全 文 ：收稿日期:2015-05-11; 修订日期:2015-10-19
基金项目:新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目［乌鲁木齐高新区
(新市区)战略性新兴产业重点领域技术研发专项］(No．
201316102)
作者简介:赵东升(1983-)，男(汉族)，山东苍山人，新疆比尔兄弟生物技
术有限公司助理研究员，硕士学位，主要从事分析测试技术与新药研发工
作．
* 通讯作者简介:韩松林(1984-)，男(汉族)，新疆阿克苏人，阿克苏职业
技术学院讲师，硕士学位，主要从事药物分析学工作．
* 通讯作者简介:李新霞(1968-)，女(汉族)，新疆乌鲁木齐人，新疆医科
大学教授，博士研究生导师，博士学位，主要从事仪器分析与新疆特色药
材开发工作．
多元多息评价新疆习用 2 种洋甘菊
赵东升1，宋百灵2，韩松林3* ，邱 兰1，李新霞2*
(1． 新疆比尔兄弟生物技术有限公司，新疆 乌鲁木齐 830013;
2． 新疆医科大学，新疆 乌鲁木齐 830011;
3． 阿克苏职业技术学院，新疆 阿克苏 843000)
摘要:目的 建立新疆习用 2 种洋甘菊(母菊、罗马洋甘菊)的定性、定量鉴别方法，对其多方面、多角度进行品质评价。
方法 采用显微鉴别、薄层色谱、液相色谱、气相色谱等现代仪器分析技术对 2 种洋甘菊进行显微结构及化学成分研究。
结果 2 种洋甘菊在显微特征中萌发孔数目、色谱特征中斑点数目及烯炔 －双环醚、红没药醇等化学成分方面均具有显著
性差异。结论 文章建立的洋甘菊多元多息显微特征和色谱特征，为新疆习用 2 种洋甘菊的品种鉴别和质量评价提供了
更为准确、有效的系统评价方法和依据。
关键词:母菊; 罗马洋甘菊; 多元多息; 显微特征; 色谱特征; 品质评价
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2016． 01． 040
中图分类号:Ｒ281． 4;Ｒ282． 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2016)01-0107-03
新疆维吾尔族民间习用两种用洋甘菊，一种是德国洋甘菊，
又称母菊，母菊属，为一年生草本植物［1］;另一种是罗马洋甘菊，
春黄菊属，一至多年生草本植物［2］。两种洋甘菊均具有多种生
物活性，母菊具有抗过敏、抗胃肠胀气、抗痉挛、发汗、轻度镇静、
止痛、改善肺癌病人症状、促进血液循环、抗炎、抗真菌等作
用［3 ～ 8］，而罗马洋甘菊具有抑制恶心、呕吐、消化不良、食欲不振
等作用［9，10］。
近十多年，新疆南北疆广泛种植 2 种洋甘菊。母菊主要用于
维吾尔药、茶叶制品及挥发油的提取原料等，而罗马洋甘菊主要
用于挥发油的提取。由于母菊，罗马洋甘菊 2 种洋甘菊习用部位
均为头状花序，但两者的植株、头状花序外观极为相似，在维吾尔
民间及药材收购过程中，罗马洋甘菊常混淆为母菊。因此，本文
利用显微、薄层、HPLC、GC等多种现代分析技术，从结构和化学
成分诸方面构建了新疆习用 2 种洋甘菊的多元多息的鉴别方法
和体系，为新疆 2 种习用洋甘菊的品质评价、资源开发及可持续
利用提供一定的参考。
1 仪器与试药
显微镜(尼康 ECLIPSE 80i)，半自动点样仪(CAMAG LINO-
MAT5)，薄层色谱数码成像系统(CAMAG ＲEPＲOSTAＲ3)，超高
效液相色谱仪(Waters Acquity UPLC，PDA 检测器，Empower 色谱
工作站)，气相色谱仪(岛津 GC － 2010，FID 检测器)，离心机
(MULTIFUGE X3Ｒ)，薄层板加热仪(CAMAG TLC PLATE HEAT-
EＲ Ⅲ)，旋转蒸发仪(EYELA ＲOTAＲY EVAPOＲA TOＲ N1001)，
超声波清洗仪(500W，40 KHz，昆山市超声仪器有限公司)，pH计
(Satrorius PB － 10) ，分析天平(Mettler － Teledo，AB135 － S，d =
0． 01 /0． 1mg)，聚酰胺薄膜(浙江台州四甲生化塑料厂)，硅胶 G
预制板(5cm × 10cm，Merk)，等。
龙脑(中国食品药品检定研究院，批号:8KT6 － BLVP)，乙酸
龙脑酯(中国食品药品检定研究院，批号:NZTU － EQ63)，愈创奥
(Sigma，批号:STBC5481V)，芹菜素(成都普瑞科技有限公司，
A110605)，芹苷元 － 7 － 葡萄糖苷(成都普瑞科技有限公司，
A110222)，木犀草素(成都普瑞科技有限公司，L120321)，木犀草
素 － 7 － 葡萄糖苷(中国药品生物制品检定所，批号:111720 －
200905)，7 － 甲氧基香豆素(SAFC，批号:11409PC)，红没药醇
(SIGMA － ALDＲICH，批号:BCBD7168V)，香草醛(成都市科龙化
工试剂厂)，2 － 氨基乙基联苯基硼酸酯(简写 NP，SIGMA －
ALDＲICH，批号:BCBF5015V)，十二烷基硫酸钠(SDS，＞ 99． 0%，
BIO BASIC INC)，PEG400(天津市百世化工有限公司) ，乙腈
(Fisher Scientific，赛默飞世尔科技(中国)有限公司，纯度:99．
9%，批号:20120112)，甲醇(Fisher Scientific，赛默飞世尔科技(中
国)有限公司，纯度:99． 9%，批号:20120217)，甲苯(分析纯)，正
丁醇(天津市富宇精细化工有限公司)，正庚烷(天津市致远化学
试剂有限公司)，环己烷(天津市福晨化学试剂厂，分析纯);乙酸
乙酯(天津市富宇精细化工有限公司)，N － N 二甲基甲酰胺(分
析纯，天津市富宇精细化工有限公司)，磷酸二氢钾(天津市光复
精细化工研究所)，氢氧化钠(天津市致远化学试剂有限公司)，
盐酸(北京化工厂)，磷酸(天津永晟精细化工有限公司)，甲酸
(天津市登科化学试剂有限公司)，浓硫酸(分析纯，北京化工
厂)。母菊花(新疆阜康)、罗马洋甘菊花(新疆伊犁)药材，经新
疆医科大学药学院胡君萍教授鉴定确认。
2 方法与结果
2． 1 显微鉴别研究
2． 1． 1 样品制备 取 2 种洋甘菊花各约 5． 0 g，分别置研钵中，研
碎，过 4 号筛，备用。
2． 1． 2 制片 水合氯醛透化制片。
2． 1． 3 鉴别 显微镜下观察，放大倍数为 10 × 40(倍)。
结果如图 1，母菊中花粉粒具有 4 个萌发孔，无非腺毛，而罗
马洋甘菊花粉粒有 3 个萌发孔，具有非腺毛。
2． 2 薄层色谱研究
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATEＲIA MEDICA ＲESEAＲCH 2015 VOL． 27 NO． 1 时珍国医国药 2015 年第 27 卷第 1 期
2． 2． 1 挥发油成分
对照品溶液制备:取龙脑、乙酸龙脑酯和愈创奥对照品，加甲
苯制成每毫升分别含 1，2，4mg 的混标溶液。
供试品溶液制备:取 2 种洋甘菊花粉末各 1g，分别置具塞锥
形瓶，加二氯甲烷 10ml，室温下浸泡 1h，过滤，滤液旋转蒸发仪
35℃下浓缩，浓缩液氮吹仪吹干，残渣加甲苯 0． 5ml溶解，作为供
试品溶液。
鉴别:母菊供试品溶液、混合对照品溶液、罗马洋甘菊供试品
溶液分别点于同一 5cm × 10cm 硅胶 G 薄层板上，点样量分别为
4． 5，15，4． 5μl，带宽 10mm，以氯仿为展开剂，展开 9cm，取出，晾
干，喷以 1%的香草醛浓硫酸显色剂，可见光下检视(图 2)。
结果，以替代对照法，先判定龙脑、乙酸龙脑酯、愈创奥参照
物的相对位移［11］，再根据参照物的位置确定母菊挥发油提取物
中含有没药醇、萜类化合物、烯炔 －双环醚，而罗马洋甘菊挥发油
提取物中含有没药醇、少量萜类化合物、无烯炔 －双环醚。
图 1 2 种洋甘菊花粉粒显微鉴别特征图
图 2 2 种洋甘菊挥发油成分薄层色谱特征图
2． 2． 2 甲醇提取物
对照品溶液制备:取木犀草素、芹菜素、木犀草素 － 7 －葡萄
糖苷、芹苷元 － 7 －葡萄糖苷、7 －甲氧基香豆素对照品，加甲醇制
成浓度分别为 0． 05，0． 25，0． 01，0． 25，0． 05 mg·ml －1的混标溶
液。
供试品溶液制备:取 2 种洋甘菊花粉末各 0． 5g，分别置具塞
锥形瓶，加甲醇 10ml，超声(60℃水浴)处理 5min，冷却至室温，过
滤，取续滤液为供试品溶液。
鉴别:母菊、罗马洋甘菊供试品溶液、混标溶液分别点于同一
5cm × 10cm聚酰胺薄膜上，点样量分别为 3，3，15μl，带宽 10mm，
以 75%含水量 O/W微乳(SDS －正丁醇 －正庚烷质量比为 0． 27
∶ 0． 63∶ 0． 10)－甲酸 = 9∶ 2 为展开剂，展开 9cm，取出，晾干，
喷以 NP 显色剂(NP、PEG400，加甲醇制成每 1ml 含 10mg NP、
50mg PEG400)，100 ～ 105℃加热 2min，荧光 366nm 下检视(图
3)。
结果，母菊甲醇提取物中分离得到 10 个斑点，而罗马洋甘菊
甲醇提取物中分离得到 8 个斑点。2 种洋甘菊甲醇提取物中均
含有木犀草素、芹菜素、木犀草素 － 7 －葡萄糖苷、芹苷元 － 7 －葡
萄糖苷、7 －甲氧基香豆素。2 种洋甘菊中木犀草苷含量相近，母
菊中芹苷元 － 7 －葡萄糖苷、7 －甲氧基香豆素含量高于罗马洋甘
菊，而罗马洋甘菊中木犀草素、芹菜素含量高于母菊。
图 3 2 种洋甘菊微乳液薄层色谱图
2． 3 液相色谱法研究
2． 3． 1 供试品溶液的制备 取 2 种洋甘菊粉末各 1． 0 g，精密称
定，分别置烧瓶中，加甲醇 80 ml，搅拌加热下回流 l h，冷却至室
温，过滤，滤液置 100 ml量瓶，加甲醇至刻度，摇匀，过滤，取滤液
25． 0 ml，置圆底烧瓶中。加氢氧化钠溶液(0． 4 g 氢氧化钠溶于
5． 0 ml水)5． 0 ml，加热回流 25 min，冷却，盐酸调 pH 至 5． 0 ～
6． 2，转移至 50 ml量瓶，甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液
作为供试品溶液。
2． 3． 2 对照品溶液配制 分别取芹苷元 － 7 －葡萄糖苷、芹菜素、
木犀草苷对照品适量，溶于适量 N － N 二甲基甲酰胺，甲醇稀释
至刻度，制成浓度分别为 1． 317，1． 246，1． 085 mg·ml －1;另取 7
－甲氧基香豆素、木犀草素适量，甲醇溶解，制成浓度分别为
1． 042，1． 059 mg·ml －1。
2． 3． 3 色谱条件 色谱柱为 BEHC18(2． 1 mm × 50 mm，1． 7
μm)，流速为 0． 3 ml·min －1，检测波长为 335 nm，柱温为 37℃，
进样量为 1． 5 μl，流动相 A［0． 005 mol·L －1磷酸二氢钾溶液，稀
磷酸(5． 0 ml磷酸，加水至 100ml)调 pH至 2． 55 ± 0． 05］、流动相
B(乙睛∶ 甲醇 = 65 ∶ 35)，洗脱程序为 0 ～ 0． 75min，A/B = 74 /
26、0． 75 ～ 13min，A/B = 74 /26→55 /45、13 ～ 14min，A/B = 55 /45
→74 /26、14 ～ 15min，A/B = 74 /26。
按上述色谱条件进样测定(图 4)。结果，母菊中芹菜素、木
犀草苷、芹苷元 － 7 －葡萄糖苷、7 －甲氧基香豆素、木犀草素的含
量分别为 0． 465，0． 0540，6． 21，1． 26mg·ml －1、未检出，而罗马洋
甘菊中芹菜素、木犀草苷、芹苷元 － 7 －葡萄糖苷、7 －甲氧基香豆
素、木犀草素的含量分别为 1． 37，0． 0129，3． 21，0． 0114，0． 0975
mg·ml －1。
2． 4 GC法研究
2． 4． 1 色谱条件 G16 毛细管柱(30m × 0． 32mm，0． 25μm)，检测
器为 FID，柱初始温度为 70℃，以 4℃ /min 速率程序升温至
230℃，保持 10min，检测器保持在 250℃条件下，注射口保持在
220℃，载气为氮气，流速为 1ml·min －1，分流进样，分流比 50∶
1。
2． 4． 2 供试品溶液制备 取 2 种洋甘菊花粉末各约 60g，分别置
圆底烧瓶，加水 300ml，以 3 ～ 4ml /min速度蒸馏 4h，收集挥发油，
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时珍国医国药 2015 年第 27 卷第 1 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATEＲIA MEDICA ＲESEAＲCH 2015 VOL． 27 NO． 1
转移至 25ml容量瓶，环己烷定容，摇匀。
1．木犀草苷;2．芹菜苷元 － 7 －葡萄糖苷;
3． 7 －甲氧基香豆素;4．木犀草素;5．芹菜素
图 4 2 种洋甘菊供试品和混标 HPLC特征图
2． 4． 3 对照品溶液制备 取适量红没药醇对照品，环己烷溶解，
制成 0． 922 mg·ml －1对照品溶液。
1．红没药醇氧化物 B;2．红没药醇氧化物;
3．红没药醇;4．红没药醇氧化物 A
图 5 2 种洋甘菊供试品(母菊 B、罗马洋甘菊 C)和
红没药醇(A)对照品 GC特征图
按上述色谱条件进样测定(图 5)，以红没药醇为参照对照
品，红没药醇氧化物 B、红没药醇氧化物、红没药醇氧化物 A的相
对保留时间分别为 0． 89、0． 97、1． 1min。按照下式计算洋甘菊中
没药烷衍生物百分含量(%):2500 (ru / rs)(CS /W);式中 ru 为供
试品中红没药醇氧化物 B、红没药醇氧化物、红没药醇、红没药醇
氧化物 A峰面积之和;rs 为对照品红没药醇峰面积;CS 为红没药
醇对照品浓度，按 mg·ml －1计;W为洋甘菊质量，按 mg计。
结果，母菊挥发油中含有红没药醇氧化物 B、红没药醇氧化
物、红没药醇、红没药醇氧化物A四种化合物，没药醇衍生物含
量为 0． 042%;而罗马洋甘菊挥发油中仅检出红没药醇氧化物和
红没药醇氧化物 A两种化合物，没药烷衍生物含量为 0． 001%。
3 讨论
新疆维吾尔医药中习用的 2 种洋甘菊花外观极为相似，实际
使用中常出现混用的现象。因此，本文利用现代仪器分析技术从
显微、TLC、UPLC、GC等多方面、多角度对这 2 种洋甘菊进行多元
多息定性、定量鉴别分析及品质评价研究。
随着国际药品标准化、现代化的推进，显微鉴别仍是一种快
速、实用、专属性强而又经济的鉴别方法。因此，本文采用现代显
微鉴别技术研究新疆 2 种习用洋甘菊，建议以花粉粒上萌发孔的
数目及有无非腺毛来简单、快速区分母菊和罗马洋甘菊。
薄层色谱作为现在国内外药典控制药品质量的一种重要手
段，已被药品生产和监管部门认同，并仍被广泛应用。因此，本文
采用现代薄层色谱技术研究新疆 2 种习用洋甘菊中挥发油成分
和甲醇提取物，建议以挥发油成分薄层鉴别中烯炔 －双环醚化合
物斑点有无或甲醇提取物微乳薄层色谱中斑点数目及木犀草素、
芹菜素、芹苷元 － 7 －葡萄糖苷、7 －甲氧基香豆素斑点颜色来区
分母菊和罗马洋甘菊。
采用液相色谱法进行定性鉴别、含量测定是国际药品质量控
制的一种趋势。因此，本文采用高效液相色谱技术研究新疆 2 种
习用洋甘菊提取物中芹菜素、木犀草苷、芹苷元 － 7 －葡萄糖苷、7
－甲氧基香豆素、木犀草素的定性、定量，建议以木犀草素有无及
芹菜素、木犀草苷、芹苷元 － 7 －葡萄糖苷、7 －甲氧基香豆素含量
来对母菊和罗马洋甘菊品质评价。
气相色谱法在药品质量控制中的地位也在不断提升，特别是
含有挥发性成分的药品。因此，本文采用气相色谱技术研究新疆
习用 2 种洋甘菊中挥发油成分，建议以红没药醇或红没药醇氧化
物 B有无及没药烷衍生物含量来对母菊和罗马洋甘菊进行定
性、定量的综合品质评价。
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