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酒葡萄对霜霉病的抗性机理初探



全 文 :河北职业技术师范学院学报 第 17卷第 4期 , 2003年 12月
Journal of Hebei Vocation-Technical Teachers Co llege Vo l. 17  No. 4  December 2003
酒葡萄对霜霉病的抗性机理初探
齐慧霞1 , 刘永军2 , 吴学仁3 , 齐永顺 3 , 李双民 4 , 邵晨霞 1* , 景新华 1*
( 1河北科技师范学院 农学系 , 2生命科学系 , 3园艺园林系 , 4河北省昌黎县职教中心 ,河北 秦皇岛 , 066600)
摘要: 对 5个不同抗性的酒葡萄品种进行感病性鉴定 ,并对其成熟叶片进行接种 ,以不接种作为对照。 4天后测
定叶片中的过氧化物酶 ( POD)、超氧化物歧化酶 ( SOD)、可溶性糖含量和蛋白质含量。 结果表明: 5个供试品种
均不同程度感霜霉病。感病轻的梅鹿辄、 SV 6059品种接种后的 POD活性、可溶性糖含量均低于对照。所有酒葡
萄品种接种感病后的 SOD活性均高于对照。 接种感病后发病较重的拉别长依、赤霞珠的蛋白质含量高于对照。
关键词: 酒葡萄 ; POD; SOD; 霜霉病 ; 抗病性
中图分类号: S663. 101   文献标识码: A   文章编号: 1008-9519( 2003) 04-0053-03
葡萄霜霉病 ( Plasmopara Viticola berl . et De Toni )遍及世界所有葡萄产区 ,也是酒葡萄的主要病害
之一。 葡萄霜霉病菌可以危害酒葡萄的绿色器官 ,其中以叶片受害最为严重 ,严重影响葡萄植株的生长
和产量 ,进而也大大影响了葡萄酒的产量和品质。本试验对不同酒葡萄品种进行田间自然感病鉴定及室
外接种鉴定的研究 ,并对接种前后不同品种叶片中蛋白质含量、可溶性糖含量、 POD和 SOD活力的变
化进行分析 ,希望能为葡萄对霜霉病的抗性机理的深入研究提供基础资料。
1 材料与方法
1. 1 试验材料
试验于 2002年 6月至 9月在河北科技师范学院园艺园林实验站进行 ,供试的酒葡萄品种有米勒、
拉别长依、 SV 6059 、梅鹿辄、赤霞珠 5个品种。供试菌种从试验站酒葡萄新感病的叶片上采集得到。试
验期间 ,所有酒葡萄品种正常管理 ,且管理一致。
1. 2 试验方法
1. 2. 1 品种对霜霉病抗性鉴定 田间自然抗病性鉴定于酒葡萄霜霉病发病盛期进行。采用单株小区 ,
5次重复 ,每个小区调查整株叶片的感病性 ,然后以严重度记录结果。严重度按叶片感病面积分六级记
载 ,分级标准为: 0级—叶片上无病斑 ; 1级—病斑面积占叶片总面积的 5%以下 ; 2级—病斑面积占叶片
总面积的 5%~ 25% ; 3级—病斑面积占叶片总面积的 25%~ 50% ; 4级—病斑面积占叶片总面积的
50%~ 75% ; 5级—病斑面积占叶片面积的 75%以上 ,病斑几乎布满叶片或叶片枯死。
室外接种鉴定在植株感病前套袋 ,每个品种接种 30个叶片 (供试植株第 5~ 7节位叶片 ,以不接种
作为对照 ) ,重复 3次 ,于叶背喷施孢子悬浮液 (其浓度为每视野孢子 40~ 50个 ) ,套袋保湿 48 h后除去
塑料袋 , 7 d后记载感病严重度。
1. 2. 2 不同品种叶片中四项生化指标的测定 选取各品种植株完全展开的第 5、 6节位的健康叶片 60
片进行喷雾接种 ,并保湿 24 h。喷清水为对照。接种后第 4天取叶片 ,测定叶片的 POD活性、 SOD活性、
可溶性糖含量和蛋白质含量。 POD活性的测定采用联苯胺比色法 [1 ]。 SOD活性的测定采用 NBT光化
还原反应法 [2 ]。可溶性糖含量的测定采用蒽酮比色法 [3 ]。可溶性蛋白质含量的测定采用考马斯亮蓝 G-
250染料结合法 [3 ]。
2 结果与分析
2. 1 不同酒葡萄品种对霜霉病的抗病性
品种对霜霉病的抗性鉴定结果表明 , 5个供试品种均感霜霉病。 SV6059的病情指数最低 ,为
收稿日期: 2003-09-03
* 河北科技师范学院农学系 99级学生。
20. 39% ,拉别长依的最高 ,达 65. 10% (表 1)。
2. 2 不同酒葡萄品种接种霜霉病菌与对照 POD活性的变化
接种霜霉病菌前后不同酒葡萄品种叶片 PO D活性表明:接种感病后酶活性表现了一定的消长趋
势。其中感病较重的米勒、拉别长依、赤霞珠几个品种接种后的 POD活性高于对照 ,其中赤霞珠接种后
的 POD活性远远高于对照。 而感病较轻的梅鹿辄、 SV 6059接种后的 POD活性均低于对照 (表 2)。
表 1 不同酒葡萄品种对霜霉病的抗病性鉴定
品种 病情指数 /%田间自然 田间接种 平均值
SV6059 17. 24 23. 53 20. 39
梅鹿辄 46. 34 64. 47 50. 50
赤霞珠 54. 54 65. 80 60. 17
米勒 58. 81 67. 03 62. 92
拉别长依 63. 72 66. 47 65. 10
表 2 接种霜霉病菌后酒葡萄叶片 POD活性的变化
品种 POD活性 / [△ OD ( mg· min)
- 1 ]
接种 对照
赤霞珠 0. 015 0 0. 004 1
拉别长依 0. 004 3 0. 001 1
米勒 0. 001 9 0. 000 4
梅鹿辄 0. 001 1 0. 002 3
SV6059 0. 000 5 0. 005 9
2. 3 不同酒葡萄品种接种霜霉病菌与对照 SOD活性的变化
接种霜霉病菌前后不同酒葡萄品种叶片 SOD活性表明: 所有酒葡萄品种接种感病后的 SO D活性
均高于未接种的对照 (表 3)。 其中米勒、赤霞珠的 SOD活性升高速度较快且活性较高。 而拉别长依的
SOD活性升高速度较慢且活性较低。感病后 SOD活性升高最快的是赤霞珠 ,是对照的 2. 65倍 ;而升高
最慢的是拉别长依 ,它的 SOD活性仅是对照的 1. 22倍。由此可见 , SOD酶活性在酒葡萄品种间存在着
很大的差异性。
2. 4 不同酒葡萄品种接种霜霉病菌与对照可溶性糖含量的变化
不同酒葡萄品种接种霜霉病菌前后可溶性糖含量的变化表明:接种后感病较重的米勒、赤霞珠、拉
别长依的可溶性糖含量皆高于对照 ,而感病较轻的梅鹿辄、 SV 6059的可溶性糖含量均低于对照 (表 4)。
表 3 接种霜霉病菌后酒葡萄叶 SOD活性的变化
品种 SOD活性 / [ U ( min· g )
- 1 ]
接种 对照
米勒 209. 78 87. 71
拉别长依 159. 75 130. 78
梅鹿辄 155. 05 81. 89
SV6059 153. 50 66. 71
赤霞珠 129. 21 48. 73
表 4 接种霜霉病菌后酒葡萄叶片可溶性糖含量的变化
品种 可溶性糖含量 /( mg· g
- 1 )
接种 对照
赤霞珠 55. 62 29. 05
米勒 40. 18 20. 38
拉别长依 37. 60 34. 31
梅鹿辄 39. 50 45. 58
SV6059 32. 81 31. 44
2. 5 不同酒葡萄品种接种霜霉病菌与对照蛋白质含
量的变化
不同酒葡萄品种接种霜霉病菌前后蛋白质含量的
测定表明:接种感病后拉别长依、赤霞珠的蛋白质含量
高于对照 ,而梅鹿辄、 SV 6059、米勒的蛋白质含量均低
于对照 (表 5)。蛋白质含量升高最快的是拉别长依 14,
是对照的 2. 84倍 ;而 SV 6059、米勒的蛋白质含量的变
化却很小。可见接种感病后不同抗性的酒葡萄品种间
蛋白质含量的变化有很大的差异。
表 5 接种霜霉病菌后酒葡萄叶片蛋白质含量的变化
品种 蛋白质含量 /( mg· g
- 1 )
接种 对照
拉别长依 2. 61 0. 92
赤霞珠 2. 11 1. 32
梅鹿辄 1. 18 1. 62
SV6059 0. 98 1. 00
米勒 0. 89 1. 00
3 结论与讨论
5个供试酒葡萄品种均感霜霉病 , SV 6059病情指数最低 ,为 20. 39% ,拉别长依最高 ,达 65. 10% 。
54 河北职业技术师范学院学报                  17卷
感病轻的梅鹿辄、 SV 6059品种接种后的 POD活性、可溶性糖含量均低于对照。所有酒葡萄品种接
种感病后的 SOD活性均高于对照。接种感病后发病较重的拉别长依、赤霞珠的蛋白质含量高于对照、米
勒的蛋白质含量的变化却很小。
本试验仅对接种与对照叶片进行了测定 ,不同酒葡萄品种随着接种时间的延续 ,各项生化指标的变
化情况以及这些生化指标与抗病性的关系还有待于进一步研究。
参考文献:
[ 1] 孙文全 . 联苯胺比色法测定果树过氧化物酶活性的研究 [ J]. 果树科学 , 1985, 5( 3): 105-108.
[ 2] 白宝璋 ,王景安 ,孙玉霞 ,等 . 植物生理学实验指导 [ M ]. 北京: 中国科学技术出版社 , 1986.
[ 3] 西北农业大学 . 基础生物化学实验指导 [M ]. 西安:陕西科学技术出版社 , 1986.
作者简介: 齐慧霞 ( 1968-) ,女 ,讲师。
S TUDIES OF RESIST AN CE SYSTEM O F GRAPEV IN E TO DOWNY M IDEW
Q I Hui-xia1 , L IU Yong-jun2 , WU Xue-ren3 , Q I Yong-shun3 , L I Shuang-min4 ,
S HAO Ch en-xia
1 , JIN G Xin-hua
1
( 1 Dept of Ag ronomy, 2 Dept of Li fe Science, 3 Dept o f Horticulture& Ga rden, HN U ST;
4 V o-tech Educa tion Centre o f Changli County; Qinhuangdao Hebei , 066600, China)
Abstract: Evaluation of resistance to Plasmopara vit icola for 5 g rapevine varieties was done. The ma-
ture leaves o f 5 g rapev ine cultiva rs with dif ferent ha rdiness w ere inoculated wi th Pseudo peronos pora
cubensis , and the protein content , soluble sugar content, the activities o f perox idase( POD)and super-
ox ide dismutase ( SOD) w ere tested four day s la ter af ter the leaves being inoculated. The resul ts
show ed that all the fiv e varieties w ere infected wi th downy mildew at dif ferent lev els. The POD and
the soluble suga r content o f M ei Lu-zhe and SV 6059 w ere low er compared wi th tho se wi thout being
inoculated. The SO D in the 5 g rapevine varieties w as higher than the compa rison. The pro tein content
o f La bie-changyi and Chi xia-zhu which w ere seriously diseased af ter being inocula ted w as higher than
the compa rison.
Key words: g rapevine; POD; SO D; Plasmopara v iticola; resistance
(上接第 21页 )
ST UDY ON MORPHOPAT HOLOGY O F ART IFICIALLY IN FECTED
IN FECT IV E LARYNGO TRACHEITIS
SHEN Ping , SHI Qiu-mei , DON G Shu-zh en, SHEN Wen-jing
( Dept o f Anima l Science, HN U ST, Qinhuangdao Hebei , 066600, China )
Abstract: Infective La ryngot rachei tis w ere injected subcutaneously into urina ry vesicle of chicken em-
bryo s and the incidence of this disease w as 95% . This disease wa s cha racterized w ith the following
signs: labo red breathing , asthma, coughing out exuda te wi th blood, t rachea wi th yellow-whi te un-
true mucosa, the disopera tiv e t rachea muco sa sw elling , bleeding and becoming ro t ten; The dea th of
ra te w as 25% . The trachea , lung , heart , liv er, kidney and spleen of dead chicken were imbedded w ith
paraffin and stained w ith H. Z in o rder to study thei r histopa thologici l lesion wi th light micro-
scope. The resul ts show ed tha t parenchymatous organs w ere inf lamed and effused; the epi thelial cells
w ere tumescent , denatured and necrobio tic; and the blood ci rculation w as obst ructed.
Key words: Infectiv e La ryngot rachei tis; o rgans; histopatho logy
554期             齐慧霞等 酒葡萄对霜霉病的抗性机理初探