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浓缩单胞藻在虾夷扇贝育苗中的应用效果



全 文 :第 24卷第 4期 大 连 水 产 学 院 学 报 Vol.24No.4
2 0 0 9年 8月 JOURNALOFDALIANFISHERIESUNIVERSITY Aug.2 0 09
文章编号:1000-9957(2009)04-0317-04
浓缩单胞藻在虾夷扇贝育苗中的应用效果
周玮 1、 2 , 王国栋 1 , 宋善旗2
(1.大连水产学院 农业部海洋水产增养殖学重点开放实验室 , 辽宁 大连 116023;
2.大连水产学院生命科学与技术学院 , 辽宁大连 116023)        
摘要:将超滤浓缩单胞藻分别以 25%、 50%、 75%和 100%的比例与鲜活饵料配合用于培育虾夷扇贝 Pati-
nopectenyessoensis幼虫 , 通过对虾夷扇贝苗种培育过程中幼体生长发育指标的观测和水质指标的分析 , 研
究了浓缩单胞藻在贝类育苗中的应用效果。结果表明:100%浓缩藻组水质较稳定;培育前期 , 25%、 50%
的浓缩藻组对苗种无不利影响;中后期幼体的附着率 、 成活率均高于单独投喂鲜活饵料的对照组 , 表明在
幼体的中后期可完全投喂浓缩单胞藻饵料。
关键词:浓缩单胞藻;虾夷扇贝;育苗
中图分类号:S963.21    文献标志码:A
  单胞藻是海珍品苗种培育的重要基础生物饵
料 。单胞藻的生产费用通常占海珍品育苗全部生产
费用的 20% ~ 30%[ 1] 。在目前生产水平下 , 单胞
藻培养很不稳定 , 经常受到诸如气候 、设备 、 操作
方法等很多条件的制约[ 2] , 因此海珍品育苗生产
过程中 , 单胞藻饵料的供应情况仍是影响育苗生产
效果的重要因素 。为解决此问题 , 国内外均开发出
许多单胞藻浓缩产品 , 如保存藻泥 [ 3 -4] 、 浓缩藻
膏 [ 5-6] 、浓缩藻液等产品 。尽管浓缩单胞藻在海珍
品苗种生产领域受到广泛的重视 , 但有关浓缩单胞
藻投喂效果的研究报告相对较少。杨秀生等 [ 7]使
用扁藻干制品 (扁藻粉和扁藻精)对海湾扇贝浮
游幼虫进行投喂试验 , 表明扁藻干制品可以作为鲜
藻的替代品用于扇贝育苗;王培磊 [ 8] 在浓缩藻冷
冻保存技术研究中 , 进行了海湾扇贝幼虫对浓缩藻
保护剂选择的试验 , 结果使用甘油作为保护剂的浓
缩藻取得了良好效果 。 2008年 , 作者将浓缩藻产
品用于贝类育苗生产 , 通过进行浓缩单胞藻产品投
喂效果的试验 , 对浓缩单胞藻产品在海珍品苗种生
产中的应用前景进行了探讨。
1 材料与方法
1.1 材料
试验用虾夷扇贝 PatinopectenyessoensisD型幼
虫由大连金州陆源海产科技园提供 , 幼虫大小为
(110.1±1.5)μm×(90.3±2.5)μm。
鲜活藻液用传统方法单种培养所得 , 分别为湛
江等鞭金藻 Dicrateia.zhanjiangnsis(106个 /mL)
(简称金藻)、 新月菱形藻 Nitzschiaclostertum (106
个 /mL)(简称菱形藻)、亚心型扁藻 Platymonas.
sp.(105个 /mL)(简称扁藻)。浓缩藻由中空纤维
超滤浓缩机浓缩制成 , 浓缩后在冰箱 (0 ~ 4 ℃)
中保存 3个月备用。浓缩单胞藻分别为金藻 (108
个 /mL)、 菱形藻 (108个 /mL)和扁藻 (107个 /
mL), 投喂前镜检上述浓缩单胞藻无活性。
试验用海水为砂滤水 , 水温为 14.0 ~ 15.0 ℃,
盐度为 30.0 ~ 30.4, pH为 7.90 ~ 8.00, TNH+4 -N
含量小于 9.6g/L。试验过程中 24 h连续微充气。
1.2 方法
试验中按浓缩藻替代鲜活藻的不同百分比设计
5个试验组 , 记为 A、 B、 C、 D、 E组 , 饵料组成
分别为 100%鲜活藻液 、 25%浓缩藻液 +75%鲜活
藻液 、 50%浓缩藻液 +50%鲜活藻液 、 75%浓缩藻
液 +25%鲜活藻液 、 100%浓缩藻液 。其中 A组为
对照组 , 每个试验组均设 2个平行 。浓缩藻和鲜活
藻液的组成相同 , 均由金藻 、 菱形藻和扁藻组成 ,
比例为 5∶3∶2。
试验在 100 L的塑料水槽中进行 , 每槽加入海
水 80 L, D型幼虫投放密度为 8个 /mL, 各试验组
 收稿日期:2008-07-10
 基金项目:大连市优秀人才基金资助项目 (2002031)
 作者简介:周玮 (1963-), 男 , 教授。 E-mail:zhouwei@dlfu.edu.cn
DOI :10.16535/j.cnki.dlhyxb.2009.04.010
分别按试验设计的比例投喂 , 每天 4次 , 日投喂量
根据幼虫摄食情况进行调整 , 即 (0.5 ~ 5) ×104
个 /d;每天 6:30和 18:30换水 50%;浮游幼体培
育到眼点幼体期时 , 投放聚乙烯网片附着基 , 每槽
放入 3片。幼体完全附着变态后 , 结束试验。
每次倒池后对各组随机取 30个幼虫进行固定
并测量大小 , 同时计数各组密度;计算幼虫的特定
生长率 (SGR)、 浮游存活率和附着成活率。
跟踪测定 A组和 E组不同日投喂量下的水质
变化情况 , 测定换水前后 、投饵前后 TNH+4 -N的
变化情况。
幼虫特定生长率和浮游存活率的计算公式为
  SGR(%/d)=(lnLt-lnL0)/t×100,
  存活率 =投附着基前幼虫的个数D型幼虫的个数 ×100%,
式中:L0、 Lt分别为试验初始 、 试验 t天时幼虫的
平均壳长 (μm);t为试验天数 (d)。
附着成活率的测定 试验结束时 , 在每个附有
稚贝的网片上分别沿对角线由上到下剪取 3个网
扣 , 放入含体积分数为 4%的甲醛海水中 , 不断震
荡使稚贝脱落 , 约取 50只稚贝转移到方型皿中 ,
在显微镜下随机测量 30个稚贝的大小和每个网扣
上稚贝的平均数量(空壳不计), 以此计算附着成
活的稚贝数 。
采用次溴酸盐氧化法测定 TNH+4 -N含量。
1.3 数据分析
试验数据均以平均值 ±标准差表示 , 结果用
SPSS11.5统计软件中 One-WayANOVADuncan
方法进行方差分析 , 显著性水平为 0.05。
2 结果
2.1 浓缩藻对虾夷扇贝幼虫生长速度的影响
从 D型幼虫选育到投放附着基 , 共饲育 17 d。
从表 1可见:试验初期 , 鲜活藻液组的投喂效果较
好 , 第 3d时 , 随着鲜活藻液比例的增加 , 个体特
定生长率依次升高 , 100%鲜活藻液组 (A组)为
3.410 %/d, 100%浓缩藻液组 (E组)降到 3.369
%/d;浓缩藻含量超过 50%以上的 D组与 E组之
间的生长效果差异不显著 (P≥0.05), 浓缩藻含
量在 50%以下的 A组 、 B组 、 C组的特定生长率
之间差异不显著 (P≥0.05), 但 C组与 D组之间
显著差异 (P<0.05)。随着培育时间的延长 , 浓
缩藻与鲜藻液投喂效果的差异逐渐缩小 , 到 13 d
以后各组间的特定生长率差异均不显著 (P≥
0.05), 而且浓缩藻含量高的试验组开始表现出生
长优势。 17d时 100%浓缩藻组 (E组)的特定生
长率超过其他试验组 , 达到 5.137%/d。
表 1 浓缩藻对虾夷扇贝幼虫特定生长率的影响
Tab.1 SpecificgrowthratesoflarvalyessoscallopPatinopectenyessoensisfedtheconcentratedmicroalgae %/d
组别 group 浓缩藻∶鲜活藻 concentraed∶fresh 3d 8d 13d 17d
A 0%∶100% 3.410±0.011a 4.552±0.021a 4.974±0.001a 5.118±0.001a
B 25%∶75% 3.399±0.004a 4.530±0.003a 4.957±0.011a 5.108±0.004a
C 50%∶50% 3.397±0.006a 4.516±0.008ab 4.951±0.005a 5.119±0.005a
D 75%∶25% 3.376±0.001b 4.445±0.059bc 4.963±0.034a 5.117±0.027a
E 100%∶0% 3.369±0.006b 4.437±0.011c 4.992±0.006a 5.137±0.008a
注:同列中标有不同小写字母者表示组间差异显著 (P<0.05), 标有相同小写字母者表示组间差异不显著 (P>0.05), 下同。
Note:Themeanswiththediferentleterswithinthesamecolumnaresignificantdiferencesatthe0.05probabilitylevel, andthemeanswiththesame
leterswithinthesamecolumnarenotsignificantdiferences, etsequentia.
2.2 浓缩藻对幼虫存活率 、附着成活率的影响
从表 2可见:各试验组扇贝幼虫均能正常生长
发育 、 变态 , 从 D型幼虫到眼点幼虫 , 存活率均
在 63.75%以上 , 各试验组幼虫的存活率在整个试
验期间差异均不显著 (P≥0.05), 表明浓缩藻的
投喂量对幼体成活率的影响不大;稚贝附着成活率
与浓缩藻用量具有一定的相关性 , 即随着浓缩藻比
例的增加 , 附着成活率呈现增加的趋势 , 其中以 E
组最好 (44.07%), D组次之 (42.20%), 对照
组 (A组)最差 (37.18%), 各试验组之间差异
均不显著 (P≥0.05)。因此 , 低温下保存的超滤
浓缩单胞藻完全可以用于虾夷扇贝苗种培育期。
2.3 投喂浓缩藻对育苗环境中 TNH+4 -N的影响
从图 1可见 , 浓缩藻的投喂对育苗环境中
TNH+4 -N含量变化呈显著的相关性 。在不同日投
饵量组中 , E组的 TNH+4 -N含量均比鲜活藻液组
318 大 连 水 产 学 院 学 报            第 24卷
A组低 , 两组差值随日投饵量的增加而变大;同
时 , 各组 TNH+4 -N指标变化随时间的增加和换水
次数的增加呈波浪型上升趋势。
表 2 投喂浓缩藻的虾夷扇贝幼虫的存活率 、附着成活率
Tab.2 SurvivalratesandsettlementofthelarvalyessoscalopPatinopectenyessoensisfedtheconcentratedmicroalgae
组别group
出现眼点幼虫时间eyespotappearingtime
眼点幼虫密度 /(个· mL-1)eyespotlarvaldensity
眼点幼虫数量 /万个eyespotlarvalamount
幼虫存活率 /%survivalratesoflarvae
附着稚贝数量 /万个juvenilesettlement
稚贝附着成活率 /%survivalratesofjuveniles
A
B
C
D
E
02-23
02-24
02-24
02-23
02-23
5.6±0.2
5.8±0.4
5.1±0.3
5.3±0.3
5.7±1.1
45.20±1.70
46.40±0.34
40.80±0.23
42.40±0.23
45.60±0.91
70.63±0.03
72.50±0.05
63.75±0.04
66.25±0.04
71.25±0.14
15.63±1.02
16.83±2.14
17.28±2.19
19.00±1.23
19.60±0.97
37.18±0.02
38.43±0.05
39.88±0.07
42.20±0.01
44.07±0.11
注:各组培育密度均为 8个 /mL, D型幼体数量均为 64万个 , 投附着基时间均为 2月 26日。
 注:横坐标中 , 1为倒池后 , afterexchangingofatank;2为投饵后 , afterfeeding;3为第一次换水前 , beforethefirstwaterexchanging; 4
为第一次换水后投饵前 , afterfirstexchangingandbeforefeeding;5为投饵后 , afterfeeding; 6为第二次换水前 , beforethesecondwa-
terexchanging;7为第二次换水后投饵前 , aftersecondexchangingandbeforefeeding;8为投饵后 , afterfeeding。
图 1 不同条件下 A、 E组 TNH+4 -N的变化曲线
Fig.1 TheNH+4 -Nvariationcurveindailybaitdensityof(0.5、 1.5、 2.0、 5.0) ×104 cels/mL
3 讨论
虾夷扇贝对食物的选择一般有赖于浮游生物的
大小 , 只要食物颗粒的大小适宜就被滤食 [ 3-4] 。因
此饵料生物形态只要营养平衡 , 颗粒大小合适 , 且
具有一定的悬浮性 , 用来饲喂双壳贝类是可行的 。
从幼体特定生长率角度分析 , 试验初期鲜活藻液组
的投喂效果明显优于浓缩藻组 , 且浓缩藻投喂比例
越大 , 幼体特定生长率越低 , 这种现象突出表现在
试验的第 3天。分析其原因 , 可能与扇贝幼体开口
期 D型幼虫幼小纤细 、 摄食能力低以及对外界环
境条件变化的应付能力差有关 , 同时也与幼虫培育
时期新陈代谢水平低 , 对饵料的营养吸收有较高的
要求有关 。试验第 3天以后 , 相关因素的影响趋势
开始发生逆转 , 第 8天时浓缩藻与鲜活藻液投喂效
果的差异逐渐缩小 , 到第 13天以后各组特定生长
率差异不显著 (P≥0.05), 而且浓缩藻含量高的
试验组开始表现出生长优势 , 第 17天时 100%浓
缩藻组的特定生长率超过所有试验组。这是因为随
着扇贝幼体的生长 , 其对饵料的摄食能力加强 , 同
时营养代谢水平提高 , 表现出较强的生理适应性。
另外 , 采用超滤浓缩后的单胞藻 , 最直观结果就是
319第 4期          周玮 ,等:浓缩单胞藻在虾夷扇贝育苗中的应用效果
将饵料体积大大缩小 , 利用超滤原理 , 将藻细胞和
含有大量营养盐的细胞培养液以及在藻液中的其他
杂质滤除 , 这样仅仅保留了扇贝幼虫生长发育所必
需的营养源 ———单胞藻。在外界环境波动较小的环
境中 , 更利于扇贝幼体后期的生长 、 附着 、 变态 。
因此 , 作者认为 , 浓缩单胞藻可以作为扇贝幼体饵
料用于苗种培育生产 。在浓缩单胞藻的使用上 , 幼
体选育后 8 d内浓缩单胞藻饲喂量控制在 50%以
下 , 比例可逐步提高 。幼虫培育后期 , 特别是稚贝
附着以后 , 可全量使用浓缩藻饲育扇贝苗种。
扇贝幼体培育池内的水质变化 , 主要由苗种的
代谢产物 、 死亡个体的腐败矿化 、投喂老化变质的
饵料及投喂鲜活单胞藻时带入的大量营养液等多方
面原因引起 [ 9] 。本试验中 , 完全投喂浓缩藻组 (E
组)和投喂鲜活藻组 (A组)的对照试验表明 ,
投喂浓缩藻液可以最大限度地减少营养液对水质的
污染。饲喂前期 (3 d和 8 d)E组幼虫生长速度
慢于 A组 , 而此后 E组的生长超越 A组 。如果从
水质环境的角度分析 , 幼体培养到中后期 , 随着单
胞藻投喂量的增加 , 投喂浓缩藻则减少了大量培养
液的带入 , 可有效地控制育苗水质的污染 , 使得扇
贝幼虫生活在一个更稳定的环境中 。这与王培磊
等 [ 10]认为将鲜活藻液浓缩制成藻膏投喂苗种可减
少水质污染的观点一致。
单胞藻是海珍品育苗生产中不可缺少的基础饵
料 。目前育苗所需的单胞藻 , 基本上还是沿用传统
的育苗配套设施培养 。由于受单细胞藻类自身固有
的生长 、繁殖规律及其培养设施 、天气情况 、 培养
技术等条件的制约 , 影响了苗种生产的顺利进行 。
浓缩单胞藻技术的出现 , 打破了海珍品育苗和单胞
藻生产同步的模式 , 使海珍品苗种培育摆脱了对单
胞藻培养的依赖 , 增强了生产的稳定性 , 同时还节
省了大量的培养水体 、 能源和劳力。如果生产浓缩
单胞藻的成本降低且保存时间延长 , 将有望成为未
来水产育苗期单胞藻饵料供应的主要来源。
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Theutilizationofconcentratedmicro-algaeinhatchery
productioninyessoscalopPatinopectenyessoensis
ZHOUWei1, 2 , WANGGuo-dong1 , SONGShan-qi2
(1.KeyLaboratoryofMariculture, AgricultureMinistry, PRC, DalianFisheriesUniv., Dalian116023, China;
2.SchoolofLifeScienceandTechnology, DalianFisheriesUniv., Dalian116023, China)       
Abstract:ThelarvalyessoscalopPatinopectenyessoensiswereassignedto5groups, andfedthemixtureofcon-
centratedmicro-algaefiltratedbyholowfibermembraneatarateof25%, 50%, 75% and100%andfreshmi-
cro-algaetoevaluatetheefectsoftheconcentratedmicro-algaeonthegrowth, anddevelopmentofthelarvae
andthewaterquality.Theresultsshowedthattherelativestablewaterqualitywasobservedinthegroupwith
100% concentratedmicro-algae.Therewasnoadverseimpactontheearlylarvaeinthegroupwith25% to50%
concentratedalgae.Thesurvivalratesandsetlementratesofthelarvaewerealhigherthanthoseinthecontrol
groupduringthemid-andlaterrearingperiod.
Keywords:concentratedalga;Patinopectenyesoensis;larvalcultivation
320 大 连 水 产 学 院 学 报            第 24卷