全 文 ：· 试验研究 ·
石解夜光丸中小孽碱的定性定量分析
山东省药品检验所 何心 亮
1
. 盐酸小孽碱标准品
2
. 巴马汀对照品
3
. 硅胶 G (青岛海洋化工厂产品 )
4
. 紫外分光光度计 : 岛津 U V 一 2 10 A
二 、 黄连的确认试验 : 取本品大蜜丸 1
丸及除去黄连的石解夜光丸 1丸 , 及对照药
材黄连 0 . 19 , 各加 乙醇 50 m l , 回流 提取 2
小时 , 滤过 , 各取滤液 10 叮 , 分别点 于 同
一块硅胶 G 薄层板上 , 同时用小孽碱及巴马
汀作对照 , 以展开剂乙酸 乙脂一甲乙酮一甲
酸一水 ( 10 : 7 : l : 1) 展开 , 至前沿约 15 c m
处 , 取出 , 晾干 , 于紫外 灯 (3 65 n m ) 下 检
视 , 结果如下 :
一ùēà0一ù
、石解夜光丸是我国传统的中成药 , 系由
石解 、 人参 、 黄连等 25 种中药材加炼蜜制成
的大蜜丸或水蜜丸 〔 l 〕 , 由于本品是一 个 大
复方 , 且含蜜量又高 , 给分析工作带来许多
困难 , 所以必须选择含量大或方 法 灵 敏 度
高 , 干扰因素少的化学成分 , 做为分析的对
象 , 才有可能使实验结果准确可靠 。 黄连是
石解夜光丸处方的主要组分之一 , 其有效成
分小孽碱的含量也较高 , 是控制该成药质量
的理想指标之一 。 关于小孽碱的含量测定方
法 , 文献报导甚多 , 有重量法 、 硅钨酸滴定
法 、 比色法等 〔 “ 〕 , 但这些方法 , 有的操 作
麻烦 , 费时 、 干扰因素多 , 不能用于复方制
剂中黄连的测定 , 有的需用盐酸小粟碱标准
品 , 而纯度高的盐酸小孽碱标准品也不易得
到 , 而给这些方法的推广造成实际困难 。 故
本文设计用薄层层析— 紫外分光光度法 ,以盐酸小粟碱的 E魏 值计算含 量 , 对石 解
夜光丸中黄连进行了定量分析 , 实验结果表
明 , 本方法提取步骤简单 , 分离效果满意 ,
干扰因素少 , 测定结果满意 , 可 以起到控制
石解夜光丸质量的作用 。
实 验 部 分
一 、 仪器与试药 :
样品 :
1
, 石解夜光丸
2
. 黄连
沪、 _ 侧尸 、 沪 . * . , 户二 尹、 . 产 、 一产 、 , 户 、 卜 ,. 、 尹 、 , 尹 、 砂 . 、 州帅卜尹 . 、 一产 、 一尹 、 _ 尹。 、 气护、 沪 . 、 沪 . 、 尹 . 、 . 尸 、
〔2 3 〕 J · P h a r m a c o k i n · B是o P b a r二 2 ; 4 3 3 , 19 7 4
〔2 4〕 s m o l e 皿 v F , e t a l : J · p五a r m a e o k i n B i o P h a r m · 1
3 2 9 , 19 7 3
〔2 5〕 W e i g a n d W A , e t a l : I b i d , 4 : 76 , 19 7 6
〔2 6〕 陆明盛 : 生 物药剂学 , 第一版 , 江苏科技 出 版 社 ,
P 2 0 5
, 1 9 8 1
。
二27 〕 谢星辉等: 全 国药荆学术会议论文集 , P 15 1 , 1 9 8 .2
( 本文蒙吴葆杰 、 张天民副教授 指 导 ,
谨表谢意 )
3
.小萦碱
4
.巴马汀
5
.除去黄连的石解夜光丸
以上结果说明处方内其他4 2种药材对黄
连的鉴别无干扰 。
三 、 小孽碱 呱: : 的测定: 取盐 酸 小 孽
碱标准品约 5 2 m g, 用 N / 10 硫酸溶 液微 热
使溶解 , 并定容至 2 5Om l , 取 10 m l 再 稀释
至 I OOm l , 另取黄连及石解夜光丸按下述含
量测定项下制各的溶液 , 照分光光度法分别
在 4 0 一 ZO0n m 波长处测定吸收光谱及吸 收
度 , 结果如下 :
作为定量的基础 。
吸收度测定结果 :
波 长 n m 3 4 2 3 4 4 3 4 5
盐酸小集碱吸收度 0 。 6 1 2 0 。 6 15 0 。 6 17 0 。 6 1 7 O。 6 16
石解夜光丸吸收度 0 。 36 8 0 。 3 6 9 0 。 3 6 9 0 。 3 6 8 0 . 3 6 7
黄连吸收度 0。 5 3 4 n 片突片 0 . 5 3 5 0 . 5 3 4 0 。 5 3 0
四 、 盐酸小孽碱 E 麟值的测定 , 精密称
取盐酸小桑碱约 25 m g , 置 P 2 0 5 千燥器内减
压干燥 至恒重 , 用 N / 10 硫酸溶液在 80 ℃水
浴加热溶解 , 放冷至室温 , 稀释至 25 Om l ,
取 DI m l 再稀释至 10 m l , 按药典会规定的方
法进行测定 , 结果如下 :
浓溶液
稀溶液
`
1
2
{
3
1
4
}
平均值
} 7a o
.
6 }7 2 8
.
3 ! 7 2 t
. 。
}
: 2 0
.
2
{
’ 2 7 · “
}
7 2 ` · 4…7 2 4 · “ … 7 2 5 · 4
石解夜光丸及黄连中小萦碱的紫外吸收谱图
①黄连 (珍石解夜光丸
口自 乒乙少 刁刀 户声 户之
盐酸小孽碱紫外吸收谱图
以上结果表明从石解夜光丸中分离出的
小孽碱的紫外吸收光谱与黄连及小孽碱的紫
外吸收光 谱是一致的 , 其 入二 。 、 也相同 , 可以
久m a 、 及 E揉 值由全国七个药检 所 同 时
测定 , 结果由药典会确 定 E拭 为 7 2 8 , 久二 : :
为 3 4 5 士 I n m 。
五 、 石解夜光丸及黄连中小 孽 碱 的 测
定 : 取本 品大蜜丸一丸剪成小块 , 或水蜜 7
克捣碎 , 或黄连粉末 (过五号筛 ) 0 . 1克 , 准
确加乙醉 50 m l , 称重 , 于水浴上回流提 取
4 小时 , 放冷 , 称重 , 补充损失的乙醇量 ,
摇匀 , 用干燥滤 纸 过 滤 , 弃 去 初 滤 液 约
10 m l
, 取续滤液 25 m l , 浓缩 , 定量 的转移
到 10 m l 容量瓶内 , 取 10 0叮点于 硅胶 G 薄
层板上 , 使成条形 , 同时 点 2泌 0 . 1% 盐酸
小孽碱 乙醇液做对照 , 以展开剂 乙酸乙醋一
甲乙酮一甲酸一水 ( 1 0 : 了 : 1 : 1 ) 展开 , 至
前沿约 15 c m 处 , 取 出 , 晾 干 , 置 紫 外 灯
( 3 6 5 n m ) 下检视 , 划出小粟碱的色带范围 ,
用吸集器将与对照品位置相同的样品斑点薄
层取下 , 以甲醇 2 0一 30 m l 减压洗脱 , 洗 脱
液蒸干后精密加 N /扣 硫酸溶液 5 m l , 使 残
渣溶解后得样品液 , 另取与小孽碱相应位置
的同样量的硅胶 G 薄层用同法处理做空白 ,
在 34 5 士 nI m 波长处测定吸收度 , 按小桑碱
的吸收系数 E lc蓝为了2 8计算 , 结果如下 :
石解夜光丸测定结果 :
产 地 批 号 剂 型 实验次数 含量% CV %
夭 津 8 2 0 4 1 7 8 大蜜丸 3 0 。 0 7 1 3 2 。 1 3
北 京 1 9 8 3 1 。 4 8 夕 6 0 。 0 5 5 8 2 。 13
重 庆 8 3 0 4 0 1 护 3 0 。 0 6 4 4 1 。 6 7
南 京 只 , 1 。 印 1 小蜜丸 5 0 。 0 5 0 5 1 。 69
上 海 水蜜丸 4 0 。 0 9 1 5 1 。 3 1济 南 8 3 0 3 2 3 大 3 0 6 5 2 2 5 3
济 南 8 3 0 3 2 3 护 4 0 。 0 5 8 3 1 。 44
济 南 8 2 1 6 6 5 半成品粉末 2 0 。 1 2 1
8 2 1 6 6 5
4
. 为了考察石解夜光丸处方中除黄 连
外其他 24 种药材对含量测定有无 影 响 , 我
们又做了以下实验 : 取除去黄连 的石 解 夜
光丸 , 按上述含量测定项下测定其吸收度 ,
以济南 8 2 16 6 5 批产品为例 , 结果因其 他 24
种药材引起的误差约在 1 %左右 , 结果见下
表 :
实验次数 } 吸收度 (平均值 )
石解夜光丸
除去黄连的石解夜光丸
0
。
3 8 2
0
。
0 0 4
各药厂提供黄连测定结果 : 讨 论
提供 地点 实验次数 平均含量% C V%
天 津 3 5 。 19 1 。 9 5
重 庆 3 6 。 3 D 5 。 6 9
济 南 3 6 。 4 5
上 海 3 5 。 03
从以上结果看出 , 由于水蜜丸含蜜量较
少 , 故小孽碱含量较高 。
六 、 回收率的测定 :
1
. 取用本法测得含量的黄连粉末 (过 5
号筛 ) , 约。 . 1克 , 精密称定 , 加到除去黄连
的石解夜光丸粉末约 4 克中 , 按上述含量测
定项下测定 , 结果见下表 。
2
. 取盐酸小孽碱标 准 品约 30 m g , 置
P : 0
5 干燥器内干燥至恒重 , 加乙醇 稀释至
2 6m l
, 吸取 5 m l , 加到除去黄连的石解夜光
丸粉末约 4克中 , 按上述含量测定 项 下 测
定 , 结果见下表 :
一 、 蜜丸的含量测定一般多因脱蜜而引
起误差 , 但本方法不需脱蜜便能得到较好的
分离效果 , 测定结果与处方中黄连的投料量
基本一致 , 可以做为控制石解夜光丸质量的
方法之一 , 实验证明 , 其他含有黄连的中成
药 , 也可以参考本方法进行定量定性分析 。
二 、 关于薄层层析的展开系统 , 我们曾
采用正丁醇一冰醋酸一水 (了 : 1 : 2) 为展开
剂 , 虽然能够分离 ,但展开时间较长 , 分离效
果也不十分理想 。 后经北京市药检所介绍 ,改
用 乙酸乙醋一甲乙酮一甲酸一水 ( 10 : 了 : :1
1) 为展开剂时 , 展开时间短 , 分离效果好 ,
有利于定量 , 故采用后者为展开剂 。
三 、 我们还曾用荧光薄层扫描法对石解
夜光丸中小孽碱进行过测定 , 该方法灵敏 ,
快速 , 但结果较薄层层析一紫外分光度法偏
高 , 且变异系数较大 。
实验次数 平均 回收率%
;
3 6
。了么
9 4
一
4 8
参 考 文 献
〔 1〕 中华人民共和国药典 (一部 ) 7 年版 7 2 7页
〔2 〕 沙世炎等 : 中草药有效成分分析 法 (下册 ) 291 页。