全 文 ：收稿日期:2013-06-28; 修订日期:2013-11-27
基金项目:国家社会科学基金( No． 12XMZ033)
作者简介:何可群( 1971-) ，女( 白族) ，云南云龙人，贵州民族大学化学与
环境科学学院副教授，硕士学位，主要从事药用植物学、分析化学工作．
香花崖豆藤总三萜酸的含量测定
何可群1，李相兴2
(1．贵州民族大学化学与环境科学学院，贵州 贵阳 550025;
2．贵州民族大学民族学与社会学学院，贵州 贵阳 550025)
摘要:目的 研究香花崖豆藤茎皮的总三萜酸含量，为其进一步开发利用提供依据。方法 以齐墩果酸为对照品，用超声
辅助提取、分光光度法测定了香花崖豆藤总三萜酸含量。结果 香花崖豆藤中总三萜酸的相对百分含量为 7． 602%，精密
度实验 ＲSD为 1． 26% ;齐墩果酸对照品在 0 ～ 100 μg /ml范围有良好的线性关系，回归方程为 Y = 0． 011 3X － 0． 017 7，相
关系数 Ｒ2 = 0． 999 1。结论 该方法操作简便、结果可靠，能为香花崖豆藤药用价值的开发及扩大资源利用提供科学的依
据。
关键词:香花崖豆藤; 总三萜酸
DOI标识:doi: 10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2014． 05． 019
中图分类号:TS201 文献标识码:A 文章编号:1008-0805( 2014) 05-1070-02
Determination of Total Triterpene Acid from Millettia dielsiana
HE Ke-qun1，LI Xiang-xing2
( 1． Chemistry and Environmental Science Department of Guizhou Minzu University，Guiyang Guizhou 550025，
China; 2． Ethnology and Sociology Department of Guizhou Minzu University，Guiyang，Guizhou，550025，China)
Abstract: The percentage of total triterpene acid in Millettia dielsiana was determined by spectrophotometry at 540nm based on
the standard curve with oleanolic acid as controlled sample． The results showed the percentage of total triterpene acid in Millettia
dielsiana was 7． 602% and there was good linearity ( Ｒ2 = 0． 9991) during the range of 0 ～ 100 g /mL for oleanolic acid，the re-
gression equation: Y = 0． 0113X － 0． 0177． The relative standard deviation ＲSD was 1． 26% ． The spectrophotometry method is sim-
ple and reliable to measure the content of total triterpene acid in Millettia dielsiana It provides a certain referential gist for the ex-
ploitation and expand resource utilization of the Millettia dielsiana＇s medical value．
Key words: Millettia dielsiana; Total triterpene acid
香花崖豆藤 Millettia dielsiana是豆科崖豆藤属多年生藤本植
物，在西南地区民族医药中其藤茎常代鸡血藤入药，又名山鸡血
藤、大巴豆、山胡豆，分布在我国华南、西南、华中等地，具有行血
补血、通经活络、强筋骨的功效，主要用于血虚体弱、劳伤筋骨、月
经不调、闭经、产后腹痛、恶露不尽、各种出血、风湿痹痛、跌打损
伤的治疗［1，2］。已有的研究表明香花崖豆藤的化学成分主要是
芸苔甾醇、豆甾醇、谷甾醇、木栓酮、鸡血藤醇、蒲公英赛酮及多种
异黄酮类化合物［2 ～ 7］。通过文献检索，国内外还未见有关香花崖
豆藤总三萜酸测定的研究报道，本实验对香花崖豆藤茎皮的总三
萜酸含量进行研究，以便为该民族药的进一步开发及扩大资源利
用提供科学依据。
1 材料
1． 1 药材 香花崖豆藤。香花崖豆藤 Millettia dielsiana采自贵州
省贵阳市花溪区，标本保存于贵州民族大学化学与环境科学学院
药学教研室。
1． 2 仪器 756PC紫外 －可见分光光度计(上海舜宇恒平科学仪
器有限公司)，METTLEＲAE240 电子分析天平(上海天平仪器
厂)，BGZ － 30 电热鼓风干燥箱(上海博迅实业有限公司医疗设
备厂)，SG3200HE超声清洗仪(上海冠特超声仪器有限公司)，数
显恒温水浴锅(常州博远实验分析仪器有限公司)。
1． 3 试剂 无水乙醇、冰醋酸、高氯酸、香草醛均为分析纯，齐墩
果酸对照品购自贵州迪大科技有限责任公司(纯度≧ 98%，批
号:84650 － 60 － 2)。
2 方法
2． 1 香花崖豆藤总三萜酸的提取方法［8 ～ 10］ 将晒干的香花崖豆
藤茎皮在电热鼓风干燥箱中于(60 ± 1)℃烘干 5h，精确称取干
燥、粉碎(过 40 目筛)的香花崖豆藤茎皮粉末 2． 000g，按 1∶ 20
的固液比用无水乙醇浸泡、超声提取 2 次。提取条件:时间 60
min，超声频率 40kHz，功率 150W，提取结束后，合并提取液、过
滤、冷却、用无水乙醇定容至 100 ml、摇匀备用。
2． 2 标准溶液的制备及测定波长的选择［11 ～ 13］
2． 2． 1 标准溶液的制备 精确称取 65℃干燥至恒重的齐墩果酸
20． 00mg，置 100ml容量瓶中，加无水乙醇适量使其溶解，以无水
乙醇定容，摇匀，每毫升溶液含齐墩果酸 200 g。
2． 2． 2 测定波长的选择 精确吸取齐墩果酸标准溶液(200 g /
ml)、香花崖豆藤茎皮提取液各 1． 00ml，分别置于 2 支 10ml 比色
管中，于 85℃挥干溶剂，冷却，分别精确加入 5%香草醛 －冰醋酸
0． 500ml，再分别加入高氯酸 1． 00ml，摇匀，于 70℃水浴中反应
20min，取出，在冰水浴中冷却，用冰醋酸稀释至刻度，摇匀，静置
5min。以试剂空白建立基线，在 400 ～ 700nm 波长范围进行波长
扫描，得到齐墩果酸和香花崖豆藤茎皮提取液显色后的吸收光
谱，以确定最大吸收波长。
2． 3 齐墩果酸标准曲线的绘制［11 ～ 13］ 精确吸取质量浓度 200 g /
ml的齐墩果酸标准溶液 0，1． 00，2． 00，3． 00，4． 00，5． 00ml分别置
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时珍国医国药 2014 年第 25 卷第 5 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATEＲIA MEDICA ＲESEAＲCH 2014 VOL． 25 NO． 5
于 6 支 10ml比色管中，以下操作同“2． 2”，以试剂空白为参比，于
540nm波长下测定吸光度 A，以吸光度为纵坐标，显色液中齐墩
果酸的质量浓度 C(g /ml)为横坐标，绘制标准曲线。
2． 4 样品测定［10 ～ 13］ 精确量取“2． 1”所得香花崖豆藤茎皮乙醇
提取液 1． 00ml，置于 10ml 比色管中，以下操作同“2． 2”，于
540nm波长下测得香花崖豆藤茎皮提取液的吸光度 A，代入回归
方程得香花崖豆藤茎皮的总三萜酸类化合物以齐墩果酸计算的
质量浓度 C(g /ml)，换算为干燥药材中总三萜酸的百分含量。
2． 5 重复性试验 精确称取香花崖豆藤茎皮样品 5 份，按含量测
定方法进行测定，计算平均含量及 ＲSD值。
2． 6 加标回收试验 精确量取香花崖豆藤茎皮乙醇提取液1． 00
ml 3 份，再分别精确加入齐墩果酸标准溶液(浓度为 200 μg /ml)
1． 00ml，按样品含量测定方法进行测定，计算加标回收率及 ＲSD
值。
3 结果
3． 1 测定波长的选择 由“2． 2”的实验结果可知齐墩果酸及香
花崖豆藤茎皮提取液显色后在 540nm均有最大吸收，故以 540nm
作为总三萜酸的测定波长。
3． 2 标准曲线 于 540nm波长下测定齐墩果酸标准溶液系列的
吸光度 A，以吸光度为纵坐标，显色液中齐墩果酸的质量浓度 C(
g /ml)为横坐标，绘制标准曲线(图 1)，经回归处理得方程:Y =
0． 0113X － 0． 0177，相关系数:Ｒ2 = 0． 999 1，齐墩果酸浓度在 0 ～
100 μg /ml范围内吸光度与质量浓度线性关系良好。
图 1 齐墩果酸标准曲线
3． 3 样品总三萜酸含量的测定 由表 1 可知，香花崖豆藤样品中
总三萜酸的平均含量为 7． 602%，重复性试验 ＲSD 为 1． 26%，精
密度高。
表 1 总三萜酸测定及精密度试验结果
测定次数 样品总三萜酸含量(%)
1 7． 495
2 7． 557
3 7． 593
4 7． 613
5 7． 753
平均值(%) 7． 602
ＲSD(%) 1． 26
3． 4 加标回收率 由表 2 可知加标回收率在 96． 29% ～
100． 92%，ＲSD为 1． 92%。
表 2 加标回收试验结果
样品提取液
体积 /ml
样品三萜酸
含量 /g
加标量
/g
测得量
/g
回收率
(%)
平均值
(%)
ＲSD
(%)
1． 00 1500． 24 200 1637． 12 96． 29
1． 00 1500． 24 200 1671． 39 98． 30 98． 50 1． 92
1． 00 1500． 24 200 1715． 83 100． 92
4 结论
香花崖豆藤是西南苗、彝、白、瑶、侗、仡佬等多个少数民族民
间常用药，治疗血虚体弱、风湿关节炎等疾病疗效确切，但迄今为
止，其资源还未得到有效的开发利用。本文首次对香花崖豆藤茎
皮的总三萜酸含量进行研究，结果表明香花崖豆藤干燥茎皮总三
萜酸百分含量为 7． 602%，为该民族药的药用价值开发及扩大资
源利用提供了一定的科学依据。
参考文献:
［1］ 江苏新医学院，中药大辞典，上册［M］． 上海:上海人民出版社，
1977:1206．
［2］ 左经会．六盘水药用植物［M］．北京:科学出版社，2013:252．
［3］ 王 瑞．福山爱保．香花崖豆藤化学成分的研究［J］．中草药，1989，
20(2):2．
［4］ 王 瑞，耿培武． 香花崖豆藤化学成分的研究(Ⅱ)［J］． 中草药，
1990，21(9):5．
［5］ 宋建兴，胡旺云． 香花崖豆藤化学成分的研究［J］． 西南林学院学
报，1992，12(1):40．
［6］ 巩 婷，王洪庆，陈若芸． 香花崖豆藤中异黄酮类化合物的研究
［J］．中国中药杂志，2007，32(20):2138．
［7］ 曾 瞻．丰城鸡血藤与香花崖豆藤的鉴定区别［J］． 井冈山医专学
报，2005，12(1):79．
［8］ 辛 国，王恩鹏，张 辉．三萜类化合物的提取分离及测定方法研
究［J］．长春中医药大学学报，2008，24(4):378．
［9］ 刘玉明，柴逸峰，娄子洋，等． 分光光度法测定蓝桉果实总三萜酸
［J］．中国医院药学杂志，2005，25(1):4．
［10］ 袁 媛，杨 毅，开桂青，等． 灵芝三萜提取工艺研究［J］． 安徽化
工，2007，33(4):27．
［11］ 周俐裴，芦柏震，候桂兰．中药三萜类化合物的提取分离及测定方
法研究进展［J］．海峡药学，2007，19(3):62．
［12］ 张雁冰，王克让，刘宏民．马桑叶中总三萜酸的含量测定［J］． 时珍
国医国药，2006，17(4):529．
［13］ 蔡亚玲，阮金兰，苏 群，等． 紫背鼠尾草中总三萜酸的含量测定
［J］．中药材，2008，31(5):692．
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