菌环具有内外双环 , 环的直径较大 , 还需进一
步验证。与对照组比较
*P<0.01
对照组
阿司匹林组
东北鹤虱胶囊
组别 药物剂量(g/kg) 扭体次数 疼痛抑制率(%)
-
78
64
66
61
0.2
0.2
10
5
1
表 2 东北鹤虱胶囊剂对醋酸致小鼠疼痛作用的影响
45.20±4.83
9.80±9.59*
15.90±10.57*
15.20±10.29*
17.70±6.15*
药物抑菌环直径(mm)
氟哌酸 丁胺卡那 庆大霉素 先锋Ⅴ 氯霉素 氨苄青霉素 待测药
495
编号 菌名
痢疾杆菌
福氏志贺菌
大肠埃希菌
伤寒沙门氏菌
洋葱假单胞菌
绿脓杆菌
1
2
3
4
5
6
表 5 东北鹤虱胶囊二轮抑制杆菌情况
30
-
26
32
34(可疑)
28
20
22
22
22
22
22
药物抑菌环直径(mm)
氟哌酸 丁胺卡那 庆大霉素 先锋Ⅴ 氯霉素 氨苄青霉素素 待测药
22
10
24
23
18
22
24
20
22
20
30
8
28
18
26
27
16
8
18
-
11
2
20
-
14/13(可疑)
-/8(可疑)
7
-
11
10/10
编号 菌名
7
8
9
10
表 6 东北鹤虱胶囊二轮抑制球菌情况
25
29
32
30
22
24
22
24
30
28
-
28
21
26
21
20
26
24
30
22
30
26
38
32
金黄色葡萄球菌
表皮葡萄球菌
草绿色链球菌
A 群链球菌
16/14(与青有协同)
11/10
内环 12/12
外环 24/24
内环 12/11
外环 18/18
药物抑菌环直径(mm)
环丙沙星 复方新诺明 红霉素 链霉素 氨苄青霉素 青霉素 待测药
3 讨论
以上结果表明东北鹤虱胶囊可以对抗二甲苯引
起的小鼠耳肿胀 ,大剂量时作用与阿司匹林相似;同
时东北鹤虱胶囊各个剂量组均有明显抑制小鼠疼痛
反应的作用 ,并与阿司匹林组相似 ,初步认为东北鹤
虱胶囊剂具有镇痛 、抗炎作用。本实验用 KB法初筛
了东北鹤虱胶囊剂的抗菌作用 , 结果表明该中药对
球菌的作用较明显 ,尤以金黄色葡萄球菌为显著 ,但
对其它菌(尤其是肠道菌群)作用不明显。
慢性腹泻发生机制复杂 ,包括(1)肠上皮细胞转
运功能改变 。(2)肠动力改变 。(3)炎症介质(5-
HT 、His等)的影响。(4)旁分泌-免疫-神经-内
分泌系统的改变 。(5)肠上皮细胞的病理改变(病态
细胞综合征和细胞增殖异常)。(6)肠道菌群失调
等 。以上机制根据不同的发病情况会有所不同 , 但
有一点是肯定的 ,既通常是有多个机制参与 [4 , 5]。这
也是西药治疗往往疗效不满意的主要原因 , 因为西
药的药效比较单一。已有实验证明东北鹤虱胶囊可
以调整肠动力 、改善肠道液体的分泌和吸收(另文报
道),以及本文观察到的镇痛 、抗炎作用 ,和对肠道正
常菌群影响较小的特点 , 显示出中药在这个领域有
独特的优势。中草药化学成分复杂 ,是一个天然组合
的化学库 ,具有多层面 、多途径 、多靶点的作用特点 ,
因此具有广阔的应用前景 。
(致谢:本研究中东北鹤虱胶囊抗菌实验系由天
津医科大学检验系病原生物教研室承担完成 , 在此
表示感谢 。)
参考文献:
[ 1]
[ 2]
[ 3]
[ 4]
[ 5]
(2004-06-04收稿)
江苏新医学院 , 中药大辞海 [ M ] .上海:科学技术出版社 ,
1977.2 629-2 630
袁曾麟 .中国医学细菌菌种目录[ M] .北京:理工大学出版社 ,
1993.249-251
陈奇 .中药药理实验方法学 [ M] .北京:人民卫生出版社 ,
1996.260-360
周昌 .胃肠药理学 [ M ] .北京:科学出版社 , 1998.6-269
潘国宗 , 曾世植主编 .现代胃肠病学[ M ] .北京:科学出版社 ,
1996.1 276-1 277