全 文 :香草兰(Vanilla planifolia)属兰科藤本攀援植
物, 又名香子兰、 香荚兰、 香果兰。 原产于墨西
哥, 有 “天然食品香料之王” 的美称, 是目前消费
者最喜欢的香料之一。 我国于20世纪60年代初从
斯里兰卡引进种植。 近年来在海南省大面积推广,
在海南种植面积已有约 133.3hm2[1-4]。 目前, 香草
兰主要采用扦插方法来繁殖, 但此常规方法育苗周
期长、 扦插茎蔓用量大、 繁殖系数低, 难以较快发
展。 近年来, 通过组织培养快速繁殖技术, 既能大
量快速繁殖种苗, 又能迅速祛除病毒和更新品种。
目前, 国内外香草兰组织培养方面研究较少, 并主
要集中在无菌体系的建立, 初培和继代阶段徘徊,
部分进行了生根实验研究[5-6], 但都未涉及移栽与
工厂化育苗研究。
本研究以香草兰试管苗为材料, 对香草兰试管
苗移栽影响因素进行了研究, 以期为香草兰组织培
养技术的完善及其快速繁殖、 工厂化育苗提供科学
依据和技术指导。
1 材料与方法
香草兰组培苗生根与移栽的研究①
王丽萍 1,2)②吴 刚 1) 闫 林 1,2)杨逢春 1)
宋应辉 1) 练飞松 1) 范 睿 1) 陈 鹏 1)
(1 中国农业科学院热带香料饮料作物研究所 海南万宁 571533
2 海南省热带香辛饮料作物遗传改良与品质调控重点实验室 海南万宁 571533)
摘 要 对香草兰组培苗进行生根与移栽试验。 结果表明: 香草兰组培苗生根培养基 MS+6-BA0.1mg/L与 NAA
0.1mg/L, 生根率达 100%。 移栽基质为椰糠+细沙+苔藓(体积比 1∶1∶1), 移栽成活率达 82%。 无主根组培苗
在 NAA500mg/L激素中速沾 10s后移栽成活率达 60%以上。
关键词 香草兰 ; 组培苗 ; 生根 ; 移栽
分类号 S573.9
Studies on Rooting and Transplanting Techniques of Vanilla planifolia
WANG Liping WU Gang YAN Lin YANG Fengchun
SONG Yinghui LIAN Feisong FAN Rui CHEN Peng
(1 Spice and Beverage Corps Research Institute, CATAS, Wanning, Hainan 571533
2 Hainan Provincial Key Laboratory of Genetic Improvement and Quality Regulation
for Tropical Spice and Beverage Crops, Wanning, Hainan 571533)
Abstract Tissue culture seedlings were used as explants to investigate the factors influencing rooting and
transplanting efficiency. The results showed that optimal rooting and seedling medium is MS+6-BA
0.1mg/L+NAA 0.1mg/L. The rooting rate was 100%. In the transplanting medium contained coconut husk,
sand and moss (1∶1∶1) , the surviving rate of the plantlets could reached to 82%. The surviving rate of
the plantlets without rooting, which were transplanted after soaking in the solution of NAA 500 mg/L for
10 s, could reached over 60%.
Keywords Vanilla planifolia ; tissue culture seedling ; rooting ; transplanting
① 基金项目: 农业部公益性行业科研专项(200903024); 农业部南亚专项(10RZZY-08); 热带香辛饮料作物种质资源保护
(11RZZY-08)。
收稿日期: 2011-04-28; 责任编辑/黄 艳; 编辑部E-mail: rdnk@163.com。
② 王丽萍, 女, 硕士, 从事热带种质资源与遗传育种研究。
Vol.31, No.5
2011年5月 热 带 农 业 科 学
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL AGRICULTURE
第31卷第5期
May. 2011
9- -
2011年5月 第31卷第5期热带农业科学
1. 1 材料
以墨西哥香草兰组培苗为实验材料。
1. 2 方法
1. 2. 1 香草兰生根壮苗试验
香草兰组培苗增殖培养基MS+6-BA+NAA, 适
当的降低激素浓度以利于组培苗壮苗与生根。 组培
苗生根试验选用6-BA与NAA2种激素, 浓度分别为
6-BA0.5mg/L与 NAA0.05mg/L, 6-BA0.2mg/L与
NAA 0.05 mg/L, 6-BA 0.2 mg/L与 NAA 0.1 mg/L,
6-BA 0.1 mg/L与 NAA 0.1 mg/L。 从组培苗上剪取
2.5~3.5cm长的小苗转接到生根培养基上, 生根基
本培养基为 MS附加蔗糖浓度 30g/L, 琼脂 6g/L,
pH5.8, 培养温度为30℃, 设置3个重复, 每个重
复中各处理接种5瓶, 每瓶接种组培苗5根, 培养
20d后统计生根率、 生长指标、 根系等指标, 并观
察组培苗生长情况。
1. 2. 2 香草兰移栽基质的选择
不经过炼苗, 将组培苗直接从培养瓶里取出,
洗净主根及气生根系上的培养基, 在一定浓度的杀
菌剂溶液里浸泡 1min, 然后将生根苗移栽到时盛
有不同基质的营养钵中, 移栽基质分别为椰糠, 椰
糠+细沙(2∶1), 椰糠+细沙+肥土(4∶1∶1),
椰糠+细沙+苔藓(1∶1∶1)基质均用一定浓度
的杀菌剂清毒放置3d后再使用。 苗木移栽后浇
透水。 全部试验在自动控温控湿大棚里进行, 环
境温度保持在28~35℃, 每处理移栽20株组培
苗。 移栽50d后统计组培苗成活率。
1. 2. 3 无主根组培苗移栽试验
将未生根组培苗直接从培养瓶里取出, 洗净
气生根系上的培养基, 在一定浓度的杀菌剂溶液
里浸泡1min后取出, 进行生长素浸泡与速沾处
理。 激素分别为 NAA, IBA, 6-BA, 浓度均为 100
mg/L浸泡时间为 3min。 激素NAA, IBA, 6-BA浓度
500mg/L, 速沾时间为10s。 浸泡或速沾主根组培苗
后, 用力将组培苗上的激素甩净, 插入移栽基质中,
每处理移栽20株组培苗。 移栽50d后统计组培苗成活
率与生根率。
1. 2. 4 移栽后期管理
组培苗移栽后每天浇水2次, 用喷壶喷洒, 使
移栽苗全株淋湿, 基质少量浇水使根部及周围湿
润, 不能全部浇透以防烂根。 同时可以通过移栽苗
叶色来判断是否缺水, 如果叶色墨绿证明不缺水,
如果叶色出现浅绿色证明缺水。 同时, 在移栽10d
后开始喷施 Hogland营养液, 每周 1~2次, 生长
两个月后在根部适当的添加苔藓与椰糠, 有保水增
肥的作用[7,8]。 温度控制 28~35℃, 因为空气湿度
低, 大棚采用打开水帘及抽风机的方式, 使湿度保
持在 70%~80%。 香草兰移栽过程中容易发生根腐
病, 主要是由于根部积水过多, 透气性差, 所以根
部不能浇过多水。
2 结果分析
2. 1 香草兰生根壮苗试验
方差分析结果表明, 不同浓度生长素对香草兰组
培苗生根的影响极大, 详见表1。 从表 1可以看出
6-BA0.1mg/L与 NAA0.1mg/L生根率最高, 可达到
100%。 而经过 6-BA0.2mg/L处理的组培苗, 茎基
部形成较多的愈伤组织, 生根率低, 小苗长势弱,
而6-BA0.1mg/L处理的组培苗叶色浓绿, 根系好。
因此诱导香草兰组培苗生根最适宜的培养基为
MS+6-BA0.1mg/L与NAA0.1mg/L。
2. 2 香草兰移栽基质的选择
不同移栽基质对香草兰组培苗移栽成活率及生
长影响比较大。 由表2可以看出移栽成活率最高基
质为椰糠+细沙+苔藓(1∶1∶1), 成活率达82%,
同时新生叶片数多, 叶色正常, 植株生长旺盛。 最
差的基质是椰糠, 移栽成活率为0。 基质椰糠+细
沙(2∶1)生根率为 65%, 但是后期生长状况不好,
主要是由于细沙的保肥能力差, 喷施的营养液大里
流失。 基质椰糠+细沙+肥土(4∶1∶1)生根率为
31%, 成活率不高, 主要是由于肥土的保水能力较
说明: 采用 SPSS12.0对数据进行差异显著性分析(LSD0.05), 同列数据后不
同小写字母间表示差异显著, 下同。
培养基
平均根
系数/个
平均根
长/cm
生根
率%
生长
/cm
6-BA 0.5mg/L+NAA 0.05mg/L 3.0 b 1.1 d 70 c 0.7 c
6-BA 0.2mg/L+NAA 0.05mg/L 2.5 b 2.0 c 80 b 1.7 b
6-BA 0.2mg/L+NAA 0.1mg/L 3.0 b 3.5 b 95 a 2.1 b
6-BA 0.1mg/L+NAA 0.1mg/L 5.0 a 4.3 a 100 a 3.0 a
表 1 香草兰组培苗生根壮苗试验结果
10- -
王丽萍 等 香草兰组培苗生根与移栽的研究
培养基
平均根
系数/个
平均
根长/cm
生根
率%
生长
/cm
6-BA 0.5mg/L+NAA 0.05mg/L 3.0 b 1.1 d 70 c 0.7 c
6-BA 0.2mg/L+NAA 0.05mg/L 2.5 b 2.0 c 80 b 1.7 b
6-BA 0.2mg/L+NAA 0.1mg/L 3.0 b 3.5 b 95 a 2.1 b
6-BA 0.1mg/L+NAA 0.1mg/L 5.0 a 4.3 a 100 a 3.0 a
表 2 不同移栽基质对组培苗移栽成活率的影响
好, 香草兰移栽苗很容易烂根。
2. 3 无主根组培苗移栽试验
不同激素对香草兰无根组培苗移栽成活率、 生根
率、 生长量的影响很大。 采用10s速沾NAA500mg/L
激素的处理方法, 移栽成活率(63%)与生长量均高
于其它, 详见表3。
3 结论与讨论
3. 1 结论
香草兰组培苗移栽前要进行生根壮苗培养, 这
个培养过程不需要高浓度激素, 香草兰组培苗经过
MS+6-BA 0.1 mg/L与 NAA 0.1 mg/L培养后, 生根
率高, 长势好, 叶色深绿, 不需要炼苗可直接进行
移栽。 将生根的组培苗取出, 洗净根系上的培养
基, 在杀菌剂溶液中浸泡 1min, 无主根组培苗在
NAA500mg/L溶液中速沾10s。 然后将组培苗移栽
到盛有椰糠+细沙+苔藓(1∶1∶1)基质的一次性
塑料杯中, 基质用杀菌剂消毒, 苗木移栽后浇透
水, 移栽成活率可达82%。
3. 2 讨论
在生根壮苗培养中, 6-BA高浓度根部容易产
生愈伤组织, 在移栽的过程中使根部容易脱落, 影
响移栽成活率。 同时, 低浓度 NAA组培苗不易生
长, 植株矮小。 移栽基质中加入苔藓, 不但提高了
移栽成活率, 最重要的是让幼小的移栽苗长出气生
根, 同时能保持一定湿度与透气性, 提供有机养分。
无主根组培苗速沾不同种激素试验中, 适当增加NAA
的浓度易于生根, 但是浓度过高, 会使组培苗褐化。
生根苗无需炼苗直接移栽与无根苗速沾激素后移栽
的方法, 加速了香草兰组织培养的发展, 推进了工
厂化育苗的实施。
参考文献
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研究[J].热带农业科学, 2006, 26(6): 43-46.
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广东农业科学, 2008(11): 35-36.
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高效增殖体系的建立[J].林业科技开发, 2006, 20(6):
62-64.
[8]王丽萍, 梁淑云.铁皮石斛原球茎诱导与增殖研究[J].
中国农学通报, 2010, 26(1): 265-268.
移栽基质
成活
率%
新叶
数/片
气生
根数/个
生长
量/cm
椰糠 0.0 d 0.0 d 0.0 c 0.0 c
椰糠+细沙(2∶1) 65.0 b 2.0 b 1.0 b 1.7 b
椰糠+细沙+肥土(4∶1∶1) 31.0 c 1.0 c 0.0 c 1.0 bc
椰糠+细沙+苔藓(1∶1∶1) 82.0 a 4.0 a 3.0 a 2.5 a
表 3 生长调节剂对香草兰无根组培苗生根的影响
附图 香草兰生根与移栽组培苗
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