免费文献传递   相关文献

假臭草精油对小菜蛾的毒力及酶活力的影响



全 文 :浙江农业学报 Acta Agriculturae Zhejiangensis,2014,26(5):1278 - 1283 http:/ /www. zjnyxb. cn
郭达伟. 假臭草精油对小菜蛾的毒力及酶活力的影响[J]. 浙江农业学报,2014,26(5):1278 - 1283.
DOI:10. 3969 / j. issn. 1004 - 1524. 2014. 05. 25
收稿日期:2013-03-15
基金项目:福建省科技合作重点项目(2010R1026-2)
作者简介:郭达伟(1973—),男,福建龙岩人,在职推广硕士研究生,副研究员,主要从事病虫害无公害防治研究。E-mail:gdw9105023@
126. com
* 通讯作者,郭达伟,E-mail:gdw9105023@ 126. com
假臭草精油对小菜蛾的毒力及酶活力的影响
郭达伟*
(龙岩市农业科学研究所,福建 龙岩 364000)
摘 要:为了探讨外来入侵杂草假臭草的科学利用方法,用点滴法和熏蒸法测定了假臭草精油对小菜蛾的
毒杀、拒食作用及其对小菜蛾体内羧酸酯酶和谷胱甘肽-s-转移酶活性的影响。结果表明,假臭草精油对小
菜蛾幼虫有一定的毒杀作用,点滴处理 48 h致死中浓度为 2. 102 × 105 mg·L -1、熏蒸处理 48 h 致死中浓度
为 1. 404 × 105 mg·L -1;假臭草精油对小菜蛾幼虫有明显的拒食作用,12 h 拒食中浓度为 2. 69 × 104 mg·
L -1,处理浓度为 1. 00 × 105 mg·L -1,拒食率可达 100%,不同处理时间的拒食中浓度无明显差异。假臭草
精油处理小菜蛾幼虫会导致小菜蛾幼虫体内的羧酸酯酶和谷胱甘肽-s-转移酶活性的变化,但未呈现出规
律性。
关键词:假臭草精油;小菜蛾;毒力;羧酸酯酶;谷胱甘肽-s-转移酶活性
中图分类号:S 482. 3 文献标志码:A 文章编号:1004-1524(2014)05-1278-06
Effects of essential oil extracted from Praxelis clematidea on enzyme activities of Plutella xy-
lostella and its toxicity
GUO Da-wei*
(Laboratory of Plant Protection,Longyan Institute of Agricultural Sciences,Fujian 364000,China)
Abstract:To investigate the new methods and tools of alien weeds usage,effects of essential oil extracted from Prax-
elis clematidea on enzyme activities (carboxylesterase and glutathione-s-transferase)of diamondback moth (DBM),
Plutella xylostella,and its toxicity by using topical methods of application and fumigation were studied in this paper.
Results showed that LC5 0 after 48 h of P. clematidea essential oil against DBM larvae was 2. 102 × 10
5 mg·L -1 by
topical application methed and was 1. 404 × 105 mg·L -1 by fumigation treatment. The median antifeedant concentra-
tion (AFC50)of P. clematidea essential oil against DBM larvae was 2. 69 × 10
4 mg·L -1 . The antifeedant rate could
reach 100% when treating concentration was 1. 00 × 105 mg·L -1 . Treating time had no significant effects on AFC50 .
The activities of carboxylesterase and glutathione-s-transferase of DBM larvae treated with P. clematidea essential oil
were changed significantly but not in a regular pattern.
Key words:Praxelis clematidea essential oil;diamondback moth;toxicity;carboxylesterase;glutathione-s-transferase
小菜蛾是危害十字花科蔬菜的重要害虫。 近年来,其抗药性的问题十分突出,已对蔬菜生
产造成严重影响。目前,小菜蛾对氰戊菊酯、敌
敌畏、辛硫磷、杀虫单、抑太保等 50 多种杀虫剂
产生了不同程度的抗药性[1]。植物源杀虫剂作
为重要的生物农药,因其化学结构新颖、对环境
安全、选择性高、不易产生抗药性等特点而受到
国内外学者的高度重视,已经成为当前新型杀虫
剂研究开发的热点之一[2 - 3]。
假臭草 Praxelis clematidea(P. grisebach)King
et Robinson,隶属于菊科(Compositae:Asterace-
ae)Praxelis属,国内又名猫腥菊,原产于南美洲。
于 20 世纪 80 年代在香港被发现,直到 1995 年才
被鉴定[4 - 5]。之前,假臭草可能已经在澳大利亚
和香港的某些地区生长多年,后传入大陆,广泛
分布于华南各省,在海南省,假臭草遍布于路旁、
果园、裸地、河边、幼龄胶园和椰子园及桉树林
[6]。假臭草繁殖率极高,易变成优势种,形成单
一群丛,导致当地生态系统的结构和功能发生变
化。假臭草对土壤肥力吸收能力强,能极大消耗
土壤养分,对土壤的可耕性破坏严重,影响其他
植物的生长,同时能散发一种有毒的恶臭味,影
响家畜觅食。因而对其入侵地区的其他生物物
种的生存构成了很大的威胁,正成为极具破坏潜
力的外来恶性杂草[6]。
假臭草用作杀虫剂的研究未见报道,仅由试
验结果推论而得,从新鲜假臭草中提取的挥发性
成分,对于昆虫的诱捕或病菌的抑制具有重要意
义[7]。为了探讨外来入侵杂草———假臭草的科
学利用,并为持续治理假臭草提供思路,同时也
为小菜蛾的防治和抗性治理提供新途径,本研究
开展了假臭草精油对小菜蛾的毒力和酶活力方
面的研究。
1 材料与方法
1. 1 供试材料
1. 1. 1 供试虫源及蔬菜
室内虫源:为福建省农业科学院植物保护研
究所及龙岩市农业科学研究所室内饲养的种群。
盆栽虫源:为龙岩市农业科学研究所试验地
盆栽甘蓝中的自然种群。
供试蔬菜:生物测定中所用的蔬菜品种均为
结球甘蓝 Brassica oleracea L. var. capitata L.。
1. 1. 2 供试药剂
假臭草精油提取:参照国家药典委员会方
法[8]提取假臭草新鲜样品,重复 3 次,用分析纯
无水硫酸钠吸去水分,再用针筒过滤器过滤后备
用。纯度以 100%计。
92%阿维菌素原药购自厦门绿土康农药有
限公司;95%毒死蜱原药购自福建福农生化有限
公司。
1. 1. 3 主要仪器及方法条件
微量点滴仪;Multiskan 酶标仪(MK3 型,
Thermo Electron Corporation);紫外分光光度计
(UV-1600 型,北京瑞利分析仪器公司);高速冷
冻离心机(RF-3200,Eppendoff 公司);人工气候
箱(LRH-250-GS,广东省医疗器械厂)。
1. 2 试验方法
1. 2. 1 生物活性测定方法
触杀毒力测定采用微量点滴法。在预备试
验基础上,将假臭草精油用丙酮稀释成(0. 2,
1. 0,1. 8,2. 6,3. 4)× 105 mg·L -1等系列浓度,选
取龄期一致的小菜蛾幼虫(3 龄),用电子天平称
重后,用微量点滴仪(25 μL,Robbins Scientific
Corporation)将不同浓度的假臭草精油点滴于小
菜蛾中胸背板,每头试虫的点滴量为 0. 5 μL,每
处理 20 头,设置 3 次重复,以丙酮及清水为
对照。
点滴法处理后,将供试虫放入培养皿(直径
为 9 cm)中,同时放入洁净的甘蓝菜叶(甘蓝叶片
用水洗净,保证无虫卵,自然晾干,用剪刀剪成略
小于培养皿),置于(25 ± 1)℃,RH(75 ± 2)%和
光周期 14∶ 10(L∶ D)的人工气候箱中,分别于 24
和 48 h 后检查死亡虫数,采用 Finney 机率值分
析法[9]计算 LD-p线、LC50值和卡方值。
熏蒸毒力测定:在预备试验的基础上,将假
臭草精油用丙酮稀释(同 1. 2. 1 节)成系列浓度,
选取龄期一致的小菜蛾幼虫(3 龄),用电子天平
称重后,置于体积为 300 mL 的锥形瓶中,锥形瓶
中放入用打孔器(直径为 1. 20 cm)制备的甘蓝叶
片 20 片。用移液枪(Gilson)分别将不同浓度的
假臭草精油 10 μL点滴于约 1 cm ×10 cm的滤纸
条上,对照用丙酮液及清水处理,将滤纸条一端
固定在橡皮塞朝瓶内一端后将橡皮塞塞紧,加封
一层保鲜膜以确保不漏气,每处理 3 次重复,每
·9721·郭达伟. 假臭草精油对小菜蛾的毒力及酶活力的影响
重复 20 头试虫。将锥形瓶置于温度、相对湿度
和光周期同点滴法的人工气候箱中,分别于 24
和 48 h 后检查死亡结果,按 Finney 机率值分析
法[9]求得 LD-p线、LC50和卡方值。
拒食试验:在预备试验的基础上,将假臭草
精油用丙酮稀释成(2,4,6,8,10)× 104 mg·L -1
等系列浓度,用打孔器(直径为 2. 0 cm)制备甘蓝
叶片,分别浸入不同浓度的假臭草精油中,3 s 后
取出晾干,放入垫有保湿滤纸的培养皿(直径为
9. 0 cm)中,每皿各摆放叶片 2 片,然后接入已饥
饿 4 h的小菜蛾 3 龄幼虫 1 头,重复 10 次,每组
处理再重复 3 次,对照叶片用含有相同浓度的丙
酮和清水处理。处理后,将培养皿置于温度相对
湿度和光周期同点滴法的人工气候箱中,分别于
12,24 和 48 h后接虫并用松下 FZ50 数码相机拍
照,以 1 cm2 方形纸片为拍摄对照,用 Photoshop
软件(Adobe公司)的选择工具勾出取食部位,根
据像素计算取食面积,据下式计算其拒食率[10],
按 Finney机率值分析法[9]求得直线回归式和拒
食中浓度 AFC50。
拒食率 =对照组取食量 -处理组取食量
对照组取食量
× 100%
1. 2. 2 酶活性测定方法
试虫处理:选取大小一致的 3 龄小菜蛾幼
虫,采用点滴法和熏蒸法(同 1. 2. 1 节)分别用不
同浓度的假臭草精油处理供试昆虫,24 h 后挑取
活虫供试。
酶液制备:在冰浴条件下,用 0. 02 mol·L -1、
pH 7. 0 磷酸钠缓冲液将 20 头试虫研磨成匀浆
液,在 10 000 r·min -1、4℃下离心 10 min,取上清
液作为酶源备用。测定时用 0. 02 mol·L -1、pH
7. 0 磷酸钠缓冲液稀释 1 倍。
酶源蛋白质含量测定:参照[11]记述的考马
斯亮蓝 G-250 染色法测定。
羧酸酯酶(CarE)活性测定方法:酶比活力的
测定参照[12]方法并加以改进:在 96 孔酶标板中
按 CarE酶比活力测定加样表(表 1)依次加样后,
室温反应 5 min 后用酶标仪测定并记录在 450
nm波长下的光密度值,以酶量(mL)为自变量,
以 D值为纵坐标,求酶活力曲线,计算羧酸酯酶
的比活力(D450·mgPr
-1·min -1)。酶活力单位
(U)定义为单位时间内每毫克蛋白催化 1 mmol·
L -1 α-NA的酶量,表示为每毫克蛋白单位时间内
D值的变化。
药剂配制:反应液包含 2. 793 mg α-NA、
0. 01747 g固蓝 RR 盐、100 μL 丙酮和 11. 90 mL
PBS;0. 1 mmol·L -1毒扁豆碱(毒扁豆碱 27. 5 mg,
溶于丙酮,经定容稀释后至 0. 1 mmol·L -1)。
表 1 CarE酶比活力测定加样表(μL)
Table 1 Reagents and scheme for CarE determination(μL)
试剂 0. 02M
PBS
毒扁豆碱 [α-NA +固蓝 RR]
混合液
E
参比 25. 00 25. 00 200. 00 0
样品 0 25. 00 200. 00 25. 00
谷光甘肽-s-转移酶(GSTs)活性测定方法:酶
比活力的测定文献[12]方法并加以改进:在 96 孔
酶标板中按 GSTs酶比活力测定加样表(表 2)依
次加样后,室温反应 5 min 后用酶标仪在 340 nm
波长下,记录光密度值,以酶量(mL)为自变量,
以 D值为纵坐标,求酶活力曲线,计算谷光甘肽-
s-转移酶的比活力(D450·mgPr
-1·min -1)。酶活
力单位(U)定义为单位时间内每毫克蛋白催化 1
毫摩尔底物的酶量,表示为每毫克蛋白单位时间
内 D值的变化。
药剂配制:GSH 溶液用 PBS 配制,浓度为
0. 02 mol·L -1;CDNB 用丙酮配制,浓度为 0. 02
mol·L -1。
表 2 GSTs酶比活力测定加样表(μL)
Table 2 Reagents and scheme for GSTs determination(μL)
试剂 0. 02 mol·L -1 PBS GSH CDNB E
参比 250 30 10 0
样品 225 30 10 25
2 结果与分析
2. 1 假臭草精油对小菜蛾的点滴毒杀作用
点滴法测定假臭草精油对小菜蛾 3 龄幼虫
的毒杀作用的结果如表 3,假臭草精油对小菜蛾
幼虫有一定的毒杀作用,且随着处理浓度的加
大,毒杀作用增强,当处理浓度达 3. 4 × 105 mg·
L -1时,24 h和 48 h 的校正死亡率均可达到 60%
以上,48 h的 LC50为 2. 10 × 10
5 mg·L -1(表 4);处
·0821· 浙江农业学报 第 26 卷 第 5 期(2014 年 9 月)
理后 48 h与 24 h相比,除浓度 3. 4 × 105 mg·L -1
外,各浓度处理对小菜蛾的毒杀作用均增强。从
表中可知,作为假臭草精油溶剂的丙酮对小菜蛾
的毒杀作用很小,与清水对照相比不存在显著
差异。
2. 2 假臭草精油对小菜蛾的熏蒸毒杀作用
假臭草精油对小菜蛾 3 龄幼虫熏蒸作用测
定结果如表 5,假臭草精油对小菜蛾幼虫有一定
的熏蒸毒杀作用,浓度越高,熏蒸毒杀作用越明
显。当处理浓度达 26 × 104 mg·L -1时,24 和 48 h
的校正死亡率均可达到 60%以上,处理后 48 h
的 LC50为 14. 04 × 10
4 mg·L -1(表 4);处理后 48 h
与 24 h相比,熏蒸毒杀作用均有明显的提高;作
为溶剂的丙酮对小菜蛾的熏蒸毒杀作用很小,与
清水对照相比不存在显著差异。
2. 3 假臭草精油对小菜蛾的拒食作用
不同浓度假臭草精油对小菜蛾 3 龄幼虫的
拒食作用测定结果如表 6。各处理组供试小菜蛾
的取食量随着假臭草精油浓度的升高而减少,平
均取食量各处理与清水对照均存在显著差异,说
明拒食率随着假臭草精油浓度升高而升高,各处
理平均拒食率与丙酮对照相比均存在显著差异。
但处理 12,24,48 h 后小菜蛾的拒食率并无显著
差别;作为假臭草精油溶剂的丙酮对小菜蛾也具
有一定的拒食作用,处理后 12,24,48 h的平均拒
食率分别为 44. 09%,35. 74%,39. 97%。处理
12,24,48 h后,假臭草精油对小菜蛾 3 龄幼虫的
拒食中浓度 AFC50分别为 2. 69 × 10
4,2. 68 × 104
和 2. 62 × 104 mg·L -1,不同时间的 AFC50无明显
差异(表 7)。
表 3 假臭草精油对小菜蛾点滴毒杀作用(单头小菜蛾平均体重为 1. 21 mg)
Table 3 Contact toxicity with topical application of Praxelis clematidea essential oil against DBM larvae
处理浓度 /
(104 mg·L -1)
处理虫数 /

处理后 24 h 处理后 48 h
死虫数 /头 死亡率 /% 校正死亡率 /% 死虫数 /头 死亡率 /% 校正死亡率 /%
2 20 2. 33 ± 0. 33 11. 67 ± 1. 67 de 8. 59 3. 33 ± 0. 33 16. 67 ± 1. 67 cd 10. 71
10 20 3. 33 ± 0. 33 16. 67 ± 1. 67 d 13. 76 5. 67 ± 0. 89 28. 33 ± 4. 41 bc 23. 25
18 20 7. 00 ± 0. 58 35. 00 ± 2. 89 c 32. 75 8. 00 ± 1. 00 40. 00 ± 5. 00 b 35. 73
26 20 10. 00 ± 0. 58 50. 00 ± 2. 89 b 48. 27 11. 33 ± 1. 20 56. 67 ± 6. 01 a 53. 56
34 20 13. 67 ± 0. 67 68. 33 ± 3. 33 a 67. 25 13. 33 ± 1. 20 66. 67 ± 6. 01 a 64. 43
CK丙酮 20 1. 00 ± 0. 58 5. 00 ± 2. 89 e 1. 71 1. 33 ± 0. 33 6. 67 ± 1. 67 d 0. 00
CK清水 20 0. 67 ± 0. 33 3. 33 ± 1. 67 e — 1. 33 ± 0. 33 6. 67 ± 1. 67 d —
注:表中同列不同行之间没有相同字母表示 0. 05 水平上显著性差异。下同。
表 4 假臭草精油对小菜蛾点滴处理和熏蒸处理的 LD-P线(48 h)
Table 4 Line LD-p with topical application and Fumigation toxicity of P. clematidea essential oil against DBM larvae (48 h)
处理 LD-P线 LC50 /(104 mg·L -1) LC50置信限 LC95 / (104 mg·L -1) LC95置信限 回归相关系数 卡方值
点滴 Y = 3. 523 + 1. 1167x 21. 02 15. 35 ~ 32. 98 624. 72 222. 73 ~ 4957. 00 0. 9392 5. 0745
熏蒸 Y = 3. 55 + 1. 27x 14. 04 10. 65 ~ 18. 90 278. 89 131. 61 ~ 1083. 19 0. 94 5. 07
表 5 假臭草精油对小菜蛾熏蒸作用测定结果(单头小菜蛾平均体重为 1. 78 mg)
Table 5 Fumigation toxicity of Praxelis clematidea essential oil against DBM larvae
处理浓度 /
(104 mg·L -1)
处理虫数 /

处理后 24 h 处理后 48 h
死虫数 /头 死亡率 /% 校正死亡率 /% 死虫数 /头 死亡率 /% 校正死亡率 /%
2 20 2. 33 ± 0. 33 11. 67 ± 1. 67 cd 8. 59 3. 67 ± 0. 33 18. 33 ± 1. 67 d 12. 53
10 20 5. 33 ± 0. 89 26. 67 ± 4. 41 bc 24. 11 6. 67 ± 0. 67 33. 35 ± 3. 33 c 28. 60
18 20 6. 33 ± 1. 86 31. 67 ± 9. 28 b 29. 28 9. 67 ± 0. 67 48. 33 ± 3. 33 b 44. 67
26 20 13. 67 ± 1. 33 68. 33 ± 6. 67 a 67. 25 14. 33 ± 0. 67 71. 67 ± 3. 33 a 69. 63
34 20 13. 00 ± 0. 58 65. 00 ± 2. 89 a 63. 79 14. 33 ± 0. 89 71. 67 ± 4. 41 a 69. 63
CK丙酮 20 1. 00 ± 0. 33 5. 00 ± 2. 89 d 1. 71 1. 33 ± 0. 33 8. 3 3 ± 1. 67 e 1. 82
CK清水 20 0. 67 ± 0. 58 3. 33 ± 1. 67 d — 1. 67 ± 0. 33 6. 67 ± 1. 67 e —
·1821·郭达伟. 假臭草精油对小菜蛾的毒力及酶活力的影响
表 6 假臭草精油对小菜蛾 3 龄幼虫的拒食作用测定结果
Table 6 Antifeedant effect of of Praxelis clematidea essential oil against DBM larvae
浓度 /
(104 mg·L -1)
12 h 24 h 48 h
平均取食量 /
(mm2·头 - 1)
平均拒食
率 /%
平均取食量 /
(mm2·头 - 1)
平均拒食
率 /%
平均取食量 /
(mm2·头 - 1)
平均拒食
率 /%
2 12. 44 ± 0. 36 c 54. 95 ± 4. 72 e 23. 81 ± 0. 48 c 55. 02 ± 0. 95 e 40. 40 ± 0. 43 c 58. 76 ± 0. 55 e
4 9. 78 ± 0. 11 d 64. 76 ± 2. 27 d 16. 81 ± 0. 36 d 68. 25 ± 0. 67 d 31. 98 ± 0. 23 d 67. 36 ± 0. 33 d
6 6. 62 ± 0. 17 e 76. 09 ± 2. 10 c 13. 72 ± 0. 08 e 74. 07 ± 0. 21 c 25. 40 ± 0. 04 e 74. 07 ± 0. 09 c
8 2. 41 ± 0. 05 f 91. 33 ± 0. 61 b 6. 10 ± 0. 12 f 88. 47 ± 0. 26 b 9. 28 ± 0. 07 f 90. 53 ± 0. 09 b
10 0 f 100. 00 a 0 g 100. 00 a 0g 100. 00 a
CK丙酮 15. 50 ± 1. 03 b 44. 09 ± 4. 59 f 34. 02 ± 0. 44 b 35. 74 ± 0. 59 f 58. 82 ± 0. 30 b 39. 97 ± 0. 21 f
CK清水 28. 02 ± 1. 98 a — 52. 93 ± 0. 21 a — 97. 97 ± 0. 34 a —
表 7 假臭草精油对小菜蛾幼虫的拒食作用的直线回归
式和 AFC50
Table 7 Antifeedant regression line and AFC50 of Praxelis
clematidea essential oil against DBM larvae
时间
/h
直线回归式 AFC50(95% FL)/
(104 mg·L -1)
r
12 y = 2. 7291 + 5. 2915 x 2. 6863(1. 0682 ~ 6. 7551) 0. 7310
24 y = 2. 7921 + 5. 1575 x 2. 6798(1. 0084 ~ 7. 1216) 0. 7116
48 y = 8652 + 5. 1066 x 2. 6184(0. 9625 ~ 7. 1235) 0. 7103
2. 4 假臭草精油对小菜蛾羧酸酯酶(CarE)活性
的影响
不同浓度假臭草精油点滴处理后的小菜蛾
CarE酶比活力见表 8。研究结果表明,假臭草精
油处理只在处理剂量为 170 μg·头 - 1时,小菜蛾
CarE的活性高于丙酮及清水对照,酶比活力为
5. 48 U,其余各处理的 CarE 的活性均低于丙酮
及清水对照;熏蒸处理小菜蛾后,CarE 酶比活力
见表 8,丙酮处理后的 CarE 的活性最高,为 7. 95
U,均明显高于其他浓度下(除 2 × 104 mg·L -1外)
酶比活力。
2. 5 假臭草精油对小菜蛾谷光甘肽 S-转移酶
(GSTs)活性的影响
不同浓度假臭草精油点滴处理后的小菜蛾
GSTs酶比活力见表 8。研究结果表明,假臭草精
油点滴处理后 GSTs的活性均高于丙酮及清水处
理;50 μg·头 - 1剂量处理时的酶比活力最高,为
4. 8563 U。熏蒸处理小菜蛾后,GSTs酶比活力见
表 8,假臭草精油点滴处理后 GSTs的活性介于丙
酮处理与清水处理之间,以丙酮处理后的 GSTs
酶比活力最高,为 6. 3510 U,以清水对照的 GSTs
酶比活力最低,为 2. 2004 U。
表 8 假臭草精油处理后小菜蛾 CarE 和 GSTs 的酶比
活力
Table 8 Specific activity of CarE and GSTs of DBM larvae
with P. clematidea essential oil
处理 处理剂量 CarE酶比活力 /
(OD450·mgPr - 1)
GSTs酶比活力 /
(OD340·mgPr - 1)
点滴 (μg·头 - 1)
10 4. 8507 ± 0. 938 3. 0934 ± 0. 137
50 4. 2946 ± 0. 581 4. 8563 ± 0. 539
90 4. 7503 ± 1. 095 3. 7693 ± 0. 296
130 4. 8139 ± 0. 274 4. 6702 ± 0. 527
170 5. 4793 ± 0. 545 4. 6083 ± 0. 342
CK丙酮 4. 9397 ± 0. 195 2. 9829 ± 0. 408
CK 清水 4. 8752 ± 0. 212 2. 4466 ± 2. 010
熏蒸 (mg·L -1

)
2 × 104 7. 8473 ± 0. 123 4. 8709 ± 0. 773
10 × 104 4. 7349 ± 0. 888 4. 9106 ± 0. 313
18 × 104 4. 4077 ± 0. 568 4. 3064 ± 0. 337
26 × 104 2. 7780 ± 0. 632 3. 3642 ± 0. 323
34 × 104 3. 3765 ± 0. 690 3. 7097 ± 0. 313
CK丙酮 7. 9451 ± 1. 304 6. 351 ± 1. 003
CK清水 4. 3847 ± 0. 191 2. 2004 ± 1. 808
3 结论与讨论
植物精油作为植物体内的次生代谢物,是以
单萜为主的混合物,通过多种机制、多个作用靶
点协同作用于昆虫,对昆虫具有多种活性,如毒
杀、拒食和生长发育抑制作用、驱避作用、引诱作
用等[13];多种植物提取物对小菜蛾具有很好的
产卵忌避作用[14]。通过本研究可以得知假臭草
精油对小菜蛾具有一定的毒杀作用、很好的拒食
作用及忌避作用,但仍需要完善各种生物活性测
·2821· 浙江农业学报 第 26 卷 第 5 期(2014 年 9 月)
定,进一步测定假臭草精油对小菜蛾的生长抑
制、产卵忌避、选择性拒食等生物活性。在拒食
作用测定中,丙酮对小菜蛾也具有一定的拒食作
用,有必要进一步以丙酮为对照测定各处理的平
均拒食率。
CarE和 GSTs是昆虫体内的解毒酶,在害虫
抗药性发生中起到重要作用,本试验结果表明,
不同浓度的假臭草精油处理后,小菜蛾体内的
CarE、GSTs活性发生了不同的变化,但未能呈现
出规律性变化,有待于进一步进行假臭草精油处
理对小菜蛾杀虫剂的相关靶标酶如乙酰胆碱酯
酶、昆虫体内保护酶如超氧化物歧化酶(SOD)和
过氧化氢酶、过氧化物酶等酶活性的测定,并结
合最大反应速度和米氏常数来明确假臭草精油
处理对小菜蛾幼虫体内各种酶活性的影响。
参考文献:
[1] 黄剑,吴文君. 小菜蛾抗药性研究进展[J]. 贵州大学学
报,2003,20(1):97 - 104.
[2] 朱九生,乔雄梧,王静,等. 杠柿根皮乙醇提取液对蔬菜
害虫小菜蛾的生物活性[J]. 植物资源与环境学报,2004,
13(3):31 - 34.
[3] 苏忠,曾玲,章玉苹,等. 香泽兰提取物微胶囊剂对小菜蛾
产卵驱避作用研究[J]. 植物保护,2007,33(2):58 -61.
[4] 李光义,喻龙,邓晓,等. 假臭草化感作用研究[J]. 杂草
科学,2006,(4):19 - 20,49.
[5] 陈伟,兰国玉,安锋,等. 海南外来杂草—假臭草群落生
态特征研究[J]. 西北林学院学报,2007,22(2):24 - 27.
[6] 王真辉,安峰,陈秋波. 外来入侵杂草———假臭草[J]. 热
带农业科学,2006,26(6):33 - 37.
[7] 汤丽昌,王宁,杨先会,等. 外来入侵植物假臭草挥发性
成分分析[J]. 安徽农业科学,2011,39(10):5805 -
5806,5809.
[8] 国家药典委员会编. 中华人民共和国药典 2005 年版(一
部)[M]. 北京:化学工业出版社,2005:57.
[9] Finny DJ. Probit Analysis[M]. London:Cambridge Universi-
ty Press,1971:333.
[10] 程东美,胡美英,张志祥,等. 闹羊花素-Ⅲ对斜纹夜蛾和
小菜蛾的杀虫活性研究[J]. 天然产物研究与开发,
2002,14(1):25 - 28.
[11] Bradford MM. A rapid and sensitive method for the quantita-
tion of microgram quantities of protein utilizing the principle
of protein-dye binding[J]. Analytical Biochemistry,1976,
72:248 - 254.
[12] 慕立义. 植物化学保护研究方法[M]. 北京:中国农业
出版社,1991:154 - 155.
[13] 王肖娟,谢慧琴.杀虫剂增效作用及其作用机理研究进展
[J]. 安徽农业科学,2007,35(13):3902 - 3904,3929.
[14] Syed TS,Lu YY,Liang GW. Effect of crude extracts from
plants on the oviposetion behavior of diamondback Moth[J].
Journal of South China Agricultural University,2003,24
(3):87 - 88,92.
(责任编辑 黄 芳)
·3821·郭达伟. 假臭草精油对小菜蛾的毒力及酶活力的影响