全 文 ：铁钉菜和珊瑚藻提取物抗菌活性的初步研究
林雄平1，彭 彪1，陈慧斌2，蔡彬新1，吴发旺1
（1.宁德师范学院 生物工程系，福建 宁德 352100；2.厦门海洋职业技术学院 生物系，福建 厦门 361012）
摘要：采用圆纸片法对铁钉菜、珊瑚藻粗提取物及萃取得到的不同极性组分进行抗菌实验.结果表明：铁钉
菜和珊瑚藻均有不同程度的抗菌作用，其中铁钉菜和珊瑚藻提取物的抗细菌活性较强，而对真菌几乎没有抑菌
作用.
关键词：铁钉菜；珊瑚藻；圆形纸片法；抗菌活性
中图分类号：Q 946.8；R 931.77 文献标识码：A 文章编号：2095-2481（ 012）04-0352-03
铁钉菜（Ishige okamurae Yendo.）属于褐藻门索藻目铁钉菜科，在我国东海、南海分布广泛，是我国
重要的经济和药用海藻，民间通常用于喉炎、淋巴结炎、甲状腺肿的治疗，具有清热解毒、软坚散结的作
用[1].珊瑚藻（Corallina officinalis L.）属于红藻门隐丝藻目珊瑚藻科，生活于中潮带岩礁上或石沼内，沿海
皆有分布.全藻供药用，可作为驱蛔虫药[2].对铁钉菜、珊瑚藻抗菌方面的研究很少见到报道.本文以铁钉
菜、珊瑚藻为材料，研究了铁钉菜、珊瑚藻的乙醇和乙醚粗提取物及它们不同有机溶剂萃取物的抗菌活
性，为进一步开发利用海藻天然活性物质提供资料.
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 海藻种类 铁钉菜（Ishige okamurae Yendo.）和珊瑚藻（Corallina officinalis L.）两种海藻2009年7
月采自福建省石狮市永宁海岸岩滩上.
1.1.2 受试菌种 本实验的受试菌有3种细菌与2种真菌.其中3种细菌分别是大肠杆菌（Escherichia col－
i）、钾细菌（Silicate bacteria）、枯草杆菌（Bacillus subtilis），2种真菌分别是青霉（Penicillium glaucum）、黑
曲霉（Aspergillusniger）.菌种均来自宁德师范学院的微生物实验室.
1.1.3 培养基 培养细菌的为牛肉膏蛋白胨培养基，培养真菌的为马铃薯培养基[3].
1.1.4 试剂 95%乙醇（AR）、乙醚（AR）、乙酸乙酯（AR）、氯霉素.
1.2 方法
1.2.1 海藻样品的处理 海藻采回进行分类鉴定后，挑去杂藻，用自来水洗去样品表面的附生物、盐分
等杂质，于通风处阴干，用植物粉碎机粉碎至40目，保存于干燥器中备用.
1.2.2 索氏抽提法提取海藻粗脂 准确称取真空干燥后的铁钉菜、珊瑚藻藻粉各30g，分别在索氏抽提
器中用乙醚回流抽提（45℃水浴）72h，蒸干溶剂，测定粗脂含量，再分别加入乙醚，配成0.1g/mL的粗脂乙
醚溶液，用于抗菌实验.
1.2.3 海藻乙醇粗提取物的制备 分别称取铁钉菜、珊瑚藻藻粉各60g，用300mL95%乙醇在45℃温浴浸
提3d，过滤，滤渣再重复提取两次，每次提取3d，合并三次的提取液，蒸干溶剂得到黑褐色的固体浸膏，即
收稿日期：2012-06-13
通讯作者：林雄平(1979-)，男，讲师. E-mail：lxp2002333@163.com
基金项目：福建省教育厅 B类科技研究项目(JB10187)；福建省宁德市科技计划项目(20100033)；宁德师院服务海西项
目（2010H305）；宁德师专校资助项目(2009203)
宁德师范学院学报(自然科学版)
JournalofNingdeNormalUniversity(NaturalScience)
第24卷第4期
2012 年11月
Vol.24№.
Nov.2012
DOI:10.15911/j.cnki.35-1311/n.2012.04.013
海藻乙醇粗提取物，称重，再分别加入95%乙醇，配成0.1g/mL的乙醇溶液，用于抗菌实验.
1.2.4 乙醇粗提取物的萃取 将乙醇粗提取物加入10倍体积的蒸馏水，充分溶解后，用乙酸乙酯萃取，
得到低极性的乙酸乙酯相和高极性的水相，分别蒸干，称重，再分别加入乙酸乙酯和蒸馏水，配成0.1g/mL
的乙酸乙酯和蒸馏水溶液，用于抗菌实验.
1.2.5 抗菌实验 采用圆形滤纸片法：用接种环分别从每种受试菌的斜面上刮取菌苔于5mL无菌水中，
充分震荡摇匀后，得到5种菌悬液，浓度约为：细菌2.2×106个/mL，真菌1×106个/mL（孢子或菌丝）.将5种菌
悬液分别倒入150mL溶化并冷却至40～45℃的相应培养基中，摇匀后，迅速分装于培养基中，每个培养皿
约倒入20mL.待凝固后，取已消毒过的圆形纸片（准6mm）两片重叠，分别用微量吸液管注入每种待测溶
液、氯霉素（作为阳性对照）以及相应的溶剂（作为阴性对照）20μL，略干后，贴于培养基平板上，尔后置于
培养箱中倒置培养（细菌36～37℃，真菌28～30℃），18～24h（细菌）和48～72h（真菌）后分别观察结果，测定
抑菌圈宽度的大小.以上步骤均按无菌条件操作.
2 结果与分析
2.1 铁钉菜不同提取物的含量及抗菌活性分析
2.1.1 铁钉菜不同提取物的含量 60g铁钉菜乙醇浸提后得到6.5419g，提取率10.90%，其中3.9524g用于
萃取分离，得到水相2.2211g，乙酸乙酯相1.4232g，分别占原组分的56.20%和36.00%，可见铁钉菜乙醇提
取物中以强极性物质为主.30g铁钉菜乙醚索氏抽提后得到1.5274g，提取率5.09%.比较乙醚和乙醇粗提物
发现，乙醇粗提物提取率是乙醚粗提物提取率的2倍多.
2.1.2 铁钉菜提取物的抗菌活性的分析 实验结果见表1.由表1可见，在对细菌的抑制活性中，铁钉菜的
乙醇粗提物及其乙酸乙酯相对枯草杆菌具有抑制活性，但抑菌活性较弱，抑菌圈只达到1.0mm.除此外，
均无抑菌活性.用于阳性对照的氯霉素对细菌的抑菌能力很强，但对真菌不起抑制作用.
表 1 铁钉菜提取物抑菌活性结果
提取物
抑菌圈宽度/mm
大肠杆菌 钾细菌 枯草杆菌 黑曲霉 青霉
乙醚 - - - - -
乙醇 - - 1.0 - -
水相 - - - - -
乙酸乙酯相 - - 1.0 - -
空白对照 - - - - -
阳性对照 9.5 7.0 7.0 - -
注：“—”表示无抑菌活性，下同.
2.2 珊瑚藻不同提取物的含量及抗菌活性分析
2.2.1 珊瑚藻不同提取物的含量 60g珊瑚藻乙醇浸提后得到2.5193g，提取率为4.20%，其中1.4587g用
于萃取分离，得到水相1.2255g，乙酸乙酯相0.1454g，分别占原组分的84.01%和9.97%，可见珊瑚藻乙醇提
取液中也以强极性物质为主.30g珊瑚藻乙醚索氏抽提后得到0.3956g，提取率1.31%.比较珊瑚藻乙醇和乙
醚粗提物提取率发现，乙醇粗提物的提取率是乙醚的3倍多.
2.2.2 珊瑚藻提取物的抗菌活性的分析 珊瑚藻提取物的抑菌实验结果见表2.由表2可见，乙醇与乙醚
提取物对细菌具有较强的抑菌作用，其中对枯草杆菌、大肠杆菌和钾细菌的抑菌圈均达到1~2mm.珊瑚藻
乙醇提取物的水相对5种菌均没有抗菌活性，而乙酸乙酯相对大肠杆菌和枯草杆菌的抑菌活性比乙醇粗
提物强，其中乙酸乙酯相对大肠杆菌的抑制作用较强，达到3.0mm.实验中只有乙醚提取物对真菌起抑制
作用，其抑菌圈可达到3.0mm，其余的提取物均不起作用.
林雄平等：铁钉菜和珊瑚藻提取物抗菌活性的初步研究第4期 353· ·
表 2 珊瑚藻提取物抑菌活性结果
提取物
抑菌圈宽度/mm
大肠杆菌 钾细菌 枯草杆菌 黑曲霉 青霉
乙醚 2.0 1.0 1.0 3.0 -
乙醇 2.0 1.5 1.0 - -
水相 - - - - -
乙酸乙酯相 3.0 - 1.5 - -
空白对照 - - - - -
阳性对照 9.5 7.0 7.0 - -
2.3 铁钉菜和珊瑚藻得率和抗菌活性比较
通过比较铁钉菜和珊瑚藻的得率发现，乙醇粗提物的得率都高于乙醚粗提物.而对两种海藻乙醇粗
提物的萃取组分来看，强极性溶解物均占主体部分，特别是珊瑚藻.从抗菌活性来看，铁钉菜除了对枯草
杆菌具有一定的抑制作用外，对其它菌均无抗菌活性，而珊瑚藻则对三种细菌以及黑曲霉都具有一定的
抑制作用.由此可见珊瑚藻的抗菌活性强于铁钉菜.而就细菌与真菌的敏感性相比较，细菌相对更敏感，
易受各种提取物的抑制，而真菌较不敏感.
3 讨论
海藻活性物质的提取，通常都是采用有机溶剂，而不同的有机溶剂对海藻的提取率不一样，主要是
由于从中获得脂类、酚类、有机酸等可溶性的物质不同.本实验发现乙醇粗提物的得率明显都高于乙醚粗
提物.在海藻的甲醇提取物的抗细菌筛选中，发现大部分海藻提取物对细菌具有抑制效果[4].本实验也证
明了绝大部分提取物对细菌具有抑制作用.在对不同溶剂的海藻抗菌活性筛选实验上，人们发现乙醇提
取物的活性最好[5].在本实验的筛选中，对乙醇与乙醚的海藻提取物的抗菌活性进行比较，也证实了乙醇
提取物的抗菌活性较好.
有关藻类提取物的抗细菌和抗真菌活性的比较，从大型海藻的研究中可以看出通常是抗细菌的活
性大于抗真菌的活性[6].本实验也证明了大部分海藻提取物对细菌的抗菌活性远远大于抗真菌活性.据报
道，铁钉菜乙醇提取物具有较强的抗真菌活性[7，8].但本实验中，铁钉菜的抑菌活性却不是很强，这可能采
用的方法不同结果有所差异.另外，珊瑚藻显示了较好的抑菌活性，可作为抗菌的活性物质资源进一步进
行研究.
参考文献：
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（下转第358页）
宁德师范学院学报(自然科学版) 2012年11月354· ·
Research on the Antimicrobial Activities of Extracts from Ishige
okamurae Yendo. and Corallina officinalis L.
LIN Xiong-ping1，PENG Biao1，CHEN Hui-bin2，CAI Bin-xin1，WU Fa-wang1
( 1.Department of Biology, Ningde Normal University, Ningde，Fujian 352100, China;
2. Department of Biology, Xiamen Ocean Vocational College, Xiamen，Fujian 361012, China )
Abstract: Crude extracts and fractions were separated from ethanol extracts from Ishige okamurae
Yendo; and Corallina officinalis L. were tested for their efficacy against three kinds of bacteria and two
kinds of fungi through the circle agar disc diffusion method. The results showed that extracts of Ishige
okamurae Yendo.and Corallina officinalis L had different degree of antimicrobial activities. Among these,
the Ishige okamurae Yendo. and the Corallina officinalis L. all showed strong antimicrobial activities
against bacteria, but they showed seldom activities against fungi.
Key words: Ishige okamurae Yendo.; Corallina officinalis L.; circle agar disc diffusion method;
antimicrobial activity
Tissue culture of albus guripingensis
CHEN Ai-Ping
( Department of Biology, Ningde Normal University, Ningde，Fujian 352100, China )
Abstract: The optimum explants to be gotten were budllets using konjak as inoculating materials. At
different dose of hormone, MS+6-BA0.5mg/L+NAA1.0mg/Lappeared to be optimum for callus induction,
with an induction rate of 94.9%.For regeneration of plantlets from the callus, and the optimum medium
was MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L, with a differentiation rate of 95.2%. All the regenerated plantlets
rooted readily on MS+NAA0.3~0.5mg/L and grew into complete plants.
Key words: albus guripingensis; tissue culture; plant regeneration
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宁德师范学院学报(自然科学版) 2012年11月358· ·