全 文 ：第 30 卷 第 1 期 河南大学学报(医学版) Vol.30　No.1
2011 年 2 月 Journal o f Henan University (Medical Science) Feb.2011
横根费菜的生药学研究及没食子酸的含量测定
王淑娟 ,王翊洁 ,刘　静 ,丛　悦＊
(河南大学 药物研究所 , 河南 开封 475004)
摘　要:目的:对横根费菜的组织形态进行鉴别 ,并建立横根费菜中没食子酸含量测定方法。方法:采集原植物 , 对
该植物进行植物学及生药学的鉴定;采用 HPLC-UV 法 , 色谱柱为 H ypersil C18柱(4.6 mm×250 mm , 5 μm);流动
相:甲醇-体积分数为 0.3%磷酸水溶液(94∶6);检测波长:273 nm;流速:1.0 mL/min。结果:横根费菜的生药学
特征明显。根状茎木质 ,横生有分枝;叶横切面上 、下表皮细胞气孔多为不等式 、环式 , 叶脉维管束为周木型;茎维
管束外韧型 ,茎的表皮层和髓较宽阔 , 导管多为螺纹 ,可见网纹。没食子酸在 0.12 ～ 1.20 μg 质量范围内呈良好线
性关系(r=0.999 9)。结论:横根费菜生药学特征明显 ,易于观察;没食子酸的含量测定方法简单 、快捷 、准确 ,为制
定横根费菜药材质量标准提供依据。
关键词:横根费菜;生药学;高效液相色谱;没食子酸
中图分类号:R927.2　　　文献标识码:A 文章编号:1672-7606(2011)01-0032-04
　收稿日期:2010-10-10
　基金项目:河南大学 2009 年大学生创新性实践项目(09NA014)
　作者简介:王淑娟(1987-), 女 ,河南郑州人 , 从事中药炮制学习及研究工作。
　＊通讯作者:丛悦(1978-),女 ,辽宁辽阳人 ,博士 ,副教授,硕士研究生导师 ,从事天然药化、中药学及中药炮制学研究工作。
Pharmacognostical studies on Sedum kamtschaticum Fish and Determi-
nation of gallic acid in Sedum kamtschaticum Fish
WANG Shu-juan , WANG Yi-jie , LIU Jing , CONG Yue＊
(Pharmaceuticals Research Stations o f Henan University , Kai f eng , Henan 475004 , China )
Abstract:Objective:　To identify the tissue structure o f Sedum kamtschaticum Fish , and establish a method fo r the
determina tion of g allic acid in Sedum kamtschaticum F ish.Methods:　The plant wa s co llec ted to study on the
bo tanica l and pha rmacogno stical characteristics.The de te rmination by HPLC w as pe rfo rmed on a hyper sil column
C18(4.6 mm×250 mm , 5 μm)by UV detecto r at 273 nm with methanol-0.3% pho sphoric acid(94:6)as the mobile
phase , and the f low rate was 1.0 m L/min.Results:　Sedum kamtschaticum F ish w as o f pharmacognostical
char acte ristics of rhizome lignin , diageotropism w ith branche s;the inequality and concentric type in most of leaf
cross section top and bo ttom epidermal cell blowho le;amphivasal leaf v ein bundle;co llateral v ascula r bundle , broad
stems cuticular layer and the marr ow , thread of plant duct with obvious cobw ebbing.The calibr ation cur ve showed
a good linea rity within the r ange of 0.12 ～ 1.20 μg (r =0.999 9).Conclusion:　The pharmacognostical
char acte ristics of Sedum kamtschaticum Fish are obvious.The me thod is pro ved to be simple , accurate w hich
provides the ba sis fo r contr olling the quality of Sed um kamtschaticum F ish.
Key words:Sedum kamtschaticum Fish;Pharmacognosy;HPLC;Gallic acid
　　横根费菜(Sedum kam tschaticum Fish)为景天
科景天属多年生草本 ,又名景天三七 、土三七 ,勘察加
景天 、石板菜 、黄菜子 、金不换 、北景天[ 1] 等。品种考
证最早出自《救荒本草》[ 2] , 《植物名实图考》也将其作
为土三七品种之一加以描述 。主要分布于河北 、山
西 、内蒙古等地。民间亦有种植 ,具有很好的食用 、药
用价值。横根费菜性酸 、平 ,入心 、肝 、脾三经 ,具有活
血 、止血 、宁心 、利湿 、消肿 、解毒[ 3] 的功效 ,用于治疗
DOI :10.15991/j.cnki.41-1361/r.2011.01.013
王淑娟 , 等:横根费菜的生药学研究及没食子酸的含量测定 33　
蚊虫叮咬 、跌打损伤 、咳血 、吐血 、便血 、心悸 、痈肿 ,化
学成分主要有酚酸类 、黄酮类 、生物碱类等[ 4-5] 。目前
作者未见国内外有对横根费菜生药学的相关文献报
道。为此 ,作者对横根费菜进行了生药学的研究 ,并
对其没食子酸的含量进行了测定 ,为横根费菜药材质
量标准的建立提供参考依据。
1　仪器与试剂
1.1　仪器
重庆光电 XSZ-H 光学显微镜;LC-2010A 型高
效液相色谱仪(日本岛津);紫外检测器(日本岛津);
CLASS-V P色谱工作站(日本岛津);AG135 电子天
平(瑞士 Metiler Toledo 公司);KQ5200DA 型数控
超声波清洗机(江苏省昆山市超生仪器有限公司);恒
温水浴锅(郑州长城科工贸有限公司);RE-2000型旋
转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);SHB-III 循环水式
多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司);101-2AB型
电热鼓风干燥箱(天津市泰斯特仪器有限公司)。
1.2　试剂
色谱甲醇(天津市四友精细化学品有限公司);没
食子酸对照品(含量>98%,在横根费菜中分离得
到);水(纯净水 ,杭州娃哈哈百立食品有限公司);其
他试剂均为分析纯 。横根费菜于 2009年 5月采自山
东省东明县 ,栽种在河南大学药学院生药教研室 ,经
丛悦副教授鉴定为景天科横根费菜(S edum kamts-
chat icum Fish)的全草 。用石蜡切片法作茎 、叶的永
久装片[ 6] ,标本存放于河南大学天然药物研究所。
2　生药学研究
2.1　药材性状
多年生草本 ,全草长 15 ～ 40 cm 。根状茎木质 ,
横生有分枝 。叶片为肉质 , 青绿色 , 容易脱落 , 长
2 ～ 6 cm ,宽 0.5 ～ 3 cm ,匙形至倒卵形 , 先端圆钝 ,
基部渐狭 ,上部边缘有钝锯齿 ,下部全缘 ,几无柄;叶
互生 , 近对生 , 稀为三叶轮生;网状脉。茎直径
2 ～ 6 mm ,斜上 ,青绿色或绿色 ,近圆柱形 ,无毛 ,有脱
叶痕 , 易折断 。气微 ,味淡。
2.2　组织结构
2.2.1　叶表面观　上 、下表皮细胞垂周壁呈波状弯
曲 ,细胞大小不等 ,边缘微成波状。上 、下表皮均具气
孔 , 叶上表皮气孔不等式较多 ,少见环式和不定式;
叶下表皮气孔类型多为不等式 、环式 、不定式(副卫细
胞多为 3个),偶有直轴式 ,分布较不均匀。见图 1。
2.2.2　叶横切面　上表皮细胞 1列 ,细胞类圆形或
椭圆形;下表皮细胞 1列 ,细胞长方形或圆形 ,排列紧
密 , 细胞大小不一 , 细胞壁角质化增厚。叶异面型 ,
栅栏组织为 1列长圆柱形细胞 ,长约至 100 μm ,排列
疏松 ,穿过中心主脉;海绵组织细胞较小 、多列。叶脉
维管束周木型 ,中间主脉较大 ,周围 4个小型侧脉 ,导
管木化程度小 ,直径约为 15μm 。见图 2。
图 1　叶的表面观
A:上表皮;B:下表皮。
图 2　叶中部横切面简图
2.2.3　茎横切面　茎表皮细胞 1 列 , 较小 ,排列紧
密 ,长椭圆形 ,细胞壁角质增厚。皮层细胞 10 ～ 12
层 ,较宽广 , 约占横切面直径的 1/2 , 由类圆形 、椭圆
形薄壁细胞组成 ,外侧数层细胞稍小 ,内侧细胞较大。
维管束外韧型 , 形成层成环 ,微木质化;木质部导管
不规则 ,直径约至 20 μm ,多单个散在 ,分布较稀疏。
髓部较宽阔 ,约占横切面直径的 1/3 , 由圆形薄壁细
胞组成。见图 3 。
图 3　茎横切面详图
34　 河南大学学报(医学版), 2011 年 , 第 30 卷第 1 期
2.3　粉末特征
2.3.1　叶粉末　深绿色 。导管多为螺纹 ,可见环纹 ,
直径约为 15 μm ,导管旁多有树脂道存在 ,直径 50 ～
90μm 。叶表皮细胞成不规则的多边形 ,垂周壁呈波
状弯曲。
2.3.2　茎粉末　黄绿色 。木纤维较多 ,排列整齐 ,长
100 ～ 300 μm 。导管多为螺纹 ,可见到网纹 ,直径大
约为 20 μm 。有砂晶。偶见非腺毛 ,长约至 700 μm 。
见图 4。
图 4　组织解离及粉末特征
1:树脂道;2:表皮细胞;3:导管;4:非腺毛
5:木纤维;6:砂晶。
3　没食子酸的含量测定
3.1　色谱条件
色谱柱:Hypersil C18柱(4.6 mm ×250 mm ,
5μm);流动相:甲醇-体积分数为 0.3%磷酸水溶液
(94∶6 );柱温:30 ℃;检测波长:273 nm;流速:
1.0 mL/min;进样量:10 μL 。
3.2　对照品溶液的制备
精密称取 0.5 mg 没食子酸的对照品 ,甲醇溶
解 ,定容至 5 mL 容量瓶中 ,配成没食子酸(0.1 g/ L)
对照品溶液 ,过 0.45 μm 滤膜 ,放入 4 ℃冰箱内备
用。
3.3　标准曲线的绘制
将没食子酸对照品溶液依次进样 2 、4 、6 、8 、10 、
12μL ,原液及各稀释液按“3.1”项下进行色谱分析测
定 ,以峰面积为纵坐标(A),含量为横坐标(X),作标
准曲线 ,得回归方程如下:A =2 622 917.00 X +
13 411.60 , r=0.999 9 。结果表明 ,没食子酸进样量
在 0.12 ～ 1.20 μg 范围内线性良好 。色谱图见图 5 。
图 5　没食子酸对照品(保留时间 7.9 min)
3.4　供试品溶液的制备
取同一批的横根费菜鲜品 ,捣碎 ,分别精确称取
6份质量为 2.0 g 的样品 ,加入 16 mL 的体积分数为
50%乙醇 ,回流提取 1.5 h ,放凉后 ,过滤 ,旋蒸 ,吸取
提取液。用体积分数为 50%的乙醇定容至 5 mL 容
量瓶 ,用 0.45 μm 微孔滤膜过滤 ,放入 4 ℃冰箱内备
用。
横根费菜烘干品(60 ℃下恒温烘干 2 h)的供试
品溶液制备方法同上。
3.5　精密度试验
对照品溶液浓度 0.1 g/L ,按“3.1”项进行测定 ,
重复进样 6 次 ,记录其峰面积 ,结果峰面积的 RSD
为 0.78%(n=6)。
3.6　重复性试验
取同一批样品 ,按“ 3.4”项制备供试液 6 份 ,按
“3.1”项下分别进行测定 ,峰面积的 RSD 为 2.32%
(n=6)。
3.7　稳定性试验
取供试液 ,按“3.1”项分别于 0 、2 、4 、6 、10 、12 h
分别进样测定 ,结果表明供试液在 12 h 内稳定。峰
面积 RSD 为 0.81%。
3.8　回收率试验
称取 1 g 横根费菜鲜品(捣碎)6份 ,分别加入一
定量的没食子酸对照品溶液 ,以体积分数为 50%乙
醇作溶剂 ,按“3.4”项制备供试液 ,按“ 3.1”项进行测
定 ,计算回收率。见表 1。回收率试验符合规定。
3.9　没食子酸含量测定
将“3.4”项下制得的供试品溶液 ,按“3.1”项下进
行色谱分析测定 ,计算没食子酸含量。没食子酸在横
根费菜鲜品中含量为 0.012%,在横根费菜烘干品中
含量为 0.002%。样品分析见色谱图 6 ,图 7。
王淑娟 , 等:横根费菜的生药学研究及没食子酸的含量测定 35　
表 1　回收率测试结果
取样量/ 样品含量/ 加入对照品量/ 测得总量/ 回收率/ 平均/ RSD/
g mg mg mg % % %
1.006 7 0.123 5 0.120 0.238 3 95.67
0.990 6 0.121 5 0.120 0.242 4 100.77
1.002 4 0.122 9 0.120 0.238 0 95.90 98.13 2.45
1.006 2 0.123 4 0.120 0.239 7 96.94
1.005 4 0.123 4 0.120 0.244 8 101.20
1.010 3 0.123 9 0.120 0.241 8 98.29
图 6　横根费菜鲜品　　　　　　　　　　　　　　　　图 7　横根费菜烘干品
4　理化鉴别
取本品粉末5 g ,加 50 mL 体积分数为50%乙醇
加热回流提取 ,分 3次回流 ,每次 2 h ,合并提取液。
取醇提液 1 mL ,加 2滴质量分数为 1%三氯化
铝-乙醇溶液适量 ,置紫外灯下观察 ,溶液呈黄绿色荧
光(检查黄酮类)。
取醇提液 1 mL ,加 2滴质量分数为 1%三氯化
铁溶液 ,溶液显蓝绿色 (检查酚酸类)。
5　结论
横根费菜为多年生草本。根状茎木质 ,横生有分
枝。叶上 、下表皮细胞垂周壁呈波状弯曲 ,边缘微成
波状 ,细胞壁角质化增厚;均有气孔 , 叶上表皮气孔
不等式较多 ,叶下表皮气孔类型多为不等式 、环式 ,副
卫细胞多为 3个;栅栏组织细胞 1列 ,海绵组织细胞
多列 ,较小;叶脉维管束为周木型 。茎有明显的形成
层 ,外韧型维管束 ,茎的表皮层和髓较宽阔 ,这些特征
可作为横根费菜的性状鉴定依据。
采用 HPLC 法测量横根费菜中没食子酸含量 ,
发现此色谱条件可使没食子酸与其他成分达到基线
分离 ,出峰时间快。且该方法精密度高 、重现性好 、稳
定性高 、检测限低 ,符合定量分析要求 。由结果可知 ,
鲜品横根费菜没食子酸含量较烘干品高 ,药材烘干后
含量下降明显 ,说明 60 ℃条件下烘干会影响没食子
酸的含量 ,该成分受热不稳定 。上述研究结果为横根
费菜质量标准的制定提供参考依据。
参考文献:
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[责任编辑　姬　荷]