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马占相思优树组培苗扦插技术研究



全 文 :马占相思优树组培苗扦插技术研究*
裘珍飞  曾炳山  李湘阳  刘 英  陈祖旭
(中国林科院热带林业研究所 广州 510520)
摘要 以 1 ~ 2年生马占相思优良无性系组培苗为材料 ,进行了生根基质 、生根剂浸泡液 、插穗来源等
扦插试验研究 。结果表明:基质以泥炭土最好 ,生根率达 83. 0%,含泥炭土的混合基质效果次之 ,生根率为
76. 5%;3种生长素作生根剂单独使用时 ,以 IAA 800 mg /L 浓度浸泡效果最好 ,生根率达 67. 0%, NAA 、
IBA浓度超过 200 mg /L 时效果较差;不同继代组培母株和定植 1 ~ 2年生母株的插穗 ,生根率均有显著差
异 ,不同枝段位置 1年生母株差异不显著 ,2 年生母株中间幼嫩节段生根率大于顶芽 ,因此在实际生产中中
间幼嫩节段也可作为有效插穗使用 。
关键词 马占相思 组培苗 扦插 生根率
无性系造林的林相整齐 ,生产力高 ,目前国外林业发达国家无性系造林达 80%以上 ,我国桉树 、杨树等
无性系苗木已有大面积推广 ,产生了显著的经济效益[ 1] 。相思是引进 、推广时间较短的树种 ,因其具有适应
性广 、抗逆性强 、速生丰产 、用途多样等特性 ,现已成为南方广大地区的主要造林树种之一[ 2] 。国内相思无性
繁殖的研究 ,陈青度等曾经用家系超级苗为母株进行扦插试验 ,分析了季节和树种对成活率的影响[ 3] ;刘得
朝对大叶相思扦插进行了较详细的研究[ 4] 。马占相思(Acacia mangium)是我国推广应用的主要树种 ,如何
通过组织培养技术建立无性繁殖体系 ,利用组培苗进行扦插扩繁 ,营造无性系种子园推广无性系造林 ,是进
一步发展相思生产亟待解决的问题 。本文以不同幼化程度的组培苗为材料 ,进行了马占相思扦插繁殖试验 ,
对指导生产具有重要意义 。
1  材料与方法
1. 1 试验材料
在 1 ~ 2年生马占相思优良无性系组培苗建立的采穗圃剪取当年生萌条作插穗 ,取主枝和侧枝顶芽及以
下 2 ~ 4个幼嫩节段 。插穗长 8 ~ 11 cm ,具 2个以上腋芽 ,每叶片剪去 1 /2 ~ 2 /3 ,顶芽小叶可全部保留。
1. 2 试验方法
1. 2. 1 插穗处理 将插穗剪好后放入清水中 ,以 50 ~ 100条穗条对齐基部整理成扎 ,插穗基部 2 ~ 3 cm 部
分浸入生根浸泡液浸泡 4 h ,上部需套袋保鲜并遮光 。
1. 2. 2  生根浸泡液选择 设计 IAA 、IBA(200 ,400 , 600 , 800 ,1 000 mg /L)和 NAA(100 , 200 ,300 , 400 ,
500 mg /L)各 5种浓度水平试验 ,清水作对照 ,共 16个处理 ,完全随机区组设计 ,每处理 100 条 , 2次重复。
由于高浓度生根剂溶液的 pH 值往往偏低 ,为了解 pH 值对生根剂有效性的影响 ,选择 IAA 800 mg /L 生根
浸泡液 ,调节 pH 值为 4. 5 , 5. 5 , 6. 6 ,7. 6等 4个等级 ,同时进行试验。
1. 2. 3  基质选择 采用河沙 、泥炭土 、蛭石 、珍珠岩 、黄泥 、泥炭土+蛭石+黄泥(1∶1∶1)、黄泥+木炭灰
(93∶7)等 7种基质 ,将基质装入 500 mm×300 mm×75 mm 的育苗筛中 ,试验前一天用清水淋湿 ,后用 100
g /L KMnO4 溶液消毒 ,上盖薄膜 ,第 2天才使用。每筛扦插 80条 ,2次重复 。
1. 2. 4  不同幼化材料扦插  以泥炭土为基质 ,采用 IAA 为主要成分的复合生根剂 ,从定植 1 , 2年生的 10
个无性系母株和组培继代次数为 4 ,3 ,2和 1的当年生母株上选取插穗 ,插穗分顶芽及中间枝段两种类型 ,每
处理 50条 ,2次重复。观测继代次数 、不同插穗年龄及枝段位置对生根率的影响 。
1. 2. 5  数据调查和计算 扦插 30 d后调查生根率 ,表中数据为重复的平均值 ,百分数经反正弦变换后由
SAS 软件进行数据分析[ 5] 。
1. 2. 6  扦插和管理 插条经生根剂溶液浸泡后及时插入准备好的基质中 ,插后淋水 ,盖薄膜及 90%遮光
22 广 东 林 业 科 技 2005 年第 21卷第 2期
* 本研究为国家转基因植物研究与产业化开发专项“抗寒 、优质 、高产相思树基因工程育种”(JY03 - B - 24- 02)项目及省林业科技推广
项目“相思无性系组培幼化与扩繁技术研究”内容之一。
网 ,15 d内保持合适的温度 、湿度 ,喷施 1 ~ 2次 1 g /L 的多菌灵 ,生根后揭开遮光网和薄膜 ,转入常规苗圃管
理。
2  结果与分析
2. 1 3种生长素生根效应比较
目前我国常用的生根剂有效成分大多是 IBA 、NAA 和 IAA 3种生长素 。设计 3 种生长素单因子多水
平试验可确定对相思起主要作用的生长素种类和浓度 ,在此基础上进一步开展生根剂混合使用及添加辅助
增效剂等试验 ,以配置相思扦插专用生根剂。
表 1 生长素种类和浓度对扦插生根影响
处理 浓度(mg / L)
生根率
(%)
烂苗率
(%)
未生根活株数
(%)
每苗根数
(条)
每苗总根量
(cm) F 值
清水 0 33 67 0 0
200 47 40 13 4. 7 9. 8
400 5 81 14 1. 2 2. 0 F生根率=81. 0**
IBA 600 1 87 12 1. 0 1. 0 F根数 =4. 39
800 0 100 0 0 0 F总根量=1. 53
1000 0 100 0 0 0
200 27 46 17 2. 7 8. 5
400 53 20 27 2. 3 5. 4 F生根率=15. 25**
IAA 600 44 12 44 3 12. 7 F根数 =2. 08
800 67 13 20 2. 7 8. 8 F总根量=3. 9
1000 39 6 55 1. 8 4. 1
100 33 26 41 2. 0 4. 08
200 33 20 47 1. 2 2. 2 F生根率=19. 5**
NAA 300 6 43 51 1. 0 1. 0 F根数 =0. 62
400 0 70 30 0 0 F总根量=0. 30
500 6 50 44 2. 0 4. 0
注:F0. 05(4 , 5)=5. 19 , F0. 01(4 , 5)=11. 39;*表示显著差异 , **表示极显著差异 , 下同。
  从生长素种类和浓度试验结果(见表 1)可见 ,3种生长素各浓度之间生根率存在极显著差异 ,而每苗根
数和每苗总根量在各浓度之间差异不显著。分析结果表明:IBA 试验随着使用浓度的增加生根率降低 ,烂苗
率增加 ,说明 IBA 效果以低浓度为好 ,最低浓度的 200 mg /L 生根率为 47%,低于 2 00 mg /L 是否会获得更
高生根率 ,还需要进一步试验;IAA试验各浓度都具有一定的生根率 ,以 800 mg /L 浓度的生根率最大 ,达到
67%,当浓度增加到 1 000 mg /L 时 ,插穗切口形成愈伤组织 ,生根率降低 ,每苗根数和总根量也降低;NAA
试验以 100 ~ 200 mg /L浓度的使用效果较好 ,随着浓度的提增 ,烂苗率增加 。比较 3种生长素不同浓度单
独使用的效果 , IAA 最理想 ,可作为马占相思扦插生根剂的主要成分 ,使用 IBA 、NAA 时 ,浓度以不超过 200
mg /L 为宜 ,否则烂苗数增多 ,生根极少 。
不同生根浸泡液 pH 值的试验结果表明:生根液 pH 值对扦插生根率的影响呈山峰型(见图 1),当 pH
值=5. 5时 ,生根率最高为 67%,而 pH 值=6. 6时 ,最适合根的生长 ,平均每苗根长达到 15. 2 cm 。pH 值
4. 5和 7. 6都不利于插穗生根 ,因此生根浸泡液的 pH 值应以 5. 5 ~ 6. 6为宜。
图 1 浸泡液 pH值对插穗生根的影响
2. 2 不同基质对扦插生根的影响
不同树种的插条对基质有不同的要求 ,为筛选出适合马
占相思组培苗扦插的基质 ,选择 7种基质进行试验 ,结果(见
表 2)表明:不同基质的生根率和每苗根数有极显著差异 。多
重比较结果显示:泥炭土 、河沙 、黄泥和泥炭土+蛭石+黄泥
4种基质比较适合相思扦插 ,扦插生根率为 72. 5%~ 83. 0%,
它们之间差异不显著 ,但显著大于其它 3种基质;黄泥+木炭
灰不适合用作相思扦插的基质。从生根数量分析 ,泥炭土效
果最好 ,每苗平均生根达 5. 9条之多 ,显著大于所有基质;含
23裘珍飞等: 马占相思优树组培苗扦插技术研究
泥炭土的混合基质效果次之 ,每苗平均生根 4. 1条 ,除与河沙差异不显著外 ,均显著大于其余 4种基质。
表 2 不同基质插穗生根指标比较
基 质 生根率(%)
每苗根数
(条)
每苗总根量
(cm)
泥炭土 83. 0 a 5. 9 a 12. 40
河沙 74. 5 a 3. 0 bc 9. 20
黄泥 72. 5 a 2. 2 cd 12. 20
泥炭土+蛭石+黄泥(1∶1∶1) 76. 5 a 4. 1 b 17. 00
蛭石 50. 0 b 2. 1 cd 9. 75
珍珠岩 58. 0 b 1. 7 cd 5. 30
黄泥+木炭灰(93∶7) 21. 0 c 1. 5 d 1. 80
F 值 17. 11 ** 16. 75 ** 0. 91
 注:F0. 05(6 , 7)=3. 87 ,同列相同字母表示多重比较差异不显著 ,
    不同字母差异显著 。
表 3 不同继代次数母株插穗产量及扦插生根情况
继代
次数
75d 可产
插穗(条)
生根率
(%)
烂苗率
(%)
未生根活
株率(%)
1 3. 9 14. 7 20. 6 64. 7
2 8. 0 36. 5 13. 4 50. 1
3 16. 5 74. 8 15. 3 9. 9
4 34. 3 87. 0 6. 7 6. 3
F 值 46. 15 ** 5. 94 81. 39**
 注:F0. 05(3 , 4)= 6. 59 , F0. 01(3 , 4)= 16. 69。
2. 3 插穗来源对生根率的影响
2. 3. 1  不同组培继代次数的插穗生根能
力比较 从继代次数分别为 1 ,2 ,3 ,4次的
当年生母株上剪取插穗扦插 ,生根结果(见
表 3)表明:不同继代次数间的生根率 、未
生根活株率具有显著差异 。继代 1次母株
插穗的生根率低 ,仅为 14. 7%,而未生根
活株率高达 64. 7%,随着组培继代周期的
增加 ,生根率逐渐提高 , 未生根活株率下
降 ,继代 4次后 ,生根率可达到 87%,未生
根活株率仅为 6. 3%。这说明随着组培继
代数的增加 ,组培苗的幼化程度逐渐提高 ,
插穗的生根能力逐渐增强 。从不同继代数
组培苗移植 75 d 可剪插穗的条数分析可
看出 ,随着继代次数的增加 ,插穗条数成倍
增加 ,可见其繁殖能力也是不断提高的。
表中 4种插穗的烂苗率差异不显著 ,说明
烂苗与基质和生根浸泡液关系密切 ,而与
继代培养次数的关系不大 。
2. 3. 2  组培苗年龄对扦插生根的影响 
10个无性系试验的分析结果显示 ,采穗母
株年龄也是影响扦插生根的因子 , 1 年生
母株插穗的生根率明显高于 2年生母株 ,经生根剂处理后 , 1年生插穗生根率最高达 97%,最低为 70%,平
均为 87. 8%;而2年生的生根率最高为 82%,最低仅37%,平均 71. 8%。2年生母株插穗生根率比1年生母
株平均下降了 18%(见表 4)。这种现象表明马占相思幼化材料一旦脱离幼态化培养条件 ,繁殖体的成熟老
化速度就可能比较快 。《Acacia mangium G row ing and Uti lization》一书曾经介绍 ,马占相思生长 6 ~ 24个
月的种子苗 ,其生根率可以从 71. 3%急剧下降至 15. 0%[ 6] 。本次试验的结果与书中描述的情况是相吻合
的。
表 4 各无性系 1 ,2年生母株插穗生根率        单位:%
穗龄 L97 L18 L21 L20 L166 L74 L139 L14 L72 L46 平均
1 年生 93 92 97 85 88 89 92 85 87 70 87. 8
2 年生 80 81 82 80 78 79 81 62 58 37 71. 8
下降率 14 12 15 6 11 11 12 27 33 47 18. 0
2. 3. 3  枝条位置对扦插生根的影响 枝条节段位置对生根有不同程度的影响 ,统计 1年生母株 500条顶
芽插穗和 500条中间节段插穗的生根率 ,分别为 88%和 89%,差异不显著 ,说明 1年生母株枝条幼态化程度
高 ,顶芽和中间节段均可利用。用同样的方法统计 2年生母株插穗 ,顶芽生根率为 53%,中间节段生根率为
78%,中间节段比顶芽插穗易生根 ,因此在实际生产中要重视幼嫩中间节段插穗的利用。
3 结论与讨论
3. 1 马占相思组培苗扦插与基质种类 、生根剂种类及生根剂的 pH 值有关 。基质以泥炭土最好 ,插穗生根
率达 83. 0%,且根系发达 ,每苗生根达 5. 9条 ,泥炭土+蛭石+黄泥的混合基质次之 ,生根率为 76. 5%,每苗
生根 4. 1条 。3种生长素单独使用时 ,不同浓度效果不同 , IAA使用效果最好 ,生根率随着浓度增大而提高 ,
800 mg /L 是最佳处理 ,生根率为 67%,NAA 、IBA效果较差 ,使用时浓度应不超过 200 mg /L ,否则烂苗数增
多 ,生根率降低 。实际生产中调节生根剂 pH 值为 5. 5 ~ 6. 6最有利于插穗生根 。
24 广 东 林 业 科 技 2005 年第 21卷第 2期
3. 2 不同来源的插穗生根率差异较大 。不同组培继代次数母株上的插穗生根率随着继代次数的增加而提
高 ,以继代 4次以上的组培苗作母株扦插效果较好 ,生根率达 87%。母株年龄以 1年生母株的插穗最易生
根 ,2年生母株的插穗生根难度大 。在 1年生母株上采集的插穗 ,顶芽和中间节段的生根率都达 85%以上 ,
在 2年生母株上采集的穗条 ,中间节段的生根率比顶芽节段高出 25%,中间节段比顶芽节段易生根。
3. 3 比较 1年生和 2年生母株插穗的生根率 ,2年生母株插穗生根率下降 18%,表明相思幼化后成熟老化
程度较快 ,因此在经营采穗圃时 ,采穗母株可利用周期可能比较短 ,如何保持母株幼态性值得进一步研究 。
参考文献
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The Food and Ag riculture O rganization o f the United Nations , 1993
Study on Cutting propagation of Acacia mangium
Qiu Zhenfei Zeng Binshan Li Xiangyang Liu Ying Chen Zuxu
(The Research Institute o f T r opical For estry , CAF , Guang zhou , 510520)
Abstract In this paper the inf luence of dif ferent ro oting medium , ho rmones and cut ting material on
vegeta tive propagation roo ting o f A. mang ium aged 1 ~ 2 yea r f rom superior clones w as studied . The re-
sults showed:Peat w as the best medium fo r roo ting(83. 0%) and mix ture including peat w as better
(76. 5%). Roo ting rate t reated w ith 800 mg /L IAA was maximized(67. 0%) and the roo ting rate w as low
when the cut ting s we re t reated by NAA or IBA over 200 mg /L. The cut ting material f rom different subcul-
ture seedling s aged 1 ~ 2 year had very dif ferent ro oting. The roo ting percentage w as the same from di ffer-
ent kno t of 1-year-seedling s. But the middle juvenile knot o f 2-year-seedling s had mo re roo ting than tip
buds.
Key words  Acacia mangium , tissue culture seedling , cut ting propagat ion , ro oting rate
(上接第 21页)
Study on Tissue Culture Technology of Eucal yptus dunnii
Yi Min1   Ran Long xian2  Tang Li1
(1. Guang zhou biolog ical cont rol station , Guang zhou , 510000;2. Co llege o f Environment and Resource , CSFU)
Abstract Experiments w ere carried out to investigate the ef fects of dif ferent auxin and cytokinin
and their combinat ions on the dif ferentiat ion o f hypocoty ls from aseptic seedling s and segments w ith ax illa-
ry buds of stems in Eucalytus dunnii , and the optimal culture conditions w ere determined. The re sults
show ed that M S w ith 6-BA 0. 20 mg /L and N AA 0. 1 mg /L is the most prope r medium fo r bud dif ferentia-
tion and subculture , and the sprouts resulted f rom bud cluster was easy to be cut apart. Even mo re the sprouts
grew bloomily and reached 5 mm in one month. The other results showed that IBA promoted Eucalyptus dunnii to
strike roots and the best medium for roo tage is 1 /2 MS supplemented with 0. 20 mg /L IBA.
Key words  Eucalyptus dunnii , tissue culture , hypoco ty ls , rapid propagation
25裘珍飞等: 马占相思优树组培苗扦插技术研究