全 文 ：60西北药学杂志 1 9 9 9年 4月 第 4 1卷 第 2 期
· 药理 ·
滇白珠抗菌抗炎和镇痛活性的实验研究
张治针 果德安 李长龄 郑俊华 小汝一男 ’ 贾仲华 ’ 二阶堂保 ` (北京医科大学药学院 北京 1 0 0 08 3)
摘要 淇 白珠根挥发 油对金黄葡萄球 菌 、 绿脓杆 菌 、 大肠杆 菌和 变形 杆菌均有抑制作用 ;滇 白珠根醋酸乙醋
和正丁醉提取物 显著抑制小 鼠腹腔毛细血管通透性而具有杭炎作用 ,对热致疼痛具有明显的镇痛作 用 。
关键词 淇 白珠 ; 杭炎 ;镇痛 ; 抑 菌
S t u d y o n a n t i b a e t e r i a l
, a n t i
一
i n f l a m m a t o r y a n d a n a l g e s i e a e t i v i t i e s o f
G a u l t h e r i a y u n n a n e n s i s
Zh a n g Z h i z h e n
,
G u o D e a n
,
L i C h a n g l i n g
,
Z h e n g J
u n h u a ( s
c入o o z of 尸丙a o n a c e u t i c a z S c i e n e e s , 刀e ij n g 腼 J ic a l v , : i-
v e sr i yt
,
B e ij i
n g 1 0 0 0 8 3 )
A B S T R A C T T h e r e s e a r e h r e s u l t s s h o w e d t h a t t h e v o l a t i l e 0 11 f r o m t h e r o o t s o f G a u l t h e r i a 少 u n n a n e n s i s
h a d b a e t e r i o s t a t i e a e t iv i t y
.
T h e e x t r a e t s w i t h a e e t a t e a n d b u t y l a l e o h o l p o s s e s s e d s t r o n g a n t i
一
i n f l a m m a t o r y
a n d a n a l g e s i e a e t i v i t i e s i n m i e e
.
K E Y W O R D S G
a u l t h e r i a 少u n n a n e n s i s ; a n t ib a e t e r i a l ; a n t i 一 i n f la m m a t o r y ; a n a l g e s i e
滇 白珠 为 杜 鹃 花科植物 滇 白珠 G a u l t h er ia
y u n n a
, , e n s i s ( F r a n c h
·
) R e h d
. 的根 ,具有祛风除湿 、
活血化疲 、 通络止痛 、 清热解毒等功效 , 用于风湿性
关节炎 、关节肿痛 、跌打损伤 、 慢性气管炎 、 风寒感 冒
等症 〔` , 。 为了探讨滇白珠抗炎 、 消肿 、 止痛 、清热解毒
等作用的活性部位及活性成分 , 我们对其挥 发油和
乙醇提取物的作用进行了初步研究 。
1 实验材料
1
.
1 菌 种 金 黄 葡 萄 球 菌 ( tS a P h刃oc cu :
a u er u : )
, 绿脓杆菌 ( P s e u d o m o , : a s a e r u g i , , o s e ) , 大
肠杆菌 ( E cs h er ich ia co 石 ) (北京医科大学第三临床
医学院细 菌室 ) ;变形 杆菌 ( P r o t e u s v u l g a r i s ) ( 中
国药品生物制品检定所 ) 。
1
.
2 试 药 滇 白珠 〔贵阳中医学 院孙学蕙 教授 收
购 , 鉴 定 为 杜 鹃 花 科 植 物 滇 白 珠 G a ul t h er l’a
y u n n a
,` e , , 5 15 ( F r a n e h
·
) R e h d
. 的根 ;滇 白珠挥 发油
(滇白珠 Z k g , 粉碎 , 水蒸汽蒸馏 , 收集挥 发油约 4
m D
;滇白珠挥发油饱 和液 (收 集挥发油 后 的蒸馏
液 ) ;滇 白珠提取物 (取滇白珠粉末 3 k g , 用 乙醇温
浸 ,减压 回收溶剂得浸膏 ; 浸膏依次用氯仿 、 醋酸乙
醋 、 正 丁醇萃 取 , 分别减 压 回收溶媒 , 得氯仿部分
( A )
,醋酸乙酷部分 ( B )和正丁醇部分 ( D ) 。 取正丁
醇部分 1 0 9 经大孔吸附树脂 D 1 01 ,用 30 % 乙醇洗
脱 , 减压回收溶剂得浸膏为 30 % 乙醇部分 (C ) 。 A 、
B
、
C
、
D 均 以生理盐水配成 10 m g / m l 的混悬液 。
1
.
3 动物 昆明种小鼠 ,雌雄各半 ,体重 19 ~ 21 9
( 中国药品生物制品检定所试验动物中心 ) 。
2 方法和结果
2
.
1 滇 白珠挥发 油杭 菌活性 的研 究 按文献明取
金黄葡萄球 菌 、 绿脓杆菌 、 大肠 杆菌和变形杆菌经
1 8 h 增菌 ,用无菌生理盐水 ( N S )稀释 1 0 5 f u /m l 。 设
对革兰阳性菌敏感的梭节青霉素和对革兰阴性菌敏
感的卡那霉素作为阳性对照 ;挥发油 、挥发油饱和液
和阳性对 照药用 N S 和少量 乙醇溶解 , 初始 浓度为
5 1 2 拌g / m l , 然后倍 比稀释为 5 1 2 , 2 5 6 , 1 2 8 , 6 4 , 3 2 ,
1 6
,
8
,
4
,
2
,
l
,
0
.
5 拼g /m l ; 阴性对照用等体积 N S 。 加
菌混合后放于 37 ℃孵育 18 h 。 以最高稀释度液体澄
明 , 判定为该药的最小抑菌浓度 (M IC ) 。 实验结果
东邦大学药学部 千叶 2 7 4一 8 5 1 0 日本
西北药学杂志1 9 9 9 年 4月 第1 4卷 第 2期
(见表1 ) 表 明 , 挥发油 和挥 发油饱和液对 4 种 细菌
有抑制作用 ,挥发油作用更强 。
2
.
2 滇 白珠杭 炎活性 按文献川将小 鼠随机分为
N S
、 阿 司 匹林和 提取 物 B 、 C 、 D 各 10 0 m g k/ g 及
2 0 m g / k g s 个组 ; 19 , l h 后从尾静脉注射 0 . 5 %伊
文思蓝溶液 0 . 2 m l ; 随即 i p 0 . 6写醋酸溶液 0 . 2 m l ,
20 m in 后脱颈椎处死 鼠 , 剪开腹 部 , 用 6 m l N S 分
数次洗涤腹腔 , 吸出洗涤液 ;合并加 N S 至 10 m l , 离
心 1 5 m i n ( 3 0 0 0 r / m i n ) ; 取上清 液于 5 9 0 n m 处测
定 ; 计算小鼠腹腔渗入之染料量 。 结果 (见表 2) 表
明 , 滇白珠醋酸 乙醋部分 ( B )和正丁醇部分 ( D )能显
著抑制小鼠腹腔毛细血管通透性而具有抗炎作用 。
表 1 滇 白珠挥发油的最小抑菌浓度 (拜g /m l)
样品 金葡菌 绿脓杆菌 大肠杆菌 变形杆菌
阑值 , 小于 5 5 或大于 30 5 或跳跃者弃之不用 。 将合
格小 鼠随机分组 (见表 3 ) 。 19 后 l h 分别测小鼠痛阂
值 。 实验结果 (表 3) 表明 , A 3 个剂量和 B 10 o m g / k g
无镇痛作用 , B 2 0 0 m g / k g 和 C 、 D 组 2 个剂量均能
延长小 鼠添后足的潜伏期 , 提高痛闭 ,显示明显镇痛
作用 , C 作用最强 。
3 讨论
① 滇 白 珠 挥 发 油 中 水 杨 酸 甲 醋 含 量 达
9 3
.
3 6%
, 推测水杨酸 甲醋为其抗菌的主要成分 。
②已有研究显示阿魏酸 、 ( + ) 一儿茶素、 水杨酸 、
原儿茶酸 、 懈皮 素和芦丁具有抗炎作用 , 这些化合
物是滇白珠醋酸 乙酷提取部分中的主要成分 〔。 , 很
可能是滇白珠抗炎作用的活性成分 。
③滇 白珠醋酸 乙醋 、 正丁醇提取物对小 鼠热刺
激法所致疼痛具有明显的镇痛作用 。但是 , 我们从中
分得的 14 个化合 物〔们 , 多数 未见有镇痛 活性的报
道 。 其镇痛 活性成分值得进一步研究 。
表 3 滇白珠提取物对小鼠的止痛作用 (n 二 15)
样品 剂量 ( m g k/ g ) 辐射热刺激法 热板法
N S 6
.
7士 1. 0 13 . 8士 4 . 4
阿司匹林 5 0 0 1 2. 0士 2. 8“ 21 . 8士 5 . 0二
样品 A 1 0 0 6 . 8士 1. 6 13 . 9士 2 . 3
2 0 0 6
.
9士 1. 8 1 3 . 9士 2 . 6
3 0 0 6
.
5士 2 . 0
样品 B 1 0 0 10 . 1士 2. 7 . 1 4 . 4士 7 . 5
2 0 0 12
.
1士 5 . 4 . ` 2 0 . 4士 6 . 9二
3 0 0 7
.
1士 1. 7
样品 C 1 0 0 6 . 9士 1 . 8 6 2 1 . 8士 6 . 2 ` .
2 0 0 13
.
1士 4 . 8 ` . 2 4 . 9士 6. 5 “
3 0 0 10
.
9士 3 . 0 .
样品 D 1 0 0 6. 6士 2. 6 21· 5士 6· 1 . `
2 0 0 1 2
.
3士 4 . 3 ` ’ 2 1 . 8士 6. 8 . ’
3 0 0 1 0
.
5士 2. 1 ’
, P ( 0
.
0 5
, , , P < 0
.
0 1
七飞I,月任.06
狡节青霉素
卡那霉素
挥发油
挥发油饱和液 6 4 64
表 2 滇白珠提取物对毛细血管通透性的抑制作用
( ; : = 1 2 )
样品 剂量 ( m g / k g ) 伊文思蓝年 g / m l )
N S 0
.
2 9 1士 0 . 0 1 2
阿司 匹林 5 0 0 0 . 1 7 8士 0 . 0 1 0 “
样品 B 1 0 0 0 . 1 7 6 士 0 . 0 1 0 “
2 0 0 0
.
1 6 4 士 0 . 0 1 0 二
样品 C 1 0 0 0 . 2 4 9 士 0 . 0 1 6
2 0 0 0
.
2 4 6 士 0 . 0 2 9
样品 D 1 0 0 0 . 1 8 3 士 0 . 0 1 0 ’ `
2 0 0 0
.
1 7 5士 0 . 0 1 5 ` .
与 N S 组比较 , , 二 P < 0 . 0 1
2
.
3 淇白珠镇痛作 用
2
.
3
.
1 辐射热刺激法 按文献山将小鼠随机分为
N S
、 阿 司 匹林和 提取 物 A 、 B 、 C 、 D 各 1 0 0 , 2 0 0 及
30 0 m g k/ 9 3 个剂量共 14 个组 。 小鼠尾部 1 4/ 一 1/
5 处作 为照射部 位 , 以尾 巴移动或甩 尾为疼 痛反应
指标 。 记录 自照射到甩尾时间作为痛阑 。 给药前测
2 次 ,取均值作为基础痛闭 。 19 后 l h 测定 ,计算其
痛 阑均值 。 实验结果 (表 3) 表明 , A 3 个剂量均无镇
痛作用 , B 、 C 和 D Z个剂量均能提高小 鼠痛 阑 。
2
.
3
.
2 热板法 按文献 (3] 进行 。 水温控制在 5 ℃
士 0 . S C 。 热板需预热 1 0 m i n ,取 1 9一 2 1 9 雌性小
鼠 , 小 鼠自放在热板上至出现舔后足所需时间为痛
参考文献
江苏新医学院 . 中药大辞典 (下册 ) . 上海 : 上海人民出版
社 , 1 9 7 7 : 1 8 7 9
郑俊铺 . 药品微生物学及检定技术 . 北京 :人民卫生出版
社 , 1 9 8 9 : 3 4 9
陈奇 . 中药药理研究方法学 . 北 京 : 人 民卫生出版社 ,
1 9 9 3 : 3 0 5
,
3 8 0
,
3 7 7
张治针 , 果德安 , 李长龄 , 等 . 滇 白珠化学成分的研究
( I )
. 中草药 , 1 9 9 8 , 2 9 ( 8 ) : 5 0 8
(收稿 : 1 9 9 8 一 0 7一 1 6 )