全 文 ：［收稿日期］ 2011-06-17
［基金项目］ 甘肃省财政厅高校科研项目(4) ，甘肃省教育厅
资助项目(0806-03)
［第一作者］ 邓毅，教授，硕士生导师，从事中药学教学、中药性
能与配伍应用及中药不良反应的研究，Tel:
13919289773，0931-8765397，E-mail:dengyi188 @
sina． com
［通讯作者］ * 张艳萍，副主任技师，从事电生理及心电图诊
断，Tel:13649313353
甘肃不同品种甘草对肺炎链球菌感染小鼠肺炎的药效
邓毅1，丁仁伟1，张艳萍2* ，孙向阳1，段云燕1
(1. 甘肃中医学院，兰州 730000;2. 甘肃中医学院附属医院，兰州 730020)
［摘要］ 目的:比较不同品种甘草水煎液对肺炎链球菌感染小鼠肺炎的药效。方法:采用肺炎链球菌悬液滴鼻造模，以各
种品种甘草水煎液 2. 96 g·kg － 1·d － 1 ig，连续 15 d 后，以小鼠存活天数、生命延长率、肺指数、肺指数抑制率及病理切片为指标观
察各品种甘草的抑菌作用。结果:各品种甘草对肺炎链球菌均有不同程度抑制作用，能提高小鼠平均存活天数，降低肺指数及
肺组织病理级数，与模型组比较有统计学意义(P ＜ 0. 05)。结论:野生光果甘草提高小鼠存活天数作用较强，其次为野植物甘
草、野生黄甘草，野生光果甘草与栽培植物甘草相对较弱;各品种甘草对小鼠肺指数的抑制作用相似，野生光果甘草活性相对
较强。
［关键词］ 甘肃;不同品种;药效学;肺炎链球菌;抑制
［中图分类号］ R285． 5 ［文献标识码］ B ［文章编号］ 1005-9903(2011)23-0212-03
甘草为甘肃五大地道药材“归芪党黄草”之一，
品种齐全，质地优良。《中国药典》记载甘草有乌拉
尔甘草、胀果甘草、光果甘草，主要分布于内蒙古、新
疆、甘肃等地;此外甘肃产有野生黄甘草。研究表明
甘草具有抗菌、抗炎、抗病毒及保护发炎的咽喉和气
管黏膜等作用。本实验观察甘肃不同品种甘草对肺
炎链球菌感染小鼠肺炎的作用，比较其作用的差异，
为评价甘草药效提供实验依据。
1 材料
1. 1 动物 健康昆明种(SPF)小鼠 372 只，体重
(20 ± 2)g，雌雄各半，中国农业科学院兰州兽医研
究所提供，动物许可证号 SCZK(甘)2010-0001。
1. 2 菌种 肺炎链球菌标准株，由中国生物制品研
究院提供，菌号 31001-9a。
1. 3 药 物 制 备 野 生 乌 拉 尔 (植 物)甘 草
Glycyrrhiza uralensis Fisch、野生胀果甘草 G． inflata
Bat、野生光果甘草 G． glabra L．、野生黄甘草 G．
korshinski G． Grig、栽培乌拉尔(植物)甘草，购于甘
肃省酒泉市，经甘肃中医学院中药鉴定教研室李成
义教授鉴定。取破碎至 1 ～ 3 mm 的各品种甘草各
100 g，加水1 000 mL，浸泡 30 min，武火加热，文火煎
煮 60 min，纱布滤过，水浴浓缩至 500 mL，含生药量
为 0. 2 g·mL － 1，冰箱保存备用。
1. 4 药物与试剂 林可霉素(批号 100212，宜昌人
福药业有限责任公司) ，营养琼脂(批号 20071112，
国药集团化学试剂有限公司) ，新生小牛血清(批号
90436528，三利生物制品厂)。
1. 5 仪器 ZDX-35BI 型自动电热压力蒸气灭菌器
(上海申安医疗器械厂) ，HH． B11. 600 电子恒温培
养箱(上海跃进医疗器械厂) ，BS110S 型电子分析天
平 1 /10 万(北京赛多利斯仪器系统有限公司) ，电子
天平 (武汉市自动化仪表厂) ，CH-212 显微镜
(Olympus) ，101 型 电子恒温干燥箱(北京科伟水鑫
实验仪器设备厂) ，UV120-02 型紫外分光光度计(日
本岛津)。
2 方法
2. 1 肺炎链球菌菌液的培养
2. 1. 1 血琼脂培养基的制备 无菌操作台上，将营
养琼脂平板常规处理后，加入定量无菌血清，混匀放
冷后，制成血琼脂培养基。
2. 1. 2 肺炎链球菌的培养 无菌操作台上，将冻干
封闭的肺炎链球菌菌种常规活化后，再次划线传代
培养后［1］。用 0. 5 号标准比色液调整菌液，使吸收
度为 0. 1，密度约为 1. 5 × 108个 /mL。
2. 2 对肺炎链球菌感染小鼠存活的保护作用 取
健康昆明种小鼠 168 只，雌雄各半，自由饮食 3 d
后，随机分为 8 组(每组 21 只) ，空白组、模型组、阳
·212·
第 17 卷第 23 期
2011 年 12 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 17，No． 23
Dec．，2011
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2011.23.036
性对照组(林可霉素)、野生乌拉尔甘草组、野生光
果甘草组、野生胀果甘草组、野生黄甘草组、栽培乌
拉尔甘草组。除空白组外，其余各组乙醚轻度麻醉，
0. 05 mL 肺炎链球菌悬液滴鼻，1 次 / d，连续 3 d，直
至小鼠出现抖毛、点头、呼吸加深加快、腹式呼吸和
哮喘等症状时，每组各取 1 只小鼠脱颈处死，取肺做
病理切片，观察到毛细血管充血或炎性渗出物后，空
白组、模型组给予 2. 96 g·kg － 1生理盐水 ig，阳性对
照组给予林可霉素 5. 92 g·kg － 1，各品种甘草组分别
给予 2. 96 g·kg － 1水煎液 ig，(每天分 2 次服) ，连续
15 d，观察并记录小鼠存活天数［2］，并计算生命延
长率。
生命延长率 =(实验组平均存活天数 －模型组平均存活
天数)/模型组平均存活天数 × 100%
2. 3 对肺炎小鼠肺指数的影响 取小鼠 112 只，雌
雄各半，分组、造模及给药方法同 2. 2。2 次 / d，连续
给药 4 d，于第 5 日清晨，小鼠用电子天平称体质量
后，脱颈椎处死，摘取肺，定性滤纸吸干体液，置油纸
上，分析天平称质量。计算肺指数［3］。
小鼠肺指数 =肺重(g) /体重(g)× 100
2. 4 对肺炎小鼠肺的保护作用 另取健康昆明种
小鼠 80 只，雌雄各半，分组、造模及给药方法同
2. 2。给药后第 5 天清晨，将小鼠脱颈处死，切取右
肺下叶，常规制片，HE 染色，观察各小鼠肺切
片［4-5］。将肺炎程度分为 (－ )～ ()级［6］:①无
肺炎为(－ ) ;②充血水肿期为(+ ) :肺叶肿胀，暗
红色，毛细血管弥慢性扩张充血，混有少量红细
胞、中性粒细胞和巨噬细胞;③红色肝样变期为
() :肺叶肿大，充血呈暗红色，质地变实，似肝脏
外观毛细血管充血，肺泡腔内充满大量红细胞，其
间夹杂少量中性粒细胞和巨噬细胞;④灰色肝样变
期为 () :肺叶肿大，充血消退，红色转变为灰白
色，质实如肝，肺泡腔内有纤维素渗出，相邻肺泡
腔纤维素可互相连接。
2. 5 统计学方法 采用 SPSS 17. 0 软件，计量资料
以 珋x ± s表示，组间比较采用 t 检验，等级资料用秩和
检验，以 P ＜ 0. 05 为差别有统计学意义。
3 结果
3. 1 对肺炎链球菌感染小鼠存活时间的影响 林
可霉素组及各品种甘草均能提高小鼠平均存活天
数，与模型组比较有统计学差异(P ＜ 0. 05) ，各品种
甘草组间与林可霉素组比较有统计学意义(P ＜
0. 05) ，作用弱于林可霉素，各品种甘草组间比较无
统计学意义，野生胀果甘草组作用趋势相对较强。
见表 1。
表 1 对肺炎链球菌感染小鼠存活的保护作用(珋x ± s，n = 20)
组别
剂量
/ g·kg － 1
平均存活
时间 / d
生命延长
率 /%
空白 0 13. 44 ± 1. 792) 53. 27
模型 2. 96 6. 28 ± 2. 54 －
林可霉素 5. 92 11. 00 ± 2. 702) 75. 16
野生植物甘草 2. 96 8. 81 ± 2. 702，3) 40. 29
野生光果甘草 2. 96 8. 50 ± 3. 432，3) 35. 35
野生胀果甘草 2. 96 9. 11 ± 3. 142，3) 45. 06
野生黄甘草 2. 96 8. 81 ± 3. 262，3) 40. 29
栽培植物甘草 2. 96 8. 53 ± 3. 142，3) 35. 83
注:与模型组比较 1)P ＜ 0. 05，2)P ＜ 0. 01;与林可霉素组比较
3)P ＜ 0. 05(表 2 ～ 3 同)。
3. 2 对肺炎小鼠肺指数的影响 林可霉素组及各
品种甘草均能降低小鼠肺指数，与模型组比较有统
计学意义(P ＜ 0. 05) ，林可霉素与各品种甘草组比
较无统计学差异，各品种甘草组间比较无统计学意
义，见表 2。
表 2 对肺炎链球菌感染小鼠肺指数的影响(珋x ± s)
组别
剂量
/ g·kg － 1
n
肺指数
/%
抑制率
/%
空白 － 13 1. 124 ± 0. 2021) 26． 87
模型 － 10 1. 537 ± 0. 268 －
林可霉素 5． 92 10 1. 239 ± 0. 2481) 19. 39
野生植物甘草 2． 96 13 1. 268 ± 0. 2891) 17. 50
野生光果甘草 2． 96 11 1. 267 ± 0. 2341) 17. 57
野生胀果甘草 2． 96 10 1. 245 ± 0. 2511) 19. 00
野生黄甘草 2． 96 11 1. 255 ± 0. 1991) 18. 35
栽培植物甘草 2． 96 10 1. 254 ± 0. 2661) 18. 41
3. 3 对肺炎小鼠肺的保护作用 各甘草对小鼠肺
具有相当的保护作用，各甘草组抗肺炎作用明显强
于模型组，林可霉素组抗肺炎作用明显高于各甘草
组。见表 3。
3. 4 对肺炎小鼠病理变化的影响 显微镜下观察:
正常小鼠肺组织结构清晰，各级支气管和肺泡结构
完整，肺泡间隔和肺泡腔均匀、一致，未见肺泡间隔
增宽，肺泡腔大小不等，无明显炎细胞浸润;模型小
鼠肺毛细血管扩张充血，肺泡腔内有浆液性渗出物
·312·
邓毅，等:甘肃不同品种甘草对肺炎链球菌感染小鼠肺炎的药效
表 3 对肺炎小鼠肺病理变化的影响
组别
剂量
/ g·kg － 1
肺炎
－ +  
空白 － 10 0 0 0
模型 － 0 2 2 6
林可霉素 5． 92 0 91) 1 0
野生植物甘草 2． 96 0 41) 61) 0
野生光果甘草 2． 96 0 51) 51) 0
野生胀果甘草 2． 96 0 71) 31) 0
野生黄甘草 2． 96 0 31) 71) 0
栽培植物甘草 2． 96 0 31) 61) 1
及红细胞、中性粒细胞和巨噬细胞，严重者可见肺泡
腔内渗出纤维素丝，肺泡断裂、融合、闭塞、肺泡结构
破坏明显，各给药组均有不同程度的改善。肺病变
程度分级:空白组均为阴性;模型组病变较严重，6
个()级病变，占模型组 60%;除栽培植物甘草组
有 1 例级病变外，其余各组病变级数多为 + 级与
级，与模型组比较，病变级数明显降低，表明盐酸
林可霉素及甘草水煎液对感染肺炎链球菌小鼠的肺
具有保护作用。通过比较各组小鼠肺的炎症评分，
模型组评分明显高于各甘草组，各甘草组对小鼠肺
均有保护作用。见表 3，图 1。
A. 空白组;B. 模型组;C. 林可霉素组;D. 野生植物甘草组;E. 野生光果甘草组;F. 野生胀骨甘草组;G. 野生黄甘草组;H. 栽培植物甘草组
图 1 各组肺炎小鼠肺组织病理变化(HE，× 100)
4 讨论
甘草具有抑制多种链球菌的作用［7-9］，体内体外
对金黄色葡萄球菌也具有较强的抑制作用［10］。本
研究结果表明，盐酸林可霉素及各品种甘草可不同
程度推迟感染小鼠发病和死亡时间，提高小鼠的平
均存活时间;降低肺指数，降低肺组织病变级数。盐
酸林可霉素为抑制肺炎链球菌的有效药物，其作用
明显强于各品种甘草，但在降低肺指数方面与各品
种甘草组比较无统计学差异，说明盐酸林可霉素及
各品种甘草能抑制小鼠肺部炎症，使肺内炎性渗出
物明显减少，对小鼠肺有明显的保护作用。而野生
光果甘草的作用较强，其次为野植物甘草、野生黄甘
草，野生光果甘草与栽培植物甘草相对较弱。
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［责任编辑 何伟］
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第 17 卷第 23 期
2011 年 12 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 17，No． 23
Dec．，2011