全 文 ：3　讨论
　　肝损伤是脂肪肝的重要病理过程 , 其病因主要有病毒性肝
炎 、化学药物中毒等。肝细胞的损坏 ,导致血清酶的升高。中医
虽无肝损伤的记载 , 但考察其临床特点 , 肝损伤与胁痛、
黄疸等病证有相似的症状学特征。发病部位主要在肝脾两
脏 , 肝失条达 ,气血循行不畅 , 化湿生痰为主要病机 , 治疗上宜益
气活血 , 泻热祛湿为主。
　　本研究通过复制不同的急性肝损伤及脂肪肝模型 , 观察了
JGZJN对小鼠急性肝损伤及脂肪肝的保护作用。结果表明:JG-
ZJN20g/kg、40g/kg剂量组对 DL-乙硫氨酸引起小鼠肝 TG的升
高有明显降低作用 , 但对血中的 TC、TG、肝 TC无明显的改善;
JGZJN20g/kg剂量组对四环素引起小鼠肝 TG和肝系数的升高
有明显降低作用;JGZJN各剂量组对四氯化碳引起小鼠肝损伤
的 ALT、AST、AKP和肝系数无明显改善作用;JGZJN20g/kg剂量
组 D-氨基半乳糖引起小鼠肝损伤的 ALT和 AST的升高有明显
降低作用 ,病理组织学检查表明:JGZJN各剂量组对小鼠肝脏组
织病变发生率和病变程度与模型比较均有一定降低 , 其中尤以
JGZJN20g/kg剂量组效果最为显著 , 提示 JGZJN对 D-氨基半乳
糖引起小鼠肝损伤有一定的保护作用。结果表明 JGZJN对动
物急性肝损伤有一定的保肝降酶作用和肝 TG的升高有拮抗作
用 ,为该药临床治疗脂肪肝提供了实验参考 , 其作用机制有待
于进一步研究。
复方一枝蒿颗粒的抗炎 、抗菌作用和对免疫功能的影响
陶海英 , 孙玉华 1 , 胡正梅 , 刘发 1
(新疆西域药业有限公司 , 乌鲁木齐　 830011;1新疆药物研究所 , 乌鲁木齐　 830001)
　　摘　要　目的:研究复方一枝蒿颗粒的抗炎 、抗菌和对免疫功能的影响 ,为其临床治疗风热感冒提供药理学参考 。方法:抗炎
作用采用毛细血管通透性和角叉菜胶足肿胀试验 ,对免疫功能的影响采用血清溶血素生成和淋巴细胞培养试验;抗感染作用采用
体内外抗菌试验方法。结果:(1)2.0, 4.0, 8.0g/kg· d连用 3天对小鼠腹腔毛细血管通透性的抑制率分别为 31.6%, 35.4%和 54.
4%;(2)1.5, 3.0, 6.0g/kg· d连用 7天 , 对大鼠角叉菜胶足肿胀的抑制率为 23.3% ～ 64.9%;(3)小鼠体内抗菌以对肺炎球菌 、乙型
溶血链球菌作用最强 , ED
50
分别为 1259.5mg/kg和 1587.4mg/kg, 对金黄色葡萄球菌 ED
50
为 2103.0mg/kg;(4)在 62.5 ～ 500μg/ml
浓度范围内促进 B淋巴细胞增殖;2.0, 4.0, 8.0g/kg· d连续 ig8天 , 3个剂量均可促进小鼠血清溶血素的生成;(5)0.8g, 1.6g和 3.
2g/k· d连续 ig3天均可使三联疫苗致家兔发热体温降低。结论:复方一枝蒿颗粒有抗炎 、抗菌 、解热和体液免疫促进作用。
　　关键词　复方一枝蒿颗粒;抗炎;抑菌;解热;体液免疫
　　复方一枝蒿颗粒 (compoundartemisiarupestrisgranule;
GARG)由一枝蒿 、板蓝根 、大青叶经提炼精制而成 ,是新疆维吾
尔医特色产品 , 主要用于治疗风热感冒及控制感冒引起的各种
症状 , 因疗效确实 ,深受广大患者欢迎。现将基础药理作用研究
结果报告如下。
1　材料
1.1 　试验药物　复方一枝蒿颗粒 ,每包 10g,相当 7.2g生药 ,
成人每次 1包 , 一天 3次 , 新疆西域药业有限公司生产 , 批号:
030501。苦甘冲剂 ,青岛国风药业股份有限公司生产 , 国药准字
Z37020781, 批号:030476。
1.2　动物　 昆明小鼠 、Wistar大鼠 、新西兰种家兔均由新疆医
学动物供应中心提供 ,合格证号:新医动字 2003-0002号。
1.3 　实验细菌和培养基　实验菌株由北京生物制品检定所
提供:金黄色葡萄球菌 ATCC25923;肺炎链球菌 ATCC49619;
乙型溶血性链球菌 ATCC6305;大肠埃希菌 ATCC25922。培养
基:MH肉汤培养基 , 杭州天和微生物试剂有限公司产 , 批号:
20029191;MH血清肉汤培养基(MH肉汤 +灭活小牛血清)本
室制备;MH琼脂培养基 , 杭州天和微生物试剂有限公司产 , 批
号:20010611;MH血琼脂平板培养基(MH琼脂培养基 +脱纤维
羊血),本室制备。
1.4　试剂　 LPS, 美国 SIGMA公司出品;ConA, 北京医药站进
口分装;RPMI-1640, 美国 LIFECHNOLOGIES公司;MTT, 德国
MERCKKGaA公司;角叉菜胶 ,美国Sigma公司产品。绵羊红细
胞(SRBC), 无菌条件下从绵羊静脉抽取。
1.5　试液配制
1.5.1　 HBSS储备液　KCl20.0g, KH2PO4 0.30g, NaCl40.0g,
Na2HPO4 0.24g,葡萄糖 5.0g, MgSO4· 7H2O1.0g, CaCl2 7.0g,
酚红 0.5g。依次将上述试剂溶于重蒸水并补足到 1L, 以 NaOH
(重蒸水配制)调 pH至 6.7左右 , 过滤除菌 ,即为 5倍浓缩的储
备液。应用时 ,取 1份储备液加 4份重蒸水混合成 pH7.2的
HBSS液。
1.5.2　 RPMI-1640营养液　 取 RPMI1640 培养基 10.4g,
HEPES5.9g, 谷氨酰胺 300mg, 丙酮酸钠 0.11g, 环丙沙星注射
液 20ml, NaHCO3 2.0g溶于重蒸水并补加至 1000ml,以 NaHCO3
调 pH值至 7.1左右 , 再加灭活的 NBS(约相当于总体积的
15%),以蔡氏滤器滤过除菌 , 无菌分装 ,置 0 ～ 4℃保存。
1.5.3　 MTT显色液 　 MTT以 PBS配成 5mg/ml的存储液 , 滤
过除菌 ,置 0 ～ 4℃保存。
64 中药药理与临床 2007;23(2)DOI :10.13412/j.cnki.zyy l.2007.02.034
2　方法与结果
2.1 　对角叉菜胶致大鼠足肿的影响　大鼠 60只 , 体重 163±
11.7g,随机分成 5组 , ig给药每天 1次 ,连续 7天。 末次给药一
小时后 ,每鼠右后足跖皮下注射 1%角叉菜胶溶液 50μl,于 0、 1、
2、3、5、7h,用千分卡尺测量左 、右后足厚度 , 以左 、右后足厚度差
值表示肿胀度 ,并计算抑制率。结果复方一枝蒿颗粒三个剂量
组 ,在各时间段内和模型组比较足肿胀度明显降低 , 见表 1。
　　表 1　 复方一枝蒿颗粒对角叉菜胶致大鼠足肿的影响( x±s)
组别 剂量(g/kg)
鼠数
(只) 体重(g)
不同时间的足趾肿胀度(mm)
1h 2h 3h 5h 7h
模型对照　　　 10 163.0±14.0 0.37±0.10 0.55±0.12 0.68±0.13 0.78±0.11 0.94±0.11
苦甘冲剂　　　 2.0 10 163.2±10.9 0.15±0.06＊＊ 0.29±0.09＊＊ 0.39±0.12＊＊ 0.51±0.31＊＊ 0.66±0.15＊＊
复方一枝蒿颗粒 1.5 10 164.6±9.8 0.26±0.20 0.39±0.18＊ 0.48±0.17＊＊ 0.60±0.17＊ 0.81±0.24
复方一枝蒿颗粒 3.0 10 163.7±13.3 0.14±0.06＊＊ 0.25±0.08＊＊ 0.35±0.09＊＊ 0.44±0.11＊＊ 0.53±0.13＊＊
复方一枝蒿颗粒 6.0 10 163.4±12.4 0.13±0.08＊＊ 0.24±0.09＊＊ 0.32±0.10＊＊ 0.42±0.10＊＊ 0.50±0.10＊＊
　　与模型组比较 ＊P<0.05, ＊＊ P<0.01(下同)
2.2 　对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响　小鼠 50只雌雄兼
用 , 体重 20.5±0.2g,依体重 、性别均衡分 5组 , ig给药每天 1次
连续 3天。末次给药后 2h, 尾静脉注入 0.5%伊文思蓝生理盐
水溶液 0.1ml/10g,并立即 ip0.6%乙酸 0.2ml/只 , 20min后处
死小鼠 , 剪开腹部 ,用 6mlNS分次洗涤腹腔 , 吸出冲洗液 , 合并
以后以 NS稀释至 10.0ml, 3000rpm离心 15min, 取上清液于
590nm测吸收度。结果苦甘冲剂组 、复方一枝蒿颗粒各剂量组
均可使伊文思蓝在腹腔渗出明显减少 , 且复方一枝蒿颗粒的作
用与剂量大小相关 , 见表 2。
　　表 2　复方一枝蒿颗粒对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响( x±s)
组别 动物数(只)
剂量
(g/kg)
吸收度
(OD)
抑制率
(%)
生理盐水　　　 10 0.528±0.114　　
苦甘冲剂　　　 10 2.5 0.343±0.096＊＊ 35.1
复方一枝蒿颗粒 10 2.0 0.361±0.078＊＊ 31.6
复方一枝蒿颗粒 10 4.0 0.341±0.090＊＊ 35.4
复方一枝蒿颗粒 10 8.0 0.241±0.073＊＊ 54.4
2.3　 抗菌作用
2.3.1　体外抗菌实验　试管稀释法测得复方一枝蒿的 MIC
分别为:金葡菌 1∶8、肺炎球菌 1∶8、链球菌 1∶4、大肠杆菌 >1
∶2。
　　将上试验之每个浓度混合液均倾注平板 , 37℃培养 24h作
计数菌落计数测得 MBC分别为:金色葡萄球菌:1∶8,肺炎链球
菌:1∶8,乙型溶血性链球菌 1∶4,对大肠埃希无抑菌作用。相
应 , 苦甘冲剂的 MIC和 MBC分别为金黄色葡萄球菌 1∶64和 1
∶32, 肺炎链球菌 1∶16和 1∶8, 乙型溶血性链球菌 1∶16和 1
∶8,大肠埃希菌 1∶4和 1∶2。
2.3.2　体内抗菌实验　先用预试验求得上述四种细菌 iv对小
鼠的 MLD。小鼠每一剂量 5只 , 每日 ig给药一次 , 第 4日 iv0.
2ml细菌(100%MLD), 注射菌液后立即和 6小时再分别给药一
次。观察 48小时药物对小鼠死亡的保护率。结果表明复方一
枝蒿颗粒对肺炎链球菌具有较强的抗菌能力 , 对该菌感染小鼠
的 ED50为 1259.9mg/kg;其次为为乙型溶血性链球菌 , ED50为
1587.4mg/kg;对金黄色葡萄球菌感染小鼠的 ED50为 2103.0mg/
kg;对大肠埃希菌感染小鼠的 ED50为 27473.3mg/kg。体内抗菌
强度均高于苦甘冲剂(ED50分别为 2780.5mg/kg、 7617.8mg/kg、
3086.44mg/kg和 4210.2mg/kg)。
2.4 　对小鼠血清溶血素生成的影响　取小鼠 50只 , 依体重 、
性别随机分为 5组 , ig给药每天一次连续 8天。第三天给药后
2h, 各组鼠均腹腔注射 20% SRBC悬液 0.2ml/只 , 免疫后 5天
眼眶取血 ,测定和计算每半数溶血值(HC
50
)。 结果 , 苦甘冲剂
组和对照组比较 HC50值明显升高 , CARG中 、大剂量组 HC50亦
明显升高 ,和对照组比较有显著性差异 , 见表 3。
　　表 3　复方一枝蒿颗粒对小鼠血清溶血素生成的影响( x±s)
组别 鼠数(只)
剂量
(g/kg) 吸收度 HC50
生理盐水对照　 10 0.028±0.009　　 32.9
苦甘冲剂　　　 10 2.5 0.228±0.036＊＊ 271.7
复方一枝蒿颗粒 10 2.0 0.199±0.059＊＊ 236.9
复方一枝蒿颗粒 10 4.0 0.274±0.104＊＊ 325.8
复方一枝蒿颗粒 10 8.0 0.393±0.112＊＊ 468.8
2.5 　对小鼠 T、B淋巴细胞增殖的影响　小鼠摘眼球放血处
死 ,无菌取脾 ,剔除脂肪与结缔组织 ,置于 100目尼龙布上剪碎 ,
尼龙布置内盛 10ml冷 HBSS液的培养皿上 , 以玻棒轻研脾碎
块 ,收集细胞液 , 1000rpm离心 10min, 弃上清 ,经低渗(0.83%的
NH4Cl)处理除去红细胞 ,做细胞计数 , 调整细胞浓度为 1×106 /
ml(以上过程均在 0 ～ 4℃进行)。取细胞悬液 200μl, 加入 ConA
(3μg/ml)50μl及不同浓度的试验样品 50μl, 于 37℃ 5% CO2
条件培养 66h后取出 ,加 MTT(10ul/孔)混匀后再培养 4 ～ 6h,
吸弃上清 ,加 DMSO(100μl/孔)使甲月替产物充分溶解 , 测定各孔
OD570nm。
　　另同法制备脾淋巴细胞 , 在相同试验系统中用 LPS(20μg/
ml)取代 ConA。结果见表 4。
　　表 4　复方一枝蒿颗粒对小鼠 T、B淋巴细胞增殖的影响( x±s)
组别 样品浓度(μg/ml)
T细胞
OD值　　 抑制率(%)
B细胞
OD值 增殖率(%)
空白对照 0.170±0.039＊＊ 0.282±0.149＊＊ -
ConA(LPS) 0.451±0.055 165 0.405±0.116 44
苦甘冲剂 2000 0.339±0.076＊＊ -25 0.426±0.123 5
复方一枝蒿颗粒 62.5 0.432±0.091 -4 0.526±0.099 30
复方一枝蒿颗粒 125 0.443±0.108 -2 0.599±0.092＊＊ 48
复方一枝蒿颗粒 250 0.391±0.111 -13 0.500±0.158 23
复方一枝蒿颗粒 500 0.327±0.085＊＊ -27 0.469±0.121 16
复方一枝蒿颗粒 1000 0.319±0.064＊＊ -29 -
2.6　对三联疫苗致家兔发热的影响　家兔 30只体重 2.1±0.
2kg, 雌雄兼用 ,依体重 、性别随机分为 5组 , 实验前每兔测三次
体温取均值作为基础体温。 ig给药 , 每天 1次 ,连续 3天 , 末次
给药后立即按每公斤体重 1.2ml静脉注射三联疫苗 , 自进针起
65中药药理与临床 2007;23(2)
每隔一小时测一次体温 , 连测 3次 , 记录体温值 , 并计算其与基
础体温的差值。 结果三个剂量的 CARG均能明显降低致热家
兔体温 , 且作用强度与剂量呈正相关 , 见表 5。
　　表 5　对三联疫苗致家兔发热的影响( x±s, n=6)
组别 剂量(g/kg)
致热后体温与基础体温差值(■℃)
1h 2h 3h
模型对照　 1.04±0.29 1.15±0.20 1.17±0.20
苦甘冲剂　 1.0 0.67±0.14＊ 0.80±0.26＊ 0.85±0.26＊
复方一枝蒿 0.8 0.68±0.16＊ 0.81±0.22＊ 0.88±0.19＊
1.6 0.71±0.21＊ 0.73±0.28＊ 0.80±0.28＊
3.2 0.60±0.22＊ 0.61±0.22＊＊ 0.63±0.24＊＊
3　讨论
　　CARG能增强小鼠 B淋巴细胞的增殖能力 , 提高小鼠血清
溶血素水平;但在 62.5 ～ 1000μg/ml浓度范围内抑制 T淋巴细
胞的增殖。能明显降低三联疫苗引起家兔体温升高 , 降低炎性
刺激所致小鼠腹腔毛细血管的通透性 , 抑制角叉菜胶引起大鼠
足肿胀 , 提示对发热与急性炎症有抑制作用 , 另外 , CARG还具
有一定的抗菌效果。 上述试验结果可为复方一枝蒿颗粒临床
治疗风热感冒提供药理学参考。
热炎宁颗粒的抑菌 、抗炎和解热作用研究
贾红慧 , 勾倞 , 包涵 , 袁洁 , 李代英
(四川省疾病预防控制中心 ,成都　610041)
　　摘　要　目的:研究热炎宁颗粒的体外抑菌 、抗炎及解热作用。方法:呼吸道常见致病菌用琼脂二倍稀释法测定最低抑菌
浓度(MIC);用角叉菜胶诱发大鼠足肿胀和二甲苯诱发小鼠耳肿胀等急性炎症模型研究抗炎作用;用伤寒 、副伤寒甲乙三联菌苗法
研究解热作用。结果:热炎宁颗粒对呼吸道常见致病菌具有一定的抑制作用 ,其 MIC为 11 ～ 176 mg/ml(生药);热炎宁颗粒有抑制
二甲苯诱发小鼠耳肿胀和角叉菜胶诱发大鼠足肿胀等急性炎症的作用;同时热炎宁颗粒还有解热的作用。结论:热炎宁颗粒在体
外抑菌 , 抗炎以及解热等方面均有一定作用 , 为临床使用该制剂治疗风热感冒 ,特别是上呼吸道感染提供了实验参考。
　　关键词　热炎宁颗粒 ;抑菌 ;抗炎 ;解热
　　热炎宁颗粒由蒲公英 、虎杖 、北败酱 、半枝莲等四味药材组
成 , 主要含有咖啡酸 、大黄蒽醌 、虎杖苷 、黄酮等成分 , 具有清热
解毒的功能 , 临床上主要用于外感风热 、内郁化火所致的风热
感冒 , 发热 ,咽喉肿痛 , 口苦咽干 ,咳嗽痰黄 ,尿黄便结;化脓性扁
桃体炎 , 急性咽炎 , 急性支气管炎 , 单纯性肺炎见上述症候者。
本文对其体外抑菌 , 抗炎和解热等作用进行了研究。
1 　材料
1.1　试验药物　热炎宁颗粒浸膏由四川乐山大千药业有限公
司提供 , 批号 020810, 每克浸膏含 4.5g原生药 , 相对密度 1.25。
阿斯匹林肠溶片(石家庄神威药业有限公司 , 批号 01010612),
每片含乙酰水杨酸 25mg。 安乃近片 (西安利君制药股份公
司),每片含安乃近 0.5g。头孢曲松钠(浙江永宁制药厂 , 批号
30520483)含量 93.2%。
1.2　动物 　昆明种小鼠 、SD大鼠均由四川大学实验动物中心
提供 , 合格证:川实动管质第 67号 、第 70号。雄性日本大耳兔 ,
由四川省实验动物专委会养殖场提供 , 合格证:川实动管质第
99-11号。鼠颗粒饲料及兔颗粒饲料均由四川大学实验动物
中心提供 , 合格证:川实动管质第 74号。
1.3　细菌 　试验所用菌株均为 2002年从四川地区收集的临
床分离致病菌 , 经重新鉴定后用于试验 , 其中金黄色葡萄球菌 8
株 、表皮葡萄球菌 2株 、A群链球菌 3株 、B群链球菌 3株 、肺炎
链球菌 3株 、大肠埃希菌 3株 、肺炎克雷伯菌 3株 、枸橼酸杆菌 2
株 、阴沟肠杆菌 2株 、铜绿假单胞菌 4株 、不动杆菌 4株 、变形杆
菌 2 株 , 共 39 株。 另有标准质控菌株:金黄色葡萄球菌
ATCC25923。
1.4　试剂 　角叉菜胶(沈阳药学院提供)。伤寒 、副伤寒甲乙
三联菌苗(卫生部成都生物制品研究所 , 批号:921001)。 M-H
培养基(中国药品生物制品检定所)。
2　方法与结果
2.1 　体外抑菌作用　制备 M-H肉汤培养基 、M-H固体培养基
及血培养基 ,平板法测定最低抑菌浓度(MIC), 结果表明 , 热炎
宁颗粒对所试革兰氏阳性 、阴性细菌有一定的体外抗菌作用 ,其
中对所试金葡球菌 、表葡球菌菌株的 MIC值多为 22 mg/ml, 对
变形杆菌的 MIC值为 22 mg/ml,对枸橼酸杆菌的 MIC值范围为
44～ 88 mg/ml,对肺炎克雷伯菌 、不动杆菌的 MIC值范围为 44
～ 176 mg/ml, 对铜绿假单胞菌的 MIC值范围为 88 ～ 176 mg/
ml, 对阴沟肠杆菌 、大肠埃希菌的 MIC值为 176 mg/ml, 但对所
试链球菌无效 ,其 MIC值均大于 2812 mg/ml。
2.2 　对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响　雄小鼠 50只 , 体重 21
～ 23g, 分层随机分为 5组 , 灌胃给药(25ml/kg), 每天 1次连续
3天 , 第 3天给药后 1h, 取二甲苯 0.03ml均匀涂布于小鼠右耳
正反两面致炎 , 1h后处死小鼠 , 每鼠剪下左右两耳 , 用直径 7mm
打孔器分别在同一部位打下园耳片 , 称重。 每鼠左右两耳片重
量差即为肿胀度 ,结果见表 1,热炎宁颗粒 3剂量组(相当临床
使用剂量的 10倍 、20倍 、40倍)有抑制二甲苯所致鼠耳肿胀作
用。
66 中药药理与临床 2007;23(2)