全 文 :① 基金项目: 中国热带农业科学院科技基金资助(No.Rky0723)、 科研院所社会公益研究专项(No.2005DIB4J045)。
收稿日期: 2008-12-23责任编辑/白 净 E-mail: rngcrngc3@gmail.com
② 通讯作者。
2009年2月
TROPICAL AGRICULTURAL ENGINEERING Vol.33, No.1
热 带 农 业 工 程 第33卷第1期
Feb. 2009
三色竹芋[Ctenanthe oppenheimiana (E. Morren) K.
Schumann cv. Tricolor],又名艳锦密花竹芋、紫背锦
竹芋、七彩竹芋、三色栉花竹芋,为竹芋科 (Maran-
taceae)锦竹芋属(Ctenanthe Eichler)植物。 株高30~
60cm, 地下有根状茎; 叶长椭圆状披针形, 全缘;
叶面深绿色, 具淡绿、 白色、 淡粉红色羽状斑纹,
叶背、 叶柄均为暗紫色, 观赏价值较高。 三色竹芋
可采用分株繁殖, 但速度很慢。 利用组织培养方法
可大大提高其繁殖速率[1], 但极易发生叶片颜色分
离, 产生白化苗和类似紫背竹芋的幼苗。 笔者对三
色竹芋组织培养过程中影响叶片颜色的主要因素进
行了研究, 并建立了一套相应的组织培养方法。
1 材料与方法
1. 1 材料
三色竹芋侧芽。
1. 2 方法
1. 2. 1 培养基配制
以MS或1/2MS为基本培养基, 添加适量植物生
长调节剂、 30g/L蔗糖、 6g/L卡拉胶, pH5.8, 高
温高压灭菌后备用。
1. 2. 2 外植体处理
三色竹芋的组织培养和叶色保持研究①
徐 立 李志英② 黄碧兰
中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所
( 海南儋州 571737)
农业部热带作物种质资源利用重点开放实验室
摘 要 以三色竹芋的侧芽为外植体, 研究了三色竹芋不定芽诱导、 增殖和生根的组织培养过程, 并研究了
6-BA浓度和继代次数对叶片颜色的影响。 结果表明: 以三色竹芋的侧芽为外植体, 经过芽的分化、 增殖和生根
可获得批量组培苗; 降低6-BA的浓度, 减少继代次数, 有利于保持叶片的颜色。
关键词 三色竹芋 ; 叶片颜色 ; 6-BA; 继代次数
中图分类号 S682.36; Q945.52
Tissue Culture and Leaf Color Maintenance of
Ctenanthe oppenheimiana cv. Tricolor
XU Li LI Zhiying HUANG Bilan
(1 Tropical Crops Genetic Resources Institute, CATAS;
2 Ministry of Agriculture Key Laboratory for Utilization of Tropical Crops
Germplasm Resources, Danzhou, Hainan 571737)
Abstract Lateral buds of Ctenanthe oppenheimiana cv. Tricolor were used for tissue culture, and adven-
titious buds induction, proliferation and shoots rooting were observed. During the proliferation of C. op-
penheimiana cv. Tricolor, the effects of 6-BA and subculture times on the leaf color were analyzed as
well. The results showed that the seedlings were mass produced from the lateral buds and that low con-
centration of 6-BA and less subculture frequencies were conducive to leaf colour maintenance.
Key words Ctenanthe oppenheimiana cv. Tricolor ; leaf color ; 6-BA ; subculture frequency
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2009年2月 第33卷第1期热带农业工程
将盆栽三色竹芋于室内控水10d; 取3~5cm的
健壮侧芽, 冲洗掉泥沙; 用适量洗涤剂溶液浸泡30
min; 流水冲洗30min; 在超净工作台上吸干水分;
浸入1g/L升汞溶液, 加1滴吐温-20, 表面消毒15
min; 用无菌水漂洗5次; 接种于芽诱导培养基上。
1. 2. 3 6-BA质量浓度和继代次数对叶片颜色的影
响
在培养基中添加不同浓度的6-BA, 每30d继代
1次, 连续继代5次后统计叶片颜色; 在添加6-BA
1.0~3.0mg/L的培养基中分别连续继代5、 7、 10、
12次后统计叶片颜色。
2 结果与分析
2. 1 无菌系的建立
侧芽在添加6-BA 3.0~10.0mg/L的MS培养基上
均可萌发, 并分化出小芽, 诱导率为100%。 随着
6-BA浓度的提高, 小芽的数量由1个增加到2~3个。
2. 2 增殖与继代培养
将诱导出的侧芽切分, 接种在添加6-BA2.0
mg/L+KT1.0mg/L+NAA0.2mg/L的MS培养基上进
行继代培养。 30d后, 切分的侧芽可形成含3~5个
不定芽的丛生芽。 丛生芽在相同成分的培养基上不
断切分继代, 可继续增殖分化, 每30d继代1次,
平均增殖系数为2(图1)。
2. 3 激素浓度对叶片颜色的影响
培养基中6-BA的浓度对叶片颜色的保持有明显
影响。 在添加不同浓度6-BA的培养基中连续培养5
代后, 三色竹芋叶片的颜色分离程度差异明显, 如
表1所示。
由表1可以看出, 在0.5~10.0mg/L时, 随着
6-BA浓度的提高, 叶片颜色分离越严重; 6-BA质量
浓度在1.0mg/L以上即出现分离现象, 5.0mg/L时
分离严重, 叶片颜色保持率仅20%; 当6-BA浓度达
到10.0mg/L时, 叶片颜色完全分离(图2 A), 但仍
可正常增殖(图2 B)。
2. 4 继代次数对叶片颜色的影响
在添加6-BA1.0~3.0mg/L的培养基中连续培
养5代后, 即出现了叶片颜色分离现象, 随着培养
代数的增加, 叶片颜色分离越严重。 在6-BA1.0
mg/L的培养基中连续培养12代时, 叶片颜色保持率
降至54%; 在6-BA3.0mg/L的培养基中则降至37%
(表2)。
2. 5 生根与移栽
不定芽长至2cm时, 切下转接到添加NAA0.1
mg/L的1/2MS生根培养基上, 诱导不定根。 培养12d
左右, 即可看到不定根的萌 (下转第 35页)
6-BA浓度
ρ/mg·L-1
初接种
数量/株
三色株
比例/%
白化株
比例/%
绿色株
比例/%
0.5 50 100a 0 0
1.0 50 92a 3 5
2.0 100 90a 3 7
3.0 100 81ab 7 12
5.0 50 20c 35 45
10.0 50 0d 47 53
表 1 6-BA质量浓度对三色竹芋叶片颜色的影响
表 2 继代次数对三色竹芋叶片颜色的影响
6-BA浓度
ρ/mg·L-1
初接种数量
/株
三色株率/%
5代 7代 10代 12代
1.0 50 92 90 82 54
3.0 50 81 75 63 37
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(上接第16页)
发; 20d左右, 可长出2~4条1cm长的不定根, 生
根率达100%。 将生根瓶苗洗净培养基后移栽至苗
床, 基质为椰糠和河沙(按6︰1体积混合)。 移栽前浇
透水, 移栽后遮荫保湿, 三色苗和绿苗成活率为
100%, 白化苗全部死亡。
3 结论与建议
三色竹芋是紫背竹芋的突变体, 叶色突变体在
组织培养过程中不易保持。 本试验结果表明, 培养
基中6-BA的浓度和继代次数对三色竹芋叶片颜色有
明显影响, 6-BA的浓度越高、 连续继代次数越多,
叶片颜色分离越严重。 因此, 在三色竹芋的组织培
养过程中, 应采用较低的6-BA浓度(<3mg/L), 严格
控制继代次数(<12代)。 同时, 为了保证增殖数量,
采用6-BA高浓度(3mg/L)和低浓度(0.5mg/L)培养基
间隔使用, 也可适当增加继代次数, 获得更多的种
苗, 满足市场需求。
参考文献
1 王四敏.竹芋和三色竹芋的试管繁殖研究[J].四川师
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