全 文 ：第 1卷 第 2期
1 9 93年 6月
东 海 海 洋
DO N GH AI MI R AE N C I SE NE C
Vo l 1 1
Ju n e
,
N O
,
2
不同世代大石花菜切段育苗的生态试验
骆其君 装香青 费志清
(浙江水产学院养殖系 , 宁波 , 3 1 5 0 10)
【内容提要】 以 大 石 花菜 G e l i id u脚 p ac 毋cu o O k a m . 的雌配子体 、 雄 配子体
和艳子体的 切段 为材 料 , 进行 切段 的再 生 、 附着与直立 苗培 育的辐照度一温度双 因
子试验及 p H 和盐度 的试脸 。 观测 切 段培育的死亡率 、 再 生率 、 附 着率 、 切段平均
再 生 芽数和再 生芽长度的 变化 , 还观察 了 切段培育 出直立 苗及其生 长的情况 。 结 果
表 明 : 雌 、 雄配 子体和饱 子体在不 同辐 照 度 一温度 组 合以 及 不 同盆度 、 p H 条件
下 , 切段 的培育情况 没有显著差异 。 说明三者的生态适应性基本一致 。 适宜的培育
条件 是温 度 1 7 . 5一 2 2 . 5℃ , 辐 照 度 2 0一 6 0 拌E m 一 2 · s 一 1 , 盐 度 15一 3 5 , p H S . o 一
8
.
5
0
关键词 : 大石 花 菜切段 培育 世代 生 态
前言
近几年 , 关 于大石 花菜 G e il id u m p ac 毋cu m O k a m . 切段 再生育苗的研究已有连续报
道 〔’ 一 ’ 〕 。 采用的材料为 自然生长的种藻 , 不分雌 、 雄配子体和抱子体。
国内仅有角叉菜的雌配子体和抱子体的原生质体培 养与再生研究的报道 〔4 〕和江篱不
同世代切段离体培养的研究 〔’ 〕 。 国外这方面很少有报道 。 本研究通过对不同世代大石花
菜切段培育的生态学试验 , 证明了不同世代藻体的切段育苗都是可行的 , 从而为切段育苗
技术的深入研究打下了基础 。 同时 , 也丰富了石花菜的生物学研究 , 并为其他藻类的研究
提供了借鉴 。
2 材料与方法
种藻为大石花菜 , 19 91 年 6 月至 9 月分批采 自浙江普陀山潮间带 。 鉴别其不同世代
的个体 , 分别暂养 。 切段再生育苗同文献 〔 1〕 方法 , 培养液为改良 T C 一 3# 海水培养液 。
辐照度一温度试验是采用人工光源 , 辐照度为 O一 4 , 20 , 60 , 10 0 和 14 0 拜Em 一 2 ·
s 一 ’ ; 温度采用电热棒控温仪调节水浴温度及补充冷水来完成 , 梯度为 7 . 5 , 12 . 5 , 17 . 5,
本文 19 9 2年 1 1月 7 日收 到 .
浙江省科委 、 自然科学基金资助项 目 .
王建中、 乐凯雷和史海东参加部分试验 。 谨致谢意 .
骆其君等: 不同世代大石花菜切段育苗的生态试验
2
.
5
,
27
.
5℃ 。 每天观察温度 、 辐照度并加定量燕馏水补偿蒸发的水分 , 每 10 天换一次
培养液 , 45 天后置于室内散射光条 件下培养 45 天 , 温度为 17 一 23 ℃ , 辐照度为 O~
10 拜E m 一 2 · s一 l 。
盐 度试验用消毒海水 、 蒸馏水和食盐分别配制成 盐度为 O, 5 , 10 , 15 , 20 , 25 ,
30
,
3 5
,
40
,
4 5和 50 等 1 1个梯度的培养液 。
上述试验在 2 《洲〕 ` m 3 塑料盒中进行 。 每盒处理放置 3 片竹 片 , 分别放上 30 段不同
世代切段 , 并重复一次 。
p H 试验在 z s o c m , 烧杯 中进行 , 用 l m o l / dm 3 H e l 和 Z m o l / d m , N a o H 调节
p H
, 依次为 6 . 0 , 6 . 5 , 7 0 , 7 . 5 , 5 . 0 , 8 5 , 9 . 0 和 9 . 5等 8 个梯度 。 每个梯度用 3 个烧杯
放 3 种不同世代藻体 的切段 。 重复一次 。 处 理 5 天后移至竹片 , 测定 20 夭培养后的结
果 。
测定的指标为切段死亡率 ( % ) 、 再生率 ( % ) 、 附着率 ( % ) 、 单个切段平均出芽量
(个 ) 、 再生芽平均长度 (m m ) 、 直立苗平均密度 ( 裸 / 。m Z ) 、 直立苗平均高度 ( m m ) ,
方法同文献 〔 l 〕 和 〔3〕。
结果与讨论
辐照度一温度试验
对干不同辐照度的影响 , 死亡率随辐照度的增大而增高。 切段的再生率 、 附着率 、 平
均芽长及单个出芽量没有明显的变化 , 但表现为 20 一 60 户E m 一 2 · s一 , 范围内切段的再生 、
附着有一定优势 ; 而 10 一 14 0 拜Em 一 2 · s 一 ’ 的辐照度具较大的死亡率 。 从直立苗的长势来
看 , 以直立苗密度和高度为指标 , 也有类似的现象 , 说明辐照度在 20 一 60 拼Em 一 , · : 一 ’ 范
围内对于石花菜切段的培育是适宜的 , 较高的辐照度具明显的损害作用 , 近于黑暗的条件
不利于切段的进一步培育。
对于不同温度的效应 , 较低温度 ( 7 . 5℃ ) 培养 30 天后 , 死亡率较低 , 再生率和附着
率也低 , 平均再生芽数 目较少 , 平均芽长较低 。 说明在较低温度条件下 , 切段的再生缓
慢 , 生长速度也低 , 引起再生切段的附着能力差 , 导致直立苗出现迟缓 , 数量也少 。 随着
温度的升高 , 切段芽的再生 、 附着及生长大为改善 , 切段再生芽平均长度随之增长 , 但单
个出芽量差异不大 。 当温度提高到 27 . 5℃时 , 死亡率剧增 , 相应地再生率降低 , 附着率
亦然 。 45 天后再经过 45 天培育 , 直立苗密度及高度都很低 , 与 7 . 5℃温度处理的直立苗
形成明显对比。 之所以出现这种情况 , 关键在于低温培育生长缓慢 , 后期适宜的条件能够
补偿前期的不良条件 , 以至逐步趋近适宜条件下的生长状况 ; 而高温 ( 27 . 5 ℃ ) 静置培养
将不可逆转地损伤切段 , 甚至导致切段褪色死亡 。
上迷情况说明了在一定辐照度 一温度条件下 , 再生和附着随辐照度一温度的增大而加
快 , 当增大到一定程度时 , 如大于 10 产E m 一 2 · s 一 , 和 2 .7 5℃时 , 代谢速度加快 , 静置培
养巾代谢废物迅速积累 , 影响到切段的生活力 。 培养液 多呈淡黄色 , p H 值升高。 可见 ,
适宜的辐照度 一温度为 20 一 60 召E m 一 2 · s 一 ’ , 1 7 . 5一 2 . 5℃ 。 前期的低辐照度 、 低温条件主
要使切段再生附着缓慢 , 后期经过 4 5 天同样适宜条件的补偿培育 , 直立苗的生长有一定
的恢复 ( 表 1 )o
·
64
· 东 海 海 洋 1 卷 2期
分别统计每一处理 中各个指标并取其均值 , 可以看到不同世代藻体的切段在不同辐照
度一温度条件下培养 , 切段的再生 、 附着没有显著差异 (表 l ) , 表现为再生率 、 附着率比
较接近 。 培育再生切段的生长速度也十分接近 , 表现为单个出芽量 、 平均芽长很相近 。 从
再生到附着 , 形成切旬体 , 直到出现直立苗其形态变化也没有明显的不同 。 对于直立苗的
生长情况 , 三者也十分相似 , 差异在 2% 以内 。 可以认为 , 石花菜的雌 、 雄配子体和抱子
体的切段生长的生态条件 (辐照度 、 温度 ) 是一致的 。 从这三者切段育苗过程 中形态发生
的相似性 , 进而可以得出其唯一的原因是三者有类似于抱子 、 合子发育的进程 , 是同型世
代交替的结果 。
表 l 辐照度一温度对不同世代切段培育的影响 ( 1992 年 l 月 l 日 一 4 月 3 日 )
火户介光辐照度 (” E m 一 2 · s一 ` ) 温度 (℃ ) 不同世 代 .0 20 6 0 ! o ! 40 7乃 12 5 17 ) 2 2 . 5 2 7 . 5 S M F死亡率 (% ) 2一 0 l , 2 3 2 10 . 1 1 5 . 2 0 j 0 . 5 1 . 7 l , 0 2 9 . 5 6 7 6 6 , 8 6 6 . 30
再生率 ( % ) 8 8 . 2 9 2 . 5 9 5 3 8 9 6 8 8 4 8 3 2 9 9 6 9 8 3 9 8』 7 0 . 1 90 . 7 90 . 1 8 9 . 2
附着率 ( % ) 8 6 . 8 90 . 2 9 0 . 7 8 2 . 2 6 9 2 6 2 . 1 9 8 . 3 9 7 7 9 7 , 8 6 8 , 9 8 4 4 84 2 8 4 . 7
平均芽长 ( m m ) 3乃 l 2名3 4 .4 3 ,9 8 2 ,8 0 0 3 4 4 2 5 4 , 9 1 4 . 5 2 3 . 0 8 3 3 7 3 4 5 3 , 4 1
单个出芽量 (个 ) 5 4 3 6 一4 6 7 2 3 6 3 7 5 . 7 7 3 . 10 8乃 5 6 8 8 7 . 17 6乃 , 6一 2 4 6 3 8 6 . 5 1
直立苗密度 (裸 / c m Z ) 3 . 5 5 4 . 40 3 . 4 9 2 3 1 1 9 3 2 , 38 3 6 3 3 . 9 3 3 , 7 2 1 . 7 0 3 . 2 0 3 2 0 3 . 14
直立苗高 ( m m ) .4 64 4 . 80 4 4 5 4 2 5 3 9 5 4万4 4 . 5 5 4 . 5 0 4 . 4 5 4 . 0 7 4 4 5 4 4 3 4 . 3 7
S — 抱 子体世代 . M — 雄配子体 , F— 雌配子体世代 。 90 天后侧 直立苗 。
.3 2 盐度试验
不同盐度对石花菜不同世代藻体切段影响见表 2 , 盐度在 10 一 40 时 , 切段几乎无死
表 2 盐度对不同世代切段培育的影响 ’ ( 19 92 年 4 月 10 ~ 5 月 5 日 )共兰 盐 度 不同世代0 5 l 0 15 2 0 2 5 30 3 5 4 0 4 5 5 0 S M F
死亡率 (% ) 10 0 4 6 . 7 0 0 0 0 0 0 0 4 . 4 17 8 1 3 . 0 17 0 15名
再生率 (% ) 0 5 5石 9 3 3 9 3 . 3 1o 1o 1o 1o 1o 86 7 2 2 . 2 7 7 . 0 7 7 . 6 7 7石
附着率 (% ) 0 2 5 . 3 7 2 . 3 90 . 0 9 1 , 5 8 8 6 9 1 . 5 80 .2 56名 4 0 . 4 0 59 4 5 5刀 58 . 3
单个 出芽量 ( 个 ) 0 4 3 7 0 10 5 10 . 7 10 9 12 . 5 12万 7 、 7 ? . 3 0 . 5 7 . 4 7 . 7 7 . 7
室内散射光 0 一 80 解E m 一 2 · s 一 ` , 温度 ! 7 ~ 2 3℃ , 培养 25 天侧定。
亡 , 当盐度在 5 以下或 4 5 以上时 , 死亡率增大 。 表明石花菜是能够在广盐条件下进行切
段育苗 , 这可能由于切段苗与成体的生态条件要求不同 , 也可能因为切段苗能够适应短暂
的盐度变化 。 当盐度在 15 ~ 35 时 , 培养 25 天 , 发现具有较多的再生芽 , 而盐度低于 10
或高于 4 0 时 , 单个出芽量减少 , 这表明低盐度 ( < 15) 和高盐度 ( > 4 0) 会抑制切段的
骆其君等: 不同世代大石花菜切段育苗的生态试验 .6 5.
再生 。 盐度在 1 5一 3 5范围内 , 单个出芽量在 10 . 7 ~ 12 . 5 之间变化 , 表现出最大的出芽状
况 , 而盐度低于 10 或高于 40 时 , 再生芽数目减少 。 对于附着率也有相似的现象 。
总之 , 对于石花菜不同世代切段培养的适宜盐度为 巧一 35 。 超出这个范围将导致切
段的再生 、 附着及生长几方面出现不 良情况 。
对于不同世代的切段 , 没有明显的差异 , 例如 , 以死亡率 、 附着率 、 再生率及单个出
芽量为指标 , 方差分析结果均无显著差异 , 说明在多种盐度条件下 , 不同世代石花菜切段
的再生 、 附着及生长没有明显的不同 。
3
.
3 p H 试验
p H 低于 .7 0 , 石花菜切段培养后 , 藻体表现为褪色 、 死亡 , 褪色的时 间随 p H 降低
而加快 。 p H 高于 .9 5 , 切段也表现为褪色 、 死亡 。 试验 中加入 N a O H , 调高 p H , 往往在
切段表面形成一层沉淀物 , 覆盖着切段 。 p H 在 7 . 5一 9 .0 之间 , 基本上没有大量切段死亡
的现象 , 切段的再生率均在 90 % 以上 , 尤其以 p H 为 8 . 0 一 8 . 5 的 条件具最高的再生率 。
切段的附着率 、 单个出芽量也有类似的情况 。 总之 , p H 为 7 . 5一 9 . 0 是石花菜切段培养的
适宜条件 , 最好的 p H 为 8 . 0一 .8 5。 这与 自然环境下海水的 p H 值一致 (见表 3)
表 3 p H 对不同世代切段培育的影晌 ( 199 2 年 3 月 25 日一 4 月 15 日 )万炭… P H 不同世代6 . 0 6 . 5 7 . 0 7 . 5 8 . 0 8 . 5 9 0 9 . 5 S M F死亡率 ( % ) 1o 1o 1o 0 0 0 0 1 o 5 0 5 0 5 0
再生率 ( % ) 0 0 0 9 8 . 3 1o 1o 9 3 . 3 0 4 9 . 1 4 7名 5 0 . 0
附着率 (% ) 0 0 0 9 3 . 3 9 8 3 9 7 . 0 8 3 . 7 0 46 , O 4 6 .4 4 8 . 1
单个出芽 t (个 ) 0 0 0 8刀 10 . 1 9 . 4 7 . 9 0 4 . 9 4 . 8 3 . 9
至于石花菜不同世代的切段培育情况 , 无论在何种 p H 条件下 , 其平均死亡率 、 再生
率 、 附着率和单个出芽量都很相近 , 表现出三者切段的再生和附着没有很大不同 。 这三种
世代的藻体均可作为切段育苗研究 、 试验和生产的种藻 , 说明大石花菜切段的培育不受季
节限制 , 也不受藻体是否已形成生殖器官的限制 。
参考文献
l 裴鲁青等 . 大石花菜切段再生育苗的初步研究 . 浙江水产学院学报 , 19 8 , , ( 2) : ” 一 10 5
裴奋青等 . 大石花菜切段再生育苗的进一步研究 . 浙江水产学院学报 , 19 89 , 8 (2 ) : 1 13 一 12 2 .
装奋青等 . 石花莱切段苗种海上培育的初步研究 , 浙江水产学院学报 , 19 91 , 10 (2 ) : 1 10 一 1 16 .
张全启 . 角叉菜原生质体分离 、 培养与再生的研究 . 青岛海洋大学学报 , 1 , 91 , 21 ( l) : 52 一 6.2
陈昌生等 . 五种江翻切段离体培养的研究 . 福建水产 , 19 87 , ( 2) : 19 一 23 .
X
.
G
.
F e i & L
.
J
.
H ua
n g
.
A r it if e i a l s op 邝 lin g a n d if e ld e u lit v a it o n o f G e il d ium in C hi n a
.
H y d r o b io lo gy
,
19 1
,
22 1
1 16 ~ 124
.
·
6 6
· 东 海 海 洋 1 1 卷 2期
Ao e cl o g ieal s加d yo n t hr a e is ingo fs e edl ingso f
d if e
r e n tg e n er a t io nsr fa gm e n to s f G el d i i帅p a e in eum o kam
L uo Q i孙 n, P e i L u q i n g , F e i Z h i q i n g
( Z h ej ia gn F is h
e r如 C o lleg e , N功 g b o B r a n c h , 刃动 g b o , 3 1 50 10 )
A加 tr 自Ct
T h e fr a g m e n t s o f fe m a l e g a m e t o P h y t e
,
m a le g a m e t o P h y t e a n d s P o r o P h y t e o f G e l id
u m
aP
c劳e u m O k a m . a er u s e d i n th e s t u d y o n t h e er g e n e r a t i n g , s o w i n g a n d r a i s i n g e r ec t s e e d l i n g s
u n d e r v a ir o u s e n v i r o n m e n t a l e o n d i ti o n s
,
w h ie h e o n s i s t s o f d i fe
r e n t i r r a d i a n e e 一 t e m P e r a t u r e ,
P H a n d s a li n i t y
.
T h e s e t h r e e g e n e r a ti o n s P r e s e n t t h e s im i li a r e fe
e t s
.
T h e o P t iu m e o n d i t i o n s a r e
1 7
.
5一 2 2 . 5 o f t e m P e r a t u r e , 1 5一 35 o f s a l i n i t y , 2 0一 6 0 拜E m 一 25 一 l o f i r r a d ia n e e , 8 . 0一名 . s o f
P H
.
K e y , o油 : fr a g m e n t s o f G e l众iI u m p a e价 e u用 O k a m . , r a i s i n g o f s e e d li n g s , e e o l o g y , g e n e r -
a t i o n s