全 文 ：癌变·畸变·突变　　1999年第 11卷第 2期　　　　　　　　　　　　　　　Carcinogenesi s Teratogenesis and Mutagenesis Vol 11 No 2 1999
香烟烟雾凝集物的紫露草微核检测
徐鑫成1　江丕文2
1黑龙江农垦师范专科学校　阿城　150301　2沈阳教育学院生物系　沈阳　11000
　　众所周知 ,吸烟有害健康 , 并增加环境污染指
数(1-3),但有关香烟烟雾凝集物(CSC)对真核植物细
胞微核诱变的研究国内尚少见报道(4-5)。早在 1986
年 ,国家环保局就将紫露草微核技术列为生物监测的
规范方法之一 ,为此 ,本文报道了利用紫露草微核技
术检测 CSC的诱变效应 。
结　果
1　小鼠急性毒性试验
经 1wk 观察 ,全部动物活动良好 ,无任何中毒症
状 ,无死亡 。雌雄小鼠经口一次给予 10g/kg .bw 受
试物 ,相当于人体实际摄入量 600倍 ,属实际无毒级
物质 。
2　小鼠骨髓细胞微核试验
各剂量组微核率分别为 2.2‰、2.6‰、2.7‰与
阴性组 2.7‰比较无显著性差异(P >0.05);而阳性
组微核率 40.7‰与阴性组比较有显著性差异(P <
0.01)。
3　小鼠睾丸染色体畸变试验
各剂量组染色体畸变率分别为 3.0%、3.2%、2.
6%与阴性组 2.4%比较无显著性差异(P>0.05);而
阳性组畸变率 41.6%与阴性组比较有显著性差异(P
<0.01)。
4　Ames试验(2)
各剂量组加或不加 S9的回变菌落数均未超过自
发回变的两倍 ,即对鼠伤寒沙门氏菌无致突变作用 。
5　30d喂养试验
各组在实验期间对动物生长发育及活动等情况
无不良影响 ,各剂量组与对照组及各实验组之间在进
食量 、食物利用率及体重增长情况均无显著性差异
(P >0.05),其血液学 、生化学及病理学等指标 ,也未
发现对实验动物有不利于健康的影响。
6　致畸试验
孕鼠体重增长经 F 检验 ,阴性组与各剂量组之
间无显著性差异(P>0.05),而阴性组与阳性组之间
差异有高度显著性(P <0.01)。对胚胎形成及胎鼠
生长发育 ,阴性组与各剂量组均无吸收胎和死胎 ,活
胎率为 100%。阳性组吸收胎 68.0%、死胎率 1.4%
明显高于阴性组(χ2 检验 P <0.01),阳性组胎鼠平
均身长和体重低于阴性组(P <0.01),各剂量组与阴
性组无明显差异(P >0.05)。对胎鼠外观和内脏检
查 ,阳性组畸变率分别为 60.9%和 100%,其余各组
均未见畸形 。骨骼检查各组均有畸形(第五胸骨缺
失)检出 ,但除阳性组畸变率(72.7%)明显高于其它
组(P <0.01)外 ,各剂量组畸形率均接近自然发生率
(5-15%)。
讨　论
康宝褪黑素片在国外人群中已经食用 ,为保障食
用者安全及进一步提供可靠的毒理学依据 。对其进
行了急性毒性 、小鼠骨髓细胞微核 、小鼠睾丸染色体
畸变 、Ames 、30d喂养 、致畸六项试验 ,结果表明该受
试物属实际无毒级物质 ,最大无作用剂量达 3g/kg.
bw(相当于人体实际摄入量的 180倍以上),所观察
的各项指标均在正常值范围 ,且无诱变性和致畸性。
说明该产品作为保健食品用于人体是基本安全的 。
参考文献
1　中华人民共和国国家标准 ,食品安全性毒理学评价程序和方法.
中华人民共和国卫生部 , 1994
2　Maron DM , Ames BN.Revised methods foe Salmonella mutagenicity
test.Mutat Res , 1983;113:173
3　黄幸纾.环境化学物致突变 、致畸 、致癌试验方法.杭州:浙江科
学技术出版社 , 1985:221
(1998-07-02收稿;1998-10-14修回)
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材料与方法
实验用的紫露草(Tradescantia paludosa)由农垦
师专纪汉文教授检定提供 。阴性对照液为蒸馏水(A
液)。介质对照液为蒸馏水加 0.02%吐温-80(B
液)。阳性对照液为环磷酰胺(上海华联制药厂),用
0.02%吐温-80配成 10μg/ml(C 液)。CSC 溶液 ,系
采用批号为 GY2-7013白灵芝烟(哈尔滨卷烟厂生
产)10 支 ,用自制水抽泵吸烟机 ,以 3min/支吸烟速
度 ,按 K·罗森韦尔方法(6),洗脱 ,定容 ,用 0.02%吐
温-80均一处理使之尼古丁浓度为 0.2mg/ml(日本
岛津 UV-365测定),使用时 ,用 0.02%吐温-80蒸
馏水稀释至不同浓度 ,分别为 0.5μg/ml(D液)、1μg/
ml(E液)、2.5μg/ml(F 液)、和 5μg/ml(G液)。
每种处理液500ml装于 500ml烧杯中 ,盖上塑料
网 ,每一处理液随机取发育一致的幼嫩紫露草 10支
(切下 8cm 茎 ,插入处理液中 2cm),23-25℃自然光
照培养 6h(3h 时用空气泵充气 3min),弃处理液 ,换
贮备 8h的自来水 ,继续培养 24h(修复),将花蕾取
下 ,于下午 14.00卡诺固定 24h ,并用 70%酒精冰箱
保存备检 。
结果与讨论
取适宜花蕾的花药 ,常规压片 ,改良石碳酸品红
染色 ,每组镜检至少 5片 ,每片 300个四分体 ,按常规
方法(7 ,8)统计微核率(MCNF),结果见表 1。
表 1　CSC对紫露草微核的诱变结果
编号 浓度(μg/ml) 样本数 微核率(%)　 x±s t 值 P值
阴性对照 A 液 蒸馏水 5 2.57±0.54
溶剂对照 B液 0.02%吐温-80 5 2.93±0.59 0.99 >0.05
环磷酰胺(CP) C液 10 5 10.30±2.61 6.49 <0.01
香烟凝集物(CSC)
D 液 0.5 5 4.26±0.72 4.17 <0.01
E液 1.0 5 5.84±1.06 6.18 <0.01
F液 2.5 5 7.44±1.43 7.12 <0.01
G 液 5.0 5 11.37±1.39 13.15 <0.01
　　本实验紫露草自发微核率为 2.57%,较蒋永光
等的报道稍低(9),但与梁坚等的结果接近(10)。阴性
对照与介质对照之间无显著差异 ,并与阳性对照之间
差异极显著(P <0.01),说明实验体系可靠 ,但环磷
酰胺的微核率较梁坚等的报道为高 。CSC 各浓度与
阴性对照之间均为 P <0.01 ,与介质对照之间也是 P
<0.01。并且虽着 CSC 浓度增大 ,诱发的微核率呈
线性相关 ,微核率(Y)与 CSC浓度(X)的回归方程为
Y =3.86+1.499X(r =0.993 , P <0.01)。说明紫
露草对CSC较为敏感 ,并有较强的诱变效应 。
与真核细胞微核产生机理机关 ,在紫露草微核检
测中 ,由于所观察的四分体所处的时期不同 ,结果会
有较大的波动。在四分体形成初期 ,有些在减数Ⅱ过
程后才将形成的微核正在形成或将在形成之中 ,所以
很易漏检 ,而减数Ⅰ末期子核形成后产生的微核在减
数Ⅱ末期时即有显现 ,并且有相当比例是一个四分体
中有两个子细胞中各有一个大小基本相同的微核。
不论是减数 Ⅰ还是减数 Ⅱ ,其末期刚开始 ,染色体正
在解螺旋 ,子核膜尚未形成 ,那些远离染色体主流 ,没
有纺锤丝连接的染色体片段 ,有很多就已经包被一层
球形膜形成微核了 。至于这几种微核产生的比例 ,尚
有待于进一步研究 。
参考文献
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10　梁坚 ,杨玉英 ,李裕生,等.明矾对紫露草微核的诱变效应.癌变·畸
变·突变 ,1998;10(1):50 (1998-11-24投稿;1999-01-30修回)
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