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马占相思幼茎薄细胞层培养成苗的初报



全 文 :马占相思幼茎薄细胞层培养成苗的初报 ’
郑玉梅 王世旎
(华南农业大学生 物系 , 广 州 5 1 06 4 2 )
本文用马占相思 ( A “ 。 ia nt a 。娜 u m ) 幼茎的薄细胞层为外植体 ( 包括表皮层及其 内方
钓几层皮层厚角组织和薄壁组织 ) , 经试验 , 采用两种不同的培养程序进行离休培养 , 都获
得了绿苗 。
一种培养程序是先诱导外植体产生愈伤组织 , 然后转移到一种或相继的两种分化培养基
中 , 使愈伤组织分化长出绿苗 , 另一种培养程序是直接成苗 。 第一种程序所用培养基如下 :
( D 诱导愈伤组织培养基是附加 2 , 4 一D O . 4一 o . s m g / L和 B A o . s m g / L的经修改的 M S培
养基 , 蔗糖 209 / L , ( 2) 分化培养基的附加成份为 N A A o . 01 一。 . s m g / L 、 B A Z一 s m g / L
或另加 L H 250 m g / L , 基本培养基同上 。 接种 7一 10 天后 , 肉眼可见外植体产生了乳白色的坚
实的愈伤组织 。 视其生长情况而定 , 经 25 一35 天后将材料转入分化培养基 , 经 25 一 45 天后陆
续分化出绿色丛苗 (少有单生苗 ) 。
第二种程序所用培养基如下 : 附加成份为 N A A o . 01 一 0 . s m g / L 、 B A Z一 s m g / L 、 或者
另加 Z Zm g / L或 L H 25 Om g / L , 基本培养基同上 , 蔗糖 3傀 / L 。 接种后25 一45 天 , 接种体上
即产生绿色丛苗 ( 少有单生苗 ) 以及愈伤组织 。 此时可将培养物中的苗丛连同愈伤组织切割
成若干块 , 扩大繁殖 。 扩大繁殖用培养基的成份与原培养基成份稍有不同为佳 。
本文注意到取材季节明显的影响培养物的生长状况 。 根据 92 ~ 94 年等年实践 。 以每年的
2一 4月期间取材接种 , 容易诱导产生愈伤组织及分化成苗 , 5月份开始 , 所取外植体在 同 样
的培养条件下 , 极少能分化成苗 。
树龄为 3一 5年的树木上所取外植体 , 明显地优于 10 年生树木的 , 易于产生愈伤组织和分
化成苗 。
本文所获得的苗 , 在形态发生上 , 都表达 了该属植物种子繁殖时一 般合 子胚生长的特
征 。 即苗 ( Sh o t) 的最初若干片叶为 2回羽状复叶 , 其总叶柄为扁平的叶状柄 ( P h y n do i -
u m )
, 先端有一对羽片 。 按马占相思一般实生苗第 2一 6片叶为 2回羽状复叶 。 是否可以根据
此特征推断 , 本文所获得的这些苗 , 是由单个细胞起源的 。
关于愈伤组织的来源 , 经石蜡切片观察 , 初步确定皮层厚角及薄壁组织都可在 培养下进
行分裂 , 参与形成愈伤组织 。 其细胞分裂方式为直接分裂 , 尚未见到有丝分裂者 。
苗的起源 、 根的诱导及起源等 , 正在研究之中。
国家 自然科学基金资助项目
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